Fcy::Fur/5-FC基因治疗对小鼠宫颈癌的体内实验研究

目的:研究融合基因Fcy::Fur联合5-FC对宫颈癌移植瘤的生长抑制作用及其副反应.方法:构建宫颈癌U27瘤株的Km小鼠荷瘤模型,阳离子脂质体介导Fcy::Fur融合基因体内转染联合腹腔注射5-FC,观察肿瘤体积、重量、倍增时间、生长抑制率以及胃肠道副反应.结果(1)治疗结束时基因治疗组和5-FU组肿瘤体积和重量分别为2.224±0.60cm3、2.38±0.04g和2.32±0.68cm3、2.49±0.73g,小于对照组的4.42±1.49cm3、4.74±1.59g,P<0.05;肿瘤倍增时间由对照组的44.33±2.33h延长为基因治疗组和5-FU组的50.04±2.71h和49.52±3.21h,P<0.05;基因治疗组和5-FU组的肿瘤生长抑制率分别为49.83%和47.51%,两者在肿瘤体积、重量和倍增时间及生长抑制率方而比较均尤统计学意义,P>0.05.(2)5-FU组小鼠有明显的胃肠道反应,体重增长缓慢,与其它两组比较,P<0.05;而基因治疗组小鼠体重增长与对照组比较,P>0.05.结论:融合性自杀基因Fcy::Fur联合5-FC对小鼠宫颈癌移植瘤的生长有抑制作用,无明显胃肠道副反应.     

新抗癌药物维甲类衍生物-R-81001对白血病细胞作用的电镜组化研究

R-81001是医科院药物所新合成的维甲类衍生物,分子量为454.63。经实验证明它对亚硝胺诱发的小鼠前胃上皮增生癌变有明显的抑制作用,而且它的毒性较同类其他衍生物均低。为探讨其作用原理以及对临床应用可能有指导意义的用药方式,我们用电镜组化方法,从超微结构水平结合细胞生长曲线,研究了R-81001对人早幼粒白血病细胞株(HL-60)的作用,同时进行了联合用药的研究。HL-60细胞培养在RPMI—1640培养液中,加10％小牛血清及适量抗菌素。收集对数生长期的细胞,以2×10~5ml的细胞悬液每瓶5mcl分装在培养瓶内。按种细胞的同时给药。实验分1％DMSO组,1×10~(-6)M-R-81001组,1％OMSO加1×10~(-6)MR-81001联合给药组以及不加上述任何药物的对照组。     

光动力作用对人膀胱癌细胞株BIU-87增殖代谢活性的影响

目的 :研究光动力抑癌作用机制。方法 :采用MTT法检测光动力作用后人膀胱癌细胞株BIU -87增殖代谢活性。结果 :光动力实验组吸光密度值 (0 .1683± 0 .0 3 3 7)显著低于实验对照组 (0 .5 12 8± 0 .0 3 82、0 .7775± 0 .0 93 2、0 .72 2 3± 0 .0 3 5 5、0 .72 10± 0 .0 3 69) (P <0 .0 1)。结论 :光动力作用降低了人膀胱癌细胞株BIU -87的增殖代谢活性 ,这可能是其抑癌作用机制之一。     

激光激活BPD-MA光动力作用对人膀胱癌细胞株BIU-87DNA合成的影响

目的 :研究光动力抑癌作用机制。方法 :采用3H -TdR掺入法检测激光光敏化BPD -MA后人膀胱癌细胞株BIU -87细胞DNA的合成。结果 :实验前对照组的CPM值为 482 3 .5± 5 4.2 6,激光激活BPD -MA光动力显著抑制人膀胱癌细胞株BIU -87细胞DNA的合成 (12 63 .7± 2 0 6.84VS 482 3 .5± 5 4.2 6,P <0 .0 5 )。而单纯光敏剂BPD -MA和假照射处理对人膀胱癌细胞株BIU -87细胞DNA合成无明显影响 (P >0 .0 5 )。结论 :激光激活BPD -MA光动力抑制人膀胱癌细胞株BIU -87细胞DNA的合成可能是其抑癌作用机制之一。     

