烟草野火病研究概况

本文从地理分布、经济损失、症状、寄主范围、病原学、流行学和防治学方面对烟草野火病的研究概况进行了综述。      

五个烟草野火菌株的生理小种鉴定

  背景和目的  针对目前国内尚未以国际通行的抗性鉴别宿主区分烟草野火菌的生理小种, 首次基于抗性遗传规律鉴定了所收集野火菌株的生理小种归属。  方法  通过大田喷雾接种、温室浓度梯度接种、无损伤接种及同一叶片上的对比试验等4个平行试验, 将ATCC11528等5个野火菌株接种到黄花烟等6个不同抗源遗传背景的烟草上, 根据不同试验出现的不同病理反应对各野火菌株进行生理小种分类。  结果  所收集的5个野火菌株经多轮分子标签鉴定纯化, 可用于接种试验。野火菌株D151、ZD和M109、ATCC11528和W11分别被鉴定为0、1、3等3个小种。  结论  采用国际通行的抗性鉴别宿主和4个平行接种试验区分了5个野火菌株的生理小种归属。为培育野火菌小种专化抗病烟草和克隆烟草中小种专化抗病基因提供了重要基础。      

中微量元素对烟草野火病的控制效果及其对烟草生物学性状的影响

通过设计小区试验,选择适当的时间对烟草必需的8种矿质营养元素(钙、铁、硼、锰、锌、钼、铜、镁)进行叶面喷施,研究了不同营养元素对烟草野火病的控制作用及其对烟草生物学性状的影响。结果表明,处理3(H3BO3)和处理6(Na2MoO4)对烟草野火病具有较好的防控效果分别为60.14%和71.76%;同时它们具有促进烟草叶面积增加的作用。     

防治烟草野火病的药剂测定与筛选

采用常规平板纸碟法,室内测定了12种药剂对烟草野火病菌(Pseudomonas syringae pv.tabaci)的皿内抑菌效果,结果表明,50%福美双可湿性粉剂、25%休菌清乳油、72%农用链霉素可溶性粉剂和10%浸种灵乳油对P.syringae pv.tabaci具有良好的抑菌效果。对不同药剂进行优化组合复配,采用同样的常规平板纸碟法测定其抑菌效果,结果表明,复配组合药剂的抑菌效果比单剂的抑菌效果有不同程度的提高,其中以农用链霉素+福美双、新植霉素+铜高尚、福美双+浸种灵、农用链霉素+硫酸铜和铜高尚+浸种灵等5种复配组合的抑菌效果较好。本研究可以为生产上烟草野火病的防治提供基础数据和参考。     

非杀菌性化学物质诱导烟草抗野火病的初步研究

测定了水杨酸、草酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、腐殖酸钾、磷酸氢二钠等7种化学物质对烟草野火病菌的室内抑菌效果和对烟草植株的诱抗作用。结果表明，供试的7种化学物质对烟草野火病菌均没有直接杀伤作用，其中水杨酸和草酸对烟草植株抗野火病有较好的诱导效果。     

氮肥对烟草野火病的影响研究初报

采用随机排列的田间小区设计和人工接种方法，研究了７种施氮量和两种施肥方法对野火病的影响。结果表明：①随氮肥用量的增加（２ｋｇ～１１ｋｇ纯氮／亩），野火病病斑扩展速度相应加快。②亩氮肥用量相同的条件下，移栽时一次性作底肥施完的方法促进病斑扩展，而一半作基肥另一半在移栽后２８天追施的方法则抑制病斑扩展速度。     

烟草野火病拮抗生防菌的筛选、鉴定与应用

为筛选出烟草野火病拮抗生防菌,开发防治烟草野火病的新型生物农药,降低烟叶农药残留,提高烟叶的安全性,从烟田采集的健康烟草叶片经平板划线法分离和纯化后得到287个细菌分离物,从中筛选到14个对烟草细菌性野火病有抑制作用的拮抗生防菌,测得其中具有较强抑制作用的菌株抑菌带宽度为9.3 mm,经16S rDNA序列鉴定,该菌属于枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。烟草叶片经该拮抗菌液诱导后接种,叶片内主要防御酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性均显著增强。防效测定表明:施用生防剂后接种野火病菌的处理,拮抗菌株防治效果达97.54%,对照农用链霉素防治效果为41.44%。先接种野火病菌后施生防剂的处理,拮抗菌株防治效果达51.40%,对照农用链霉素防治效果为50.69%。说明该拮抗菌株的预防效果高于当前生产上使用的农用链霉素,且其预防效果优于治疗效果。     

