库尔勒梨多酚氧化酶的酶学特性

以邻苯二酚为底物,采用分光光度法对库尔勒梨多酚氧化酶(PPO)的酶学特性进行研究。结果表明：库尔勒梨PPO 的最适pH 值为5.7,最适温度为42℃;短时间高温能显著抑制PPO 酶活力;PPO 催化的酶促褐变反应符合米氏动力学方程,该酶促反应的最大速率为169.49U/min,Km 值为0.152mol/L;与柠檬酸、NaCl 和EDTA-2Na相比,抗坏血酸对库尔勒梨PPO 的抑制效果较好。     

山楂多酚氧化酶的酶学特性研究

研究山楂多酚氧化酶(PPO)的酶学特性。采用分光光度法测定PPO的酶活性,考察底物特异性、p H值、温度、热稳定性、底物浓度、金属离子以及抑制剂对PPO酶活性的影响。实验结果表明,山楂PPO的最适底物为邻苯二酚;最适p H值为6.5;最适温度为40℃;90℃热处理1.0 min或85℃处理1.5 min PPO酶活基本完全丧失;山楂PPO最适底物浓度为0.10 mol/L,PPO酶促褐变反应动力学符合米氏方程,相应的动力学参数Km=55.83 mmol/L,Vmax=98.04 U/min;Al3+对PPO酶活的抑制作用较强,Mn2+、Ca2+和Zn2+次之,Cu2+和Mg2+对PPO酶活抑制作用不明显,Fe3+对PPO酶活有一定的促进作用;四种抑制剂对山楂PPO酶活均有一定的抑制作用,且抑制效果与抑制剂浓度呈量效关系,相同浓度下抑制效果由强到弱顺序为:抗坏血酸L-半胱氨酸亚硫酸氢钠柠檬酸,抗坏血酸的抑制效果最为显著。     

小麦多酚氧化酶酶学特性的研究

选取3个小麦品种作为试验材料,以邻苯二酚为底物,采用分光光度法在410 nm处测定小麦多酚氧化酶的活性,研究温度、pH值、底物浓度对其活性的影响以及酶促动力学常数Km,结果表明:小麦多酚氧化酶的最适温度范围为60～75℃,最适pH值为4.0～4.6,描述的单底物酶促反应动力学,相应的动力学参数km=0.19 mol/L,vmax=4.04×102(mol·L-1)·min-1.     

白萝卜多酚氧化酶的酶学特性研究

白萝卜作为我国第二大蔬菜。其贮运和加工过程中的褐变多以酶促褐变为主,全面系统地了解白萝卜多酚氧化酶（PPO）的酶学特性,并研究其抑制手段,对提升白萝卜及其制品的品质和商品价值有着重要的意义。本文以新鲜白萝卜为原材料,采用丙酮洗涤、0.2 mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从中提取PPO,考察了pH、温度对酶活的影响,分析了其温度稳定性、底物浓度对PPO活性的影响,探讨了过程的反应动力学,并对多种酶抑制剂对PPO活性的影响进行了比较,为控制加工过程中白萝卜的酶促褐变提供了理论依据。试验结果表明：以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH 值为6.0,最适反应温度为40 ℃,Km和Vmax值分别为53.8 mmol/L和588 U/min。90 ℃热处理2.5 min或85 ℃热处理3.5 min可基本完全钝化其活性,Vc、异Vc和L-cys对PPO酶活的抑制较为明显。     

白萝卜多酚氧化酶的酶学特性研究

白萝卜作为我国第二大蔬菜。其贮运和加工过程中的褐变多以酶促褐变为主,全面系统地了解白萝卜多酚氧化酶(PPO)的酶学特性,并研究其抑制手段,对提升白萝卜及其制品的品质和商品价值有着重要的意义。本文以新鲜白萝卜为原材料,采用丙酮洗涤、0.2 mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从中提取PPO,考察了pH、温度对酶活的影响,分析了其温度稳定性、底物浓度对PPO活性的影响,探讨了过程的反应动力学,并对多种酶抑制剂对PPO活性的影响进行了比较,为控制加工过程中白萝卜的酶促褐变提供了理论依据。试验结果表明:以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH值为6.0,最适反应温度为40℃,Km和Vmax值分别为53.8 mmol/L和588 U/min。90℃热处理2.5 min或85℃热处理3.5 min可基本完全钝化其活性,Vc、异Vc和L-cys对PPO酶活的抑制较为明显。     

