ALA联合HPD光动力学治疗对C6胶质瘤细胞影响的研究

目的通过细胞学水平研究确定ALA配合小剂量HPD激光光动力疗法促使肿细胞凋亡及死亡的光敏药用药剂量及与两者单独使用的差别.方法以不同剂量的ALA(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ ml、80μg/ ml、160μg/ ml)、HPD(1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml、4μg/ml、5μg/ml)、两者联合与C6胶质瘤瘤细胞一起培养,随后以630nm半导体激光200mW/cm2,照射肿瘤细胞,照射20分钟,及与不用光敏剂单照激光、单用光敏剂不照光、不用光敏剂不照激光空白对照组比较.以流式细胞仪及倒置显微镜、电镜观察促使肿瘤细胞凋亡或死亡的差别,寻找促使肿瘤细胞凋亡或死亡的最小合适剂量.结果ALA40μg/ml配合HPD2.5μg/ml与C6胶质瘤细胞同时培养,630半导体激光200mW/cm2,照射20分钟组从倒置显微镜及电镜形态学观察及流式细胞仪测定是能达到较佳的细胞凋亡的最小光敏剂剂量.单纯ALA-PDT组中能达到小鼠C6胶质瘤细胞明显凋亡的最小剂量是ALA(80μg/ml),单纯HPD-PDT组中能达到小鼠C6胶质瘤细胞明显凋亡最小剂量是HPD(5μg/ml).结论ALA40mg/kg配合HPD2.5mg/kg,630半导体激光200mW/cm2,照射20分钟是能达到小鼠C6胶质瘤细胞明显凋亡的最小光敏剂剂量.     

ALA联合HPD光动力学治疗对鼠G422胶质瘤影响的研究

目的:通过鼠G422胶质瘤研究确定ALA联合小剂量HPD激光光动力疗法促使肿瘤细胞凋亡及死亡的光敏药用药剂量及与两者单独使用的差别.方法:以不同剂量的HPD(1、2、3、4、5 mg/kg)、ALA(20、40、60、80、160 mg/kg)、两者联合口服与静脉注射鼠G422脑胶质瘤瘤模型,随后以630nm半导体激光200mW/cm2 照射肿瘤.照射20分钟,及与不用光敏剂单照激光、单用光敏剂不照光、不用光敏剂不照激光空向对照组比较.以流式细胞仪、电镜观察促使肿瘤细胞凋亡或死亡的差别,病理,肿瘤生长曲线观察治疗肿瘤,促使肿瘤细胞凋亡及死亡的最小合适剂量.结果:HPDl-2mg/kg联合ALA40-60 mg/kg给药,630半导体激光200mW/cm.,照射20分钟组,从流式细胞仪测定细胞凋亡、死亡及电镜、病理及肿瘤生长曲线形态学观察,其是能达到较佳的细胞凋亡、死亡的最小、合适的光敏剂剂量.单纯ALA-PDT组中能达到鼠G422胶质瘤细胞明显凋亡的最小剂量是ALA(80-160mg/kg),单纯HPD-PDT组是HPD4-5mg/kg.结论:HPDI一2mg/kg配合ALA40-60mg/kg,630半导体激光200mW/cm2,照射20分钟是能达到鼠G422胶质瘤细胞明显凋亡死亡,治疗肿瘤合适的最小光敏剂剂量.     

ALA联合HPD光动力学治疗对S180腹水瘤细胞的影响的研究

目的 :通过细胞学水平研究确定ALA配合小剂量HPD激光光动力疗法促使肿细胞死亡及凋亡的光敏药用药剂量及与二者单独使用的差别方法 :以不同剂量的ALA(40 μg/ml、80 μg/ml、16 0 μg/ml)、HPD(2 .5 μg/ml、5 μg/ml、10 μg/ml)、二者联合与S180腹水瘤细胞一起培养 ,随后以 6 30nm半导体激光 2 0 0mW /cm2 ,照射肿瘤细胞 ,照射 2 0分钟 ,及与不用光敏剂单照激光、单用光敏剂不照光、不用光敏剂不照激光空白对照组比较。以流式细胞仪及倒置微镜观察促使肿瘤细胞凋亡或死亡的差别 ,寻找促使肿瘤细胞凋亡或死亡的最小合适剂量。结果 :ALA4 0 μg/ml配合HPD2 .5 μg/ml与S180腹水瘤细胞同时培养 ,6 30半导体激光 2 0 0mW /cm2 ,照射 2 0分钟组从形态学观察及流式细胞仪测定是能达到较佳的细胞凋亡的最小用光敏剂剂量。单纯ALA -PDT组中能达到小鼠S180腹水瘤细胞明显凋亡的最小剂量是ALA(80 μg/ml) ,单纯HPD -PDT组中能达到小鼠S180腹水瘤细胞明显凋亡最小剂量是HPD(5 μg/ml)。结论 :ALA4 0mg/kg配合HPD2 .5mg/kg ,6 30半导体激光2 0 0mW /cm2 ,照射 2 0分钟是能达到小鼠S180腹水瘤细胞明显凋亡的最小光敏剂剂量。     

