两株低温石油烃降解菌的筛选鉴定及复配优化

筛选能够在低温条件下降解石油烃的菌株,探究降解菌株在低温条件下对石油烃的降解能力。从克拉玛依油田长期受到石油污染的土壤中通过富集、分离和纯化得到两株低温石油烃降解菌,经过形态学、生理生化和16S rDNA初步鉴定这两株菌为Agrobacterium tumefaciens和Sphingomonas pseudosanguinis。这两株降解菌能够在15℃,原油浓度3 g/L的条件下,7 d降解率分别达到48.25%和38.56%。为提高降解率,对两株菌进行复配,结果表明以2︰1比例复配时其降解率达到56.49%,高于单菌株降解率。     

高效石油降解菌群的构建及其耐盐性能研究

以原油降解率为目标,考察了5株石油烃降解菌对原油的降解情况,确定铜绿假单胞菌、氧化微杆菌、中间苍白杆菌3株菌接种量以体积比1∶1∶1混合后,原油降解率最高达74.16%。其中,铜绿假单胞菌、氧化微杆菌对饱和烃均有明显的降解作用,中间苍白杆菌只能够降解部分烷烃。探究了不同盐度对筛选出的3株菌的影响,结果表明,当液体培养基中盐质量浓度从10 g/L上升到50 g/L时,3株菌均能生长,随着含盐质量浓度的增加,菌株浓度依次减少,生长活性减弱,细胞膜通透性变大,细胞失水,导致细胞表面出现褶皱和凹痕,细胞壁变薄,细胞质减少,严重影响了细胞的活性。     

原油降解菌的分离及其降解性能

从大港油田的石油污染土壤中筛选出一株高效原油降解菌株X3,研究了该菌株对原油的降解能力,比较了不同浓度下的原油对细菌生长和降解率的影响,同时还研究了pH值和盐浓度对该菌株降解原油能力的影响.研究结果表明该菌株具有一定的耐碱性和耐盐性,原油浓度对总石油烃(TPH)的降解速率有很大影响,在30℃、原油初始浓度为1000mg/L、pH值为7、NaCl浓度为5g/L的条件下,该菌株对原油的去除效果最佳,可达到72.6%.色谱分析表明碳数是影响石油烃组分降解的最大因素,碳教越大降解越难进行.     

一株高效原油降解菌的分离鉴定和降解特性研究

原油泄漏及盐渍化土壤的原油污染问题日益严重,高浓度原油及高盐条件下微生物活性受到抑制,生物修复技术难以广泛应用。由辽河油田原油污染土壤中分离得到1株高效原油降解菌TG-1,经鉴定为红球菌属(Rhodococcus);菌株在无机盐培养基中对6%质量分数的原油7 d降解率高达95.6%,对直链烷烃、姥鲛烷及植烷的降解率均在90%以上;在1%～6%(10～60 g/L)盐浓度下,原油降解率均在65%以上;对盐质量分数为3%及5%的原油污染土壤15 d原油降解率分别为79.3%及60.7%。结果表明,菌株TG-1表现出较好的耐盐性及高效原油降解效率,具有修复原油污染盐渍化土壤的应用潜力。     

微波和紫外诱变选育高效石油烃降解菌株

采用紫外和微波发生器对实验室分离得到的1株石油降解菌Enterobacter sp.MX1进行紫外微波和微波紫外复合诱变。根据致死率曲线,在紫外照射功率15 W、时间3 min条件下得到突变菌株MXU2,并对其进行微波复合诱变30 s后筛选得到1株稳定高效石油烃降解菌株MXU2W2;微波照射50 s筛选得到MXW3,并对其紫外复合诱变4 min后筛选到1株稳定的高效石油烃降解菌MXW3U2。紫外微波MXU2W2和微波紫外MXW3U2这2珠菌降解石油烃7 d后,MXW3U2的对柴油体积分数1%的培养基降解率达到57.62%。正交实验确定微波紫外复合诱变的突变菌株MXW3U2优化生长条件为:温度30℃、pH为5、盐度4%、接种体积分数4%,在此条件下,菌株MXW3U2对柴油体积分数1%的培养基降解率达66.20%。     