杏鲍菇多酚氧化酶的酶学特性研究

以杏鲍菇中多酚氧化酶（PPO）为研究对象,采用分光光度法在420nm处对其酶学特性进行研究。结果表明,杏鲍菇PPO的最适底物为邻苯二酚;最适pH为6.0;最适温度为35℃;90℃处理2min,可使酶完全失活;PPO催化的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,动力学参数为K_m=0.0207mol/L,V_max=41.32U/min;7种金属离子对PPO酶活性的影响效果各不相同,Al³⁺、Mn²⁺对PPO酶活性有一定的抑制作用,Mg²⁺、Zn²⁺、Ca²⁺和Cu²⁺对PPO酶活性的抑制作用不明显,Fe³⁺对PPO酶活性有激活作用;抗坏血酸、柠檬酸、L-半胱氨酸和亚硫酸钠对PPO酶活性的抑制作用均随浓度的增大而加强,抑制能力由强到弱依次为:抗坏血酸>亚硫酸氢钠>L-半胱氨酸>柠檬酸。      

茄子多酚氧化酶的酶学特性研究

本文对日本千年2号茄子中多酚氧化酶的酶学特性进行了较详细研究。结果表明：茄子中多酚氧化酶的最适pH为6．8，当体系pH≤5．0或者pH≥7．4时，能有效降低PPO活性。30～50℃下PPO具有较高活性，其最适温度为30℃。PPO的热稳定性较差，沸水加热1min时，酶活已丧失87．57％。柠檬酸、抗坏血酸、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、EDTA-2Na等对PPO活性有抑制作用，其中抗坏血酸抑制作用最强。     

蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性

为分析蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性,本文对影响蓝莓多酚氧化酶（PPO）的酶活力的主要因素:p H、温度、金属离子、抑制剂及热稳定性进行了研究。结果表明:蓝莓中PPO最适p H为6.5,最适温度为30℃,Ca²⁺和Mn²⁺对蓝莓PPO有抑制作用,Cu²⁺、Mg²⁺、Zn²⁺、Fe³⁺对蓝莓PPO有激活作用。柠檬酸、抗坏血酸、L-半胱氨酸及亚硫酸氢钠能抑制PPO酶活,但柠檬酸抑制效果较差。热稳定性实验结果表明:蓝莓果PPO耐热性较差,高温短时可显著抑制PPO酶活性。      

烟草中多酚氧化酶的酶学特性研究

从新鲜的烟叶中提取多酚氧化酶,该酶在55℃时经过10分钟酶的活性就达到高峰,但持续的时间很短,热稳定性差;在40℃时经过20分钟酶的活性才达到高峰,但持续的时间较长,具有良好的热稳定性。烟草中的多酚氧化酶在 pH 值为6时,酶的活性最高:pH 值高于6或低于6,活性均下降。烟草中的多酚氧化酶与焦儿茶酚(二元酚)的结合力最强,三元酚次之,一元酚不作用。烟草中的多酚氧化酶是一种含酮的蛋白质,增加铜离子的浓度能增强多酚氧化酶的活性;EDTA、亚硫酸氢钠、硼酸、柠檬酸都是烟草多酚氧化酶的良好抑制剂。     

赵州雪花梨多酚氧化酶酶学特性研究

研究赵州雪花梨多酚氧化酶的酶学特性.结果表明:以邻苯二酚为底物,雪花梨中多酚氧化酶的最适pH值为7.0, 最适温度为25 ℃;底物浓度与酶活成正相关,90 ℃处理4 min 可钝化其活性;酶反应动力学研究表明,以邻苯二酚为底物时,Vmax=437 U/min,Km=0.015 6 mM.     

砀山酥梨膜结合态与可溶态多酚氧化酶性质比较

为探究砀山酥梨膜结合态多酚氧化酶（mPPO）性质,本文以砀山酥梨为原料,研究其mPPO催化特性及热失活动力学,并与可溶态多酚氧化酶（sPPO）性质进行比较。结果表明:以邻苯二酚为底物时,mPPO与sPPO催化特性及热失活动力学性质不同。mPPO比活力及对底物亲和力高于sPPO。mPPO在pH4.50时酶活最高,而sPPO最适pH为5.00。mPPO酸碱稳定性高于sPPO,mPPO在pH3.50～4.50环境中保持24 h后酶活大于原始酶活。砀山酥梨mPPO在35～45 ℃温度区间内活性最高,且mPPO在55～75 ℃区间热稳定性高于sPPO。热失活动力学分析结果表明,热处理对sPPO及mPPO的钝化均符合一级反应动力学,动力学参数E_a值及Z_T值分析表明mPPO比sPPO催化反应对温度的依赖性更小,热耐受性更高。     

雪梨多酚氧化酶酶学特性及其果汁褐变控制技术研究

雪梨在加工过程中极易发生酶褐变,为抑制雪梨汁的酶褐变,试验以雪梨为原料制备多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)粗酶提取液,加入邻苯二酚为底物,采用分光光度法对其PPO的酶学特性及不同护色剂对PPO活性的影响进行了研究;并选择L-半胱氨酸、D-异抗坏血酸钠、抗坏血酸3种添加剂对雪梨汁进行护色,通过响应面优化试验确定雪梨汁最优护色组合。结果表明:雪梨PPO的最适pH为4.5,最适温度为30 ℃;雪梨PPO具有一定的热稳定性,随着温度的提高,抑制PPO活性所需要的时间逐渐减少;雪梨PPO催化底物邻苯二酚的酶促反应动力学与米氏方程高度符合,最大反应速率Vmax=217.39 U/min,米氏常数Km=0.152 mol/L。雪梨汁加工的最优护色剂组合为:6.56 mmol/L的L-半胱氨酸、4.58 mmol/L的D-异抗坏血酸钠和6.18 mmol/L的抗坏血酸,在此条件下对雪梨汁褐变的抑制率可达90.82%。     