烟草野火病发生与防治的研究进展

综述了烟草野火病的症状、发生流行规律和影响因素;烟草野火病的发生对烟叶结构的破坏、对烟叶光合特性和对烟株体内主要物质代谢的影响;对烟株体内防御酶活性的影响;烟草野火病的防治手段和措施;对烟草野火病的深入研究提出了建议.     

烟草野火病菌生物学特性研究

研究了烟草野火病茵的部分生物学特性，涉及致病性、菌株的保存与复壮、生长曲线及O.D.600值与CFU／mL之间关系、病菌毒素的产生等诸方面。研究发现用甘油溶液保存病菌4年后仍具有较强的致病力，并且通过复壮可使致病力进一步增强：不同菌株的产毒能力存在明显的差异，以致病力强的菌株产毒能力为更强；改用对病菌更敏感的鼠伤寒沙门氏菌为指针成功地测定了烟毒素的活性。     

烟草野火病菌特异性检测引物筛选及应用

烟草野火病是山东烟区主要的细菌性病害之一,为了能够对该病害进行精确、快速的分子鉴定,本研究从NCBI基因组数据库中下载了假单胞菌属25个不同菌种和127个丁香假单胞菌属不同致病变种的全基因组数据,利用Mauve 2.3.1进行全基因组比对,获得丁香假单胞菌烟草致病变种特异性区段。在此基础上利用Primer Premier 6.0进行引物设计,筛选出了一对丁香假单胞菌烟草致病变种的特异性检测引物40429。利用7株山东不同烟区的烟草野火病菌和4株分别来自于贵州、湖北、福建及云南的烟草野火病菌进行了该引物的适用性验证,结果表明该引物均可扩增得到大小为203 bp的单一目的条带。说明该引物对于烟草野火病菌的检测具有良好的适用性,可以用于野火病菌的分子鉴定。     

黑龙江省烟草野火病菌生理小种鉴别寄主的筛选

为明确黑龙江省烟草野火病菌生理小种的分化情况,采用针刺接种法,将黑龙江省主要烟区采集的15个烟草野火病菌菌株接种到28个供试烟草品种上,通过对发病率的差异性分析和聚类分析来测定供试烟草品种的抗性表现,从而建立了一套鉴定烟草野火病菌生理小种的鉴别寄主体系,并将15个供试菌株划分为Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ4个生理小种.     

猕猴桃溃疡病菌拮抗菌筛选、鉴定及发酵条件优化

目的:从不同地区猕猴桃根际土壤中筛选拮抗猕猴桃溃疡病菌的菌株,优化其产生抑菌活性物质的发酵条件,为猕猴桃溃疡病的生物防治提供潜在的资源菌。方法:采用平板稀释法从猕猴桃根际土壤中分离获得菌株,采用抑菌圈法筛选拮抗菌;通过形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析对其进行鉴定;并采用单因素及正交试验优化培养基组分及发酵条件。结果:从土壤中共分离到288株放线菌,其中编号为NA-TXL-1的菌株对猕猴桃溃疡病菌的拮抗效果最佳,采用预防法、治疗法进行盆栽实验,发酵原液的防治效果分别为73.06%、55.62%,初步鉴定该菌株为抗生链霉菌。其最佳发酵配方和培养条件为:乳糖30 g/L、酵母粉3 g/L、NaCl 1 g/L、K_2HPO_4 0.5 g/L、MgSO_4·7H_2O 0.5 g/L、FeSO_4 0.01 g/L,种子培养基为乳糖-酵母粉培养基,接种量为2%,起始pH值为7.0,发酵原液、上清液、重悬液分别培养5、14、5 d。结论:经鉴定,拮抗菌株为Streptomyces antibioticus。在优化的发酵条件下,该菌株对猕猴桃溃疡病菌具有更好的拮抗效果。     

