人用疫苗生产用细胞、胰酶及疫苗成品中猪细环病毒PCR检测方法的建立及验证

目的建立人用疫苗生产用细胞、胰酶及疫苗成品中猪细环病毒(Torque teno sus virus,TTSu V)的PCR检测方法,并进行验证。方法根据Gen Bank中登录的TTSu V1(JN688927)及TTSu V2(AY823991)的序列,合成TTSu V1及TTSu V2基因组部分DNA序列,连接于PUC57质粒上,制备重组质粒,以重组阳性质粒DNA为模板,PCR扩增316 bp的TTSu V1片段及252 bp的TTSu V2片段,同时验证方法的灵敏度和特异性。并采用该方法对2批0.1%胰酶、Vero、KMB17、MRC5、Hep2、BT细胞及6批疫苗[3批Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine made from Sabin strain,SIPV)收获液、1批SIPV成品、1批冻干甲型肝炎减毒活疫苗[hepatitis A(live)vaccine,freezedried,f HAV]成品、1批肠道病毒71型(enterovivus type 71,EV71)灭活疫苗成品]进行检测。结果建立的PCR法最低分别可检出10 fg/μL TTSu V1和0.01 fg/μL TTSu V2的目的基因;该方法可特异性扩增出TTSu V1和TTSu V2的目的基因条带。2批0.1%胰酶、Vero、KMB17、MRC5、Hep2、BT细胞及6批疫苗均未检出TTSu V1及TTSu V2。结论成功建立了疫苗生产用原材料、细胞、疫苗收获液及成品中TTSu V的PCR检测方法,且该方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于本所疫苗生产中对TTSu V的检测。     

脊髓灰质炎免疫策略进展及疫苗供应现状

脊髓灰质炎(简称脊灰,poliomyelitis)是由脊灰病毒引起的急性肠道传染病,严重危害人类健康和社会经济发展。1988年,全球消灭脊灰倡议行动启动以来,全球脊灰病例减少了99%以上。近年来野生型脊灰病毒(wild poliovirus,WPV)的流行呈降低趋势,而一些使用口服脊灰减毒活疫苗(oral live attenuated poliomyelitis vaccine,OPV)的国家正面临疫苗衍生脊灰病毒的风险。因此,世界卫生组织(WHO)调整了脊灰免疫策略,要求所有目前接种OPV的国家,在免疫程序中至少增加1剂脊灰灭活疫苗(inactivated poliovirus vaccine,IPV)。IPV能避免OPV使用过程中的疫苗相关脊灰型麻痹(vaccine-associated paralytic poliomyelitis,VAPP)、疫苗衍生脊灰病毒(vaccine-derived poliovirus,VDPV)和疫苗重组脊灰病毒(vaccine recombinant poliomyelitis virus,VRPV)的发生。WHO要求使用IPV和二价脊灰减毒活疫苗(bivalent oral poliovirus vaccine,bOPV)序贯免疫程序替代三价脊灰减毒活疫苗(trivalent oral poliovirus vaccine,t OPV),逐步实现全程接种IPV。     

国内脊髓灰质炎疫苗不同序贯免疫程序免疫效果及安全性的研究进展

口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(oral poliomyelitis attenuated live vaccine,OPV)和脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine,IPV)的实施在消灭脊髓灰质炎(poliomyelitis)中发挥了重要作用,但仍存在疫苗相关麻痹型脊髓灰质炎(vaccine-associated paralytic poliomyelitis,VAPP)和疫苗衍生脊髓灰质炎病毒(vaccine-derived poliovirus,VDPV)病例的发生。为避免该风险,中国自2016年5月1日起停用三价OPV(trivalent oral poliomyelitis attenuated live vaccine,t OPV),改用二价脊髓灰质炎减毒活疫苗(bivalent oral poliomyelitis attenuated live vaccine,bOPV),并将IPV纳入国家免疫规划(national immunization program,NIP),即采用IPV-OPV-OPV-OPV序贯免疫程序进行接种,不仅能降低VAPP的发生,还能维持较高的肠道黏膜免疫力。本文就国内不同IPV-OPV序贯免疫程序的应用、免疫效果及安全性作一综述。     

Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗毒种的遗传稳定性

目的分析Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine,sabin strain,s IPV)毒种(亚主种子、工作种子)及疫苗代次病毒(SO+4)的遗传稳定性。方法比较疫苗株SabinⅠ、Ⅱ型及PfizerⅢ型亚主种子、工作种子及疫苗代次病毒的感染性滴度及D抗原含量的变化情况,并对上述病毒进行全基因组测序。结果各代次Sabin株病毒滴度均维持在7.62~8.62 lg CCID50/ml,D抗原含量均维持在30~128 DU/ml。与Gen Bank上登录的SabinⅠ(AY184219.1)、Ⅱ(AY184220.1)、Ⅲ型(AY184221.1)减毒株原始种子(SO)基因序列相比,Sabin株亚主种子(SO+2)、工作种子(SO+3)及疫苗代次病毒(SO+4)均未出现碱基突变。结论 s IPV毒种及疫苗代次病毒的全基因序列与原始种子相比,均未发生变化,毒力均一,遗传性状方面保持了较好的稳定性。     

