铁皮石斛多糖分离纯化及其药理活性研究进展

铁皮石斛是我国名贵的药食同源资源,具有较高的保健价值。铁皮石斛多糖是铁皮石斛中重要的活性成分之一。本文对铁皮石斛多糖的提取、分离纯化、分子量、单糖组成进行总结归纳,并对铁皮石斛多糖的降血糖及改善糖尿病并发症、保护胃黏膜损伤、抗肿瘤、调节微生态的最新研究进展进行综述。针对目前铁皮石斛多糖含量影响因素较多、分离纯化重复性差、结构分析不够清晰、构效关系的研究不够深入等现状,提出未来研究的展望,以期为铁皮石斛的开发利用提供有益参考。     

黄芪多糖的分离、结构表征及益生活性研究

对从蒙古黄芪中分离纯化获得的APS-1和APS-2进行结构表征,同时考察黄芪粗多糖(Astragalus crude polysaccharide,APS)的益生活性。运用高效凝胶过滤色谱(high performance size exclusion chromatography,HPGFC)、离子色谱(ion chromatography,IC)、红外(infrared spectroscopy,FT-IR)和核磁(nuclear magnetic resonance spectros copy,1H-NMR)技术分析APS-1和APS-2的分子质量、单糖组成和糖苷键类型。利用人体粪便体外发酵APS,通过气相色谱法分析短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFA)的产生来评价APS的益生活性。结果显示,APS-1和APS-2分子质量分别为38. 4和5. 2 k Da。APS-1主要由半乳糖和葡萄糖组成,摩尔比为1∶49. 76。APS-2主要由鼠李糖、半乳糖和葡萄糖组成,摩尔比为1∶2. 99∶16. 26。APS-1以α-糖苷键为主,APS-2同时包含α...     

铁皮石斛多糖分离纯化及其药理活性研究进展

目的：从铁皮石斛中分离纯化得到铁皮石斛多糖,对其进行结构表征,并探究其抗炎作用。方法：以铁皮石斛为原料,通过水提醇沉法得到铁皮石斛粗多糖,再经过DEAE-52纤维素离子交换树脂和葡聚糖凝胶Sephadex G-100从粗多糖中分离纯化得到多糖组分DOP-1。利用紫外扫描法、气相色谱法、高效凝胶色谱、红外光谱和核磁共振扫描等技术对多糖DOP-1进行结构分析,并测定DOP-1对小鼠腹腔巨噬细胞RAW 264.7细胞增殖抑制效果,及其对LPS诱导的RAW264.7细胞NO、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）表达的影响。结果：分离纯化得到的多糖DOP-1为鼠李糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的均一性多糖,单糖摩尔比为0.6:9.0:2.7:2.9,分子量为59.2 kDa。DOP-1对RAW 264.7细胞增殖无显著性抑制,与模型组相比,DOP-1能显著抑制NO、TNF-α和IL-1β的表达量。结论：本实验得到的铁皮石斛多糖结构明确,且具有较好的抗炎活性,提取工艺条件具有可行性。本研究可为铁皮石斛多糖在抗炎功效产品的开发利用提供理论依据。

     

小麦麸皮阿拉伯木聚糖体外益生活性研究

通过体外发酵培养的方法,比较了碱提阿拉伯木聚糖(AX)及其酶法(AX_(EM1)、AX_(RM2))和酸法(AX_(C1)、AX_(C2))降解产物的体外益生活性。结果表明,碱提AX及其酶法和酸法降解产物均能促进双歧杆菌增殖,与葡萄糖相比,log值增加0.98~1.27个数量级;酶解样品AX_(EM1)对乳酸杆菌的增殖效果最好,阳性对照菊粉及其他AX样品及均不能促进乳酸菌生长。AX及其降解产物益生活性分数均大于0,表明AX及其降解产物均具有一定的益生活性;其中益生活性值最高的为AX_(EM2),益生活性分数达到0.35,高于阳性对照菊粉。采用离子色谱测定发酵液短链脂肪酸组成及含量发现,AX_(EM1)组发酵液中总短链脂肪酸含量最高,约41.02μmol/mL。丁酸作为益生元活性的重要指示性指标,仅在酶解样品AXEM2中检出,含量为0.05μmol/mL,与AX_(EM2)样品益生活性分数最高的结果一致。     

响应面法优化铁皮石斛多糖纯化工艺

目的:用响应面法优化铁皮石斛粗多糖的双水相萃取纯化工艺。方法:通过单因素实验考察了(NH₄)₂SO₄质量分数、C₂H₅OH质量分数和萃取温度对多糖萃取率和除蛋白率的影响,进而进行响应面试验,以多糖萃取率和除蛋白率为响应值进行统计分析。结果:各因素对多糖萃取率和除蛋白率的影响程度由大到小依次为萃取温度 > (NH₄)₂SO₄质量分数 > C₂H₅OH质量分数。以双水相体系的总质量为基准,实验最佳萃取条件为: (NH₄)₂SO₄质量分数为18.80%、C₂H₅OH质量分数为25.00%、萃取温度为25.00 ℃,铁皮石斛多糖萃取率和除蛋白率分别为94.39%和91.36%。结论:此方法能够有效对铁皮石斛粗多糖进行纯化,为铁皮石斛多糖的开发利用提供理论依据。     