石油降解菌的筛选及复合菌群的构建

从陇东油泥处理站的含油污泥中筛选分离得到5株高效石油降解菌,分别命名为LD3、LD5、LD7、W6、XB。通过菌株形态观察和生理生化反应进行初步鉴定,鉴定结果为XB属于动性球菌属(Planococcus Migula sp.),W6属于微球菌属(Micrococcus Cohn sp.),LD3属于链球菌属(Streptococcus sp.),LD5和LD7属于葡萄球菌属(Staphylococcus sp.)。通过单因素试验对5株菌的最佳降解条件进行探索,在降解温度为30℃时,5株菌的降解率均达到最高,其中LD3的降解率最大为77.80%;在培养液初始p H为7时,5株菌的降解率均达到最高,其中LD3的降解率最大为82.43%;LD3、LD7、XB的最佳接种量为6%,LD5的最佳接种量为4%,W6的最佳接种量为1%,通过对单个菌株的原油降解产物GC-MS分析,获得了各个菌株的原油组分的降解范围,采取互补原则,充分结合各菌株的降解优势,选取LD3、LD7、W6构建复合菌群,复合菌群对石油总烷烃的去除率为92.06%,复合菌群的降解残油组分GC-MS分析结果表明,复合菌群能降解原油中所含C13~C35之间的大部分烷烃,为含油污泥的实际修复提供理论指导。     

一株耐盐性莠去津高效降解菌Halomonas sp.SY-AD-9的分离、鉴定及其特性

[目的]进行盐单胞菌Halomonas sp.对莠去津降解的研究,解决含有莠去津的高盐废水处理问题。[方法]从长期受莠去津污染的土壤中分离出一株莠去津降解菌SY-AD-9,通过摇瓶实验及分子生物学技术研究该菌株对于莠去津的降解特性。[结果]结合生理化特性以及16S r RNA基因相似性分析将其初步鉴定为盐单胞菌属,基因序列已提交Gen Bank,登陆号为HM627247。该菌含有trz N和atz BCDEF 6个莠去津降解相关基因。该菌株具有很高的耐盐性,耐受极限高达14%。Na Cl质量分数为6%时该菌株在48 h内对200 mg/L的莠去津降解率为98.5%。[结论]利用盐度为6.5%的莠去津实际废水并且通过与本实验室另外一株莠去津降解菌SY-AD-39(Pseudomonas sp.)比较,菌株SY-AD-9具有更好的应用潜力。     

石油烃降解菌降解性能及其对含油土壤的修复

考察了筛选出的3株石油降解菌C3 Pseudomonas putida、C4 Acinetobacter calcoaceticus、C5 Sphingomona sp.对石油烃的降解性能,研究了3株菌的复合菌、生物炭+复合菌、生物炭固定化复合菌等不同菌剂加入方式对含油土壤的修复效果。结果表明:3株菌均能以石油烃为唯一碳源和能源生长,C3、C4对饱和烃的去除能力较强,C5对芳香烃的去除能力较强,3株菌的复合菌对石油烃各组分的去除具有协同效果,30℃培养28d复合菌对石油烃的降解率达到79.73%;生物炭与复合菌联用对石油烃的去除具有协同效应,其去除效果CTBTB+BCTB;生物炭的加入有利于降解菌在土壤中的定殖,其中生物炭作为固定化载体加入土壤对降解菌的数量增加最为有利。     

高效石油降解菌的筛选及初步鉴定

经过以石油烃为唯一碳源的选择性培养基平板初筛和三角瓶发酵复筛,采用紫外分光光度法测定石油降解率,从江汉油田和冀东油田石油污染的土壤和水体中,筛选出有降解石油能力的微生物9株.其中3株细菌(X-1,X-2,X-3)降解石油能力较高,X-1菌株的石油降解率最高达64.28%.根据形态学观察和部分生理生化特征初步鉴定,该菌为节杆菌属(Arthrobacter sp.).     

