一株产普鲁兰酶芽孢杆菌的筛选鉴定及发酵条件优化

从甘肃定西某淀粉加工厂附近土壤中分离得到一株产普鲁兰酶酶源菌AI-1,通过形态学、生理生化试验及16S rRNA序列鉴定并对其进行系统发育分析,鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),对其发酵培养基成分和发酵条件进行了优化。优化后的发酵培养基成分为:可溶性淀粉1.5%,酵母膏1%,蛋白胨1%,NaCl0.5%,K2HPO40.1%,MgSO4·7H2O 0.05%;最佳发酵条件为:培养温度36℃,发酵培养基初始pH 7.0,接种量8%(V/V),摇床转速150 r/min,发酵周期72 h。在此优化条件下,菌株AI-1发酵所产普鲁兰酶的酶活由最初的2.45 U/m L提高到了4.52 U/m L。     

一株产普鲁兰酶芽孢杆菌的筛选鉴定及发酵条件优化

从甘肃定西某淀粉加工厂附近土壤中分离得到一株产普鲁兰酶酶源菌AI-1,通过形态学、生理生化试验及16S rRNA序列鉴定并对其进行系统发育分析,鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),对其发酵培养基成分和发酵条件进行了优化。优化后的发酵培养基成分为:可溶性淀粉1.5%,酵母膏1%,蛋白胨1%,NaCl0.5%,K2HPO40.1%,MgSO4·7H2O 0.05%;最佳发酵条件为:培养温度36℃,发酵培养基初始pH 7.0,接种量8%(V/V),摇床转速150 r/min,发酵周期72 h。在此优化条件下,菌株AI-1发酵所产普鲁兰酶的酶活由最初的2.45 U/m L提高到了4.52 U/m L。     

普鲁兰酶产生菌的筛选、鉴定及其发酵条件优化

从土壤中分离出一株产普鲁兰酶活性较高的菌株Z1,初步鉴定为盐球菌（Halococcus sp．）。研究了其产酶最适条件,确定产酶最适碳源为糯米淀粉、最适氮源为酵母膏＋蛋白胨,优化的培养条件如下：发酵初始pH值为6．0,接种量为14％,500mL摇瓶装液量为150mL,转速为180r·min^-1,培养温度为30℃,培养时间为52h。在优化条件下产酶量达到最高峰,酶活力可达5．06U·mL^-1。     

嗜温耐乙醇β-葡萄糖苷酶高产菌株及其性质

从生物质资源丰富的武夷山中采样天然腐烂枯枝、烂叶、土壤等材料中分离筛选,采用对硝基酚-β-葡萄糖苷(pNPG)法对复筛菌株进行酶活测定,得到一株高产β-葡萄糖苷酶菌株,并对其酶学性质进行研究,结果表明:该酶的液体发酵最高酶活高达482.1U/mL,最适反应pH值为4.8,最适反应温度为65℃;乙醇浓度为10%对酶活有最大促进作用,对β-葡萄糖苷酶酶活提高将近1倍,乙醇耐受能力高达30%。将该酶应用于同步糖化发酵中,发酵至120h得乙醇最高产量,所产乙醇含量高达41.25g/L,与阴性、阳性对照相比,乙醇产量提高近2倍。该菌株所产的β-葡萄糖苷酶酶活力较高,应用于同步糖化发酵过程具有明显的促进效果,对于促进纤维素乙醇的产业化进程具有广阔的发展前景。     

用于环保的耐热脂肪酶产生菌Wi-3的诱变及其酶学特性研究

从福州温泉澡堂排水道中分离筛选到一株可用于环保的耐热脂肪酶产生菌株Wi-3,经UV NTG复合诱变,选育出突变株Wi-3-3和Wi-3-5,其酶活比出发菌株分别提高了32.3%和11.8%.对Wi-3-3的产酶条件进行研究,结果表明在35℃、起始pH值7.0、250 mL摇瓶装量为35 mL、接种量为4 mL(菌浓1.5×108个·mL-1)、发酵周期为35 h的培养条件下产酶最高.用硫酸铵提取Wi-3-3发酵液中脂肪酶进行酶学特性的初步研究,结果表明其最适反应pH值为8.6、最适反应温度为55℃.     