铁皮石斛焕肤液的研制

采用低温超微破壁技术提取铁皮石斛多糖作为基本成分,加入胶原蛋白、茉莉花精油(广西横县茉莉花提取)和甘油葡糖苷,研究铁皮石斛焕肤液加工工艺及产品配方。以性状与细腻度、保湿性实验和刺激性为主要指标,考察不同配方的使用体验,确定最佳配料比,使用目前市场上大众认可的同类品种加以验证。结果得出:铁皮石斛多糖提取液、胶原蛋白液、甘油葡糖苷按10∶3∶2的比例混合后,再加入4.67%比例的茉莉花精油即为最佳配方比。结论表明,本实验制备的铁皮石斛焕肤液具有良好保湿性、安全性。     

纳滤技术及其在功能性低聚糖分离纯化中的应用

纳滤是介于反渗透和超滤之间的一种较新膜技术,本文阐述了纳滤膜的种类及膜分离装置,纳滤的特性及机理,并综述了其在功能性低聚糖分离纯化中的应用。     

离子交换法分离纯化甘露低聚糖

采用离子交换树脂法分离纯化甘露低聚糖,由实验得到最佳分离条件为进样量为10 mL、柱高为600 mm、流速为2 mL/min、温度为60 ℃,在此条件下甘露低聚糖的纯度为68.4%.     

铁皮石斛抗肿瘤活性成分的探究

为了探究铁皮石斛中的抗肿瘤活性成分,本研究采用乙酸乙酯、95%乙醇、水三种不同极性的溶剂依次对铁皮石斛茎的干燥粉末进行了提取,初步得到了三种提取物;初提取物在MTT细胞增殖检测结果的指引下,结合硅胶柱层析、TLC薄层分析和凝胶柱层析进行分离纯化,最终筛选出具有强抗肿瘤活性的组分。结果显示乙酸乙酯提取物经分离纯化后得到了最强抗肿瘤活性成分,其对肝癌细胞HepG-2、胃癌细胞SGC-7901和乳腺癌细胞MCF-7的增殖都有明显的抑制效果,半抑制浓度IC50依次为:0.45μg/mL、0.36μg/mL、0.34μg/mL,经波谱学数据鉴定,该化合物为金钗石斛菲醌。金钗石斛菲醌首次分离自金钗石斛,其抗肿瘤功效已经得到证实,并引起了广泛的关注,本研究成果对以铁皮石斛为原料的药品和保健食品的开发具有重要的指导意义。     

铁皮石斛多糖的凝胶特性表征

为探究不同因素对铁皮石斛多糖凝胶特性的影响,研究多糖浓度、成胶温度、碱和离子对铁皮石斛多糖凝胶特性、持水性、乙酰基含量等的影响,通过差示扫描量热仪(DSC)、傅里叶红外光谱仪(FTIR)、X射线衍射仪(XRD)对多糖的性质进行表征。结果表明,多糖质量浓度从5 mg/mL增加到25 mg/mL时,其凝胶强度从70.87 g增加到206.39 g,持水性从78.52%增加到94.25%;在温度达到40 ℃时,凝胶强度达到最大为129.29 g,对应的持水性也最大为90.58%;随着不同碱(NaOH、Na2CO3、KOH、K2CO3)质量浓度的升高,凝胶强度均先持续增加后降低,凝胶的持水性均逐渐降低,在同等碱添加量条件下,形成的凝胶强度大小顺序为Na2CO3>K2CO3>NaOH>KOH;电解质方面,钠离子可以提高凝胶的强度和持水性,而尿素会显著降低凝胶的强度和持水性。FTIR图谱表明:乙酰基的吸收峰强度随Na2CO3添加量的升高而降低。多糖的脱乙酰程度与碱含量有关。XRD结果表明:其衍射峰强度与碱的添加量有关,表现为碱添加量越高,衍射峰越强。DSC结果表明:随着碱量的增多,水吸收峰的峰值温度升高,峰的热焓值增大。凝胶形成机理可能与乙酰基的水解促进多糖分子间的相互作用有关。     

肉苁蓉低聚糖的分离纯化及组成分析

以内蒙古阿拉善盟地区出产的肉苁蓉为试验材料,采用碱性溶液为浸提剂,95%乙醇进行蛋白和多糖的脱除,活性炭脱色的方法,对其低聚糖进行了分离纯化。通过Sephadex-G100柱层析分级得到两个级分。经HPLC测定,肉苁蓉提取液中以甘露糖为主,还包含有鼠李糖和蔗糖以及一些低聚合糖。     