润滑油降解菌的分离筛选与鉴定

以润滑油为唯一碳源,从石油污染土壤中筛选分离得到了2株润滑油降解菌,考察发现2株菌株均能生物降解润滑油,菌株X1、X2在2 d内的润滑油降解率分别达到40.83%和32.54%,其中X1的润滑油降解能力更强。通过测定16S rDNA基因序列的方法对两株菌株进行了鉴定。结果表明,所分离的2株菌株中,X1为伤口埃希菌(Escherichia vulneris),X2为黄假单胞菌(pseudomonas lutea strain)。     

一株石油烃降解菌的固定化及其降解特性研究

从石油污染盐渍土壤中筛选出一株对液蜡乳化效果明显、对原油降解率达56.8%的菌株,命名为BZ-L。经生理生化和16SrRNA序列分析,初步鉴定该菌株属于沙雷氏菌属。以海藻酸钠和活性炭为包埋剂,对该菌株进行固定化研究。结果表明,当活性炭含量为0.8%时,固定化微球的破损率最低、渗透性最好;在接种量为35.0g·L-1、NaCl浓度为6.0%时,固定化微球对原油的降解率可达61.7%;菌株BZ-L的固定化微球对原油的降解率明显高于游离菌,且比游离菌的耐盐性能更强,可用于石油污染盐渍土壤的生物修复。     

石油降解菌株Pseudomonas sp．DY12的筛选及降解性能研究

从石油炼厂污染土壤中筛选出具有石油降解能力的菌株Pseudomonas sp.DY12,并对其降解石油烃能力进行了研究.考察了培养温度、接种量、培养基初始pH值、培养时间及摇床转速对菌株降解性能的影响,优选出菌株Pseudomonas sp.DY12降解石油烃的最佳条件,即:培养时间4 d、菌悬液接种量4%(体积分数)、培养温度30℃、培养基初始pH值7.0～8.0、摇床转速160 r·min-1,在此条件下菌株Pseudomonas sp.DY12对石油烃的降解率可达69.4%.     

石油污染物的微生物降解研究

从炼油厂污水池底泥中分离出3株石油降解菌。经过摇床培养研究了各菌株及混合菌对石油烃的降解性能,并考察了营养物质、电子受体对石油污染生物降解作用的影响。结果表明,25 d后,3种单菌对石油烃的降解率依次达到87.69%,52.14%,92.02%,混合菌高达93.18%;营养物质、电子受体对石油污染物生物降解影响显著,营养物质N与P适宜比为2∶1(质量比),电子受体H2O2适宜累计添加量为12 000 mg/kg。     

海洋石油降解菌的筛选、鉴定及降解活性

从渤海入海口的滩涂采集泥沙,采用石油为唯一碳源的筛选培养基,梯度稀释法与划线平板法作为筛选方法,分离、筛选出1株可降解石油的菌株SI-JHS。经过16S rDNA测序及Biolog 95种碳源分析,鉴定该菌株为假交替单胞菌(Pseudoalteromon sp.)。通过改变pH值、温度、盐度和石油含量等实验对SI-JHS进行石油降解试验。研究表明,菌株SI-JHS的最适宜降解条件为:盐度3.5%,pH值7.0,温度35 ℃,在该条件下,SI-JHS对石油降解率可达75.71%。     

石油烃降解菌的分离鉴定及其产生乳化剂条件

从天津塘沽原油污染海滩的泥样中分离得到一株石油烃降解菌SY095,经生理生化及16S rRNA基因序列分析鉴定为红球菌(Rhodococcus sp.)。该菌株能以正十六烷为碳源代谢产生一种对柴油等烃类具有良好乳化作用的生物乳化剂。菌株SY095产生乳化剂的最适宜条件为:正十六烷10g/L,初始pH值为7.2,30℃下160r/min摇床培养2d。在此条件下,培养液表面张力降到最低值,约32mN/m;经测定,其临界胶束浓度(CMC)值约为75mg/L。     

酸性红B高效降解耐盐菌株BY-2的分离鉴定及降解特性研究

从已运行一年的三相内循环好氧生物流化床系统中分离筛选出一株降解酸性红B的高效耐盐菌株BY-2,通过对菌株的理化形态特征及16s r RNA序列分析,初步确定菌株BY-2为Pseudomonas sp.属。考察了初始pH、盐度、染料浓度以及接种量等条件对酸性红B降解与菌体生长的影响。结果表明:初始pH为7,盐浓度为50 g×L~(-1),酸性红B初始浓度为500 mg×L~(-1),接种量2%,反应18 h时,酸性红B的降解率可达90%以上。降解中间产物的紫外-可见光光谱和GC-MS分析说明菌株BY-2对酸性红B有良好的降解作用,菌株BY-2在实际染料废水处理中具有潜在应用价值。     

