新型的治疗阿尔茨海默氏症药物(1-二甲基磷酰基-2,2,2-三氯)-乙基-1-醇烟酸醋对体外神经细胞的作用

目的: 观察本实验室合成的一种治疗阿尔茨海默氏症(AD)的药物(1-二甲基磷酰基-2, 2, 2 -三氯)-乙基^-1-醇烟酸醋(NMF),对体外培养的皮层神经细胞活性的影响以及对海人藻酸(KA)所致的神经损伤的保护作用。方法: 采用体外培养皮层神经元的方法,解剖分离 15 d胚胎小鼠皮层神经细胞, 接种于 96孔板,48 h 后加药并培养 72 h,以 MIT 法 观察 NMF 对小鼠皮层神经细胞活性的影响;同时将接种于 24 孔板的细胞预先给予 NMF,d 3 时加或不加KA处理后,以台盼蓝染色鉴别并计数死、活细胞,可得出细胞的存活率。结果: NMF 明显促进胎鼠皮层神经元活性,其中 NMF1、0. 1、10nmol·L^-1促进神经元活性增殖率分别高达 34.7%、37.4%、36. 7%, NMF 明显促进正常胎鼠皮层神经元存活卒,与对照组比较,10nmol·L^-1 NMF 对皮层神经元的存活率分别提高 39.3%、73.5%。 NMF能显著 对抗 KA 所致的神经元损伤,与 KA 损伤组相比, NMF0.1、10、10nmol·L^-1对损伤皮层神经元的保护率分别为 77.30%、80.10%、84.15%。结论: NMF 明 显促进胎鼠皮层神经元的洁性、提高正常皮层神经元,的存活卒,并能有效地保护KA所致的神经元损伤,提示 NMF 是一种很有潜力的治疗 AD 的药物。     

Ca2+/CaM-CaN 途径参与神经肽Y 诱导的大鼠心肌细胞肥大

目的: 探讨Ca²⁺ CaM 依赖的钙调神经磷酸酶(CaN) 途径在神经肽Y(NPY) 诱导心肌细胞肥大中的作用。方法: 用NPY (10、100 nmol·L^-1) 刺激WISTAR 乳鼠心肌细胞, 并用CaN 特异性抑制剂环胞霉素A 加以干预。应用3H-Leu 掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率, 用免疫印迹(Western-blot) 和组织化学法分别测定心肌细胞内CaN-α蛋白表达和CaN 酶的活性。结果: 较高浓度NPY(100 nmol·L^-1) 可明显增加心肌细胞3H-Leu 掺入量(P < 0.05), 加入CsA 可阻断上述效应;NPY(100 nmol·L^-1) 还可明显增加心肌细胞内CaN 酶比活性(P <0.05), 并刺激心肌细胞CaN-α蛋白表达(P <0.05) 。结论: NPY 可活化大鼠心肌细胞Ca²⁺CaM-CaN 途径, 而CaN 特异性抑制剂环胞霉素A 可抑制NPY 诱导的心肌肥大, 说明Ca²⁺ CaM 依赖的钙调神经磷酸酶(CaN) 途径参与神经肽Y 诱导的心肌细胞肥大效应。     

贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸抗疱疹病毒复方筛选

目的: 评价贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸复方抗疱疹病毒活性, 有效复方在整体动物的安全性。方法: (1) 采用细胞病变效应法(CPE), 测定贯叶连翘提取物与盐酸赖氨酸3 种复方(分别以质量比1∶1 、1 ∶2 和2 ∶1 配比) 对Vero 细胞和2BS 细胞的细胞毒性, 以及对单纯疱疹病毒I 型(HSV-1) 和水痘-带状疱疹病毒(VZV) 的抗病毒活性。(2) 一次灌胃(ig) 给予小鼠复方(2 ∶1), 观察14 d, 测定LD50 。结果: 贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸3 种复方体外对HSV-1 和VZV 表现不同程度的抗病毒活性, 最小有效浓度(MIC) 和半数有效浓度(IC50) 范围分别为9.7~ 19.5 mg·L^-1和6.8 ~ 9.7 mg·L^-1, 测得复方(2 ∶1) 单次小鼠ig 的LD50 为11.7 g·kg^-1, 95 %置信区间为6.5 ~ 17.2 g·kg^-1 。结论: 贯叶连翘提取物和盐酸赖氨酸复方体外具有较好抗HSV-I 和VZV 作用,2 ∶1 复方属于无毒药物范围。     