果酒中多酚氧化酶及其性质的研究

对山楂酒中含有的六种分子量不同的多酚在多酚氧化酶作用下,测定氧化前后其涩度的变化.发现多酚物质的氧化作用能够加重果酒的苦涩味.并对山楂中的多酚氧化酶进行提取,测定其基本特性,确定了底物、温度、pH值对其活性的影响,并进一步测定其酶动力学曲线,发现多酚氧化酶催化的最适温度是25℃,其最适pH是6.5,其作用的最适底物是儿茶酚,其米氏常数是1.077×10-2M.     

梅州金柚果肉中多酚氧化酶特性的研究

以邻苯二酚为底物,采用分光光光度计测定氧化物的方法对金柚果肉多酚氧化酶(PPO)的特性进行研究。结果表明,PPO最大吸收波长为422nm,最适温度范围为50~70℃,最适pH范围为6.0~6.6,在本实验条件(pH6.4,60℃)下,K m=0.947mol/L、V max=0.375U/min,高于80℃处理PPO开始被钝化。      

桑叶多酚氧化酶分离及活性研究

采用分光光度法和扫描电子显微镜对桑叶多酚氧化酶(PPO)的结构、活性以及不同抑制剂的抑制效果进行研究。结果表明:桑叶多酚氧化酶为纤维状蛋白;其最适pH值为7.0,最适温度为40℃;在相同抑制剂浓度下,总体抑制效果为:抗坏血酸>亚硫酸氢钠>柠檬酸>氯化镁>氯化钠。     

小麦多酚氧化酶(PPO)活性的基因型、环境及其互作效应的分析

选用16个有代表性的小麦品种(系)，分别在山东8个地区进行小麦多酚氧化酶(PPO)活性的基因型与环境效应分析。结果表明，在随机效应中，小麦籽粒PPO活性的品种与试点互作效应最为显著。在对面团白度性状进行选择时，既要选择多酚氧化酶(PPO)活性低的品种，又要注意选择在PPO积累低的地区种植，以实现优质品种的优质生产。     

超高压激活鲜榨梨汁多酚氧化酶的酶学特性

为探究超高压加速梨汁褐变的机制,以鲜榨翠冠梨汁为原料,采用超高压（500 MPa、5 min）处理,以未处理的梨汁为对照,测定超高压处理对梨汁货架期色泽的影响,检测处理前后梨汁中溶解氧质量浓度和总酚浓度,并研究多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）的最适pH值、最适反应温度、热稳定性、米氏常数（Km）。结果表明,超高压组梨汁货架期6 h褐变（色差值（ΔE）＝1.61）,而未处理组货架期24 h仍未见明显褐变（ΔE＝0.56）。鲜榨梨汁PPO存在PPO1（pH 5.0）和PPO2（pH 7.0）两种形式,超高压加速褐变与PPO1和PPO2被激活有关：PPO1活力从6.5 U/mL上升到14.1 U/mL,上升了1.17 倍;PPO2活力从2.6 U/mL上升到25.5 U/mL,上升了8.8 倍。激活效应的内在原因是PPO存在潜在酶活性形式,其本身活力较弱甚至无活力,超高压是激活PPO潜在酶活性的外在原因之一,十二烷基硫酸钠处理、热处理等也可激活PPO潜在酶活性。超高压降低PPO的Km值,提高了其与底物之间的亲和力,从而提高酶促反应速率;PPO1与底物的亲和力1/Km从2.353 L/mol上升到46.909 L/mol,上升了18.9 倍;PPO2与底物的亲和力从2.852 L/mol上升到62.857 L/mol,上升了21.0 倍。超高压同时会降低最大酶促反应速率（Vmax）,Vmax对酶促反应速率的影响如超过Km的影响,将会表现出钝化效应。综上,超高压通过激活PPO潜在酶活力、提高PPO与底物的亲和力和酶促反应速率,加速鲜榨梨汁褐变。     

薯蓣多酚氧化酶特性及褐变控制

从薯蓣中提取多酚氧化酶，采用分光光度法对其动力学特性进行研究。结果表明，该酶最适作用pn为5．8，最适作用温度为20℃，Km=1．82mol/L，Vmax=1．11(△OD/min)。本文同时考察了抑制剂对薯蓣多酚氧化酶活性的影响。