荧光碳点负载阿霉素载药体系在肝癌治疗中的应用

以荧光碳点(CD)为载体、阿霉素(DOX)为抗肿瘤药物,通过静电吸附作用构建了一种pH响应型的碳点负载阿霉素(CD-DOX)载药体系。应用紫外可见吸收法、二甲基噻唑蓝法和荧光显微成像法对碳点负载阿霉素载药体系的性能进行了检测。实验结果表明:在pH值为7.4的环境中,当碳点与阿霉素的质量比为1时,得到的碳点负载阿霉素载药体系的药物负载率最大。碳点负载阿霉素载药体系具有敏感的pH响应性,它对人体肝癌细胞生长的抑制作用约是其对人体正常肝细胞抑制作用的1.7倍。同时,碳点负载阿霉素载药体系也能够长时间地实时监测细胞状态和追踪药物释放过程。因此,该载药体系的性能良好,有望应用于肝癌的治疗及可视化的药物追踪中。     

5-氨基酮戊酸光动力治疗小鼠皮肤乳头状瘤的实验研究

目的:研究5-氨基酮戊酸光动力学疗法(ALA-PDT)对小鼠皮肤乳头状瘤的治疗作用。方法:二阶段使用二甲基苯蒽/巴豆油诱发小鼠皮肤产生乳头状瘤,在肿瘤表面局部应用不同剂量的5-氨基酮戊酸溶液(10%、20%、30%),3小时后用波长为632.8nm的氦氖激光照射肿瘤10min,照射剂量为90J/cm2。辐照后,每天观察肿瘤变化情况,每周测量肿瘤体积三次,计算相对肿瘤增殖率T/C(%)。记录肿瘤消失(瘤体脱落)数及肿瘤复发情况。并设单用激光、单用药物、阴性对照及阳性对照组。结果:ALA低、中、高三个剂量光动力治疗组和阳性对照组均可使肿瘤显著缩小,到治疗后第14天,相对肿瘤增殖率分别为4.8%、3.4%、0。ALA高剂量光动力治疗组小鼠瘤体全部脱落,继续观察四周未见复发。药物对照组、激光对照组对肿瘤无作用。结论:ALA-PDT对小鼠皮肤乳头状瘤生长有显著的抑制作用,其抑制作用与ALA剂量明显相关。     

LED活化MPPa光动力作用对人卵巢癌细胞生长抑制的初步研究

目的:观察LED活化MPPa介导的光动力作用对人卵巢癌细胞生长的抑制作用。方法:采用倒置显微镜观察和MTT法检测LED活化MPPa光动力作用后人卵巢癌细胞株COC1/DDP细胞的生长状况。结果:LED活化MPPa介导的光动力作用显著抑制人卵巢癌细胞COC1/DDP细胞的生长,在一定浓度的MPPa条件下,细胞生长抑制作用和LED能量密度间呈剂量依赖关系。倒置显微镜下观察到LED活化MPPa介导的光动力作用组癌细胞数量显著减少,细胞固缩,而单纯LED照射组、单纯MPPa光敏剂处理组和假照射组三对照组间无明显差异;MTT法示LED活化MPPa介导的光动力作用组细胞抑制率显著高于单纯LED照射组、单纯MPPa组和假照射组(P<0.01),单纯LED照射组较假照射组有促进细胞增殖作用(P<0.05),而单纯MPPa光敏剂处理组和假照射组间无明显差异(P>0.05)。结论:LED可以作为一种新型的光源活化MPPa等光敏剂介导的光动力作用从而有效抑制人卵巢癌细胞株COC1/DDP细胞生长。     

