茶多酚对大鼠肾缺血再灌注损伤保护作用实验研究

目的探讨茶多酚(Tea polyphenols TP)预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法建立大鼠肾缺血再灌注损伤(renal ischemia reperfusion injury RIRI)模型。选用健康SD大鼠42只,随机分为3组:假手术组、单纯肾缺血再灌注损伤组,茶多酚预处理组。于肾缺血再灌注(renal ischemia reperfusion RIR)开始时刻、RIR后2h、RIR后24h分别检测血清肌酐(SCr),血清超氧化物岐化酶(SOD)、血清丙二醛(MDA)、肾组织SOD、肾组织MDA及观察肾组织的病理变化。结果茶多酚预处理组与假手术组相比较,RIRI组SCr水平升高(P<0.05),肾组织及血清中的SOD降低及MDA水平增加(P<0.05)。而茶多酚预处理组SCr、血清MDA和肾组织MDA均比单纯RIRI组低(P<0.05),血清SOD水平及肾组织SOD水平升高(P<0.05)。结论在肾脏缺血再灌注损伤过程中,茶多酚能起到对肾脏的保护作用。     

壳聚糖对氧化损伤HepG2细胞的修复作用

采用体外细胞评价法,以抗坏血酸(Vc)为参照物,分别从细胞形态、细胞活力、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性等指标来研究不同剂量壳聚糖(Cs)对HepG2细胞氧化损伤的干预效果.结果表明壳聚糖对氧化受损HepG2细胞的形态和活力具有修复作用,且在降低MDA水平的同时提高SOD含量和GSH-Px的活性.与参照物Vc相比,壳聚糖对HepG2细胞氧化损伤的修复效果更好.     

参黄草合剂对肾缺血再灌注的保护作用研究

目的:探讨参黄草合剂对肾缺血再灌注小鼠的保护作用。方法:将小鼠随机分为对照组、模型组、参黄草合剂组,用药组给药14 d;建立肾缺血再灌注损伤模型。比较各组小鼠血清中Scr、BUN、MDA、SOD水平、肾组织中MDA、SOD、TNF-α、IL-1β及IL-6水平的影响。结果:模型组中Scr、BUN、MDA、TNF-α、IL-1β及IL-6水平升高,SOD活性降低;与模型组比较,用药组中Scr、BUN、MDA、TNF-α、IL-1β及IL-6水平显著降低,SOD活性升高。结论:参黄草合剂对肾缺血再灌注损伤小鼠具有保护作用。。     

姜黄素对过氧化氢诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用

[目的]:研究姜黄素对过氧化氢(H_2O_2)引起的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞氧化应激损伤的作用及可能的机制。[方法]:采用H_2O_2(75μM)诱导PC12细胞建立氧化应激损伤细胞模型,不同剂量姜黄素(终浓度为1, 10, 100μM)进行干预,采用CCK8比色法检测细胞存活率,利用荧光探针还原型二氯荧光素探针(DCFH-DA)检测细胞内活性氧,生化法检测细胞中丙二醛(MDA)的含量以及细胞中超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力。[结果]:75μM H_2O_2作用PC12细胞24 h,细胞出现明显损伤,细胞活力下降(P0.01),不同剂量的姜黄素提前干预12 h后能明显改善H_2O_2导致的PC12细胞活力下降;姜黄素各剂量组可不同程度地抑制H_2O_2诱导的胞内ROS及脂质过氧化产物MDA的产生;并且在PC12细胞中可以抑制H_2O_2导致的抗氧化酶系SOD、CAT及GSH-Px活性的降低。[结论]:在PC12细胞中,姜黄素对H_2O_2引起的细胞的氧化应激损伤具有保护作用,可能是通过降低脂质过氧化程度且提高抗氧化酶系活性实现的。     

依达拉奉对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护

目的探讨依达拉奉对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响和作用机制。方法制备SD大鼠MCAO模型,梗死2h后再灌注,并分为假手术组、生理盐水(NS)组、依达拉奉低剂量组及依达拉奉高剂量组,再灌注24h后检测各组脑组织SOD、MDA浓度。结果与假手术组相比,NS组SOD活性降低、MDA含量增加,有显著性差异;与NS组相比,依达拉奉低剂量与高剂量组SOD活性增高、MDA含量降低,且低剂量组与高剂量组相比有显著性差异。结论依达拉奉对脑缺血再灌注损伤有保护作用。     