ALA联合HPD光动力学治疗对C6胶质瘤细胞细胞内钙离子变化的研究

目的:研究ALA、HPD及ALA联合HPD光动力学治疗对C6胶质瘤细胞细胞内钙离子变化,方法:以不同剂量ALA(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)、HPD(1μg/ml、2μg/ml、3pg/ml、4μg/ml、5μg/ml)及不同剂量组合ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞,应用Fluo-3AM为细胞内钙离子荧光指示剂,以激光共聚焦显微镜测定对照组及光动力学组照光后培养24小时活细胞细胞内钙离子含量,及测定单激光及对照组、光动力学治疗组照光前36秒及照光20分钟至停照光后20-100分钟细胞内钙离子浓度的动态变化,每12秒测定一次.结果:空白对照组、单激光、单加光敏剂组活C6胶质瘤细胞显示钙离子荧光值,在120分钟内变化较小.而光动力学治疗组,初照光5-15分钟内荧光明显慢慢增强,以后就逐渐下降,光敏药剂量大的初5-10分钟内荧光亮度上升很快,以后下降也快,可下降为0,剂量越大变化越明显,且光敏剂ALA较HPD更明显.二光敏剂联合组以上反应更明显,HPDl-2μg/ml联合ALA40-60μg/ml与HPD 5μg/ml组动态图相似.结论:通过本实验可推测光动力学作用后细胞内钙离子超载可能在细胞凋亡及死亡中发挥重要作用.二光敏剂联合可提高疗效,降低HPD光敏剂用量,减少皮肤光毒付反应,HPDl-2μg/ml联合ALA40-60μg/ml是较合适的剂量.     

ALA联合HPD光动力学治疗鼠S180肉瘤研究

目的通过鼠肿瘤动物模型确定ALA配合小剂量HPD激光光动力疗法促使肿细胞死亡及凋亡的疗效及光敏药物最佳用药剂量。方法以不同剂量的ALA口服(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml)、HPD2.5μg/ml静脉注射、24小时后,以630nm半导体激光250mW/cm2照射,每光斑照射20分钟剂量,照光前及照光后不同时间以肉眼、肿瘤大小测定、病理、电镜、流式细胞仪观察单纯ALA-PDT、HPD-PDT、二者配合的疗效差别并与未作光动力学治疗的空白对照组模型作比较,寻找最佳的光敏药物配合的剂量。结果ALA20-40μg/ml口服配合HPD2.5μg/ml静脉注射作半导体630nm激光250mW/cm2照射20分钟组光动力学治疗组,从形态学观察,肿瘤大小测定、病理、电镜、流式细胞仪观察是能达到较佳的肿瘤坏死变性、细胞凋亡、肿瘤消失的最小用光敏剂剂量。结论ALA20-40mg/kg配合HPD2.5mg/kg,630半导体激光250mW/cm2,照射20分钟是能到小鼠S180肉瘤肿瘤模型光动力学治疗最佳疗效的最小光敏剂剂量。     

ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞基因P16及P53变化的研究

目的研究ALA、HPD及ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞瘤基因P16及P53变化.方法以不同剂量ALA(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)、HPD(1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml、4μg/ml、5μg/ml)及不同剂量组合ALA联合HPD光动力学治疗C6胶质瘤细胞,以流式细胞仪测试基因P16及基因P53的变化.结果本实验中未作PDT治疗的对照组,肿瘤细胞生长良好,可见P16值小于6.59%.P53值小于4%.而PDT治疗组随着光敏剂剂量的加大P16及P53基因值逐渐上升,是未作PDT治疗组的3-4倍,且两光敏剂混合组,P16及P53基因值大于单纯ALA或HPD-PDT治疗组.HPD1μg/ml联合ALA60μg/ml,HPD2μg/ml联合ALA40μg/ml就能达到HPD5μg/ml PDT治疗组P16基因及P53基因水平.结论推测PDT疗法激活了P16基因及p53基因功能,促使肿瘤细胞凋亡及坏死.联合疗法HPD1μg/ml联合ALA60μg/ml,HPD2μg/ml联合ALA40μg/ml光动力学治疗能达到HPD常规剂量5μg/ml PDT的效果,这样可明显提高ALA-PDT疗效及减少HPD-PDT的皮肤光毒反应.     