优化ALA-PDT对正常人角质形成细胞凋亡的影响

目的:本文通过不同浓度的ALA与不同用药时间对体外培养的人角质形成细胞(KC)PDT的生物效应研究,观察PpⅨ荧光强度及KC凋亡和生长周期的影响,优化ALA最佳药物浓度和用药时间,探讨ALA-PDT抑制银屑病KC异常增生的可行性和最佳效果.方法:将新鲜包皮组织经两次酶消化法进行KC分离与培养,分设KC对照组、单纯ALA组、单纯照光组及0.1、0.6、1.2、1.8、3.6mmol/L ALA五个浓度组,经0.5、1、3、5h四个避光孵育时间后PDT.FCM、酶标仪、荧光显微镜检测KC中PpⅨ荧光强度,确定ALA最佳药物浓度和最佳用药时间;Hoechst33342 / PI双染法和Annexin V / PI双染法检测KC凋亡率和对生长周期的影响.结果: 0.6mmol/L ALA(用药1h)-PDT组为最佳药物浓度和最佳用药时间, 显示PpⅨ荧光强度表达与KC凋亡率最高,能明显抑制S期与G2期的细胞增值,使细胞增殖指数降为最低,与其他各组相比差异显著(P<0.05).结论: 0.6mmol/L ALA(用药1h)-PDT能明显抑制KC增殖,优化后的ALA-PDT更迅速有效地促进人KC凋亡.     

ALA联合HPD光动力学治疗对鼠G422胶质瘤影响的研究

目的:通过鼠G422胶质瘤研究确定ALA联合小剂量HPD激光光动力疗法促使肿瘤细胞凋亡及死亡的光敏药用药剂量及与两者单独使用的差别.方法:以不同剂量的HPD(1、2、3、4、5 mg/kg)、ALA(20、40、60、80、160 mg/kg)、两者联合口服与静脉注射鼠G422脑胶质瘤瘤模型,随后以630nm半导体激光200mW/cm2 照射肿瘤.照射20分钟,及与不用光敏剂单照激光、单用光敏剂不照光、不用光敏剂不照激光空向对照组比较.以流式细胞仪、电镜观察促使肿瘤细胞凋亡或死亡的差别,病理,肿瘤生长曲线观察治疗肿瘤,促使肿瘤细胞凋亡及死亡的最小合适剂量.结果:HPDl-2mg/kg联合ALA40-60 mg/kg给药,630半导体激光200mW/cm.,照射20分钟组,从流式细胞仪测定细胞凋亡、死亡及电镜、病理及肿瘤生长曲线形态学观察,其是能达到较佳的细胞凋亡、死亡的最小、合适的光敏剂剂量.单纯ALA-PDT组中能达到鼠G422胶质瘤细胞明显凋亡的最小剂量是ALA(80-160mg/kg),单纯HPD-PDT组是HPD4-5mg/kg.结论:HPDI一2mg/kg配合ALA40-60mg/kg,630半导体激光200mW/cm2,照射20分钟是能达到鼠G422胶质瘤细胞明显凋亡死亡,治疗肿瘤合适的最小光敏剂剂量.     

甘露聚糖肽(力尔凡)治疗胃癌的临床研究

目的:观察甘露聚糖肽联合化疗治疗胃癌的疗效。方法:104例胃癌患者随机分成两组。观察组52例,应用甘露聚糖肽联合化疗药物治疗,甘露聚糖肽每日静点20mg,连用2周。对照组52例,单用化疗药物治疗。两组化疗用药方案相同。评价治疗前后两组病人的血象、血清肿瘤标志物水平、病人的不良临床表现(乏力、食欲减退、恶心、呕吐、手脚麻木)改善情况。结果:①观察组血象(WBC、RBC、HB、PLT)在治疗前后无明显变化P>0.05;而对照组治疗后血象下降较治疗前有显著差异P<0.05:两组治疗后血象变化具有统计学意义P<0.05。②观察组治疗前后血清肿瘤标志物CA-199、CEA、CA-153水平变化不显著,与对照组相仿,两组治疗后血清肿瘤标志物CA-199、CEA、CA-153水平变化无统计学意义P>0.05。③观察组治疗后不良临床症状改善明显,生活质量明显提高,与对照组比较有显著差异P<0.05;结论:甘露聚糖肽具有良好稳定化疗病人血象、改善病人全身状况、抑制肿瘤细胞繁殖、提高患者生活质量的作用。     