2009～2016年脊髓灰质炎灭活疫苗批签发汇总及质量分析

<正>脊髓灰质炎(简称脊灰)是由脊灰病毒引起的一种急性肠道传染病,口服脊灰减毒活疫苗(oral poliovirus vaccine,OPV)对控制和消灭脊灰作出了巨大贡献[1]。但OPV使用后有极低的概率引起疫苗相关麻痹型脊灰(vaccine associated paralytic poliomyelitis,VAPP)和疫苗衍生脊灰病毒(vaccine deri-ved polio     

大连市二价脊髓灰质炎减毒活疫苗安全性分析

目的分析二价脊髓灰质炎减毒活疫苗(bivalent oral live attenuated poliomyelitis vaccine,bOPV)、三价脊髓灰质炎减毒活疫苗(trivalent oral live attenuated poliomyelitis vaccine,t OPV)及脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated polio-virus vaccine,IPV)疑似预防接种异常反应(Adverse Events Following Immunization,AEFI)发生情况,评价bOPV安全性。方法收集大连市2009～2017年所有疫苗(包括第一类和第二类疫苗)的AEFI报告病例数和疫苗接种剂次,采用描述性流行病学方法进行统计分析。结果 bOPV发生AEFI 19例(男性8例,女性11例,男女发病比例为0. 73∶1),报告发生率为6. 88/10万,低于全部疫苗的平均报告发生率,高于t OPV,差异均有统计学意义(P 0. 05),与IPV-Salk相比,差异无统计学意义(P 0. 05);11例发生在接种1 d内,7例发生在接种1 d后,1例发生在接种15 d后,其中一般反应18例,异常反应1例,发生严重异常反应的报告发生率为0. 36/10万,与全部疫苗和t OPV发生严重异常反应的报告发生率相比,差异无统计学意义(P 0. 05)。结论 b OPV的AEFI发生率高于t OPV,低于全部疫苗,疫苗有较高的安全性。     

脊髓灰质炎病毒类病毒颗粒作为候选疫苗的研究进展

脊髓灰质炎是一种由脊髓灰质炎病毒引发的高感染性疾病,该病可导致瘫痪甚至致命。口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(live attenuated oral poliovirus vaccine,OPV)和脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine,IPV)的使用为全球消灭脊髓灰质炎的主要途径,但目前的OPV及IPV均存在生物安全隐患。脊髓灰质炎病毒类病毒颗粒(virus-like particles,VLPs)可保留原病毒的大量重要抗原表位,诱导较强的免疫反应,且无生物安全隐患,是一种具有巨大潜力的疫苗。本文结合全球范围内OPV与IPV的使用情况,对目前脊髓灰质炎病毒VLPs的研究现状及其作为脊髓灰质炎疫苗的意义和目前的困难作一综述。     

Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)渗透压摩尔浓度的质量分析

目的分析Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)渗透压的摩尔浓度。方法选取本所2016～2018年1季度生产的92批次Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)[inactivated poliomyelitis vaccine made from Sabin strains(Vero cells),sIPV],采用渗透压摩尔浓度测定仪检测其渗透压摩尔浓度,并对检测数据进行正态性检验。结果 2016～2018年生产的92批sIPV渗透压摩尔浓度数据符合正态分布(P 0. 05),渗透压摩尔浓度均值为330. 38 mOsmol/kg,标准差为9. 38 mOsmol/kg。生产初期(2016年)与现阶段(2017～2018年)生产的sIPV渗透压摩尔浓度差异无统计学意义(P 0. 05)。结论 sIPV渗透压摩尔浓度变化趋于稳定状态,本研究为该产品渗透压摩尔浓度限度标准的制定提供了实验依据。     

Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗D抗原含量检测标准化可行性方案的探讨

目的探讨Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine prepared with Sabin strain,sIPV)D抗原含量检测标准化的可行性方案。方法采用NIBSC提供的统一检测方法及协作单位的自建方法,分别以野毒株生产的第3代传统脊髓灰质炎灭活疫苗(conventional inactivated poliomyelitis vaccine,cIPV)D抗原国际标准品12/104、第4代cIPV国际标准品替代参考物质08/143和协作单位自建sIPV参考品为协作标准,对不同制造商提供的7个sIPV样品抗原含量进行检测,并比较分析。结果以12/104为协作标准采用统一方法检测sIPV样品的结果实验室间差异最小,采用自建方法检测结果差异最大,且无效试验的比例较高;以sIPV参考品为协作标准时,两种方法的试验有效性和结果的一致性均有所提升。结论建立sIPV专属国际标准品,采用实验室自建方法是sIPV D抗原含量检测国际标准化的最适方案。     