ALA联合HPD光动力学治疗鼠G422胶质瘤肿瘤细胞内钙离子变化的研究

目的:研究ALA、HPD及ALA联合HPD光动力学治疗鼠G422胶质瘤肿瘤细胞内钙离子变化.方法:以不同剂量ALA(20、40、60、80、160mg/kg、)、HPD(1、2、3、4,5mg/kg)及不同剂量组合ALA联合HPD光动力学治疗鼠G422胶质瘤肿瘤,应用Fluo-3AM为细胞内钙离子荧光指示剂,以激光共聚焦显微镜测定对照组及光动力学组照光后立即、一天、三天肿瘤活细胞细胞内钙离子含量,并同时测定单激光、单用光敏剂、及空白对照组鼠肿瘤细胞内钙离子表达.结果:空白对照组、单激光、单加光敏剂组鼠G422胶质瘤肿瘤显示3天内钙离子荧光值维持在较恒定值,光动力组在治疗后立即组可见钙离子值明显高于未作光动力学治疗的对照组,且与光敏剂剂量增加有关.光动力学治疗后一天及三天组肿瘤细胞内钙离子值明显低于立即组及未作光动力学治疗组.且与光敏剂剂量增加有关.ALA-PDT组较HPD-PDT组更明显.联合治疗组HPD1-2mg/kg联合LA40-60mg/kg光动力学治疗组肿瘤细胞内钙离子值接近HPD 5mg/kg光动力学治疗组.结论:通过本实验可推测光动力学作用后细胞内钙离子超载可能在细胞凋亡及死亡中发挥重要作用.二光敏剂联合可提高疗效,降低HPD光敏剂用量,减少皮肤光毒副反应,HPD1-2 mg/kg联合ALA40-60 mg/kg是较合适的剂量.     

ALA口服光动力学治疗鼠G22胶质细胞瘤的研究

目的:通过鼠肿瘤动物模型确定ALA口服激光光动力疗法促使肿细胞死亡及凋亡的疗效及光敏药物最佳用药剂量。方法:以不同剂量的ALA口服(20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、120μg/ml、240μg/ml)、以630nm半导体激光200mW/cm2照射,每光斑照射20分钟剂量,照光前及照光后不同时间以肉眼、肿瘤大小测定、病理、电镜、流式细胞仪观察疗效差别并与未作光动力学治疗的空白对照组模型作比较,寻找最佳的光敏药物配合的剂量。结果:随ALA口服剂量增加PDT疗效增加,口服剂量达60mg/kg疗效明显增加能抑止肿瘤生长,肿瘤变暗,质变硬,结痂,60mg/kg,120mg/kg,240mg/kg疗效相似,并不能达到完全的杀除肿瘤,该法作为肿瘤治疗若与HPD-PDT联合使用,可提高疗效,减少HPD剂量,减少避光时间,ALA-PDT可作肿瘤诊断,可避免了HPD光敏诊断的皮肤光毒反应。结论:光动力学治疗脑瘤口服剂量达60mg/kg疗效明显增加,能抑止肿瘤生长,剂量再增加疗效相似,并不能达到完全的杀灭肿瘤。     