壳聚糖载药纳米微球对人肝癌细胞的杀伤作用及AFM探测

本文以5-氟尿嘧啶（5-Fu）为抗肿瘤药物模型,壳聚糖为载体,制备平均粒径约为250nm的5-氟尿嘧啶/壳聚糖（5-Fu/Cs）载药纳米微球。采用MTT法评价载药纳米微球在体外对人肝癌细胞BEL7402的杀伤率,并采用原子力显微镜探测用药处理前后的肿瘤细胞表面超微结构的变化。结果表明,载药纳米微球对肿瘤细胞的杀伤率在量效和时效上明显比同剂量单独5-Fu作用的杀伤率高;AFM结果显示5-Fu与载药纳米微球对人肝癌细胞BEL7402作用后的细胞膜表面超微结构的变化存在较大差异,载药纳米微球在肿瘤细胞表面的吸附作用或内吞作用,导致载药纳米微球在细胞表面的释药机制不同于单独药物的扩散模型。     

PDT对SW480细胞和转染CD自杀基因的SW480结肠癌周期和凋亡的影响

目的:观察PDT对SW480细胞和转染CD自杀基因的SW480结肠癌细胞周期和凋亡的影响.方法:采用脂质体基因转移技术将CD基因转染SW480结肠癌细胞后,进行PDT处理,用流式细胞仪分析ALA-PDT结合CD/5Fc自杀基因系统对结肠癌细胞周期和凋亡的影响.结果:ALA-PDT可使SW480细胞G1,细胞比率明显降低,S期细胞比率升高;ALA-PDT不会增加SW480细胞凋亡.PDT与5-Fc结合对SW480-CD细胞各周期比率的影响与对照组相似,表明对各期细胞影响度相似;两种方法结合可以明显诱导SW480细胞凋亡.结论:静止期SW480细胞对PDT比较敏感,增殖期细胞相对不敏感.PDT与5-Fc结合对静止期和增殖期癌细胞均有杀伤作用,且可明显诱导细胞凋亡.     

Induced hyperglycemia as a factor of modification of sarcoma 45 sensitivity to chemotherapy

The injection of sarcolysine, methotrexate, thiophosphamide, cyclophosphamide, adryamycin and platidinum during glucose infusion is shown to increase their antitumour activity. The antitumour effectiveness of 5-FU did not increase under conditions of artificial hyperglycemia, while that of vincristine decreased. Intensification of the activity of some chemotherapeutic drugs in combination with hyperglycemia was observed against the background of their increased general toxic effects.     

Influence of oxidation temperature on the microstructure and electrical properties of Ta2O5 on Si

The effect of the oxidation temperature (673-873 K) on the microstructural and electrical properties of thermal Ta₂O₅ thin films on Si has been studied. Auger electron spectroscopy and X-ray photoelectron spectroscopy results revealed that the films are non-stoichiometric in the depth; an interfacial transition layer between tantalum oxide and Si substrate, containing presumably SiO₂ was detected. It has been found by X-ray diffraction that the amorphous state of Ta₂O₅ depends on both the oxidation temperature and the thickness of the films—the combination of high oxidation temperature (>823 K) and thickness smaller than 50 nm is critical for the appearance of a crystal phase. The Ta₂O₅ layers crystallize to the monoclinic phase and the temperature of the phase transition is between 773 and 823 K for the thinner layers (<50 nm) and very close to 873 K for the thicker ones. The electrical characterization (current/voltage; capacitance/voltage) reveals that the optimal oxidation temperature for achieving the highest dielectric constant (∼32) and the lowest leakage current (10⁻⁸ A/cm² at 1 MV/cm applied field) is 873 K. The results imply that the poor oxidation related defects are rather the dominant factor in the leakage current than the crystallization effects.     

