低强度中频超声杀伤卵巢癌细胞的初步研究

目的:观察低强度中频超声时人卵巢癌细胞的杀伤作用.方法:取对数乍长期的H08910细胞,分成实验组和假辐照组,以低强度中频超声(频率1.7MHz)辐照用MTT法计算细胞抑制率;光镜观察细胞形态,Hoechst33258荧光染色法检测凋亡细胞.结果:低强度中频超声照射各组间细胞抑制率工对照组相比有统计学差异,光镜下可见细...     

低强度超声对小鼠肝癌H_（22）细胞抑制效应的初步研究

目的：观察低强度超声对小鼠肝癌H22细胞体外生长的影响。方法：以低强度超声辐照小鼠肝癌H22细胞,采用倒置显微镜观察和MTT法检测观察超声对小鼠肝癌H22细胞的抑制作用。结果：低强度超声波能够显著抑制小鼠肝癌H22细胞的增殖,并且跟辐照时间呈剂量依赖关系。辐照后24h其MTT光吸收值随着超声作用时间的延长而显著降低。结论：低频超声辐照对小鼠肝癌H22细胞体外生长具有明显的抑制作用。     

毫米波辐照诱导鼻咽癌细胞凋亡及分子机制的实验研究

采用细胞计数、光镜和FOM等方法检测毫米波对人鼻咽癌CNE1细胞增殖、细胞凋亡及相关基因表达的影响,结果发现：波长为7.1mm,频率为42.2GHz,功率密度为1mW/cm^2的毫米波辐照,1次／日,30min／次,照射4次,能显著抑制CNE1细胞增殖和克隆形成;并诱导细胞凋亡,光镜下可见到明显的凋亡细胞,FCM示调亡百分比显著增加。FCM结果表明其增殖抑制作用与P21表达上调及Cyclin D1表达下调有关,其调亡诱导机制可能是非P53依赖的途径,而主要通过上调c-Myc、下调Bcl-2和Fas基因的表达来实现。     

低强度超声对鼻咽癌细胞线粒体膜电位的影响

目的:观察低强度超声对鼻咽癌细胞线粒体膜电位的影响.方法:以低强度超声(频率1.7 MHz,剂量1.35W/cm2)辐照鼻咽癌细胞,采用Rhodamine123染色送CLSM下检测鼻咽癌细胞线粒体膜电位的变化.结果:超声波能够量著损伤鼻咽癌CNE2细胞线粒体,辐照后孵育4h,CLSM 下光吸收值与对照组相比显著降低,结...     

低强度超声对鼻咽癌细胞生物学效应的研究

目的：研究不同剂量低强度超声对人低分化鼻咽癌细胞CNE-2的急,、慢性生物学效应。方法：人鼻咽癌细胞CNE-2受不同剂量、频率为1.7MHz的超声波辐照,利用台盼兰染色法确定三种未致细胞急性损伤的超声剂量,并观察受此三种剂量超声辐照后细胞的增殖能力以及克隆形成力的变化。结果：0.30W/cm^2×35s、0.65W/cm^2×10s和1.35W/cm^2×5s未致细胞急性死亡。受0.30W/cm^2×35s、0.65W/cm^2×10s、1.35W/cm^2×5s辐照及对照组细胞倍增时间分别为：15.8h、23.6h、31.6h和22.9h;克隆形成率分别为：（41.54±1.48）%、（25.41±1.70）%、（15.62±1.60）%和（28.03±1.2）%。受0.30W/m^2×35s辐照后细胞增殖和克隆形成较对照组均有所增加,受1.35W/cm^2×5s辐照后细胞增殖和克隆形成较对照组均受到抑制。（p〈0.05）结论：CNE-2细胞对超声敏感性高,其生物学效应取决于超声剂量。     