白藜芦醇对大鼠脑缺血再灌注氧化应激损伤的影响

目的探讨白藜芦醇(Resveratrol,Res)对大鼠脑缺血再灌注氧化应激损伤的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组,线栓法复制大鼠右侧大脑中动脉栓塞模型)、Res低剂量组(15 mg/kg,I/R+R1组)和Res高剂量组(30 mg/kg,I/R+R2组),于缺血2 h再灌注24 h进行神经功能缺损评分;化学比色法测定大鼠血清和脑组织中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性;TTC法测定脑梗死体积;干湿重法测定脑含水量,HE染色观察脑组织的病理改变。结果与I/R组相比,Res能改善大鼠脑缺血再灌注损伤后的神经功能缺失(P<0.01),降低血清及脑组织中MDA的含量(P<0.01),提高SOD活性(P<0.01),缩小脑梗死体积(P<0.01),降低损伤侧脑含水量(P<0.01),改善脑组织的病理变化,且呈剂量依赖性。结论 Res对大鼠局灶性脑缺血再灌注氧化应激损伤具有良好的保护作用,其机制可能与清除自由基,减轻氧化性损伤有关。     

白藜芦醇对H_2O_2诱导的HepG2细胞氧化损伤保护作用研究

本文探讨了白藜芦醇对H_2O_2诱导的HepG_2细胞氧化损伤的保护作用,以200μmol·L~(-1)的H_2O_2制备HepG_2细胞氧化应激损伤模型,检测在不同浓度的白藜芦醇(0、5、10、20、40μg·m L~(-1))的保护作用下,对细胞丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响。结果表明,白藜芦醇作用于_细胞后,能够降低H_2O_2诱导损伤引起的丙二醛(MDA)升高,提高超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,表明白藜芦醇对H_2O_2诱导所致肝细胞氧化损伤具有一定的保护作用。     

汉黄芩苷通过调节Nrf2/HO-1通路对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用

目的:观察汉黄芩苷对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤的心肌保护作用并探讨其机制。方法:选用健康雄性SD大鼠制备心脏I/R模型大鼠,随机分为5组:假手术组、模型组、ZnPPIX组、汉黄芩苷组和汉黄芩苷+ZnPPIX组。再灌注后24 h,检测各组大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)的表达水平。用ELISA试剂盒检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量及活性氧(ROS)水平,q RT-PCR和Western blot检测心肌组织HO-1,Nrf2的mRNA和蛋白水平的变化。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心功能显著下降,血清CK-MB及LDH浓度升高,SOD含量下降,ROS及MDA含量升高,Nrf2、HO-1的mRNA及蛋白表达水平明显增加(P0.05);与模型组比较,汉黄芩苷组大鼠血清CK-MB及LDH浓度降低,SOD含量显著升高,MDA及ROS含量显著下降,Nrf2、HO-1mRNA及蛋白水表达平明显增加(P0.05)。并且汉黄芩苷这一作用可被ZnPPIX部分抑制(P0.05)。结论:汉黄芩苷通过激活Nrf2/HO-1信号转导通路改善I/R过程中的氧化应激损伤,对缺血/再灌注损伤诱导的大鼠心肌具有一定的保护作用。     

不同剂量瑞芬太尼对缺血再灌注时大鼠肾细胞凋亡和bcl-2、bax表达的影响

目的观察不同剂量瑞芬太尼对大鼠肾缺血再灌注后肾小管细胞凋亡及其调控基因bcl-2和bax表达的影响,探讨瑞芬太尼肾保护作用的分子生物学机制。方法用动脉夹夹闭大鼠双侧肾蒂45min再灌注6h方法制成急性肾缺血再灌注损伤模型。采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的DNA原位末端标记技术检测细胞凋亡的情况。免疫组化检测Bcl-2、Bax基因表达。结果缺血再灌注组较假手术组肾小管凋亡细胞数明显增多,Bcl-2、Bax表达均增强,Bax/Bcl-2比值增高;瑞芬太尼各剂量处理组较缺血再灌注组凋亡细胞数明显减少,Bcl-2表达进一步增强,而Bax表达减弱,Bax/Bcl-2降低。结论瑞芬太尼可能通过上调Bcl-2基因表达,下调Bax基因表达,抑制细胞凋亡,从而发挥对缺血再灌注损伤肾脏的保护作用。     