HPPH光动力学治疗鼠G422脑胶质瘤诱导肿瘤细胞凋亡的实验观察

目的:通过对鼠G422脑胶质瘤脑及腋部皮下移植瘤模型的HPPH光动力学治疗,从电镜、FCM测定细胞凋亡率,观察各剂量组疗效,并与对照组及HpD-PDT作对比,寻找HPPH-PDT治疗鼠G422脑胶质瘤合适的HPPH剂量。方法:建立鼠G422脑胶质瘤脑及腋部皮下移植瘤模型,设立空白对照组、单注射HPPH 0.45 mg/kg组、单注射HpD组、单665 nm激光照射组、单630 nm激光照射组、HPPH-PDT各组(0.15、0.3、0.45 mg/kg组)、HpD-PDT 5 mg/kg组。单注射HPPH组、HPPH-PDT组和单注射HpD组、HpD-PDT组自尾静脉注入光敏剂,24 h后以波长665 nm的半导体激光照射HPPH-PDT组和单665 nm激光组肿瘤,功率密度200 mW/cm~2,每光斑照射17 min,能量密度为204 J/cm~2;以波长630 nm的半导体激光照射HpD-PDT组及单630nm激光照射组肿瘤,功率密度200 mW/cm~2,每光斑照射20 min,能量密度为240 J/cm~2。于PDT后9 d处死鼠,取肿瘤、肿瘤边缘、正常脑组织,作电镜、FCM细胞凋亡检查。结果:以流式细胞仪及电镜观察肿瘤细胞凋亡,显示鼠G422脑胶质瘤脑及皮下移植瘤HPPH-PDT各剂量组、HpD-PDT组与空白、单注药和单照光三组对照组比较,肿瘤细胞凋亡率明显升高,P<0.01,差别有统计学意义。HPPH-PDT各组细胞凋亡率高于HpD-PDT组,0.3 mg/kg、0.45 mg/kgHPPH-PDT组的细胞凋亡率明显高于0.15 mg/kgHPPH-PDT组,HpD-PDT组,P<0.01,差别有统计学意义,0.45 mg/kg HPPH-PDT组细胞凋亡率稍高于0.3 mg/kgHPPH-PDT组,P>0.05,差别无统计学意义。故HPPH0.3 mg/kg是适宜的HPPH-PDT光敏剂剂量。HPPH-PDT0.3 mg/kg组和HpD-PDT组比较,肿瘤细胞凋亡率明显升高,P<0.01,差别有统计学意义。故由肿瘤细胞凋亡率和电镜分析,HPPH-PDT能诱导鼠G422脑胶质瘤细胞凋亡,凋亡率与HPPH剂量相关,适宜的剂量为0.3 mg/kg;HPPH-PDT诱导鼠G422脑胶质瘤细胞凋亡的作用较HpD-PDT强。结论:从电镜、FCM观察HPPH-PDT对鼠G422脑胶质瘤生长有抑制作用,能诱导肿瘤细胞凋亡及死亡。凋亡率与HPPH剂量有关,适宜的剂量为0.3 mg/kg;HPPH-PDT诱导鼠G422脑胶质瘤细胞凋亡的作用较HpD-PDT强。     

ALA联合HPD光动力学治疗鼠G422脑胶质细胞肿瘤基因P16及P53变化的研究

目的:研究ALA、HPD及ALA联合HPD光动力学治疗鼠G422脑胶质细胞瘤肿瘤基因P16及P53表达的变化.方法:以不同剂量ALA(20mg/kg、40 mg/kg、60 mg/kg、80 mg/kg、160 mg/kg)、HPD(1 mg/kg、2 mg/kg、3 mg/kg、4 mg/kg、5mg/kg)及不同剂量组合ALA联合HPD光动力学治疗鼠G422脑胶质细胞肿瘤以波长630nm半导体激光照射,功率密度200mW/cm2,每光斑照射20分钟,PDT后一天、三天、七天及十四天,以流式细胞仪测试各组基因P16、P53不同光敏剂组及不同时间表达的变化并与不照光对照组比较.结果:本实验中未作PDT治疗的对照组肿瘤,肿瘤生长快,P16对照组最低值12.01%.最高值15.41%,HPD-PDT组表达最低值17.12%,最高值34.735%,ALA-PDT组.表达最低值17.1%,最高值25.51%,而HPD与ALA联合治疗组表达最低值16.5%,最高值28.22%;P53对照组最低值15.02%,最高值23.16%.HPD-PDT组,表达最低值29.98%,最高值43.62%.ALA-PDT组,表达最低值25.06%,最高值33.25%,而HPD与ALA联合治疗组表达最低值28.08%,最高值41.01%.总的P16、P53光动力学治疗组表达明显高于对照组,随光敏剂剂量增加表达值渐增,HPD-PDT组表达高于ALA组,HPDlmg/kg联合、ALA60-80mg/kg,HPD2mg/kg联合ALA40-60mg/kg,HPD3-4mg/kg联合ALA20mg/kg能达到P16表达最佳值及最高值.PDT后七天表达较佳.结论:推测PDT疗法激活了P16基因及p53基因功能,促使肿瘤细胞凋亡及坏死.联合疗法HPDlmg/kg联合ALA60-80mg/kg,HPD2mg/kg联合ALA40-60mg/kg光动力学治疗表达是最佳值或最高值,这样可明显提高ALA-PDT疗效及减少HPD-PDT的皮肤光毒反应.     