不同剂量甘丙肽拮抗剂在三叉神经主核对甘丙肽外向电流的双向作用

目的 在三叉神经主核(PrV) 上检测不同剂量甘丙肽拮抗剂M35 和M40 对甘丙肽外向电流的作用。方法 全细胞膜片钳记录技术。结果 0.01、0.03及0.1 μmol·L^-1 的M35, 使甘丙肽引发的外向电流分别抑制53.1%、40.4% 及27.2%; 但1、3 μmol·L^-1 M35 使甘丙肽外向电流分别增大16.2%及38.4%。而给予0.01 及0.03 μmol·L^-1M40 时, 甘丙肽外向电流增大93.7%及68.4%;0.3、1 及3 μmol·L^-1 M40 使甘丙肽外向电流分别抑制49.2%、69.9%及87.2%。结论 低浓度M35为甘丙肽拮抗剂, 高浓度M35 有甘丙肽激动剂作用;低浓度M40 为甘丙肽激动剂, 高浓度M40 为甘丙肽拮抗剂, PrV 同一神经元上可能存在不同甘丙肽亚型受体。     

氨氯地平对老年高血压患者肾功能的影响

目的 了解老年高血压病患者血和尿β2 微球蛋白(β2-MG), 尿白蛋白(A Lb)、尿IgG 的变化及氨氯地平对其影响。方法 用放射免疫技术测定20 例正常人和48 例高血压患者氨氯地平治疗前后血尿β2-MG、尿ALb、尿IgG 等的变化。结果 老年高血压组血尿β2-MG、尿ALb、IgG 分别为(301±19)、(72±13) nmol·L^-1、(17±7)、(15±5) mg·L^-1,均高于正常人, 氨氯地平治疗12 w k 后上述指标分别为(201±20)、(29±11) nmol·L^-1、(9±4)、(9±6) mg·L^-1, 与治疗前相比均明显降低, P 均<0.01。结论 氨氯地平能降低老年高血压患者血和尿β2-MG, 尿ALb、IgG 浓度, 保护肾功能。     

大鼠一次性灌服虎杖提取物后白藜芦醇血浓度测定方法的研究

目的 研究大鼠血浆中白藜芦醇含量的测定方法。 方法 采用液-液萃取反相高效液相色谱梯度洗脱法对大鼠血浆样品中的白藜芦醇含量进行测定。 结果 因为血浆中白藜芦醇在0.0035 ~1.400 mg·L^-1线性范围内关系良好(r=0.9998), 最低定量限为0.035 mg·L^-1;低、中、高三种浓度下的回收率、日内及日间精密度均符合方法学要求。故用本法测定大鼠一次性灌服虎杖提取物后白藜芦醇的血药浓度并计算药代动力学参数, 半衰期t_{1 2}=11.5 min, 达峰时间t_max=10.0 min, 达峰浓度C_max=1.93 mg·L^-1。 结论 本法符合生物样品分析要求,可用于体内白藜芦醇浓度测定。     

Caco-2 细胞对人参皂苷Rg3 的摄取及代谢研究

目的:研究Caco-2 细胞对人参皂苷Rg3 的摄取、代谢及其动力学变化。方法:采用液相色谱质谱联用(HPLC-MS) 检测方法测定细胞中Rg3 及其代谢产物Rh2 药物浓度, 考察时间、pH 值、温度、药物浓度及抑制剂对Rg3 摄取速率及代谢物产量的影响。结果:Rg3在Caco-2细胞上的摄取是时间及浓度依赖性的, 其被动转运系数K_d 为0.07 nmol·h^-1 ·mg^-1prot;最大摄取速率V_max 为3.32 nmol·h^-1·mg^-1 prot;Km是16.31 μmol·L^-1 。加入代谢抑制剂叠氮化钠及2, 4-二硝基酚时摄取速率明显降低(与对照组相比P <0.01) 。结论:Caco-2 细胞模型适用于人参皂苷的吸收机制研究;Rg3 在肠道中的代谢为其生物利用度低的原因之一。     

