沉淀法去除糖化酶中转苷酶的研究

研究了磷钨酸，十二烷磺酸钠，单宁酸三种试剂去除液体曲糖化酶中转苷酶的方法，利用正交试验了每种方法的最优工艺条件，在最优工艺条件下，磷钨酸法转苷去除率为７５．９％，糖化酶活力损失９．６％，十二烷基磺酸钠法转苷酶去除率为６９．１％，糖化酶活力基本不变；单宁酸法转苷酶去除率为７０．３％，糖化酶活力提高９．８％。     

糖化酶As3.4309的固定化方法研究

用蟹壳、明胶和卡拉胶做载体,采用交联法和包埋法对糖化酶As3.4309进行固定化。以淀粉溶液做底物,在相同条件下,对各种固定化糖化酶进行活力测定。实验结果表明:用卡拉胶包埋的固定化糖化酶保留了最高、的酶活力;而酶活力半衰期最长的是用蟹壳与戌二醛交联的方法制得的固定化糖化酶,对所获得的结果进行了分析,从而为固定化酶的进一步研究提供了方法上的依据。     

对几种相关酶联合固定化初探

用聚丙烯酰胺包埋,再以戊二醛交联联合固定了α淀粉酶、糖化酶和葡萄糖异构酶,对联合固定化的最适条件和联合固定化酶的性质进行了初步研究．结果表明联合固定化酶较固定化单酶更能发挥协同效应,能够将底物一步水解并转化为产物．文中所用的固定化方法与其他方法相比,固定化酶的稳定性、半衰期及酶固定化后活力均较高．在６０℃、ｐＨ５５时,α淀粉酶和糖化酶二酶的联合固定化酶的活力最高,其操作半衰期达到７９ｈ;在６０℃、ｐＨ７５时,α淀粉酶、糖化酶和葡萄糖异构酶三酶的联合固定化酶的活力最高,其操作半衰期达到９０ｈ．     

不同酶法酶提取薯蓣皂苷元的研究

研究了复合酶法提取薯蓣皂苷元的酶解条件,同时比较研究了复合酶法、纤维素酶法、淀粉酶法、糖化酶法的提取效果.实验结果表明:纤维素酶法产品纯度最高;复合酶法产品收率最高,在酶解条件方面具有时间短、温度低等特点.最后确定复合酶法为最佳方法,提取薯蓣皂甘元的最佳酶解条件为:酶解时间为16 h,酶解温度35℃,酶解PH值5.0,每克黄姜用酶量为0.04g.     

固体发酵法生产饲用复合酶

以啤酒厂的副产物麦糟为培养基进行固体发酵，在３０℃经２４ｈ发酵后，复合酶中纤维素酶，糖化酶，中性和酸性蛋白酶的活力分别为４２．８Ｕ／ｇ，５８２．８Ｕ／ｇ，３５３．０Ｕ／ｇ，２３７．７Ｕ／ｇ可作为饲料用复合酶制剂。     

对几种相关酶联合固化初探

用聚丙烯酰胺包埋,再以戊二醛交联联合固定了α淀粉酶、糖化酶和葡萄糖异构酶,对联合固定化的最适条件和聚合固定化酶的性质进行了初步研究。结果表明联合固定化酶固定化单酶更能发挥协同效应,能够将底物一步水解并转化为产物。中所用的固定化方法与其他方法相比,固定化酶的稳定性、半衰期及酶固定化后活力均较高,在６０℃、ＰＨ５．５时,α淀粉酶和糖化酶二酶的联合固定化酶的活力最高,其操作半衰期达到７９ｈ;在６０℃、     

纤维素酶酶活力测定方法的校正

探讨了测定条件对纤维素酶酶活力测定的影响。研究表明,测定条件对测定结果影响较大,因此进行纤维素酶酶素酶酶活力的测定时,必须对测定条件作出规定,纤维素酶是一种复合酶,底物纤维素不溶于水,底物的不饱和程度对纤维素酶酶活力测定的影响较大,底物的不饱和程度越高,所测得酶活力就越低,和酶液稀释率、蛋白质浓度和酶活力之间的关系建立一校正方程,得出一种纤维素酶酶活力测定的校正方法。     

黑曲霉糖化酶基因在酿酒酵母中的表达

从黑曲霉eDNA文库中筛选出糖化酶基因,并在酿酒酵母中进行表达．阳性克隆在发酵培养基中培养60h后,产生的糖化酶酶活力达到峰值为4．3U／mL．测定结果显示其糖化酶大小为1908bp,编码636个氨基酸残基组成的蛋白质．酶学性质分析显示该酶的最适反应温度为50℃,pH为5．0．经柱分离纯化其发酵上清液后,SDS-PAGE电泳方法,测得它的分子量大约为70kD,且条带清晰．     

转苷酶活性测定方法

对测定糖化酶中葡萄糖苷转移酶（转苷酶）酶活的方法进行了研究。采用α－ＭＧ为底物，用ｋｎｉｇｈｔ－Ａｌｌｅｎ法测定转苷酶催化α－ＭＧ分解产生的葡萄糖，计算得转苷酶酶活值。通过条件试验，找到了底物浓度、碱性铜试剂用量、加热时间、滴定剂浓度等的最佳范围。并测定了３×１０＾４，５×１０＾４，６×１０＾６μｍｏｌ／ｍｉｎ糖化酶粉剂和发酵液中的转苷酶活性，做了酶法、光度法与该方法的对比试验。     