Characterization of Co25Ag75 and (Co90Al10)28Ag72 granular films by electron diffraction,high-resolution transmission electron microscopy and electron spectroscopic imaging

Series of sputter-deposited Co25Ag75 and (Co90Al10)28Ag72 giant-magnetoresistance granular films were characterized by electron diffraction, high-resolution transmission electron microscopy and electron spectroscopic imaging. Crystalline particles of fcc silver and hcp cobalt were detected in both thin-film systems before annealing. Annealing of (Co90Al10)28Ag72 films at 773 and 823 K yielded mixtures of fcc and hcp cobalt clusters and notably enlarged silver particles. In addition, crystallites of bcc Ag3Al were detected in the sample annealed at 823 K. The mesoscopic structure of the as-deposited films was investigated by dark-field imaging showing columnar growth-domains for silver. The columns were preserved during thermal treatment up to 773 K, whereas annealing at 823 K destroyed these domains.     

复合掺杂对高磁导率锰锌铁氧体磁性能的影响

用复合掺杂的方法制备了高性能的高磁导率MnZn铁氧体材料。研究了Nb2O5-P2O5复合掺杂对MnZn铁氧体微观结构及磁性能的影响。结果表明,适量的Nb2O5-P2O5复合掺杂有利于促进晶粒均匀致密,提高材料的起始磁导率,降低损耗。在配方中,当ζ(Nb2O5∶P2O5)为2∶8时,起始磁导率可达到11 823。     

ALA联合小剂量HPD激光光动力学治疗皮肤肿瘤临床研究

目的:局部外敷ALA和静脉注射小剂量HPD联合用药后进行激光光敏诊断和光动力学治疗,探讨这种联合用药光动力学疗法治疗皮肤恶性肿瘤的疗效.并与常规HPD-PDT及激光气化肿瘤合并ALA-PDT治疗作临床疗效对比.方法:30例患者,45处皮肤损害.采用ALA-PDT与小剂量HPD-PDT联合的方案进行治疗.光敏药物剂量:8%ALA 霜剂外敷,1.5mg/kg HPD静脉用药,波长630nm半导体激光照射(功率密度250mW/cm~2,照射时间20分钟/光斑).同时在PDT治疗过程中,及以后的随访中均以激光光敏诊断技术指导治疗及判断避光时间.并与常规HPD(5mg/kg)-PDT治疗皮肤恶性肿瘤43例及三周前激光气化肿瘤加20%ALA霜剂外敷光动力学治疗29例作疗效比较.结果:ALA联合小剂量HPD激光光动力学治疗组,除一例鳞癌II级患者及一例恶性黑色素瘤患者出现复发外,其余患者对联合治疗的效果均佳,随访6～24月,均获得了痊愈,近期痊愈率93.33%,显效率6.67%,皮肤避光时间减少到10～14天.HPD-PDT治疗皮肤恶性肿瘤组43例,40例达近期痊愈,近期痊愈率91.43%,3例显效,显效率8.57%(显效3例,2例为色素型基底细胞癌, 1例为直肠癌肛周复发).激光气化肿瘤加ALA-PDT治疗组29例,26例一次治疗痊愈,近期痊愈率89.66%,3例显效,显效率10.34%(显效3例,2例鳞癌II级经二次治疗痊愈,1例汗管癌7周复发改用手术治疗).结论:1.ALA联合小剂量HPD的光动力学疗法对于诊断和治疗皮肤恶性肿瘤有较佳的疗效.两种光敏剂的联合使用,使皮肤避光时间由原来常规剂量HPD-PDT所必需的4～5周缩短到2周左右,并改善了ALA-PDT作用深度浅(2mm)的弊端.2.光敏诊断是一种简便、快捷、灵敏、非创伤性的肿瘤诊断方法,对于提高肿瘤的早期诊断率有很大意义,又能作为判断避光时间的辅助手段.3.光动力学治疗是一种对肿瘤组织杀伤具有高度选择性的微创技术,病人对整个治疗过程的耐受性好,更适合于年老体弱或对皮肤美观有特殊需求的患者.     

