基于TMR磁传感器的黄曲霉毒素B_1定量检测方法研究

针对现有黄曲霉毒素B_1(AFB_1)定量检测操作复杂、用时较长等问题,提出一种基于TMR磁传感器和磁性层析试纸的AFB_1定量检测方法。在垂直匀强磁场中,使用TMR磁传感器检测磁性层析试纸测试线(T线)与质控线(C线)上超顺纳米磁珠的响应信号,分析T/C值随AFB_1质量浓度变化的趋势,绘制标准曲线,最终实现AFB_1定量检测。结果表明:磁珠响应信号检测结果与线磁偶极子模型仿真结果基本一致,在毒素含量0.01～10 ng/m L范围内线性相关性良好,测量一次时间为40 s,可用于即时现场检测。     

赭曲霉毒素A的抗原设计及在免疫分析中的应用

赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)是一种重要的生物毒素,其广泛存在于谷物和其他植物性食品中。食品中的OTA残留进入人体后会对健康造成危害。为快速便捷地对OTA进行检测,本文以OTA为原料,设计合成了结构更加合理的新的OTA半抗原(OTA-H1),制备了OTA的完全抗原(OTA-H1-BSA, OTA-H1-OVA),并进行了小鼠免疫实验,建立了OTA间接竞争酶联免疫分析法(ic-ELISA)。采用核磁氢谱、核磁碳谱和高分辨质谱对OTA半抗原结构进行表征,结果表明半抗原结构正确;利用OTA-H1-BSA作为免疫抗原免疫Balb/c小鼠,小鼠血清效价为8 000,表明该免疫抗原对OTA具有一定的抑制作用;利用以OTA-H1-OVA作为包被抗原建立的间接竞争酶联免疫分析法检测小麦样品时,IC₅₀为0.04 ng/mL,灵敏度较原有方法提高了30倍。本方法可用于小麦样品中OTA的快速检测。     

基于自组装及纳米磁球放大的大肠杆菌 O157:H7的压电免疫检测

应用压电免疫传感器快速检测了大肠杆菌O157:H7(E. coli O157:H7).将巯基乙酸(MACA)自组装在AT切向的压电金电极上,以N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)为反应介质,形成酰氨键固定大肠杆菌抗体.并通过α-甲基丙烯酸(MAA)把抗体修饰在纳米磁球上,采用夹心法将抗原夹在两个抗体间,压电石英晶体交流阻抗(PQCI)和循环伏安法对修饰过程进行了表征,抗原浓度与形成夹心复合物前后的PQCI振动频移相关.其免疫传感器能在3h内检测2×103～8×108 CFU/mL范围内的目标细菌,106CFU/mL情况下重复性实验的RSD在7%以下.     

心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶荧光检测方法的建立

肌酸激酶同工酶(Creatine kinase isoenzyme,CK-MB)是早期诊断急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)的重要标志物,该研究以荧光微球为标记物研究快速、灵敏的CK-MB荧光免疫层析检测方法。通过N-羟基琥珀酰(NHS)和1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)将荧光微球与市售的抗体共价偶联,优化抗体与荧光微球的偶联条件,对偶联获得的抗体荧光标记物进行表征,制备了CK-MB的荧光免疫层析检测卡,建立了CK-MB荧光免疫层析检测方法。荧光微球偶联率91.7%,CK-MB检测卡定量检测线性范围为1ng/ml~1000ng/ml,灵敏度达到了1ng/ml,CV值8%,回收率84%~108.3%。利用间接ELISA法对市售抗体进行筛选,获得了包被抗体以及标记抗体,建立了心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶荧光检测方法,实现血清中CK-MB定性与定量检测,为心肌损伤标志物荧光免疫层析检测方法的研发提供了实验技术基础。     

外磁场激励下管道弱磁应力内检测特性研究

弱磁应力检测技术支持非接触在线应力损伤检测,在长输油气管道应力内检测技术领域具有巨大的应用潜力。但弱磁信号微弱,易受外界环境干扰,检测结果易出现偏差。为加强弱磁信号的检测能力,基于铁磁材料的微观特性,建立了外磁场弱磁应力检测模型,获得了弱磁信号强度随外磁场强度与施加应力的变化规律,描述了外磁场对弱磁应力检测信号的激励特性,并进行了系统的实验研究。结果表明,弱磁信号的切向峰值与法向零点均位于应力集中区的中心位置,且不随应力与外磁场的变化而发生波动;弱磁信号切向峰值与法向峰峰值随外磁场与应力的增加而增大;外磁场对弱磁应力检测信号的激励作用随外磁场的增加先增大后减小。     

