石榴皮多酚的提取、制备及其应用研究进展

石榴皮作为一种可再生资源,其含有丰富的多酚,在食品中具有广阔的应用前景。该文对石榴皮多酚的提取、纯化、检测和应用研究现状进行综述;并介绍石榴皮中最重要的两种多酚——安石榴苷和鞣花酸的研究现状,特别是对安石榴苷的水解、鞣花酸的提取及制备等进行详细阐述;并以大白鼠为模型,阐明安石榴苷体内代谢的一般途径。     

石榴皮多酚分离纯化及对脂肪酸合成酶抑制作用的研究

以总多酚质量分数、吸附率、解吸率为指标,进行石榴皮总多酚的分离纯化研究,并通过反相高效液相色谱（reverse phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC）法测定石榴皮多酚中的鞣花酸、安石榴苷、绿原酸、槲皮素和表儿茶素质量分数。同时研究石榴皮多酚纯化物对脂肪酸合成酶的抑制作用。结果表明：石榴皮多酚纯化的最佳条件为采用D101大孔树脂,石榴皮溶液进柱质量浓度为10 mg/mL,流速为2 BV/h,清洗用水5 BV,乙醇洗脱剂的体积分数为70%,用量为5.5 BV;纯化后石榴皮多酚质量分数为71.64%,较纯化前多酚质量分数49.31%有明显提高;纯化后石榴皮多酚中安石榴苷、鞣花酸、绿原酸、槲皮素和表儿茶素质量分数分别为46.91%、9.44%、0.53%、0.75%、0.32%。石榴皮多酚提取物对脂肪酸合成酶的半最大效应浓度（concentration for50% of maximal effect,EC50）为0.72 mg/mL,说明石榴皮多酚对脂肪酸合成酶具有较好的抑制作用。     

石榴皮多酚调控肝细胞内胆固醇平衡的相关通路研究

探讨石榴皮多酚对成人肝细胞脂滴形成的影响,对肝细胞胆固醇合成限速酶基因及低密度脂蛋白受体基因表达的调控作用及其机制。以石榴皮多酚纯化物(PPPs)、安石榴苷(PC)和石榴鞣花酸(EA)为受试物,以体外培养成人正常肝细胞L-02为研究对象,采用油红O染色法观察肝细胞内脂滴变化情况,利用实时荧光定量核酸扩增(realtime quantitative,RT-PCR)分析对肝细胞胆固醇合成限速酶关键基因HMGCR m RNA、SE m RNA及肝细胞低密度脂蛋白受体基因LDLR m RNA及其上游基因SREBP-2 m RNA表达的影响。结果表明:石榴皮多酚三种受试物均能减少细胞内脂滴的形成,以石榴鞣花酸效果最好;与模型组相比较,石榴皮多酚各处理组均可极显著降低(p0.01)肝细胞内胆固醇含量;与正常组相比较,石榴皮多酚三种受试物均可使胆固醇合成关键酶HMGCR和SE基因表达调控至较低水平,对LDLR基因和SREBP-2基因表达则有明显的上调作用。石榴皮多酚及其主要成分(安石榴苷和石榴鞣花酸)降低肝细胞胆固醇及降脂作用的机制可能是通过下调胆固醇合成限速酶基因表达,上调肝细胞低密度脂蛋白受体基因表达而实现的。     

RP-HPLC法测定石榴汁中的4种多酚类成分

目的:建立检测石榴汁中没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸的测定方法。方法:采用高效液相色谱法,ArcusEP-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.1%TFA为流动相梯度洗脱,流速1.0mL/min,没食子酸的检测波长254nm,石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸的检测波长377nm。结果:没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸分别在0.020~0.320μg,0.038~0.608μg,0.074~1.184μg,0.039~0.624μg之间线性关系良好,平均加样回收率分别为97.05%、96.21%、95.30%、98.14%。结论:本方法精密可靠,可作为石榴汁中没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸4种多酚成分的检测方法。     

石榴皮多酚抗肿瘤活性及其机制研究进展

现代研究表明,石榴皮多酚在预防和治疗癌症方面都表现出了良好的生物学活性,安石榴苷和鞣花酸作为其主要成分也分别具有良好的抗肿瘤活性。本文就近年来国内外对石榴皮多酚、安石榴苷和鞣花酸的抗肿瘤活性和机制研究进展进行综述,以期为石榴资源的充分利用提供参考。     

