薰衣草花提取物对酪氨酸酶的抑制作用研究

以薰衣草花为原料,经体积分数为70%乙醇提取,将提取物浓缩成浸膏后用水分散,再依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取。以L-DOPA为底物测定石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取部分及萃取后水相部分对酪氨酸酶的抑制作用。实验结果表明,薰衣草花水相萃取物对酪氨酸酶有较强的抑制作用,IC50为0.96 g/L,动力学研究表明,薰衣草花水相萃取物对酪氨酸酶的抑制作用是可逆的,其抑制类型为线性混合型抑制,对游离酶和酶-底物络合物的抑制常数分别为3.00和12.00 g/L。     

茯苓提取物对酪氨酸酶抑制动力学及刺激性研究

研究了茯苓提取物对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的影响及其抑制动力学,测试结果表明:茯苓提取物对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的活力均有抑制作用,单酚酶和二酚酶活力下降50%的茯苓提取物质量浓度(IC_(50))分别为0.008和0.040 g/L。酪氨酸酶单酚酶的催化反应存在迟滞时间,茯苓提取物对酪氨酸酶二酚酶活力的抑制作用表现为可逆效应。Lineweaver-Burk图显示茯苓提取物对二酚酶的作用表现为非竞争性与竞争性混合的抑制类型。在此基础上采用红细胞溶血实验初步评估茯苓提取物对皮肤的刺激性,结果显示含2.000 g/L茯苓提取物的样品无刺激性,质量浓度远大于单酚酶和二酚酶活力下降50%的茯苓提取物质量浓度IC_(50),茯苓提取物在0.200~0.800 g/L的质量浓度范围内可保证其安全添加且具有美白功效。     

当归提取物对酪氨酸酶的抑制作用

以乙醇为提取剂,用高压均质技术提取当归,采用酶动力学方法研究了当归提取物对酪氨酸酶活力的抑制效应。结果表明,当归提取物对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用,相对抑制率达到50%的当归提取物质量浓度(IC50)分别约为0.32 g/L和0.58 g/L,比熊果苷抑制二酚酶活性的IC50值1.44 g/L有效得多。Lineweaver-Burk图显示当归提取物对二酚酶的抑制作用表现为竞争性抑制,对酪氨酸酶的抑制常数(KI)为0.24 g/L。     

荔枝壳提取物对酪氨酸酶的抑制作用

通过对酪氨酸酶催化L-多巴氧化速率的测定,研究了荔枝壳粉的乙醇萃取液对体外酪氨酸酶活性的抑制作用。结果表明,酶抑制率达到50%(酪氨酸酶活力下降50%)时所需的澄清液中多酚的质量浓度为0.052 mg/mL。复合抑制剂的酶抑制作用的Lineweaver-Burk线特点的分析结果显示,荔枝壳粉提取物对酪氨酸酶的抑制作用不是单一成分的抑制作用,而可能是多种抑制成分共同作用的结果。     

桑叶黄酮抑制酪氨酸酶活性的动力学研究

采用超声波辅助法,以体积分数为60%的乙醇水溶液从新疆桑叶粉末中提取桑叶黄酮。以L-多巴为底物,采用酶动力学方法研究该提取物对酪氨酸酶的抑制作用。实验结果表明,桑叶黄酮提取物对酪氨酸酶有较强的抑制作用,其IC50为0.2 g·L-1。其对酪氨酸酶的抑制作用表现为可逆效应,抑制类型为混合型抑制,对游离酶的抑制常数(KI)和对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)分别为366和873 mg·L-1。DPPH实验显示新疆桑叶黄酮提取物具有一定的抗氧化作用,对DPPH自由基氧化作用相对活性的IC50为25 mg·L-1,与VC效果相当。     