南极低温降解卡拉胶菌株的筛选、鉴定、产酶条件及酶学性质的初步研究

采用卢戈氏碘液染色法从6种海藻中筛选出高产卡拉胶降解酶菌株S942,对其种属进行了鉴定,对菌株产酶条件进行了优化,并对酶学性质进行了初步研究。16S r DNA序列鉴定结果表明,S942菌株为假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.);菌株S942产卡拉胶降解酶的最适条件为:培养时间24 h、初始pH值7.0、培养温度37℃、碳源为0.2%卡拉胶、氮源为硫酸铵、添加Ca2+、接种量5%、摇床转速150 r·min-1;酶催化反应的最适反应温度为37℃、最适反应pH值为7.0。     

降解秸秆的纤维素酶产生菌的筛选及产酶条件研究

从土壤、霉变的农产品和实验室保存的真菌中筛选到15株产纤维素酶的菌株,其中绿色木霉T206产酶能力最强。利用液体发酵,研究了碳源、氮源、接种量、起始pH值、培养时间等对菌株产酶的影响,以及该菌株所产纤维素酶的种类。在最适条件下菌株培养96h后,羧甲基纤维素酶活(CMCA)最高达到7654.33U,是优化前酶活的1.7倍,滤纸酶活(FPA)达到1675.12U。     

产脂肪酶菌株的筛选、鉴定及其发酵条件优化

通过维多利亚蓝显色培养基筛选从平顶山当地土样和食堂油污中筛选获得一株产脂肪酶菌株BA-4,经形态学观察及16S rDNA分子鉴定,初步确定该菌株属于不动杆菌属。对其产酶条件的研究显示,该菌株最适发酵培养基初始pH为7.5,发酵温度35℃,转速200 r/min,培养时间48 h。     

拟青霉E7蛋白酶发酵条件及酶性质研究

针对产蛋白酶的淡紫拟青霉E7菌株发酵条件进行优化,得到利于产酶发酵培养基配方:以2%大豆粉为碳源、2%麦麸及1%硝酸铵为氮源,pH值7.0,28℃,150 mL三角瓶装液量为30 mL,培养时间72h.对该酶性质研究结果表明:蛋白酶在40 ℃热稳定性较好,最适pH值为10.5,在pH值9～11范围内具有较高的酶活与耐碱性.     

产壳聚糖酶微生物的筛选及产酶条件的优化

目的 从土壤中筛选能降解壳聚糖的微生物,并优化其产酶条件。方法利用平板筛选法对采集的土壤中的微生物进行富集培养、初筛和复筛,得到能降解壳聚糖的菌株,并对降解壳聚糖能力最强的菌株进行发酵培养,优化产酶条件。结果筛选出3株产壳聚糖酶菌株,编号为C-01、C-02和C-03,其中,C-01、C-02为细菌,C-03为霉菌。C-01菌株产酶能力最强,其最适产酶条件为:以1%粉末壳聚糖+0.1%葡萄糖为碳源,0.5%(NH4)2SO4+0.5%蛋白胨为氮源,培养基初始pH值8.0,培养温度30℃,菌株接种量2.0%,培养时间48 h。在最适条件下,壳聚糖酶活力可达7.78 U/ml。结论已筛选出1株高产壳聚糖酶的菌株,并优化了其产酶条件,为壳寡糖的生产及应用奠定了基础。     

一株碱性纤维素酶高产菌株的分离、鉴定、系统发育分析及酶学性质的研究

对从土样中分离得到的一株碱性纤维素酶高产菌株H9进行了鉴定,该菌株呈长杆状,革兰氏染色为阳性,产芽孢.通过对其形态、生理生化特性、16S rDNA基因序列(该序列已收录于Genebank,登录号为EF501974)同源性分析的多相分类研究,确定该菌株为短小芽孢杆菌.对酶的性质研究表明,其最适pH值为8,最适温度为55℃,在pH值5～9范围内具有良好的稳定性.     

香蕉假茎中产碱性果胶酶细菌的筛选发酵优化与酶学性质

利用果胶酶处理天然纤维对环境污染小,然而筛选高产量的菌株仍是降低成本获得果胶酶的关键。本文利用以果胶为唯一碳源的培养基,从香蕉假茎中分离筛选出了一株具有较高果胶酶活性的菌株。经16S rDNA序列分析表明,该菌株与枯草芽孢杆菌(Bacillus substilis)具有99%的相似性,将该菌株命名为Bacillus sp. ZLXH-5。该菌株最佳发酵时间为2天,最佳发酵温度是37℃,最佳初始pH值是5,最佳转速是180r/min,最佳葡萄糖浓度为15g/L。通过发酵条件优化,果胶酶产量提高了56.6%。对粗酶液的性质进行分析,其在55℃下达到最佳反应速率,最适催化pH值是8.5,不同的离子对于果胶酶的活性起到不同的效果。由于该菌株具有较高的果胶酶活性,可以利用该菌株对香蕉假茎进行生物脱胶。     