HPPH光动力学治疗鼠G422脑胶质瘤的实验研究

目的: 通过对鼠G422脑胶质瘤脑及腋部皮下移植瘤模型HPPH光动力学治疗, 从肉眼、肿瘤生长曲线、病理、观察各剂量组疗效, 并与对照组及HpD作对比, 寻找HPPH-PDT治疗鼠G422脑胶质瘤合适的HPPH剂量。方法: 建立鼠G422脑胶质瘤脑及腋部皮下移植瘤模型, 设立空白对照组、单注射HPPH 0.45 mg/kg组、单注射HpD组、单665 nm激光照射组、单630 nm激光照射组、HPPH-PDT各组(0.15 mg/kg、0.3 mg/kg、0.45 mg/kg组)、HpD-PDT 5 mg/kg组。单注射HPPH组、HPPH-PDT组和单注射HpD组、HpD-PDT组自尾静脉推注入光敏剂, 24小时后以波长665 nm的半导体激光照射HPPH-PDT组和单665 nm激光照射组肿瘤, 功率密度200 mW/cm2, 每光斑照射17 min, 能量密度为204 J/cm2; 功率密度100 mW/cm2, 每光斑照射34min, 能量密度为204 J/cm2; 以波长630 nm的半导体激光照射HpD-PDT组及单630 nm激光照射组肿瘤, 功率密度200 mW/cm2, 每光斑照射20 min, 能量密度为240 J/cm2。肉眼观察肿瘤外形变化, 测量(治疗前、3、5、7、9 d)肿瘤体积, 于PDT后9 d处死鼠, 取肿瘤、肿瘤边缘、正常脑组织, 作病理检查。结果: 可见未经光动力治疗对照组肿瘤迅速生长,第9天体积平均长至治疗前的4.86～5.97倍, HPPH-PDT 0.3 mg/kg、0.45 mg/kg组与治疗前体积平均比是0.94及0.97倍,HPPH-PDT 0.15 mg/kg组是1.09倍、HpD-PDT组是1.6倍, 光动力学组肿瘤的生长速度明显低于对照组, P值＜0.05,有统计学差别, HPPH-PDT 各组优于HpD-PDT组。HPPH-PDT 0.3 mg/kg、0.45 mg/kg组抑瘤效果优于HPPH-PDT 0.15 mg/kg组、HpD-PDT组(P值＜0.05,有统计学差别)。HPPH-PDT 0.3 mg/kg、0.45 mg/kg组抑瘤效果相似。在同样能量密度时高功率密度组第9天疗效较低能量密度稍好,但无统计学差别。故由抑瘤效果层面分析HPPH-PDT对鼠G422脑胶质瘤有抑制作用, 并与HPPH剂量相关, 适宜的剂量为0.3 mg/kg; HPPH-PDT对鼠G422脑胶质瘤的抑瘤作用较HpD-PDT强。从病理观察鼠G422脑胶质瘤脑及皮下移植瘤各剂量HPPH-PDT组及HpD-PDT治疗组, 治疗9 d后仅个别标本肿瘤组织及细胞已消失, 大部分肿瘤组织明显变性坏死, 但深部仍有带活性肿瘤细胞, 与对照组成巢状生长大片活性肿瘤细胞有明显差别。且坏死程度, HPPH-PDT组明显优于HpD-PDT组, 0.3 mg/kg、0.45 mg/kgHPPH-PDT组优于0.15 mg/kg HPPH-PDT组, 0.3 mg/kg、0.45 mg/kg HPPH-PDT组两组程度相似, 故0.3mg/kg是较合适的HPPH-PDT光敏剂剂量。结论: 从抑瘤效果、病理分析, HPPH-PDT对鼠G422脑胶质瘤生长有抑制作用, 抑瘤效果与HPPH剂量有关, 适宜的剂量为0.3 mg/kg; HPPH-PDT对鼠G422脑胶质瘤抑瘤效果较HpD-PDT强。     

