~(60)Co―γ射线诱变褐色高温单孢菌的研究

以褐色高温单孢菌(Thermomonospora fusca)为出发菌株,通过60Co―γ射线诱变孢子悬液,采用透明圈法初筛和摇瓶培养复筛的方法,获得了一株纤维素酶高产菌株AV5,与出发菌株相比,其产酶能力提高1.8倍。     

褐色高温单孢菌PE-211纤维素酶的纯化及固定化研究

褐色高温单孢菌PE-211纤维素酶经硫酸铵盐析、2次SephadexG-100柱纯化,粗酶液被纯化47.5倍,比活力为54.15 IU/mg,以戊二醛为交联剂制备固定化酶.酶动力学研究表明,固定化酶的最适pH为8.5,最适温度为70℃,且固定化酶在60～80℃活力较高;该酶的耐热性很强,而固定化酶的热稳定性比原酶强;以羧甲基纤维素钠为底物,固定化酶的Km为7.19 mg/mL,Vmax为0.132 mg/(mL·min).     

60Co-γ对Cl.beijerinckii原生质体的辐照诱变

以产丁醇菌Cl.beijerinckii为出发菌株,将其原生质体化后进行60Co-γ辐照诱变,筛选出了一株稳定高产的变异株.原生质体的最优制备条件为:将培养至15 h的细胞添加1 g·L-1甘氨酸和0.3 U·L-1青霉素培养2 h后,37℃下,2×104 U·L-1溶菌酶作用8 h脱壁.经平板计数,原生质体形成率可达99.82%,原生质体再生率达10.12%.采用60Co-γ射线进行辐照诱变,当辐照剂量率5 Gy·min-1,辐照剂量为500 Gy时,原生质体致死率可达99.3%.经反复筛选,获得一株丁醇高产菌株R3,该菌具有较高的遗传稳定性.在P2半合成液体培养基中,37℃下静置培养72 h,总溶剂产量较出发菌株提高81.46%,丁醇产量提高85.41%.     

60Co-γ射线致小鼠血液系统抑制模型的建立

建立了小鼠造血型放射损伤模型。以5个不同辐射剂量60Co-γ射线一次性全身照射小鼠,筛选小鼠造血型放射损伤模型的辐射剂量。结果为不同剂量辐射后小鼠外周血WBC、淋巴细胞、淋巴细胞、HGB及PLT含量均下降,确定最佳辐射剂量为6Gy;成功建立小鼠造血型放射损伤模型。     

60Co-γ对Cl.beijerinckii原生质体的辐照诱变

以产丁醇菌Cl.beijerinckii为出发菌株,将其原生质体化后进行⁶⁰Co-γ辐照诱变,筛选出了一株稳定高产的变异株。原生质体的最优制备条件为：将培养至15 h的细胞添加1 g.L^-1甘氨酸和0.3 U.L^-1青霉素培养2 h后,37℃下,2×10⁴ U.L^-1溶菌酶作用8 h脱壁。经平板计数,原生质体形成率可达99.82％,原生质体再生率达10.12％。采用⁶⁰Co-γ射线进行辐照诱变,当辐照剂量率5 Gy.min^-1,辐照剂量为500 Gy时,原生质体致死率可达99.3％。经反复筛选,获得一株丁醇高产菌株R₃,该菌具有较高的遗传稳定性。在P₂半合成液体培养基中,37℃下静置培养72 h,总溶剂产量较出发菌株提高81.46％,丁醇产量提高85.41％。     

60Co-γ射线辐照对人参药渣膜剂理化性质及抑菌活性的影响

考察了~(60)Co-γ射线辐照处理对提取皂苷后的人参药渣膜剂理化性质和抑菌活性的影响。采用~(60)Co-γ射线辐照处理人参药渣,通过扫描电镜观察药渣形貌;通过在药渣中加入聚乙烯醇、白芨胶、卡波姆等制备膜剂,测定其透气率、密度、吸水力、抗撕强度、pH值等理化性质;采用滤纸片法测定膜剂对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌活性。结果表明,辐照处理后,药渣颗粒变小,膜剂的透气率、吸水力和抗撕强度均有一定程度提高,膜剂对枯草芽孢杆菌和表皮葡萄球菌的抑菌活性较高,最低抑菌浓度(MIC)分别为10 mg·mL~(-1)和5 mg·mL~(-1)。通过对细菌形态观察,推测辐照人参药渣膜剂的抑菌机理可能是辐照破坏了细菌的细胞壁和细胞膜,导致细胞通透性增加,进而使细胞内容物外泄,抑菌活性提高。     