盐酸托烷司琼胶囊的人体药代动力学研究

目的: 研究盐酸托烷司琼胶囊的人体药代动力学。方法: 采用高效液相色谱(HPLC)-二极管阵列紫外法测定18 名健康志愿者口服剂量10 mg 盐酸托烷司琼胶囊后受试者血浆中的盐酸托烷司琼的浓度, 并应用3p97 软件对盐酸托烷司琼的血药浓度-时间数据进行拟合, 求其药代动力学参数。结果: 盐酸托烷司琼胶囊的药代动力学参数为:达峰时间(Tmax ) 2. 33±0. 43 h, 峰值浓度(Cmax ) 10. 48±2. 70 μg·L^-1, 曲线下面积(AUC0-24 h ) 111. 89±39. 86 μg·h^-1·L^-1 。结论: 盐酸托烷司琼胶囊在志愿者体内分布及消除都很快, 10 mg 单次给药安全。     

LC-MS 法测定Beagle 犬血浆中苦参碱及其药代动力学

目的: 建立Beagle 犬血浆中苦参碱的LC-MS测定法, 测定其药物动力学及绝对生物利用度。方法: 采用Lichrospher C18 柱, 250 mm×4.6 mm(ID),5 μm, 柱温:25 ℃;流动相:10 mmol·L^-1醋酸胺水溶液∶甲醇(25 ∶75), 流速:1 ml·min^-1 。电喷雾离子化(ESI) 方式, 采用选择性离子检测, 检测离子为正离子, 苦参碱的离子是[M+H] +, m/z 249.2 。结果: 苦参碱在2～5 000 μg·L^-1的范围内呈良好的线性关系(r=0.9975), 最低检出限达0.3 μg·L^-1。日内和日间误差均小于4.5 %, 方法回收率大于96.6 %;药-时数据符合二室模型, C_max 为3821±705 μg·L^-1, T_max为0.4±0.1 h, T_1/2β为11.2±2.1 h,AUC_0→∞为7446±1456 μg·h·L^-1, 绝对生物利用度为(60.1±19.0) %。结论: 该法灵敏、快速、简单, 专属性强, 苦参碱在Beagle 犬体内有较高的绝对生物利用度。     

奥曲肽对肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用

目的: 探讨奥曲肽抑制肝癌细胞生长的作用。方法: 人肝癌细胞SMMC-7721 培养于含10 %胎牛血清、100 U·ml^-1青霉素、链霉素的RPMI1640 培养液中。以4 个稀释度10^-5、10^-4、10^-3、10^-2g·L^-1将奥曲肽加入培养液,于加药后第48 h 行MTT 比色实验检测生长抑制率。奥曲肽浓度为10^-3g·L^-1时于0、6、12、24、36 h 行DNA 染色分析细胞周期。结果: MTT 比色法测定显示奥曲肽抑制肝癌细胞的生长,在浓度为10^-5、10^-4、10^-3、10^-2g·L^-1作用48 h 生长抑制率分别为9.33 %、12.70 %、19.70 %、20.93 %。药物作用12、24 h,G0-G1 期细胞比例增加,G₂-M 期细胞比例减少。结论: 奥曲肽抑制体外培养的人肝癌细胞的增殖,机制可能是将肝癌细胞阻滞于G₀-G₁ 期,阻止细胞进入G₂-M 期。     

吡格列酮对培养的心肌细胞肥大的抑制作用

目的: 利用体外培养的乳鼠心肌细胞, 观察吡格列酮对高浓度葡萄糖与去甲肾上腺素共同诱导的肥大心肌细胞的影响, 进一步推测吡格列酮对糖尿病性心肌肥大的可能作用及作用机制。方法: 以培养的乳鼠心肌细胞为模型分组给药后, 用显微镜目镜计数心肌细胞搏动的频率;用Lowry' s 法测心肌细胞的蛋白质含量;用[³H] leucine 标记法测定心肌细胞蛋白的合成;利用计算机图象分析系统测心肌细胞的体积。结果: 吡格列酮在1 ～ 10 μmol·L^-1 浓度对25. 5 mmol·L^-1高糖与1 μmol·L^-1去甲肾上腺素联合诱导的肥大心肌细胞的蛋白含量、蛋白合成及体积均有显著的抑制作用。其抑制肥大的效果比1 μmol·L^-1 维拉帕米更为显著;同时观察到10 μmol·L^-1吡格列酮同1 μmol·L^-1维拉帕米一样有抑制心肌细胞搏动的作用。结论: 吡格列酮能有效抑制高糖与去甲肾上腺素联合诱导的心肌细胞肥大。这种作用可能是通过作用于PPARγ来实现的。     