口服ALA在脑组织及脑肿瘤中的代谢

目的:探求ALA口服在脑组织及脑肿瘤中的代谢,寻求脑肿瘤光敏诊断最佳的ALA口服剂量及时间。方法:口服不同剂量的ALA(20mg/kg、40mg/kg、60mg/kg、80mg/kg),不同时间(1小时、2小时、4小时、6小时、8小时、10小时、12小时、24小时、48小时)以激光诱导荧光OMA检测系统测定脑肿瘤、正常脑组织及左股部皮肤荧光,并经数据处理,寻求脑肿瘤、正常脑组织与正常皮肤荧光相对值相差最大的合适的ALA口服剂量及诊断时间。结果:脑肿瘤荧光峰值除以组织荧光峰值与正常脑组织荧光峰值除以组织荧光峰值之比,及在ALA40~60mg/kg,服ALA后2~8小时时比值最大。结论:从实验数据分析口服ALA作脑肿瘤OMA荧光光谱分析剂量以40~60mg/kg,服ALA后2~8小时作荧光光谱分析较合适。     

口服ALA联合HPD在鼠脑肿瘤中的代谢

目的:探求ALA口服联合小剂量HPD注射在鼠脑组织及脑肿瘤中的代谢,寻求静脉注射小剂量HPD联合口服ALA脑肿瘤光敏诊断及治疗的最佳的ALA口服剂量及时间。方法:鼠单纯静脉注射1.25mg/kg、口服不同剂量的ALA(20mg/kg、40mg/kg、60mg/kg),及二者联合,及在不同时间(用药前、用药后1小时、2小时、4小时、6小时、8小时、10小时、12小时、24小时、48小时),以激光诱导荧光OMA检测系统测定脑肿瘤及正常脑组织荧光,并与未用药健康鼠脑组织,及未用药脑肿瘤鼠脑组织作对比,并经数据处理,寻求脑肿瘤与正常脑组织荧光相对值相差最大的合适的ALA口服剂量及诊断时间。结果:单纯用1.25mg/kg的HPD在用药后8小时脑肿瘤组织与正常脑组织630nm除以610荧光峰相对值之比值最大,单纯用口服ALA20mg/kg在口服后8小时比值最大,单纯口服ALAALA40-60mg/kg,比值4-6小时比值最大。静脉注射1.25mg/kg的HPD合并口服ALA20mg/kg(简称M20组)在用药后8小时比值最大,合并口服ALA40-60mg/kg组(简称M40、M60组)比值4-6小时比值最大。结论:静脉注射HPD1.25mg/kg合并口服ALA20mg/kg(简称M20组),该小剂量使用光敏剂同样能达到光敏诊断及治疗目的。鼠在用药后8小时作光敏诊断及光动力学治疗最合适,而人在用药后24小时是最佳的光敏诊断及治疗的最佳时间。     

口服ALA在皮肤及肿瘤中的代谢

目的 :探求ALA口服在皮肤及皮肤肿瘤中的代谢 ,寻求皮肤肿瘤光敏诊断最佳的ALA口服剂量及时间。方法 :口服不同剂量的ALA(2 0mg/kg、4 0mg/kg、6 0mg/kg、80mg/kg、10 0mg/kg) ,不同时间 (1小时、2小时、4小时、6小时、8小时、10小时、12小时、2 4小时、4 8小时 )以激光诱导荧光OMA检测系统测定肿瘤及左股部皮肤荧光 ,并经数据处理 ,寻求皮肤肿瘤与正常皮肤荧光相对值相差最大的合适的ALA口服剂量及诊断时间。结果 :脉宽 2 0或 30A皮肤肿瘤荧光值总和与组织荧光值总和之比除以正常皮肤荧光值与组织荧光值总和之比在口服ALA6 0mg/kg ,服ALA后 6 - 8小时时比值最大。结论 :从以上数据分析口服ALA作皮肤肿瘤OMA荧光光谱分析剂量以 6 0mg/kg ,服ALA后 6 - 8小时作荧光光谱分析较合适 ,计算相对值在峰值宽度 2 0 - 30A面积均可。     