石榴皮多酚对脂变L-02肝细胞HMG-CoA还原酶mRNA表达的影响

研究了石榴皮多酚纯化物、安石榴苷和石榴鞣花酸对脂变L-02肝细胞胆固醇合成限速酶HMG-CoA还原酶mRNA表达的影响;采用MTT法筛选石榴皮多酚适宜浓度;体积分数50%胎牛血清的RPMI-1640培养基与L-02肝细胞孵育48 h建立脂肪变性肝细胞模型;实验分为正常组、模型组和治疗组,治疗组加入不同浓度的受施物,继续培养48 h,采用RT-PCR法检测不同受施物对脂变L-02肝细胞HMG-CoA还原酶mRNA表达的影响;结果显示:石榴皮多酚均能呈剂量依赖性地减弱脂变L-02肝细胞mRNA表达,且以100μg/mL的安石榴苷标品抑制作用最强;表明石榴皮多酚降肝细胞总胆固醇作用是通过降低HMG-CoA还原酶mRNA表达实现的,安石榴苷是石榴皮多酚中降血脂的主要活性形式。     

石榴皮多酚纯化及其抗氧化活性表征

目的：研究石榴皮多酚的纯化技术以及对石榴皮多酚提取物进行体外抗氧化活性表征。方法：选用国产10种大孔吸附树脂对超声波辅助提取所得的石榴皮粗提物进行分离纯化,并研究吸附动力学特征。采用4种常用体外抗氧化评价方法对纯化的石榴皮多酚进行活性表征。结果：大孔吸附树脂D160和XRD-6使石榴皮多酚粗提物中多酚纯度由35.05%提高到87.81%,其中,安石榴苷的纯度由原来的21.25%提高到73.96%。体外抗氧化实验表明,抗氧化活性与石榴皮提取物中多酚的纯度,尤其是安石榴苷的纯度,呈明显的剂量-效应关系;结论：大孔吸附树脂可以应用于石榴皮多酚的分离纯化;安石榴苷是石榴皮多酚中起抗氧化活性的关键成分。     

三种来源的石榴多酚抗氧化活性比较

目的:比较研究石榴皮、石榴汁、石榴渣多酚提取物的抗氧化活性。方法:通过测定多酚的总还原力、超氧阴离子自由基清除能力、羟自由基清除能力、DPPH·清除能力和对脂质过氧化的抑制能力五个指标评判和比较三种石榴多酚的体外抗氧化活性。结果:还原能力强弱为石榴渣多酚>石榴皮多酚>石榴汁多酚;对超氧阴离子自由基的清除能力顺序为:石榴渣多酚>石榴汁多酚>石榴皮多酚;清除羟自由基能力大小为:石榴汁多酚>石榴渣多酚>石榴皮多酚;对DPPH自由基的清除能力大小为:石榴汁多酚>石榴渣多酚>石榴皮多酚;对脂质过氧化的抑制能力强弱为:石榴渣多酚>石榴汁多酚>石榴皮多酚。结论:三种石榴多酚均具有较强的体外抗氧化和清除自由基活性,不同的评价体系,反应出的抗氧化能力高低不同。总体来说,石榴渣多酚和石榴汁多酚的抗氧化活性要高于石榴皮多酚,这可能与多酚组成有关。     

石榴皮多酚对脂变L-02肝细胞胆固醇合成的影响及机制探究

研究了石榴皮多酚纯化物、安石榴苷和石榴鞣花酸对脂变肝细胞胆固醇合成的影响及机制;采用MTT法筛选石榴皮多酚适宜浓度,体积分数50%胎牛血清的RPMI-1640培养基与L-02肝细胞孵育48 h建立脂肪变性肝细胞模型;实验分为正常组、模型组和治疗组,治疗组加入不同浓度的受试物,继续培养48 h,油红O染色定性观察细胞形态和脂滴堆积,高效液相色谱法定量检测细胞内胆固醇含量;紫外分光-速率法检测HMG-CoA还原酶活性变化;结果显示石榴皮多酚均能成剂量依赖性地减少细胞内脂滴的积累、减少细胞内总胆固醇的含量,同时抑制HMG-CoA还原酶的活性,其中以100μg/mL的安石榴苷标品效果最佳。表明石榴皮多酚具有降低肝细胞内总胆固醇的作用,可能是通过抑制HMG-CoA还原酶活性实现的,安石榴苷是石榴皮多酚中降血脂的主要活性形式。     