混合菌群的筛选及其与白腐真菌串联降解石油的效果初探

从江苏油田提供的7个采集点的油污土样中筛选得到石油降解率较高的6株细菌--X-5、X-12、X-13、X-21、X-22、X-23和1株真菌--Z-26,通过两两混合实验发现X-23与X-5、Z-26具有较好的协同作用,将三者按1:1:1组成得到石油降解率较高的混合菌群,其石油降解率为75.9%.为进一步降低残留的石油含量,引入了1株白腐真菌进行后期处理,使得水相中石油含量降低,颜色明显变浅.利用气相色谱分析经混合菌和白腐真菌降解前后石油成分的变化,结果发现,石油中正构烷烃得到了有效的降解,除C17和C18外,其它正构烷烃峰峰值均明显降低,甚至消失.     

烟嘧磺隆高效降解复合菌系的构建及降解特性

[目的]构建烟嘧磺隆高效降解复合菌系并明确其降解特性，为高效修复烟嘧磺隆污染土壤提供理论支撑。[方法]通过富集驯化培养，从山西省不同生态区烟嘧磺隆污染土壤中筛选出5株烟嘧磺隆降解菌，通过16S rDNA和ITS序列分析鉴定降解菌的分类地位。通过全组合构建高效降解复合菌修复体系，并通过单因素试验明确其降解特性。[结果]筛选获得10株具有烟嘧磺隆降解能力的菌株，其中5株菌株降解能力较强。经16S rDNA和ITS序列鉴定和系统发育分析，5株烟嘧磺隆降解菌株分别为A枯草芽孢杆菌、B黑曲霉、C草酸青霉、D土曲霉和E绿木霉。全组合复配结果表明，由3种菌株组成的复合菌系对烟嘧磺隆降解率最好，其中ABD组合对烟嘧磺隆降解能力最高，较单株菌降解率最高的菌株D降解率提高23.74%；将筛选的A、B、D进行不同比例复配，菌株最佳复配比A∶B∶D为2∶3∶1时，烟嘧磺隆降解率最高达98.31%，各菌株对烟嘧磺隆降解的影响效果A>B>D。复合菌系较单一菌株增加了适宜的温度、pH值和烟嘧磺隆初始浓度范围，最适培养降解条件为接种量2%～5%，温度30～40℃，pH 7.0，烟嘧磺隆初始质量浓度50～2...     

微生物降解原油的操作条件优化研究

研究将油田中的微生物产出水接种于100 m L以原油为唯一碳源的无机盐培养基,30℃、160 r/min下振荡培养10 d,考察盐度、接种量、p H值对微生物降解原油的影响。基于单因素实验确定的优化范围,即盐度0.5%~2%,接种量5%~9%,p H为7~9,进行3因素3水平实验,通过响应面分析法得出的最优条件为:盐度0.83%,接种量6.16%,p H为7.84。在最优条件下,微生物对原油10 d的降解率可以达到45.24%,较预测值提高了0.59%;并对降解后的原油进行GC-MS分析,发现在实验时间内微生物对原油中的正构烷烃和多环芳烃组分有较高的去除效率。     

乙酸改性苎麻纤维固定化微生物的石油污染修复研究

以乙酸改性苎麻纤维为载体吸附固定石油降解菌群,考察不同环境因素对游离菌和苎麻纤维固定化菌降解原油的影响,并对烷烃降解进行了探讨。结果表明,吸附-生物降解过程在原油污染修复中发挥了重要作用,固定化菌的生物降解率为85.16%。扫描电镜及红外光谱图显示,改性载体具有良好的疏水亲油性,能将微生物和石油烃吸附在表面及内部空隙中。且细菌自身产生的胞外聚合物增强了对载体材料的粘附,细菌活性未受影响。在不同环境条件下,固定化菌剂比游离菌群表现出更好的环境耐受性。GC-FID分析发现,固定化菌剂对短链烷烃(C12～C20)的降解率高达94.85%。