HPPH光敏剂不同时段在颅内外肿瘤、正常脑及皮肤组织间的代谢分布

目的:观察静脉注射不同剂量HPPH光敏剂后不同时段透过血脑屏障在颅内外肿瘤与正常脑组织、皮肤间的代谢分布,并确定静脉注射HPPH光敏剂后在脑胶质瘤高浓度聚集与正常组织大部份排出相差距离最大的时间段,为光敏诊断、光动力治疗提供最佳时间及剂量。方法:建立鼠G422脑胶质瘤、腋部皮下移植瘤模型,设立注射HPPH 0.15mg/kg组、HPPH 0.3mg/kg组、HPPH 0.45mg/kg组、以荧光图像早期癌诊断仪测定注药前、注药后(4、8、12、18、24、32、48h)肿瘤及正常脑组织、皮肤、口腔及眼粘膜的荧光峰值,选择在肿瘤中有较高的HPPH浓度,正常脑组织及皮肤大部分已排出的最大距离值,以确定HPPHPDT,HPPH注药后最佳的诊断、治疗时间及剂量。结果:从鼠G422脑胶质瘤、腋部皮下移植瘤模型注HPPH 0.15mg/kg组、HPPH 0.3mg/kg组、HPPH 0.45mg/kg组、以荧光图像早期癌诊断仪测定注药前、注药后(4、8、12、18、24、32、48h)不同时间脑肿瘤、腋部皮下肿瘤、正常脑、正常皮肤、口腔及眼粘膜的荧光峰值看,HPPH在注药后12～24h时正常组织荧光峰已较低,而肿瘤尚有较高的荧光峰,二者的距离也较大,是作荧光诊断及光动力学治疗的较佳时间,HPPH 0.3mg/kg、HPPH 0.45mg/kg组峰值平均值接近,并稍高于HPPH 0.15mg/kg组,故HPPH注药0.3mg/kg、注药后12～24h是作鼠G422脑胶质瘤肿瘤光敏诊断及光动力学治疗的较佳剂量及时间,三组注药后口腔及眼粘膜的荧光峰值均较高,且48h仍有较高的浓度,应注意口、眼在HPPH-PDT后对光的防护。皮肤48h时荧光峰较低,可减少皮肤避光时间。结论:通过荧光图像早期癌诊断仪测定静脉注射HPPH在肿瘤及正常组织中的代谢,确定HPPH能作光敏诊断及光动力学治疗,注药0.3mg/kg、注药后12～24h是较佳的光敏诊断及光动力学治疗的剂量及时间。     

HPPH光动力治疗对鼠G422脑胶质瘤缺氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响

目的:探讨HPPH光动力治疗对鼠G422脑胶质瘤脑部及腋部皮下移植瘤缺氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响并和HpD-PDT做比较。方法:建立鼠G422脑胶质瘤、腋部皮下移植瘤模型,设立空白对照组、单注射HPPH 0.45mg/kg组、单665nm激光照射组、单630nm激光照射组、HPPH-PDT组(0.15、0.3、0.45mg/kg组)、HpD-PDT 5mg/kg组。单注射HPPH组、HPPH-PDT组和HpD-PDT组自尾静脉推注入光敏剂,24h后以波长665nm的半导体激光照射HPPHPDT组和单激光组肿瘤,功率密度200mW/cm~2,每光斑照射17min,能量密度为204J/cm~2;以波长630nm的半导体激光照射HpD-PDT组肿瘤,功率密度200mW/cm~2,每光斑照射20min,能量密度为240J/cm~2。于PDT后9d处死鼠,取肿瘤、肿瘤边缘、正常脑组织及血液,行酶联免疫吸附法(ELISA)的双抗体夹心法检测HPPH-PDT和HpD-PDT后及对照组缺氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)。结果:鼠G422脑胶质瘤脑部及腋部皮下移植瘤,空白、单注药和单照光三组对照组之间缺氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达值两两比较,P>0.05,差别无统计学意义。不同剂量HPPH、HpD光敏剂PDT治疗鼠G422脑胶质瘤脑部移植瘤,HIF-1α、VEGF平均值,HPPH-PDT各组较HpD-PDT低,0.3mg/kg-PDT组、0.45mg/kg-PDT组低于0.15mg/kg-PDT组及HpD-PDT组,P<0.05,有显著差异。HPPH-PDT 0.3mg/kg-PDT组、0.45mg/kg-PDT二组值接近。HPPH-PDT 0.3mg/kg-PDW组、0.45mg/kg-PDT接近正常脑值,0.15mg/kg-PDT及HpD-PDT组稍高于正常脑值,但P>0.05,无显著差异,HPPH-PDT各组及HpD-PDT组值均明显低于对照组(空白组、单注HPPH、单注射HpD组、单665nm激光照射组、单630nm激光照射组),P值<0.05,有显著差异。各组肿瘤边缘的值稍高于肿瘤值,血液的值较肿瘤低,接近或稍高于正常脑值。不同剂量HPPH、HPD光敏剂PDT治疗鼠G422胶质瘤腋部皮下移植瘤HIF-1α、VEGF平均值,HPPH-PDT各组较HpD-PDT低,0.3mg/kg-PDT组、0.45mg/kg-PDT组低于0.15mg/kg-PDW组及HpD-PDT组,P<0.05,有显著差异,HPPH-PDT0.3mg/kg-PDT组、0.45mg/kg-PDT二组值接近。HPPH-PDT各组及HpD-PDT组值均明显低于对照组(空白组、单注HPPH、单注HpD对侧未治疗组、单665nm激光照射组、单630nm激光照射组),且P<0.05,有显著差异。各组肿瘤边缘的值稍高于肿瘤值,血液的值较肿瘤低,接近或稍高于正常脑值。结论:HPPH-PDT能诱导缺氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达降低,与HpD-PDT相比,表达更低。HPPH-PDT疗效优于HpD-PDT,本实验条件下HPPH-PDT 0.3mg/kg是较合适的光敏剂剂量。     