60↑Coγ射线诱变选育聚谷氨酸高产菌株及培养基初步优化

对一株产γ-聚谷氨酸的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis CICC10099)进行了诱变筛选及摇瓶发酵条件的初步优化,以期得到γ-聚谷氨酸高产菌株并进一步提高其产能.实验考察了不同诱变剂量下的菌体的致死率和正突变率,以确定最佳诱变条件.结果表明60Co γ射线最佳的诱变剂量为200 Gy时,致死率大于90 %,正突变率高达13.3 %.在上述剂量下,经60Co γ射线诱变后分离筛选得到一株高产突变株Bacillus licheniformis S16, 摇瓶实验表明γ-聚谷氨酸的含量达到16.9 g·L-1,较出发菌株CICC10099提高72.4 %.并且采用单因素法初步优化了摇瓶发酵培养基,优化后的培养基组成为柠檬酸12 g·L-1,甘油80 g·L-1,氯化铵6 g·L-1,L-谷氨酸15 g·L-1,K2HPO4 1 g·L-1,CaCl2·2H2O 0.1 g·L-1 ,FeCl3·6H2O 0.05 g·L-1,MgSO4·7H2O 0.75 g·L-1,MnSO·H2O 0.1 g·L-1,pH 7.5;利用优化的培养基在250 mL三角烧瓶装液量50 mL, 37℃,180 r·min-1的条件下培养80 h,发酵液中的γ-PGA含量最高,可达到18.9 g·L-1.     

60Co-γ射线辐照处理对玉米淀粉塑料的影响

以60Co-γ射线对玉米淀粉进行辐照处理,在辐照前后的淀粉中分别加入甘油作为增塑剂制备了热塑性全淀粉可降解塑料。通过FTIR、DSC、力学性能和SEM分别研究了γ射线辐照处理对玉米淀粉及淀粉塑料的分子结构、热性能、力学性能及其断面形貌的影响。结果表明,辐照能显著破坏淀粉分子内部结构,使经甘油增塑的淀粉塑料熔融吸热峰的峰值温度由192.93℃降至157.89℃,拉伸强度下降,断裂伸长率增大,淀粉的热塑性提高明显。     

60Co γ射线诱变选育聚谷氨酸高产菌株及培养基初步优化

对一株产γ-聚谷氨酸的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis CICC10099)进行了诱变筛选及摇瓶发酵条件的初步优化,以期得到γ-聚谷氨酸高产菌株并进一步提高其产能.实验考察了不同诱变剂量下的菌体的致死率和正突变率,以确定最佳诱变条件.结果表明:60Co γ射线最佳的诱变剂量为200 Gy时,致死率大于90 %,正突变率高达13.3 %.在上述剂量下,经60Co γ射线诱变后分离筛选得到一株高产突变株Bacillus licheniformis S16, 摇瓶实验表明γ-聚谷氨酸的含量达到16.9 g·L-1,较出发菌株CICC10099提高72.4 %.并且采用单因素法初步优化了摇瓶发酵培养基,优化后的培养基组成为:柠檬酸12 g·L-1,甘油80 g·L-1,氯化铵6 g·L-1,L-谷氨酸15 g·L-1,K2HPO4 1 g·L-1,CaCl2·2H2O 0.1 g·L-1 ,FeCl3·6H2O 0.05 g·L-1,MgSO4·7H2O 0.75 g·L-1,MnSO·H2O 0.1 g·L-1,pH 7.5;利用优化的培养基在250 mL三角烧瓶装液量50 mL, 37℃,180 r·min-1的条件下培养80 h,发酵液中的γ-PGA含量最高,可达到18.9 g·L-1.     

牛粪中高温纤维素降解菌的性能研究

对从牛粪中分离出来的高温单孢菌(Thermomonospora sp.)SQ3菌株的生物学特征进行了研究,包括菌种生化鉴定培养和产纤维素酶及其培养条件等的研究。降解纤维素结果显示SQ3在纤维素刚果红培养基上4天可见明显的分解纤维素透明圈。产酶条件研究显示:SQ3在发酵时间5天,发酵温度55℃,pH7.0～8.0,尿素氮源,玉米秸秆碳源的条件下产CMC酶性能最佳,在发酵8天时,产FPA酶达到最高峰值。     

炭样小单孢菌抗生素抗植物病原真菌作用

采用杯碟法探讨了炭样小单孢菌JXNU-1所产的抗生素对烟草赤星病菌、小麦赤霉病菌、水稻纹枯病菌和柑橘溃疡病菌的抑菌活性.结果表明炭样小单孢菌所产的抗生素对小麦赤霉病菌抑菌作用最强,抑菌直径达23.19 mm,抗生素对烟草赤星病菌和柑橘溃疡病菌的最低抑菌体积分数与最低杀菌体积分数为6.25%,在最低杀菌浓度下,抗生素对植物病原真菌作用20 h杀菌率为100%左右.抗生素对植物病原真菌抑菌和杀菌作用机理有待进一步研究.     