三种大枣低聚糖的分离纯化

大枣低聚糖是天然低聚糖,具有很好的营养价值。本实验将大枣水提液通过膜分离得到大枣粗低聚糖,再经DEAE纤维素、Sephadex G-15凝胶柱层析进一步分离纯化,得到3种大枣低聚糖组分,并用高效液相色谱法测定平均分子量分别为543、334、1459u。      

铁皮石斛多糖分离纯化及单糖组成测定

将铁皮石斛粗多糖经DEAE-52纤维素柱分离得到了四个多糖组分(DO-1、DO-2、DO-3、DO-4),并将组分DO-1经Sephadex G-200柱纯化得到多糖DOP。采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化方法进行高效液相色谱分析,分析结果得出,多糖DOP由D-甘露糖、L(+)-鼠李糖和D-葡萄糖三种单糖组成,通过外标法定量得知D-甘露糖∶L(+)-鼠李糖∶D-葡萄糖=1.936∶0.856∶0.691。测定了多糖DOP抗氧化活性,结果显示其具有良好的清除能力。     

硅胶柱层析法分离纯化甘露低聚糖

采用硅胶柱层析法分离纯化甘露低聚糖,由实验得到最佳分离条件为:进样量为10mL,柱高为600mm,流速为1mL/min,温度为60℃,在此条件下甘露低聚糖的纯度为71.34%.     

硅胶柱层析法分离纯化甘露低聚糖

采用硅胶柱层析法分离纯化甘露低聚糖,由实验得到最佳分离条件为:进样量为10mL,柱高为600mm,流速为1mL/min,温度为60℃,在此条件下甘露低聚糖的纯度为71.34%。      

铁皮石斛多糖分离纯化及单糖组成测定

将铁皮石斛粗多糖经DEAE-52纤维素柱分离得到了四个多糖组分（DO-1、DO-2、DO-3、DO-4）,并将组分DO-1经Sephadex G-200柱纯化得到多糖DOP。采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化方法进行高效液相色谱分析,分析结果得出,多糖DOP由D-甘露糖、L（+）-鼠李糖和D-葡萄糖三种单糖组成,通过外标法定量得知D-甘露糖∶L（+）-鼠李糖∶D-葡萄糖=1.936∶0.856∶0.691。测定了多糖DOP抗氧化活性,结果显示其具有良好的清除能力。      

铁皮石斛活性成分及其功能研究进展

铁皮石斛为我国传统滋阴名贵中药,其保健价值为人们所共识。本文综述近30年来国内外有关铁皮石斛的种质鉴定方法,着重论述铁皮石斛中的多糖、石斛碱、芪类及其衍生物、挥发性成分等天然活性物质及其功能,为合理的开发应用铁皮石斛资源提供科学依据。     

大枣低聚糖的分离纯化及结构分析

采用水浸法提取大枣低聚糖,用95％乙醇进行蛋白质和多糖的脱除,通过Sephadex—G15柱层析进行分离纯化,得到两个级分,经HPLC测定低聚糖的平均分子量为3951。红外光谱分析结果表明,该低聚糖为一种吡喃型低聚糖。     

膜技术在分离纯化大豆低聚糖中的应用

本文介绍了国内外利用膜技术从大豆乳清中分离纯化大豆低聚糖的研究进展,证明利用膜技术分离纯化大豆低聚糖是非常有效的,且发展前景十分广阔。但目前存在的主要问题是膜及膜组件的污染。     

铁皮石斛多糖多肽的发酵法提取及其抗氧化活性分析

目的 研究一种有效的铁皮石斛多糖多肽提取方法,并分析其基本性质及体外抗氧化活性。方法 以铁皮石斛为研究对象,采用芽孢杆菌发酵法对铁皮石斛进行提取,用蒽酮-硫酸法和双缩脲法分别测定铁皮石斛提取液的多糖和多肽含量,以传统热水浸提法和超声波辅助提取法为对照,通过提取液对自由基清除能力、螯合金属离子能力、抑制亚油酸自氧化能力、抑制红细胞溶血能力、保湿能力等指标,评价芽孢杆菌发酵提取液的抗氧化活性。结果 芽孢杆菌发酵提取法工艺参数为投料比例1:25(g/mL),发酵pH6,发酵温度33.5 ℃,发酵时间46 h,此时多糖提取率为37.21%,多肽含量高达4.43 mg/ kg,分子量主要分布在2000 Da以下,占84.95 %。提取液对羟基自由基(.OH)、DPPH自由基(DPPH.)和 ABTS自由基(ABTS₊^.)有较强的清除能力,Fe₂₊^螯合能力67%、亚油酸抑制率53%、H₂O₂诱导溶血抑制率64.34%、皮肤含水量提高33.57 %。结论 芽孢杆菌发酵法提取铁皮石斛,提取液多糖多肽含量高,具有较好抗氧化性和保湿性,为铁皮石斛在食品和化妆品领域的开发利用提供了一定的理论指导和实验数据参考。