环境中纤维素降解菌群的筛选与降解活性分析

分别从富含腐殖质的土壤,造纸厂原料堆放处和排污口污泥中筛选得到9组纤维素分解能力强且性能稳定的纤维素混合菌群S1,S2,S3,S4,S5,J1,J2,J3,J4。它们的初始培养条件为培养基初始pH值6-8,培养温度50-60℃,静置培养。将这9组混合菌群在各自的最适温度和初始pH值下培养3天,分别于24h,48h,72h测定CMC酶活,测得的最高的三个CMC酶活分别出现在S1的72h,S2的48h和J1的48h,分别为33．1,37．7和34．1U·mL^-1。     

光合细菌提高铅、镉及呋喃丹复合污染土壤中酶活性的研究

研究了不同理化因素对光合细菌球形红细菌(Rhodobacter sphaeroides)提高铅、镉和呋喃丹复合污染土壤酶活性的影响.结果表明,该菌株提高转化酶和磷酸酶的最佳条件均为:pH7、温度30℃及加菌量108个/g土.在最佳条件下,转化酶和磷酸酶的活性分别相对提高52.65%和19.35%.因此,光合细菌能明显提...     

青霉素酰化酶在新型复合载体上的固定化研究

在反应温度为45℃、反应时间为6 h、丙烯酰胺(AM)质量浓度为40 g/L、引发剂用量为单体质量1%的条件下制得PAM-SiO2复合载体,利用红外光谱表征了其化学结构,热失重法测定其接枝量为21%。在所制PAM-SiO2复合载体上固载青霉素酰化酶,其固载最适条件为:戊二醛用量0.1 mmol/L,pH值7.64,给酶量1%,温度42℃,时间11 h~12 h。此条件下所得固定化酶的活力为34000 U/mL;测得所制固定化酶的最适pH值为7.82,最适温度为45℃。     

产碱性脂肪酶菌株的筛选和培养

以Rodamine B平板筛选法获得了一株高活力碱性脂肪酶产生菌Pseudomonas sp. ZJU-02.摇瓶产酶实验表明，适宜产酶培养基为(%)：玉米浆3，植物油1, K2HPO4 0.1, KCl 0.05, MgSO4 0.05, Tween80 0.05；最佳培养条件为温度26℃、初始pH 6.5. 脂肪酶活力可高达86 IU/ml. 该酶在70℃以下、pH 7.0~10.5范围内稳定；酶反应的适宜温度为40℃，适宜pH为9.5. 该酶制剂在洗涤剂和制革工业中有良好的应用前景.     

一株脂肪酶产生菌及其脂肪酶催化性质的初步研究

从各种含油脂的土壤中筛选分离到一株高选择性拆分(R,S)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯[(R,S)-HPBE]的产脂肪酶菌株CF-12,经形态观察、生理生化试验和16S rDNA序列分析,鉴定该菌为沙雷氏菌属（Serratia sp.）。对菌株CF-12产脂肪酶的发酵条件进行了初步优化,确定最适产酶条件为：蔗糖5 g/L,酵母粉10 g/L,金属离子Mg²⁺ 0.75 mmol/L,发酵培养24 h,脂肪酶活性可达20.1 U/mL。该脂肪酶最适反应温度和pH值分别为40 ℃和7.0。利用冻干酶粉拆分 (R,S)-HPBE 15 h,(R)-HPBE产率达39.6%,ee=90.8%。     

蛋清溶菌酶的提取分离与酶活研究

以鸡蛋清为原料,采用正交实验分别确定盐析法与离子交换法两种提取方法的最佳条件,同时采用比浊法测定酶活力。确定了盐析法从蛋清中提取溶菌酶的最佳条件是：加入蛋清滤液体积5%的氯化钠;结晶的温度4℃;结晶的时间为4天;离子交换法的最佳吸附条件为：蛋清树脂比5∶1,pH 7.0,搅拌吸附时间为4 h。离子交换法所得酶的产量与活力均高于盐析法。     

海藻酸钠-明胶协同固定化S-腺苷甲硫氨酸合成酶的研究

以海藻酸钠和明胶为载体,对S-腺苷甲硫氨酸合成酶进行固定化。再用戊二醛对其进一步交联,增强固定化酶的稳定性。考察了海藻酸钠和明胶质量分数、CaCl2质量分数、酶和载体比例以及交联剂戊二醛体积分数等因素对固定化酶的影响。结果表明,最佳固定化条件为:海藻酸钠质量分数2.0%、明胶质量分数1.0%、CaCl2质量分数4.0%、固定化酶量为2.5 g/L凝胶、戊二醛体积分数0.6%。交联固定化酶热稳定性得到大幅度提高,在50℃下保温5 h仍保留72%的活力,而游离酶则完全失活。交联固定化酶在碱性溶液中的稳定性较高,在pH=8.0～9.0的缓冲液中4℃保温10 h酶活性仍保留87%以上。将交联固定化酶用于S-腺苷甲硫氨酸的合成,连续反应8批次后酶活性仍保留65%。