苹果多酚提取物对酪氨酸酶的抑制作用

分别以L-酪氨酸和L-多巴(二羟基苯丙氨酸)为底物,在37℃,pH=6.8的磷酸盐缓冲体系中,测定了苹果多酚提取物对酪氨酸酶单酚酶活性和二酚酶活性的抑制效应。结果表明,苹果多酚提取物可有效抑制酪氨酸酶单酚酶活性,其IC50为1.96 mg·L-1。同时,苹果多酚提取物还是较强的二酚酶抑制剂,在实验质量浓度范围(0.012 5~1.75 g·L-1)内,苹果多酚提取物对酪氨酸酶二酚酶的抑制率最高可达73.66%,IC50为36.28 mg·L-1。L-多巴氧化体系动力学分析结果表明,苹果多酚提取物在低质量浓度下对酪氨酸酶表现为非竞争性抑制类型,而在高质量浓度下则表现为混合性抑制类型。     

中药白芨提取物对酪氨酸酶的抑制作用

通过从水和乙醇中选取一种有效的提取剂,用回流法和超声波提取法提取中药白芨中的有效成分,分别以左旋多巴(L-DOPA)、邻苯二酚为底物,研究了白芨提取物对酪氨酸酶活性的影响。结果表明,白芨提取物对酪氨酸酶活性有抑制作用,66.7 mg/mL的超声波水提取物比醇提取物对酪氨酸酶有更为明显的抑制作用,其对酪氨酸酶的抑制率为62%,IC50值为28 mg/mL。     

茶皂素的纯化及抑制酪氨酸酶活性的研究

研究了茶皂素的纯化及纯化产物体外对马铃薯酪氨酸酶催化L-DOPA合成多巴醌的抑制作用及其机理。结果表明质量浓度为100 g/L时,市售茶皂素、经大孔树脂纯化的茶皂素TS及2种层析分离得到的茶皂素TS1和TS2对酪氨酸酶的抑制率分别为51.29%,90.06%,94.13%和82.47%;TS和TS1对酪氨酸酶IC50分别为48和40 g/L,抑制作用表现为可逆竞争性抑制,对酪氨酸酶的抑制常数分别为137和101 g/L。     

姜黄素类化合物及姜黄素衍生物对酪氨酸酶抑制作用的研究

从中药姜黄的提取物中分离了姜黄素、单去甲氧基姜黄素及双去甲氧基姜黄素,并对姜黄素进行了引入羧酸基团、乙酰化、氢化等结构修饰,合成了4个姜黄素衍生物,并测试了这些化合物对酪氨酸酶的抑制活性。结果表明,天然姜黄素类化合物中单去甲氧基姜黄素的活性最强,IC50为0.076 mmol/L;姜黄素的结构修饰化合物中,带羧基的姜黄素衍生物表现出很强的抑制活性,IC50为0.056 mmol/L。抑制动力学研究表明,单去甲氧基姜黄素及带羧基的姜黄素衍生物对酪氨酸酶的抑制均属于非竞争性抑制类型。     

葡萄籽提取物对B16细胞内黑色素合成的抑制作用

为探讨葡萄籽提取物(GSE)对细胞内黑色素合成的抑制作用以及可能的作用机制,为GSE作为美白化妆品的天然添加剂提供实验依据,采用高表达黑色素的小鼠黑素瘤细胞(B16)为细胞模型,观察在细胞培养液中添加不同质量浓度的GSE后,黑色素生成量的变化,黑色素生成的关键酶——酪氨酸酶的表达量及活性的变化以及对B16细胞增殖的影响。结果表明,GSE在质量浓度为100 mg·L-1时,对B16细胞内黑色素合成的抑制率为(50.05±0.21)%,对细胞内酪氨酸酶活性的抑制率为(34.89±0.17)%,细胞内酪氨酸酶表达量受到抑制,且均呈质量浓度依赖性抑制作用;在培养过程中,B16细胞的增殖没有受到影响。说明GSE对B16细胞内黑色素的合成具有显著的抑制作用,其抑制机制可能是GSE抑制了酪氨酸酶蛋白的表达以及降低该酶的活性。GSE是一种高效的黑色素合成抑制剂,可作为美白化妆品的天然添加剂。     