原花青素对乙二醇所致大鼠肾结石的影响

目的:探究肾结石大鼠在原花青素的干预下,其相关血液指标、肾内结晶及肾小管损伤情况,为预防肾结石提供思路。方法:40只健康雄性SD大鼠随机分为空白组(A)、成石组(B)、低、高剂量原花青素干预组(C、D)各10只。除空白组外,均采用1.25%乙二醇合1%氯化铵灌胃法制作肾结石大鼠模型,C、D组分别用原花青素5 mg/kg、10 mg/kg灌胃。实验结束时检测大鼠血肌酐、尿素氮浓度及肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量并观察大鼠肾内结晶情况及肾小管氧化应激程度。结果:成石组与空白组比较,大鼠肌酐、尿素氮及MDA含量增加,SOD活性降低(P0.01);低、高剂量原花青素干预组大鼠经不同浓度原花青素处理后与成石组比较,大鼠肌酐、尿素氮及MDA含量降低,SOD活性增加(P0.05)。经原花青素干预后,肾小管内形成晶体数量减少,且以高剂量原花青素(10 mg/kg)灌胃后减少更明显,且肾小管炎性反应减轻更明显。结论:肾结石大鼠在原花青素的干预下,肾内氧化应激水平降低,肾功能转好,肾内结晶数量减少,证明原花青素对预防大鼠肾结石及保护肾功能有积极作用。     

Effect of Ligusticum wallichii Aqueous Extract on Oxidative Injury and Immunity Activity in Myocardial Ischemic Reperfusion Rats

We investigated the efficacy of Ligusticum wallichi aqueous extract (LWE) for myocardial protection against ischemia-reperfusion injury. Rats were fed for five weeks with either a control diet (sham and ischemia reperfusion (IR) model control groups) or a diet mixed with 0.2%, 0.4% or 0.6% Ligusticum wallichi extract. At the end of the five week period, hearts were excised and subjected to global ischemia for 30 min followed by reperfusion for 2 h. The hearts were compared for indices of oxidative stress and immunity activities. Administration of Ligusticum wallichi extract significantly decreased serum TNF-α, IL-6, IL-8, NO, MIP-1α, CRP and myocardium MDA levels, and serum CK, LDH and AST activities, and increased myocardium Na(+)-K(+)-ATPase, Ca(2+)-Mg(2+)-ATPase, NOS, SOD, CAT, GSH-Px and TAOC activities. The results indicate that Ligusticum wallichii extract treatment can enhance myocardial antioxidant status and improve the immunity profile in ischemic-reperfusion rats.     

天然椰子油提取物对H2O2诱导的HSF细胞氧化损伤的保护作用

采用倒置生物显微镜观察人皮肤成纤维细胞(HSF)的形态,通过MTT法检测细胞存活率,并通过检测细胞内活性氧(ROS)水平、总抗氧化能力和抗氧化酶活性探讨天然椰子油提取物对H_2O_2诱导的HSF细胞氧化损伤的保护作用。结果表明,天然椰子油提取物在质量浓度为12.5~50 mg/L范围内对H_2O_2诱导的HSF细胞氧化损伤具有保护作用,且呈浓度依赖性。天然椰子油提取物可以抑制H_2O_2引起的细胞形态损伤,提高细胞存活率,还可以通过降低细胞内ROS水平、提高细胞总抗氧化能力以及提高细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,进而起到保护HSF细胞氧化应激损伤的作用。     

敌敌畏与马拉硫磷对猪肾细胞PK15增殖抑制分析

[目的]为了研究有机磷化合物在体外对猪肾细胞损伤作用。[方法]选择敌敌畏和马拉硫磷作用猪肾细胞系PK15。MTT比色法测量2种有机磷化合物对细胞抑制作用,荧光染色和DNA ladder法检测它们对PK15的致凋亡作用。同时检测氧化相关因子超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和PON1基因m RNA水平。[结果]敌敌畏和马拉硫磷抑制PK15细胞的生长呈时间-剂量效应,并能诱导PK15产生较明显的凋亡现象,同时能使细胞中的超氧化物歧化酶活性下降、丙二醛水平上升。[结论]2种有机磷农药可使细胞的抗氧化能力下降,致使细胞中的氧自由基水平上升,可能是有机磷化合物致细胞凋亡、损伤的因素之一。     