盐酸氟桂利嗪分散片和胶囊的生物等效性研究

目的: 研究盐酸氟桂利嗪分散片药代动力学及生物等效性。方法: 20名健康受试者按体重指数进行分层随机交叉服用盐酸氟桂利嗪试验制剂和参比试剂20 mg,采用高效液相色谱法测定盐酸氟桂利嗪的血药浓度。结果: 口服20 mg被试制剂与参比制剂后,盐酸氟桂利嗪AUC_0-1,分别为424.27±74.01 和 410.25±72_56 μg·h^-1·L^-1;C_max分别为67.02±14.89 和 67.45±15.68 μg·L^-1;C_max分别为2.90±0.42 和 2.98±0_47 h; t_1/2ke分别为 9.73±3.15和8.89±3.08 h。试验制剂的相对生物利用度为（104.12±12.23)%。结论: 盐酸氟桂利嗪分散片和肢囊具有生物等效性。     

固相萃取HPLC检测生物样品中甲苯磺丁脲和代谢产物及其人体药代动力学研究

目的: 建立固相萃取高效液相色谱测定人血浆和尿液中的甲苯磺丁脲和代谢产物浓度的方法,并用于研究甲苯磺丁脲人体代谢过程。方法: 固相萃取净化和富集样品,建立高效液相色谱法测定人血清和尿中曱苯磺丁脲和代谢产物的浓度。色谱条件:色谱柱为 Waters Spherisorb 5 μm Phenyl 色谱柱(4.6 mm×250 mm),流动相为甲醇-0.02mmol·L^-1 pH 3.3乙酸钠缓冲液(28:72),流速1 ml·min^-1,检测波长:230 nm。用该方法测定10名健康志愿者单次口服500 mg曱苯磺丁脲后血清和尿液中药物及其代谢产物浓度,应用3p97计算其的药动学参数。结果: 血浆曱苯磺丁脲线性范围为2~lOOμmol·L^-1 (r=0.999),回收率为105.1%~103.9%。尿液羧基曱苯磺丁脲、4-羟基甲苯磺丁脲和甲苯磺丁脲的线性范围为 2~50 μmol·L^-1 (r=0.999)、1~50 μmol·L^-1 (r=0.999)和 1~50 μmol·L^-1 (r=0.999),回收率为 98.8%~100.1%、95.4%~103.5%和97.7%~106.6%。各样品的日内、日间精密度均矣15%。健康志愿者单次口服500 mg甲苯磺丁脲的 AUC_0-∞ 为 2644.6±472.8 μmol·h^-1·L^-1,T_max是 1.4±0.6 h,C_max是235.8±47.3 μmol·L^-1,t_1/2为 6.9±2.1 h,MR_0-24=277.5±125.6。结论: 甲苯磺丁脲及其代谢产物的固相萃取高效液相色谱法灵敏、准确,重复性好,可用于甲笨磺丁脲的体内过程研究。甲苯磺丁脲代谢产物主要经尿液排出。     

DDPH对多种介质所致豚鼠离体肠道平滑肌收缩的影响

目的 研究1-(2, 6-二甲基苯氧基)-2-(3, 4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐(DDPH)对多种介质引起的豚鼠离体肠道平滑肌收缩的影响。方法 肠道平滑肌实验法。结果 不同剂量的DDPH 可非竞争性抑制磷酸组胺、氯化乙酰胆碱及Ca²⁺的作用, 使量效曲线非平行右移, 最大反应压低, 其pD₂'值分别为4.0、3.8、3.9。DDPH 还可抑制K⁺所致肠道平滑肌收缩, 但作用较维拉帕米弱, IC₅₀ 值分别为2.7μmol·L^-1 和0.7 μmol·L^-1。结论 DDPH通过非竞争性Ca²⁺拮抗作用使豚鼠回肠平滑肌松弛。     