泸型大曲中根霉固态发酵产糖化酶条件研究

对泸型大曲中根霉菌株固态发酵产糖化酶的条件进行了研究。以糖化酶活力为评价指标,设计单因素实验,研究培养基水分含量、培养时间、培养温度对根霉产糖化酶的影响,在此基础上,利用Box—BenhnkenDesign的方法,对根霉菌株固态发酵产糖化酶的条件进行优化,结果显示泸型大曲中根霉菌株固态发酵产糖化酶的优化条件为培养温度29℃,培养基水分含量53％,培养时间164h,糖化酶的酶活力为2194．44U／g。     

硅藻土吸附法去除糖化酶中的转苷酶

探讨了利用硅藻土作吸会剂去除液体曲糖化酶中转苷酶的方法。结果表明：硅藻土具有吸附转苷酶的作用并使糖化酶活力有所损失。发酵液ｐＨ值和硅藻土添加量对转苷酶去除率和糖化酶活力影响较大，而处理时间的影响较小。     

白腐乳微生物肽酶的测定及其脱苦特性研究

采用合成底物对毛霉和白腐乳发酵中分离出的细菌JS3及酵母JSBB2的肽酶活力进行了检测，测定表明微生物具有明显的二肽酶和羧肽酶活力，其中毛霉的氨肽酶和内肽酶活力较高，细菌表现出明显的氨肽酶活力，而Alcalase的外切酶活力不足。两步法水解实验表明，毛霉和细菌的粗酶液有利于降低Alcalase水解大豆蛋白（SPI）后溶液的苦味，经毛霉粗酶液作用后大豆蛋白水解液的水解度提高了16．2％，而酵母发酵液的水解和脱苦作用均不明显。     

牡蛎肉双酶复合水解工艺

以牡蛎为原料，利用多种蛋白酶对牡蛎蛋白质进行水解，挑选中性蛋白酶1398和Flavourzyme蛋白酶进行复合酶解，得出酶解的最佳工艺参数为：时间16h，中性蛋白酶1398与Flavourzyme作用的时间比为16：15，中性蛋白酶1398酶与底物比为300U／g，Flavourzyme酶与底物比为1200U／g．水解后，氨基态氮质量分数为O．469％，总氮回收率为91％．     

黄曲霉“苏—16”1的紫外线诱变及淀粉酶高产菌株的筛选

用紫外线诱变“苏－１６”的孢子，采用透明圈初筛和麸曲复筛的方法，得到一高产突变株。和原始菌株相比，淀粉液化酶活力提高了８５．２％，淀粉糖化酶活力提高了２４．４％。     

酶解大豆粉蛋白条件优化研究

从底物浓度、pH值、酶解温度、加酶量、酶解促进剂和酶解时间等方面研究了碱性蛋白酶Alcalase和木瓜蛋白酶复合对全脂大豆粉酶解的影响,并运用单因素和正交试验设计优化酶解条件.结果表明,底物体积分数4.5%、pH值8.5、温度60℃、复合酶加酶量（碱性蛋白酶Alcalase与木瓜蛋白酶活力之比为2∶1）2 640 U/g,添加5 mmol/L Mn2＋酶解180 min效果较好,水解度达到17.8%.     

菠萝蛋白酶提取的初步研究

用传统方法和新型方法提取菠萝酶,通过Folin 酶试剂法对所得的酶样的蛋白含量进行测定,分别为18mg/g和21.5mg/g;以酪蛋白为底物测定了酶样的活力为3.29×106U/g和3.33×106U/g;酶的最适的pH值为7.4,温度为45℃.酶活力影响因素中EDTA对保护菠萝蛋白酶有突出的影响.     

土壤中产碱性脂肪酶霉菌的筛选

利用RhodamineB平板筛选模型，以PVA橄榄油为底物的NaOH滴定法为测酶活主要方法，从沈阳化工学院附近含油脂丰富的土壤中筛选得到产碱性脂肪酶能力较高的霉菌M20．对其产酶条件进行优化，最终得到培养基中最佳碳源为葡萄糖2％＋植物油3％，最佳氮源为4％酵母膏，最适初始pH为8．0，最适产酶时间36h，将酶液于4℃下保存，酶活力可在3d内保持稳定．     

糖化酶的分批发酵动力学研究

用国内常规糖化酶生产菌株黑曲霉ＵＶ－１１,利用５升全自动发酵罐培养,在以淀粉为碳源,ＮＨ４Ｃｌ为氮源的合成培养基中,３３℃,ｐＨ４．５条件下进行分批发酏,菌体比生长速率为０．０２～０．０３１／ｈ时,糖化酶的比生产速率可达最大,为１５００～１８００ｕ／ｇ．ｈ,酶活力为２１９０ｕ／ｍｌ。     

影响kluyveromyces fragilis β-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的因素

研究了酶反应的温度、pH值、底物浓度和反应时间等对kluyveromyces fragilis β-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的影响．结果显示，以乳糖为底物．kluyveromyces fragilis β-D-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的最适温度为60℃，最适pH值为6．0，酶法合成低聚半乳糖的产率随着底物浓度增加而增加．kluyveromyces fragilis β-D-半乳糖苷酶催化低聚半乳糖合成的初速度较快．随着反应时间延长．反应速率降低，反应20h酶反应达到平衡．以660mg/mL乳糖为底物．在最适酪反应条件下，酪法合成低聚半乳糖的产率为207．12mg／mL。     

PDCA循环在提高木瓜蛋白酶酶活力检测重复性和再现性中的应用

木瓜蛋白酶具有蛋白酶和脂酶的活性，因而广泛用于食品加工业。由于其酶的活性直接影响使用效果，因此产品出厂检验的关键指标是木瓜蛋白酶活力。酶活力检测属于酶促反应的过程，环境温度、底物质量、不同的pH条件等，都对检测结果构成直接影响。样品的均匀性、标准对照品纯度的差异，也是影响检测结果的重要因素。