田口法优化石榴皮中3种活性成分的提取工艺

采用田口法优化乙醇回流提取石榴皮中3种酚酸——安石榴林、安石榴苷和鞣花酸,并使3种成分产率达到最大。通过单因素试验和田口法优化显著影响石榴皮提取的因素,包括乙醇体积分数、提取温度、提取时间、液料比、粒径和提取次数。结果表明,优化后取得的乙醇体积分数、提取温度、提取时间、液料比、粒径和提取次数分别为20%、70℃、2 h、50︰1(mL/g)、0.125 mm和提取2次。在这些最佳条件下,从1 g干燥的石榴皮粉末中可获得17.89±0.27 mg安石榴林、498.66±2.13 mg安石榴苷、7.30±0.05 mg鞣花酸,与预测值17.94 mg安石榴林、497.44 mg安石榴苷、7.26 mg鞣花酸符合。因此,达到利用田口法使安石榴林、安石榴苷和鞣花酸3种成分产率最大的目标。     

超声处理对石榴皮多酚提取效果的影响

石榴皮是一种易获得的、廉价的,但含有丰富多酚的废料。采用超声辅助提取法从石榴皮中提取多酚,优化工艺参数并利用高效液相色谱法(HPLC)测定石榴皮中多酚的成分和含量,同时研究了石榴皮表面在超声处理下的变化。研究结果表明,在超声条件下,用水作为溶剂有更高的多酚得率,比甲醇等有机溶剂提取效果更好。在优化条件,即液固比(mL∶g)为60∶1,超声功率为400 W和超声时间为25 min时,多酚的最佳得率为39.30 mg/g(以没食子酸为标准),高于传统溶剂提取法的得率(32.58 mg/g)。HPLC分析得到石榴皮多酚中安石榴苷含量最高,其次是石榴皮鞣素,并且超声处理能较大地强化提取效果。石榴皮表面显微观察证明,超声能够显著破坏石榴皮表面而影响植物组织完整性,使多酚更多地释放出来。     

红树莓多酚的组分分析及体外抗脂质过氧化活性

采用紫外-可见分光光度法、红外光谱法和高效液相色谱法,分析了‘菲尔杜德’红树莓多酚粗提液和纯 化液的组成成分,同时采用3 个体外抗脂质过氧化指标研究了其抗脂质过氧化活性。组分分析结果表明红树莓多酚 中可能含有黄酮类、花色苷、糖苷类物质,初步鉴定出红树莓多酚中含有原花青素B2、芦丁、水杨酸和鞣花酸4 种 酚类物质,且红树莓多酚粗提液和纯化液中多酚组成具有差异性。抗脂质过氧化活性结果表明：在一定质量浓度范 围内,红树莓多酚粗提液和纯化液对Fe2＋诱导卵黄脂蛋白脂质过氧化、H2O2诱导大鼠红细胞氧化溶血和大鼠肝组织 匀浆自发脂质过氧化具有抑制作用,且呈现剂量依赖关系;红树莓多酚粗提液的抗脂质过氧化活性强于纯化液。红 树莓多酚提取物对脂质过氧化有抑制作用,但其作用机制和途径仍需进一步研究。     

Pressurised water extraction of polyphenols from pomegranate peels

Pomegranate peels are one of the most valuable by-products of the food industry in terms of polyphenols which are conventionally extracted from plant materials by organic solvents, especially with methanol. Pressurised water extraction was investigated for the extraction of polyphenols from pomegranate peels. The most important factors affecting the extraction results were found to be particle size, temperature, and static time. The results indicated that pressurised water extraction was as effective as conventional methanol extraction for the recovery of polyphenols from pomegranate peels. Total phenolic contents of pomegranate peels obtained by pressurised water extraction at optimised conditions and conventional solid–liquid methanol extraction were determined as 264.3 and 258.2 mg/g tannic acid equivalents, respectively. Hydrolyzable tannins were the predominant polyphenols of pomegranate peels corresponding to 262.7 mg/g tannic acid equivalents. Punicalagin content of pomegranate peels by pressurised water extraction was found to be 116.6 mg/g on dry matter basis.     