ILLLI对银屑病患者红细胞SOD和MDA变化的影响

目的:探索ILLLI治疗对银屑病患者红细胞SOD、MDA变化的影响。方法:以氦氖激光或半导体激光ILLLI,每次照射时间 1h,功率 5mW,每天 1次,10次为一疗程,观察治疗前后银屑病患者外周血红细胞SOD、MDA变化,并与正常人的结果作对比。结果:银屑病各组红细胞SOD含量在治疗前无显著差异,均低于正常对照组,正常对照组SOD平均高出患者2.6倍,统计学分析差异有显著性,p<0.05,治疗后,各组SOD含量均有明显上升,平均上升近2倍之多,p<0.05,且接近正常对照组,p>0.05。银屑病各组红细胞MDA含量在治疗前无明显差别,均高于正常对照组,平均高出正常人近2.4倍,差异有显著性,p<0.05,治疗后,各组MDA含量均有明显下降,平均下降近1倍,有统计学差异,p<0.05,但未恢复到正常人水平,与正常对照组之间仍存在显著性差异,p<0.05。结论:ILLLI治疗无论是He-Ne激光或是半导体激光对银屑病病员都能激活SOD,提高患者的抗氧化能力。     

氯胺酮对He-Ne激光照射促人正常皮肤成纤维细胞增殖作用的影响

针对动物模型伤口的光生物调节作用，用He-Xe激光对人正常皮肤成纤维细胞增殖的促进作用作为细胞模型．研究了麻醉药氯胺酮的影响。用MTT法测定细胞增殖作用。分别研究了1．56mW／cm^2He—Ne激光(0，10，30，100和300s照射)对人正常皮肤成纤维细胞的增殖作用和氯胺酮(0，0．6，1．2和2．0μg／mL)预处理划He—Ne激光(300s照射)细胞增殖作用的影响。氯胺酮(0．6，1．2,2．0μg/mL)预处理能抑制468．7mJ／cm^2He—Ne激光促人正常皮肤成纤维细胞增殖的作用。这说明动物实验中用于麻醉的药物可能对激光促进伤口愈合的实验结果有影响。     

ALA联合HPD光动力学治疗对S180腹水瘤细胞的影响的研究

目的 :通过细胞学水平研究确定ALA配合小剂量HPD激光光动力疗法促使肿细胞死亡及凋亡的光敏药用药剂量及与二者单独使用的差别方法 :以不同剂量的ALA(40 μg/ml、80 μg/ml、16 0 μg/ml)、HPD(2 .5 μg/ml、5 μg/ml、10 μg/ml)、二者联合与S180腹水瘤细胞一起培养 ,随后以 6 30nm半导体激光 2 0 0mW /cm2 ,照射肿瘤细胞 ,照射 2 0分钟 ,及与不用光敏剂单照激光、单用光敏剂不照光、不用光敏剂不照激光空白对照组比较。以流式细胞仪及倒置微镜观察促使肿瘤细胞凋亡或死亡的差别 ,寻找促使肿瘤细胞凋亡或死亡的最小合适剂量。结果 :ALA4 0 μg/ml配合HPD2 .5 μg/ml与S180腹水瘤细胞同时培养 ,6 30半导体激光 2 0 0mW /cm2 ,照射 2 0分钟组从形态学观察及流式细胞仪测定是能达到较佳的细胞凋亡的最小用光敏剂剂量。单纯ALA -PDT组中能达到小鼠S180腹水瘤细胞明显凋亡的最小剂量是ALA(80 μg/ml) ,单纯HPD -PDT组中能达到小鼠S180腹水瘤细胞明显凋亡最小剂量是HPD(5 μg/ml)。结论 :ALA4 0mg/kg配合HPD2 .5mg/kg ,6 30半导体激光2 0 0mW /cm2 ,照射 2 0分钟是能达到小鼠S180腹水瘤细胞明显凋亡的最小光敏剂剂量。