3种药剂对猕猴桃花粉溃疡病菌灭菌及果实产量的影响

以陕西周至被溃疡病菌(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)污染的猕猴桃花粉为原料,分别用ClO_2溶液、噻霉酮和可杀得三千进行处理,研究3种药剂处理对Psa杀灭率、花粉生活力及处理后的花粉授粉对座果率、产量、单果重和种子数的影响。结果表明,ClO_2溶液、噻霉酮和可杀得三千3种药剂处理对花粉中Psa的杀灭率分别为99.7%,99.6%,99.4%,花粉生活力分别为62.2%,50.1%,51.2%,比对照组分别下降了0.5%,19.1%,24.1%;用处理后的花粉授粉对座果率的影响极显著(P0.01),ClO_2处理组最佳,比对照组仅降低12%;ClO_2处理组对果实的总产量、单果重和种子数均无显著性差异。说明用10mg/L ClO_2溶液处理花粉45min,对防止猕猴桃花粉传播Psa有较大应用价值。     

拮抗丁香假单胞菌海洋微生物的筛选与鉴定

该研究采用平板涂布法和平板划线法从印度洋沉积物中分离纯化海洋微生物,首先采用滤纸片法对丁香假单胞菌拮抗菌株进行初筛,然后采用牛津杯法进行复筛,并通过形态观察、生理生化试验和分子生物学技术对其进行菌种鉴定,最后研究其抑菌谱。结果表明,从印度洋沉积物中共分离纯化出115株微生物,经过初筛得到33株丁香假单胞菌拮抗菌株,再经过复筛后,筛选出一株对丁香假单胞菌抑菌效果最好的菌株,编号为NO.4.1.3-1,其抑菌圈直径达（12.63±0.06） mm。该菌被鉴定为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）;除屎肠球菌外,该菌对8株致病菌均有抑制作用,且对肺炎克雷伯氏菌、金黄葡萄球菌的抑菌作用较好,具有较广的抑菌谱。     

临床分离铜绿假单胞菌的耐药性研究

目的了解医院分离的铜绿假单胞菌感染分布及目前临床常用14种抗菌药物的耐药情况,指导临床合理选用抗菌药物。方法用K-B法分析2001~2004年间95株铜绿假单胞菌与14种常用抗生素的药敏性。结果实验菌株对14种抗菌药物都显示了较强的耐药率,其中对复方磺胺甲噁唑、四环素、氯霉素、环丙沙星、庆大霉素、左氧氟沙星、妥布霉素的耐药率均超过70%,且96.8%的菌株耐受3种以上抗菌药物。结论铜绿假单胞菌的耐药性突出。感染铜绿假单胞菌应在药敏实验指导下用药,治疗首选头孢他啶、阿米卡星或亚胺培南与氨基糖苷类联合治疗。     

部分烟草种质主要病害抗性分析

通过频率分布及多样性评价,对1000多份种质的7个主要病害抗性进行了分析.结果表明,我国烟草种质资源大部分均为感病以上品种.TMV抗性资源相对较丰富,高抗或免疫种质达17%.其余病害抗病资源中,多为抗病或中抗,高抗种质很少,不到2%.我国主要病害抗性种质较为匮乏.     

甜菜种质资源耐盐性筛选

利用0、100mM、200mM、300mM、400mM浓度的NaCl处理两份血缘关系较远的甜菜二倍体材料,结果表明:068(代号1)材料芽期耐盐性较强,自300mM始对甜菜种子发芽具有明显的抑制作用;抗1(代号2)材料耐盐性较弱,自200mM始对甜菜种子发芽具有明显的抑制作用,且用400mM处理的病芽率也达极显著水平.利用甜菜对盐敏感临界浓度300 mM对14份二倍体材料进行抗盐筛选,其中,代号1、3、8、12四份材料为抗盐胁迫种质,其它材料为盐胁迫敏感型种质.