双氢青蒿素对骨肉瘤细胞143B影响的研究

目的：研究双氢青蒿素（Dihydroatemisinine,DHA）对人骨肉瘤细胞143B的影响及所导致的形态学变化。方法：采用人骨肉瘤143B细胞株,通过设置对照组和低浓度、中浓度、高浓度的DHA组,H．E染色观察Trandwell小室穿梭能力;划痕愈合实验观察迁移能力;Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡;MTT法检测细胞增殖抑制能力。结果：DHA表现出明显地抑制人骨肉瘤143B细胞的迁移、增殖以及促进凋亡（P〈0．05）,且伴随浓度的递增和时间的延长,抑制作用更明显。结论：DHA具有较强的抗入骨肉瘤作用,其机制可能与DHA诱导骨肉瘤细胞凋亡,并抑制其增殖有关。     

低强度中频超声对白血病细胞株k562杀伤作用的初步研究

目的：研究低强度中频超声对白血病细胞株K562的杀伤作用。方法：取对数生长期的K562细胞,分成实验组和假辐照组,用MTT法和台盼兰染色计算细胞抑制率。结果：低强度中频超声照射各组间细胞抑制率与对照组相比有统计学差异,且组间存在统计学差异。结论：单纯低强度中频超声对白血病细胞株K562有较强的杀伤作用,且其杀伤效应与照射强度和时间明显相关。     

MPPA光动力作用诱导人鼻咽癌细胞凋亡的实验研究

为观察MPPa光动力作用对鼻咽癌细胞凋亡的影响,应用AnnexinV—PI双染结合流式细胞仪分析MPPa光动力作用后人鼻咽癌细胞株CNE2细胞发生凋亡和继发性坏死的比率。结果显示MPPa光动力作用实验组人鼻咽癌细胞株CNE2细胞发生凋亡和继发性坏死的比率分别增加到16.43 %和4.64 % ,且均显著高于单纯光照射组、单纯MMPa光敏剂处理组和假照射组(P <0 .0 1) ,而三对照组间无明显差异(P >0 .0 5 )。表明MPPa光动力作用能有效诱导低分化人鼻咽癌细胞株CNE2细胞凋亡的发生。这也可能是MPPa光动力作用杀伤鼻咽癌的重要机制之一。     

低强度两种波长激光对KB细胞增殖与凋亡的影响

比较同等照射条件下的低强度532nm、632.8nm激光对人口腔上皮癌（KB）细胞增殖及凋亡的影响，用MTT法检测细胞增殖，用DNA电脉、TUNEL法检测细胞凋亡，结果表明：在0.4j/cm^2-10.0j/cm^2的剂量范围内，632.8nm激光可以显著促进KB细胞增殖，而532nm激光作用不明显：上述两种波长激光在剂量为30j/cm^2、50j/cm^2时均不能诱导细胞凋亡。     

金丝桃素光动力作用诱导人鼻咽癌细胞凋亡

为了观察中药金丝桃素光动力作用对鼻咽癌细胞凋亡的影响,应用膜联蛋白AnnexinV-PI双染结合流式细胞仪,分析了中药金丝桃素光动力作用后,人鼻咽癌细胞株CNE2细胞发生凋亡和继发性坏死的比率。中药金丝桃素光动力作用实验组人鼻咽癌细胞株CNE2细胞发生凋亡和继发性坏死的比率分别增加到53.08%和6.77%,且均显著高于单纯光照射组、单纯金丝桃素光敏剂处理组和假照射组(P< 0.01),而单纯光照组、单纯金丝桃素光敏剂处理组和假照射组三对照组间无明显差异(P> 0.05)。中药金丝桃素光动力作用能有效诱导人鼻咽癌细胞株CNE2细胞凋亡的发生,这也可能是金丝桃素光动力作用杀伤鼻咽癌的重要机制之一。     

HIF-1α对低氧培养人鼻咽癌细胞侵袭转移能力的影响

目的:观察HIF-1α对低氧培养鼻咽癌细胞侵袭转移能力的影响.方法:以高转移人鼻咽癌细胞CNE2为研究对象,HIF-1α siRNA 通过脂质体转染CNE2,Realtimes RT-PCR及ELISA法检测培养细胞上清中MMP-2、MMP-9的含量,Transwell小室观察CNE2的转移侵袭能力.结果:低氧能显著升...     