生活饮用水对石榴皮多酚提取纯化工艺的影响

目的 考察水质对石榴皮多酚提取纯化工艺的影响。方法 分别用生活饮用水和纯化水对石榴皮粉末进行提取分离纯化,对其流分中的石榴皮多酚类物质进行高效液相法(HPLC)测定。结果 生活饮用水对石榴皮粉末提取纯化得到安石榴苷含量为2.65%;纯化水对石榴皮粉末提取纯化得到安石榴苷含量为78.79%。 结论 生活饮用水对石榴皮多酚提取纯化的影响极大,会加速石榴皮多酚类物质的氧化。     

微波处理对货架期石榴品质的影响

利用微波炉对采后石榴果实进行辐照处理,研究处理后果实在货架期的生理变化及贮藏品质。结果表明：10～20s 短时微波处理可抑制果皮多酚氧化酶(PPO)活性,减轻果实的褐变程度,保持果皮较高的多酚含量,减缓可滴定酸(TA)含量降低的速度,较好的保持了可溶性固形物含量(SSC)。10～20s 是适宜的微波处理时间,超过20s会产生热伤害,加重果实褐变。     

石榴皮提取物对生猪肉饼品质的影响

研究石榴皮提取物的抗氧化性能及不同质量分数（0.01%、0.05%和0.10%）石榴皮提取物的添加对生猪肉 饼pH值、蒸煮损失、色差和冷藏过程中脂肪及蛋白氧化的影响。结果表明：石榴皮提取物富含多酚和黄酮,其总 抗氧化能力、自由基清除能力、Fe2＋螯合能力随石榴皮提取物质量分数增大而增强;石榴皮提取物的添加对生猪肉饼的 pH值和蒸煮损失率无显著影响,但对生猪肉饼的亮度值、红度值有一定的负面作用;石榴皮提取物能有效抑制生猪肉 饼冷藏过程中氢过氧化物、丙二醛及蛋白羰基生成,且质量分数越高抑制效果越好,整体效果优于丁基羟基茴香醚。     

石榴皮多酚提取工艺优化及其贮藏稳定性研究

目的:优化石榴皮中多酚的超声辅助法提取工艺;研究不同质量分数的蔗糖酯和单甘酯分别与食用油和水形成的乳化体系对多酚储藏稳定性的影响。以多酚含量为关键指标,通过单因素实验确定了多酚提取的最佳因素,通过正交试验确定了因素的主次和最佳组合,以多酚留存率为关键指标来评价两种乳化剂对多酚储藏稳定性的影响。结果:优化后的石榴皮中多酚超声辅助法提取工艺为:成熟程度为幼期,料液比为1:5,提取温度为20 ℃,提取时间为50 min,提取最佳多酚含量为11.47 mg/g。在0~4 ℃下储藏15 d后,1%蔗糖酯溶于水中与多酚粗提液形成的乳化体系多酚留存率为104.24%,储藏效果最佳。多酚留存率随着乳化剂质量分数的增加呈上升趋势,乳化剂溶解于水中的作用效果优于溶解于食用油中,蔗糖酯的作用效果优于单甘酯。     

响应面试验优化石榴皮多酚提取工艺及石榴不同部位多酚的抗氧化活性分析

以石榴皮为原料,通过单因素试验及响应面试验优化石榴皮多酚的最佳提取工艺条件为：乙醇体积分数40%、超声波功率250 W、浸提温度60 ℃、料液比1∶27.5（g/mL）、超声时间39.3 min。此工艺条件下的多酚提取量为（1.13±0.26）mg/g。在优化条件下分别对石榴皮、石榴瓤和石榴籽中的多酚类化合物进行提取并比较其抗氧化活性,得到石榴不同部位的抗氧化活性大小依次为石榴皮＞石榴籽＞石榴瓤;进一步研究了人工模拟胃肠液对抗氧化活性最强组分石榴皮多酚活性的影响,发现经人工胃液处理后,石榴皮多酚的抗氧化活性升高（P＜0.05）,而经人工肠液处理后其抗氧化活性降低（P＜0.05）,推断石榴多酚类化合物在模拟胃肠液条件下其结构和功能的变化是不同的。     

石榴皮多酚的微波辅助提取及提取物抗氧化与抑菌作用研究

通过单因素实验、正交实验,用微波辅助法提取石榴皮多酚类化合物,确定了石榴多酚提取的最优工艺条件:40%(体积分数)乙醇作溶剂,料液比(g∶mL)1∶35,微波功率为242 W,提取时间60 s,提取三次,以该优化条件提取时,多酚粗提物的得率26.52%.同时还研究了石榴皮提取物对羟自由清除作用和小鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制作用,研究显示,其半抑制浓度IC50,EC50分别为0.288 mg/mL,0.0079 mg/mL.同时还通过测定抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)研究了石榴多酚的提取物对大肠杆菌和枯草杆菌的抑制作用,实验表明:石榴皮多酚类物质对大肠杆菌和枯草杆菌有较好的抑制作用,其作用在浓度为1g/L时最为显著;对应的抑菌圈直径分别为1.15 cm和1.25cm;其最小抑菌浓度分别为0.5 g/L和2 g/L.