Bone Morphogenetic Protein-7 Ameliorates Cerebral Ischemia and Reperfusion Injury via Inhibiting Oxidative Stress and Neuronal Apoptosis

Previous studies have indicated that bone morphogenetic protein-7 (BMP-7) is neuroprotective against cerebral ischemia/reperfusion (IR) injury. The present study was undertaken to determine the molecular mechanisms involved in this effect. Adult male Wistar rats were subjected to 2 h of transient middle cerebral artery occlusion (MCAO), followed by 24 h of reperfusion. BMP-7 (10⁻⁴ g/kg) or vehicle was infused into rats at the onset of reperfusion via the tail vein. Neurological deficits, infarct volume, histopathological changes, oxidative stress-related biochemical parameters, neuronal apoptosis, and apoptosis-related proteins were assessed. BMP-7 significantly improved neurological and histological deficits, reduced the infarct volume, and decreased apoptotic cells after cerebral ischemia. BMP-7 also markedly enhanced the activities of antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-PX), and reduced the level of malondialdehyde (MDA) in IR rats. In addition, Western blot analysis indicated that BMP-7 prevented cytochrome c release, inhibited activation of caspase-3, caspase-9 and caspase-8. Our data suggested that BMP-7 has protective effects against cerebral IR injury in rats, and the neuroprotective effects may be attributed to attenuating oxidative stress and inhibiting neuronal apoptosis.     

神经肽P物质对高氧损伤肺泡Ⅱ型上皮细胞氧化/抗氧化状态的影响

目的探讨神经肽P物质(Substance P,SP)对高氧损伤早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar epithelial celltypeⅡ,AECⅡ)氧化/抗氧化状态的影响。方法将分离培养的原代早产大鼠AECⅡ随机分为4组:空气组(将细胞置5%CO2、21%O2的孵箱中)、高氧组(将细胞置5%CO2、95%O2的密闭氧仓中)、高氧SP组(细胞培养液中预先加入5×10-8mol/L的SP,再置高氧中)和高氧SP受体拮抗剂组(细胞培养液中预先加入5×10-8mol/L的SP和5×10-7mol/L的L703.606,再置高氧中),各组细胞培养24 h后,镜下观察细胞形态的变化;MTT法检测细胞的增殖活力;流式细胞术检测细胞周期;JC-1探针法检测细胞凋亡早期线粒体膜电位的变化;化学比色法检测细胞丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量、总抗氧化能力(Total antioxidative capacity,TAOC)及超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)的活力。结果与空气组比较,高氧组AECⅡ的增殖活力、S+G2期细胞比例、线粒体膜电位、SOD活力和TAOC均明显下降(P<0.01),MDA含量明显升高(P<0.01);与高氧组比较,高氧SP组AECⅡ的增殖活力、S+G2期细胞比例、线粒体膜电位、SOD活力和TAOC均明显升高(P<0.01),而MDA含量明显下降(P<0.01),SP受体拮抗剂可阻断该效应。结论 SP可明显减轻高氧导致的早产大鼠AECⅡ的氧化损伤,增强细胞的抗氧化能力,进而起到促进细胞增殖的作用。     

硫酸锌对紫外线造成的角朊细胞氧化损伤及胞内抗氧化酶活性的影响

目的探讨硫酸锌对B段紫外线(Ultraviolet radiation B,UVB)造成的角朊细胞(Keratinocytes,KC)氧化损伤及胞内抗氧化酶活性的影响。方法取新生Wistar大鼠背部皮肤,采用中性蛋白酶和胰蛋白酶联合消化,经贴壁培养获得高纯度角朊细胞,在含10%FBS的L-DMEM+F12培养液中扩增培养。将细胞随机分为UVB组、加锌组和正常对照组,UVB组用15W的UVB进行照射,加锌组与50μmol/L硫酸锌共孵育24h后进行照射,正常对照组不照射。照射后24h收集各组细胞,进行氧化损伤指标(MDA、OH-、O2-)及胞内抗氧化酶(SOD和GSH)活性测定。结果 UVB组细胞MDA、OH-和O2-水平显著高于正常对照组(P<0.05),加锌组显著低于UVB组(P<0.05);UVB组细胞SOD和GSH水平显著低于正常对照组(P<0.05),加锌组显著高于UVB组(P<0.05)。结论硫酸锌可拮抗UVB对角朊细胞造成的氧化损伤,并提高胞内抗氧化物酶的水平。