ALA联合HPD光动力学治疗对S180腹水瘤细胞的影响的研究

目的 :通过细胞学水平研究确定ALA配合小剂量HPD激光光动力疗法促使肿细胞死亡及凋亡的光敏药用药剂量及与二者单独使用的差别方法 :以不同剂量的ALA(40 μg/ml、80 μg/ml、16 0 μg/ml)、HPD(2 .5 μg/ml、5 μg/ml、10 μg/ml)、二者联合与S180腹水瘤细胞一起培养 ,随后以 6 30nm半导体激光 2 0 0mW /cm2 ,照射肿瘤细胞 ,照射 2 0分钟 ,及与不用光敏剂单照激光、单用光敏剂不照光、不用光敏剂不照激光空白对照组比较。以流式细胞仪及倒置微镜观察促使肿瘤细胞凋亡或死亡的差别 ,寻找促使肿瘤细胞凋亡或死亡的最小合适剂量。结果 :ALA4 0 μg/ml配合HPD2 .5 μg/ml与S180腹水瘤细胞同时培养 ,6 30半导体激光 2 0 0mW /cm2 ,照射 2 0分钟组从形态学观察及流式细胞仪测定是能达到较佳的细胞凋亡的最小用光敏剂剂量。单纯ALA -PDT组中能达到小鼠S180腹水瘤细胞明显凋亡的最小剂量是ALA(80 μg/ml) ,单纯HPD -PDT组中能达到小鼠S180腹水瘤细胞明显凋亡最小剂量是HPD(5 μg/ml)。结论 :ALA4 0mg/kg配合HPD2 .5mg/kg ,6 30半导体激光2 0 0mW /cm2 ,照射 2 0分钟是能达到小鼠S180腹水瘤细胞明显凋亡的最小光敏剂剂量。     

汉防己甲素对兔眼角膜基质细胞增殖和凋亡作用的比较研究

目的：探讨汉防己甲素（Tet）对离体兔眼角膜基质细胞抑制增殖作用,及其对增殖率和凋亡率的作用程度比较。方法：选用原代及传代兔角膜基质细胞,实验组加入含不同浓度Tet的培养液,对照组加入含等量PBS的培养液。通过免疫细胞化学技术了解细胞的PCNA表达来枪测细胞增殖情况,计算增殖率并测定变化;流式细胞仪（FCM）测定细胞周期和凋亡率的变化。结果：Tet质量浓度为2μg／ml,3μg/ml,4μg／ml时,作用48h,随着Tet浓度的增大,PCNA阳性细胞数明显减少,角膜基质细胞的增殖率呈递减趋势,存在剂量一效应关系（P〈0．05）;FCM结果显示,随着Tet的浓度增大,实验组G0／G1期细胞增加,细胞删期阻滞在G1期,见细胞凋亡峰,凋亡率也随浓度增大而升高（P〈0．05）;Tet对增殖率影响的曲线斜率绝对值明显大于对调亡率作用的斜率绝对值,结论：Tet对角膜基质细胞的PCNA的表达具有明显抑制作用,随Tet浓度增大,角膜基质细胞的增殖率下降,Tet通过将细胞阻滞在G1期而发挥其抗增殖作用,且存在剂量效应关系;Tet诱导细胞凋亡,且也存在剂量效应关系,随浓度增大,凋亡率增加;在2μg/ml．3μm/ml,4μg／ml的浓度内,Tet对角膜基质细胞同时具有抑制增殖和诱导凋亡作用,但以抑制增殖作用为主.     