HPPH光动力治疗对鼠G422脑胶质瘤各部位突变型p53蛋白和p16蛋白表达及与HpD-PDT对比

目的:探讨HPPH光动力治疗对鼠G422脑胶质瘤脑及腋部皮下移植瘤各部位mtp53蛋白和p16蛋白表达的影响并和HpD-PDT做比较。方法:建立鼠G422脑胶质瘤脑及腋部皮下移植瘤模型,设立空白对照组、单注射HPPH 0.45mg/kg组、单注射HPD 5 mg/kg组、单665 nm激光照射组、单630n m激光照射组、HPPH-PDT各组(0.15 mg/kg组、0.3 mg/kg组、0.45 mg/kg组)、HpD-PDT 5 mg/kg组。单注射HPPH组、HPPH-PDT组和单注射HPD组、HpD-PDT组自尾静脉注入光敏剂,24 h后以波长665 nm的半导体激光照射HPPH-PDT组和单665 nm激光组肿瘤,功率密度200 mW/cm~2,每光斑照射17 min,能量密度为204 J/cm~2;以波长630 nm的半导体激光照射HpD-PDT组及单630 nm激光组肿瘤,功率密度200 mW/cm~2,每光斑照射20 min,能量密度为240 J/cm~2。于PDT后9 d处死鼠行酶联免疫吸附法(ELISA)的双抗体夹心法检测HPPH-PDT和HpD-PDT后肿瘤及对照组各部位(肿瘤、肿瘤边缘、正常脑组织)、血液突变型p53蛋白(mutant type p53 protein,mtp53)和p16蛋白表达变化。结果:空白、单注药和单照光三组对照组之间mtp53蛋白和p16蛋白表达值两两比较,P>0.05,差别无统计学意义。HPPH-PDT各剂量组及HPD-PDT组与空白对照组比较,mtp53蛋白表达值明显降低,p16蛋白表达值明显升高,P<0.01,差别有统计学意义。且接近正常脑组织值,或p16蛋白表达稍低于正常脑值,mtp53蛋白值表达稍高于正常脑组织值。0.3mg/kg和0.45mg/kg HPPH-PDT组与0.15 mg/kg HPPH-PDT组及HPD-PDT相比,mtp53蛋白表达值降低,p16蛋白表达值升高,P<005,差别有统计学意义,0.45 mg/kgHPPH-PDT组mtp53蛋白表达值稍低于0.3 mg/kgHPPH-PDT组,p16蛋白表达值稍高于0.3 mg/kgHPPH-PDT组,P>0.05,差别无统计学意义。HPPH-PDT0.3 mg/kg组的mtp53蛋白表达值低于HpD-PDT5 mg/kg组,p16蛋白表达值高于HpD-PDT 5 mg/kg组,P<0.05,差别有统计学意义。肿瘤边缘mtp53蛋白值稍高于肿瘤值,血液低于肿瘤值;p16蛋白值肿瘤边缘稍低于肿瘤值,血液高于肿瘤值。结论:HPPH-PDT能诱导mtp53蛋白表达降低,p16蛋白表达升高。与HpD-PDT相比,HPPH-PDTmtp53蛋白表达更低,p16蛋白表达更高。本次实验条件下HPPH 0.3 mg/kg是适宜的HPPH-PDT剂量。