乙型脑炎减毒活疫苗中猪圆环病毒PCR检测方法的建立及验证

目的建立乙型脑炎减毒活疫苗中猪圆环病毒1型(porcine circovirus 1,PCV1)和猪圆环病毒2型(PCV2)PCR检测方法,并进行验证及初步应用。方法参照Gen Bank中登录的PCV1(AY193712)及PCV2序列(AY181946)设计引物,以提取的PCV1和PCV2基因组DNA为模板,分别经PCR扩增726 bp的PCV1片段和433 bp的PCV2片段,并对PCR反应中的退火温度、引物浓度、Mg2+浓度参数进行优化。将PCR扩增产物分别与p MD18-T载体连接,连接产物转化感受态大肠埃希菌DH5α,挑取阳性克隆,测序并进行同源性分析。对优化的PCR方法进行灵敏度和特异性验证,并用该方法检测3批乙型脑炎减毒活疫苗工作种子批、4批明胶和10批胰蛋白酶中的PCV1和PCV2。结果确定PCR反应的退火温度为54℃,引物浓度为10μmol/L,Mg2+浓度为10 mmol∕L。扩增的目的基因测序结果与Gen Bank中发布的PCV1及PCV2序列的同源性均为100%。建立的PCR方法最低可检出10 pg的目的基因;该方法只对PCV1和PCV2基因组DNA能扩增出特异性条带。用该方法检测乙型脑炎减毒活疫苗工作种子批、明胶和胰蛋白酶,均未检出PCV1和PCV2。结论成功建立了乙型脑炎减毒活疫苗中PCV1和PCV2的PCR检测方法,该方法具有较高的灵敏度和较强的特异性,可用于乙型脑炎减毒活疫苗工作种子批及两种猪源性原材料的PCV1和PCV2污染检测。     

国外钢铁工业用耐火材料回顾与展望

首先从生产和使用两个侧面回顾了钢铁工业用耐火材料的概貌，进而简要地展示了其发展趋势。最后按钢铁工业的生产流程，分高炉、铁水预处理、炼钢炉、炉外精炼、钢包和连铸等七个方面，较详细地介绍了耐火材料在这些领域中的使用现状和前景。     

油品储运损耗的原因及降耗措施

油品是一种极易挥发的物质,由于油品的沸点低,常温下油品就会挥发,所以在油品的储运过程中,就很容易造成油品的损耗,相关部门如果不重视油品的损耗的问题,油品的存储量就会降低,造成不必要的经济损失,所以应该采取相应的降耗措施,以降低油品的损耗量。     

New Concept and Apparatus for Cytocentrifugation and Cell Processing for Microscopy Analysis

Cytocentrifugation is a common technique for the capture of cells on microscopic slides. It usually requires a special cytocentrifuge or cytorotor and cassettes. In the study presented here, we tested the new concept of cytocentrifugation based on the threaded connection of the lid and the sample holder to ensure an adjustable flow of solutions through the filters and the collection of the filtered solutions in the reservoir during centrifugation. To test this concept, we developed a device for the preparation of cell samples on circular coverslips. The device was tested for the capture and sample processing of both eukaryotic and prokaryotic cells, cell nuclei, and mitochondria for microscopy analysis including image cytometry. Moreover, an efficient procedure was developed for capturing formaldehyde-fixed cells on non-treated coverslips without cell drying. The results showed that the tested arrangement enables the effective capture and processing of all of the tested samples and the developed device represents an inexpensive alternative to common cytocentrifuges, as only the paper filter is consumed during sample processing, and no special centrifuge, cytorotor, or cassette is necessary. As no additional system of solution removal is required during sample staining, the tested concept also facilitates the eventual automation of the staining procedure.     

耐火砖生产的自动化和机械化技术

在不改变目前工厂设备布置的情况下,为了达到节能和改善工作环境的目的,实现生产装备自动化和手工生产机械化是必要的。论述了生产水泥回转窑直型砖时,从成型到检查包装工序的机械化和自动化技术。     

学习三月 受益一生

在庆祝涂料界油漆培训班成立50周年之际,我刊已连续发表了3期老专家、老前辈们在油漆培训班学习的回忆性文章,对涂料事业今后的发展给予了很大的启发和借鉴。此期特约朱轶谊老前辈给我们讲述他当年在油漆培训班学习并受益一生的工作往事。     

水泥企业能效对标分析工具介绍

2007年9月,国家发改委研究制定并下发了<重点耗能企业能效水平对标活动实施方案>,要求地方政府有关部门、有关行业协会、有关企业认真组织实施.在国家发改委/UNDP中国终端能效项目(EUEEP)的支持下,国家发改委能源研究所组织、协调中国水泥协会、天津水泥工业设计院、中国钢铁研究总院、中国钢铁工业协会、中国化工节能技术协会等机构在水泥、钢铁、烧碱三个行业共同开展企业能效对标试点活动.     

塑料用着色剂基本要求及其有关测试方法

本文从塑料加工工艺,塑料树脂性能,塑料制品应用等方面讨论了对颜料的性能要求及有关测试方法。