ALA光动力学治疗对C6胶质瘤细胞凋亡的影响

目的:通过细胞学水平研究不同剂量ALA光动力学治疗对C6胶质瘤细胞细胞凋亡的影响。方法:以不同剂量的ALA(10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)与C6胶质瘤细胞一起培养,随后以630nm半导体激光200mW/cm2,照射肿瘤细胞,照射20分钟,及与不用光敏剂单照激光、单用光敏剂不照光、不用光敏剂不照激光空白对照组比较。以流式细胞仪及倒置微镜、电镜观察促使肿瘤细胞凋亡或死亡的差别,寻找促使肿瘤细胞凋亡或死亡的最小合适剂量。结果:对照组没有细胞凋亡,ALA-PDT组随着剂量的增加细胞凋亡数增加。尤其晚期凋亡数明显增加,用药剂量增加至40μg/cc才能达到活细胞少于50%,即使剂量增加到160μg/cc,还是有19.7423的活细胞存在。结论:单纯用ALA激光PDT治疗不能达到完全将肿瘤细胞杀灭,ALA40mg/kg激光光动力学治疗才能得到明显的治疗效果。     

ALA联合HPD光动力学治疗鼠S180肉瘤研究

目的通过鼠肿瘤动物模型确定ALA配合小剂量HPD激光光动力疗法促使肿细胞死亡及凋亡的疗效及光敏药物最佳用药剂量。方法以不同剂量的ALA口服(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml)、HPD2.5μg/ml静脉注射、24小时后,以630nm半导体激光250mW/cm2照射,每光斑照射20分钟剂量,照光前及照光后不同时间以肉眼、肿瘤大小测定、病理、电镜、流式细胞仪观察单纯ALA-PDT、HPD-PDT、二者配合的疗效差别并与未作光动力学治疗的空白对照组模型作比较,寻找最佳的光敏药物配合的剂量。结果ALA20-40μg/ml口服配合HPD2.5μg/ml静脉注射作半导体630nm激光250mW/cm2照射20分钟组光动力学治疗组,从形态学观察,肿瘤大小测定、病理、电镜、流式细胞仪观察是能达到较佳的肿瘤坏死变性、细胞凋亡、肿瘤消失的最小用光敏剂剂量。结论ALA20-40mg/kg配合HPD2.5mg/kg,630半导体激光250mW/cm2,照射20分钟是能到小鼠S180肉瘤肿瘤模型光动力学治疗最佳疗效的最小光敏剂剂量。     

雷帕霉素对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的：观察雷帕霉素对人脐静脉内皮细胞增殖的影响,探讨其可能的抑制新生血管的作用机制。方法：采用四唑盐比色试验（MTT）法检测不同浓度（0.1ng/ml,1ng/ml,10ng/ml,20ng/ml）的雷帕霉素对血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）增殖的抑制作用。结果：不同浓度的雷帕霉素均能抑制由VEGF诱导的HUVEC增殖。结论：雷帕霉素能抑制HUVEC的增殖,且呈剂量依赖。雷帕霉素通过抑制血管内皮细胞的增殖来抑制新生血管的形成。     

XIAP表达水平对5-Fu诱导肝癌细胞凋亡的影响

目的研究XIAP mRNA及蛋白表达水平对不同剂量5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-Fu）诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的影响。方法脂质体介导含XIAP基因全长的质粒pef-XIAP转染人肝癌细胞HepG2,采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）及western blotting检测XIAP基因和蛋白表达水平。通过不同剂量5-Fu诱导细胞凋亡,使用CCK-8试剂通过比色法分析检测5-Fu对转染pef-XIAP的HepG2细胞生长活性的抑制作用。结果各组HepG2细胞在不同剂量的5-Fu诱导下发生凋亡、与普通HepG2细胞组比较．转染XIAP基因的HepG2细胞组的凋亡率显著降低。结论XIAP基因在人肝癌细胞HepG2中的高表达可以明显降低化疗药物5-Fu诱导的细胞凋亡,其可能在肝癌化疗耐药中起一定作用。