基于核酸适配体的荧光传感器检测赭曲霉毒素A

为了实现对食品中赭曲霉毒素A的快速检测,利用带有羧基荧光基团(FAM)的核酸适配体(Apt-FAM)与带有黑洞猝灭基团(BHQ1)的互补链cDNA-BHQ1,构建了简单、快速检测食品中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的荧光传感器。研究结果表明：当OTA不存在时,Apt-FAM通过碱基互补配对与cDNA-BHQ1结合,荧光基团FAM靠近猝灭基团BHQ1,通过荧光共振能量转移作用抑制荧光基团FAM的信号;当OTA存在时,OTA与Apt-FAM结合形成G-四链体单链结构,G-四链体远离cDNA-BHQ1,荧光信号增强。通过试验条件的优化,选择最优检测条件：互补链为cDNA1-BHQ1、孵育时间为60 min、cDNA与Apt用量比为1∶1、反应体系的pH值为7.4。在最优检测条件下,传感器检测OTA的线性范围为0.5～100 ng/mL,线性方程为y=31.934 98+41.714 94lg(C_OTA),R²=0.997,最低检出限为0.13 ng/mL。利用该传感器检测玉米粉和葡萄酒样品中的OTA,平均回收率分别为100.0%～...     

血清C反应蛋白荧光免疫层析检测方法的建立

针对人体急性炎症反应的快速检测,建立了基于量子点碲化镉(CdTe)的荧光免疫层析分析方法及快速定量检测卡,实现血清中炎症标志物C反应蛋白(CRP)的快速定量检测.该检测卡采用双抗体夹心法,首先利用酶联免疫方法筛选出CRP测定最佳包被抗体与标记抗体,然后通过N-羟基琥珀酰(NHS)和1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)共价偶联法,将CdTe量子点与CRP鼠源单克隆抗体偶联,制备抗体荧光标记物,同时优化不同条件下单克隆抗体与CdTe量子点的偶联效果,琼脂糖凝胶电泳进行鉴定,进而构建CRP荧光免疫层析检测卡,通过建立量子点荧光强度与CRP标准品浓度之间的定量关系,从而实现人体血清中CRP的定量检测.结果表明,CRP检测卡定量检测线性范围为0.1~1000ng/ml,临床样本测试结果显示与进口试剂具有良好的相关性.因此研究为急性炎症反应的快速诊断,及荧光免疫层析检测卡的研发提供了技术基础.     

考虑永磁磁链变化的内嵌式永磁同步电动机弱磁转矩控制

内嵌式永磁同步电动机(Interior permanent magnet synchronous motor,IPMSM)具有磁阻转矩使其利于扩速运行,在高速运行时需要弱磁控制来维持高转矩输出。针对IPMSM永磁磁链随实际运行工况变化的情况,研究了IPMSM弱磁转矩控制,分析了永磁磁链变化与指令电流偏差的关系,并提出了一种基于指令电流查表的弱磁转矩控制新方法。该方法主要包括指令电流查表、电压限制计算和电流修正方向计算三部分。通过与传统弱磁控制进行对比仿真验证了该方案的有效性,方案在永磁磁链变化时的输出转矩偏差明显降低。     

抗氨甲酰化蛋白抗体的制备及其ELISA检测方法的建立

为了制备抗氨甲酰化蛋白抗体,探讨了氨甲酰化与瓜氨酸化之间的关系,开发氨甲酰化蛋白检测试剂盒。以牛血清白蛋白(BSA)和氰酸钾(KCNO)为原料合成人工完全抗原(Hcit-BSA),然后免疫新西兰大白兔和BALB/c小鼠,获得抗血清,间接ELISA测定抗体效价,用方阵实验确定抗体最佳稀释倍数和包被抗原的最佳包被浓度,间接竞争ELISA检测抗体特异性。结果表明:抗体效价大于1∶8 000,抗体最佳稀释倍数为1∶4 000,包被原最佳包被浓度为0.25μg/mL,抗体能特异性识别氨甲酰化产物(carbamylation-derived products,CDPs)。Hcit-BSA具有较强免疫原性,使BALB/c小鼠产生抗氨甲酰化蛋白抗体,也为建立一种简便、快速、特异性强的免疫分析方法奠定了基础,为一些疾病的早期快速检测提供了可能。     

电动汽车用永磁同步电动机功率特性及弱磁扩速能力研究(一)——恒转矩控制及弱磁控制时的功率特性

采用d、q坐标系下的相量分析方法 ,研究永磁同步电动机 (PMSM )、特别是电动汽车用PMSM 详细分析了不同弱磁率、不同凸极率对电机电压、电流相量变化轨迹的影响 ,及由此引起的电机的功率特性及弱磁扩速能力的差异 推导出以弱磁率和凸极率为变量的PMSM的弱磁扩速倍数表达式 ,由此得出提高PMSM弱磁扩速能力的根本途径 ,比较了不同磁路结构PMSM弱磁扩速能力的大小