硫脲在酪氨酸酶催化中的抑制动力学

研究了硫脲对蘑菇酪氨酸酶活力的抑制效应。实验结果表明,硫脲与酪氨酸酶催化氧化产物醌反应,形成了无色的L-DOPA衍生物,从而阻断了多巴色素的形成。硫脲导致酪氨酸酶活力下降50%时的浓度(IC50)为1.37 mmol·L-1,在降低酶活的同时,硫脲能明显延长该酶的延滞时间,表现为不可逆反竞争性抑制。     

十一碳烯酰基苯丙氨酸的合成及其抑制酪氨酸酶二酚酶活性的研究

以十一烯酸和苯丙氨酸为原料,使用氯化亚砜将十一烯酸酰氯化,采用肖顿-鲍曼法(Schotten-Baumann)缩合反应合成了十一碳烯酰基苯丙氨酸钠,再经酸化分离后得到了十一碳烯酰基苯丙氨酸。利用IR,MS和~1H NMR对合成产物的结构进行了表征,同时考察了十一碳烯酰基苯丙氨酸对酪氨酸酶二酚酶活性抑制的机制。结果表明,十一碳烯酰基苯丙氨酸对酪氨酸酶二酚酶活性的抑制作用为竞争性可逆抑制,其半抑制浓度为3.711 g/L,抑制常数(K_i)为3.651 g/L。     

乙胺硫脲抑制蘑菇酪氨酸酶活性动力学

研究了乙胺硫脲对蘑菇酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性的抑制效应.结果表明,乙胺硫脲对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用,导致单酚酶活力和二酚酶活力下降50%的乙胺硫脲浓度(IC50)分别为14.8和45.2μmol/L.在降低酪氨酸酶酶活的同时,乙胺硫脲能明显延长单酚酶和二酚酶的延滞时间.探讨了二酚酶延滞时间产生的原因:...     

姜黄素多酚类似物对酪氨酸酶抑制活性的研究

酪氨酸酶抑制剂广泛应用于皮肤美白化妆品中.通过芳香醛分别与丙酮和环戊酮在酸性条件下催化缩合,合成了两个系列共10个姜黄素多酚类似物(A1-5和B1-5),并研究了其对酪氨酸酶的抑制活性.结果表明,含邻二酚羟基的姜黄素多酚类似物(A4和B4)对酪氰酸酶具有很强的抑制作用,半抑制浓度(IC50)分别为1.19,1.24 μmol/L,比曲酸(IC50为28.59μmoL/L)的活性强20多倍.抑制动力学研究表明,该类姜黄素多酚类似物对酪氨酸酶的抑制属于非竞争性抑制类型.     

中华猕猴桃水提液清除羟自由基以及抑制酪氨酸酶活性的研究

以Fenton反应产生羟自由基,测定中华猕猴桃水提液清除羟自由基的能力。以L-酪氨酸和L-多巴为底物,测定中华猕猴桃水提液对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的影响以及抑制动力学。实验结果表明:中华猕猴桃水提液对羟自由基有较好的清除作用,当水提液质量浓度为1.0 g/L时,羟自由基清除率达到了95.57%。中华猕猴桃水提液对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的活性均有较好的抑制作用,其半数抑制浓度(IC_(50))分别为0.28和0.35 g/L。动力学研究表明,中华猕猴桃水提液对酪氨酸酶二酚酶的抑制作用属于可逆过程,其抑制作用表现为混合型抑制。     

鹰嘴豆异黄酮对酪氨酸酶的抑制动力学

采用酶动力学方法研究了鹰嘴豆异黄酮对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的抑制动力学效应.结果表明,鹰嘴豆异黄酮对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用,使单酚酶和二酚酶活力下降50%的鹰嘴豆异黄酮质量浓度(IC50)分别为0.07 mg/mL和0.03 mg/mL.在降低酪氨酸酶酶活的同时,鹰嘴豆异黄酮能明显延长单酚酶的迟滞时间,质量浓度为0.08 mg/mL的鹰嘴豆异黄酮能使其迟滞时间由1.26 min延长至2.62 min.Lineweaver-Burk图显示鹰嘴豆异黄酮对二酚酶的抑制作用表现为可逆的竞争性抑制.