三羟基异黄酮和17-β 雌二醇对自由基缩血管效应的影响

目的: 研究自由基引发血管收缩的机制, 并通过血管静息张力的变化探讨三羟基异黄酮和17-β雌二醇对自由基缩血管效应的影响。方法: 制备猪冠状动脉血管环, 固定于恒温肌槽内, 待平衡后, 加入各种药物观察血管张力的变化。结果: 内皮完整的血管环在O₂^·-作用下产生明显的收缩, 去除内皮后无明显反应。1 μmol·L^-1三羟基异黄酮对O₂^·-引发血管收缩有明显的抑制作用(P <0.01, n=16),1 μmol·L^-117-β 雌二醇无明显作用。H₂O₂ 使去内皮血管环产生明显的收缩作用, 对内皮完整的血管环缩血管效应不明显, 30 μmol·L^-1三羟基异黄酮可明显抑制H₂O₂ 的缩血管作用。结论: 三羟基异黄酮可明显抑制O₂^·-和H₂O₂ 的缩血管效应, 其作用明显强于17-β 雌二醇。     

咪达唑仑对交感神经元电压门控性钾电流的影响

目的: 观察不同浓度咪达唑仑对交感神经元电压门控钾通道电流的影响, 探讨临床浓度咪达唑仑对钾电流的作用是否与抑制交感神经系统有关。方法: 用酶消化法获得急性分离的SD 大鼠(7 ~ 10 d) 颈上交感神经节细胞, 应用膜片钳技术记录不同浓度的咪达唑仑对电压门控钾电流的影响。结果: 在钳制电位(Vh)-80 mV, 刺激电压(Vt)^-100 mV ~ 30 mV, 时程160 ms 条件下, 不同浓度的咪达唑仑对电压门控钾电流均有抑制作用, 且呈浓度依赖性。临床相关浓度的咪达唑仑(0.3 μmol·L^-1) 使钾通道电流峰值下降3.89 %(P =0.88) 。50 %钾通道电流峰值受抑制时的咪达唑仑浓度(IC₅₀) 约为70.06 μmol·L^-1 。结论: 咪达唑仑对交感神经元电压门控钾电流具浓度依赖性抑制作用, 但临床浓度咪达唑仑对钾电流影响较小。     

异甘草素脂质体的制备及其对宫颈癌细胞体外增殖的抑制作用

目的: 研究异甘草素（ISL)脂质体对宫颈癌细胞体外增技的影响。方法: 采用超声波薄膜分散法制备ISL脂质体;葡聚糖凝肢层析法分离含药脂质体与游离药物并测定包封率;离心加速试验考察其稳定性;活细胞计数法测定生长曲线;MTT法测定细胞增殖。结果: ISL脂质体的平均粒径为233.1 nm,跨距为0.74,包封率为（70.8±2.5) %,稳定性好;ISL脂质体（5~80μmol·L^-1)浓度依赖性地抑制宫颈癌细胞HeLa和SiHa细胞增殖,并呈时间依赖性,于d3达高峰,其抑制率最高分别为83.44%和96.14%;浓度依赖性(5~80 μmol·L^-1)抑制 HeLa 和SiHa 增殖,ICW分别为 34.24 和 29.82 μmol·L^-1 (ISL的 IC₅₀分别为 75.39 和 69.33 μmol·L^-1) 结论: 该制备工艺与处方可行,命制备的ISL脂质体对人宫颈癌细胞体外增殖有明显的抑制作用,且作用明显强于ISL。     

血液灌流抢救超大剂量地高辛中毒

目的: 观察1例血液灌流抢救超大剂量( 50mg)地高辛中毒的效果。方法: 使用HA 330 ml 灌流器和YT-160 灌流器, 血管通路为股静脉单针双腔导管。入院后共进行了4 次血液灌流( HP) 治疗。结果: 第1 次HP 前后检测地高辛血药浓度均16 μg·L^-1。第2 次HP 血药浓度9. 22 μg·L^-1。第3 次HP 前血药浓度12. 4 μg·L^-1, HP 后为10. 45 μg·L^-1。第4 次HP 前3. 22 μg·L^-1, HP 后为2. 84 μg·L^-1。结论: 采用间隔一定的时间HP, 多次进行, 可阶梯式降低药物浓度。