Mutation of Cl.beijerinckii protoplasts by 60Co-γ irradiation

以产丁醇菌Cl.beijerinckii为出发菌株,将其原生质体化后进行⁶⁰Co-γ辐照诱变,筛选出了一株稳定高产的变异株。原生质体的最优制备条件为：将培养至15 h的细胞添加1 g.L^-1甘氨酸和0.3 U.L^-1青霉素培养2 h后,37℃下,2×10⁴ U.L^-1溶菌酶作用8 h脱壁。经平板计数,原生质体形成率可达99.82％,原生质体再生率达10.12％。采用⁶⁰Co-γ射线进行辐照诱变,当辐照剂量率5 Gy.min^-1,辐照剂量为500 Gy时,原生质体致死率可达99.3％。经反复筛选,获得一株丁醇高产菌株R₃,该菌具有较高的遗传稳定性。在P₂半合成液体培养基中,37℃下静置培养72 h,总溶剂产量较出发菌株提高81.46％,丁醇产量提高85.41％。     

炭样小单孢菌抗生素对水稻白叶枯病菌的抑菌作用

[目的]研究炭样小单孢菌所产抗生素对水稻白叶枯病菌的抑菌作用.[方法]采用杯碟法和二倍稀释法探讨了炭样小单孢菌所产抗生素对水稻白叶枯病菌的抑菌活性.[结果]炭样小单孢菌所产的抗生素对水稻白叶枯病菌的抑菌直径达27.10 mm,最低抑菌体积分数与最低杀菌体积分数分别为0.78%和25%,在最低杀菌质量浓度下,抗生素对水稻白叶枯病菌作用18 h杀菌率为100%.[结论]炭样小单孢菌所产的抗生素对水稻白叶枯病菌具有较强抑菌作用.     

小多孢菌菌丝体中化学成分的研究

对小多孢菌(Micropolyspora sp.)菌丝体的甲醇提取部分进行化学成分研究,从中分离到5个化合物,经波谱数据分析,鉴定其为:4′,7-二羟基-6-甲氧基异黄酮、3,4,5-三甲氧基肉桂酸、2,4-二羟基苯甲酸、3,4-二羟基苯甲酸、甘露醇,5个化合物均为首次从该菌中分离得到。     

灰葡萄孢菌对啶菌恶唑的抗药性研究初报

以灰葡萄孢菌为试验耙标,通过室内药剂驯化、紫外灯诱变,获得抗性突变体,并对抗性突变体的适合度进行测定,以评价新型杀菌剂啶菌恶唑的抗性风险。结果表明,经药剂驯化10代,抗性突变体的EC50值与敏感菌株无明显差异。在诱导14代后,EC50有所上升,但是抗性突变体的生长速率、产孢量等明显低于敏感菌株。因此,初步推断啶菌恶唑是一种抗性风险较低的杀菌剂。     

γ射线辐照改性硅橡胶基复合材料的研究

对硅橡胶复合材料进行γ射线辐照处理,研究不同辐照吸收剂量对硅橡胶复合材料综合性能的影响。结果表明：随着辐照吸收剂量的增大,复合材料的拉伸强度呈现先减小后增大最后降低的趋势,在辐照吸收剂量为150 kGy时达到最大值;复合材料的硬度随辐照剂量的增大而增大。本文还通过傅里叶变换红外光谱(FT-IR)技术对辐照前后复合材料官能团的变化进行分析与鉴定。     

荧光假单孢菌PS-1发酵条件的研究

对荧光假单孢菌(P.Fluorescens)PS-1菌株的工业发酵培养基成分和发酵条件进行了研究.通过单因子实验和正交实验,确定最佳培养基组成:可溶性淀粉10 g/L,豆饼粉15 g/L,葡萄糖3 g/L,KH2PO4 0.6 g/L,CaCO3 2 g/L;最佳发酵条件:温度为28 ℃,pH为7.0,装液量为20 mL/250 mL三角瓶装量;搅拌速率200 r/min.最大发酵菌数达到1.78×1010/mL.     

枝状枝孢菌次级代谢产物的研究

目的 :研究枝状枝孢菌大米固体发酵后产生的次级代谢产物。方法 :采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、高效液相色谱等方法进行分离纯化,以及NMR、MS等现代波谱手段进行结构鉴定。结果 :分离得到6个单体化合物,分别鉴定为:6,8-二羟基-3-甲基-1H-异铬-1-酮、6-甲氧基-8-羟基-3-甲基异香豆素、豆甾-4-烯-3-酮、3β-羟基-5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯、腺嘌呤核苷、甘露醇。结论 :化合物1～3为首次从该植物内生真菌中分离得到。     

γ射线辐射作用下硫醚的去除特性研究

随着环保要求的不断提高,对各类燃油中硫化物含量所制定的限制标准将越来越严格。常规的加氢脱硫方法存在工艺复杂、运行成本高等问题,因而探索了利用Y射线辐射去除油品中硫醚硫的新方法。以丁硫醚．十二烷为对象,考察了影响硫醚去除的主要参数。结果表明,丁硫醚的去除率随辐射剂量的增加而上升,去除反应符合一级动力学;在总辐射剂量相同的情况下,使用低剂量率进行辐照可得到较高的去除率,所对应的能量利用率或G因子也较高。另外,氧气对丁硫醚的去除有明显促进作用,当辐照剂量为290kGy时,通入空气时硫醚去除率接近80％,比相同剂量下的静态辐照和通氮气辐照分别提高了近30％及50％。在有氧气的情况下硫醚的辐照产物主要为极性较强的亚砜,很容易从油品中分离。而烷烃在辐射过程中去除量很少,油品的辐射损失不大。此外,还对硫醚的辐射转化机制进行了初步探讨。