南通坛紫菜多糖的黏度性质及其抗氧化活性

以南通洋口港坛紫菜为原料,利用水提法从紫菜中提取紫菜多糖,通过Sevage法除蛋白、活性炭脱色对其进行纯化。利用流变仪测定浓度、温度以及剪切速率对紫菜多糖黏度的影响探讨其黏度性质,并采用清除.OH自由基、O2-.自由基和DPPH.自由基模型对其体外抗氧化活性进行评价,并与VC进行了比较。结果表明:紫菜多糖溶液的黏度随着浓度和温度的升高而升高,随着剪切速率的增加而降低,多糖溶液表现为"非牛顿型流体",且具有"假塑性";紫菜多糖对.OH自由基、O2-.自由基以及DPPH.自由基都具有一定的清除能力,随着多糖溶液质量浓度的增大而增加,其中对O2-.自由基清除能力相对较强,当紫菜多糖溶液质量浓度为5 mg/mL时,对羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基的清除率分别为53.4%、78.9%和43.1%,但是与VC相比,紫菜多糖的抗氧化作用较弱。     

酶法降解坛紫菜多糖及其产物分析

以单因素试验为基础,通过正交试验确定了坛紫菜多糖的最佳酶解工艺条件为：酶解温度40 ℃、pH?6.0、酶解时间3 h。在此条件下,坛紫菜多糖酶解后的还原糖质量浓度为（1.42±0.12）mg/mL。利用液相色谱和质谱技术对酶解产物进行了组分分析和抗氧化活性检测。结果表明：酶解产物S1和S2均以半乳糖为主,半乳糖在两样品中分别占93.0%、90.5%,S1和S2的单糖组成相差不大。S1和S2都具有抗氧化活性,尤其对·OH的清除作用明显,且抗氧化活性大小S1＞S2。聚合度在10～16内的偶数糖比聚合度为4～6的坛紫菜寡糖清除·OH和O2 － ·的能力好,说明酶解产物的抗氧化活性与其聚合度有关,只有处于特定聚合度范围内才具有明显的抗氧化活性。     

坛紫菜多酚提取工艺及体外抗氧化与抑菌活性研究

以四水坛紫菜为原料,优化超声波辅助提取坛紫菜多酚工艺,评价其体外抗氧化和抑菌活性。采用单因素考察液料比、超声时间和乙醇浓度对坛紫菜多酚含量的影响,并利用响应面分析法优化提取工艺。结果表明:坛紫菜多酚提取最佳工艺条件为液料比351(mL/g)、超声时间43min、乙醇浓度66%,该条件下坛紫菜多酚含量为(6.85±0.13)mg GAE/g;体外抗氧化试验表明,坛紫菜多酚对DPPH自由基和ABTS自由基清除率的IC50值分别为(36.54±0.75),(16.07±0.32)μg/mL,ORAC值为(1 005.1±11.8)μmol TE/g;体外抑菌试验表明,坛紫菜多酚对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌和藤黄八叠球菌的最小抑菌浓度分别为1,1,1,2mg/mL。     

响应面试验优化末水坛紫菜多糖除蛋白工艺及其抗氧化活性

目的：研究末水坛紫菜多糖的除蛋白方法及所制备多糖在细胞内的抗氧化作用。方法：响应面法优化末水坛紫菜多糖酶法除蛋白工艺条件;建立H2O2诱导HeLa细胞氧化损伤模型,MTT法测定细胞存活率,2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯检测细胞内活性氧水平。结果：样品液中末水坛紫菜多糖酶法除蛋白最佳工艺条件为木瓜蛋白酶用量0.7 mg/mL、酶解温度50 ℃、酶解时间55 min,此时蛋白清除率为61.28%;在此基础上,用4%三氯乙酸继续除蛋白,蛋白清除率可达80.73%,多糖保留率为79.7%。与模型组相比,经末水坛紫菜多糖处理的损伤细胞存活率显著提高（P＜0.01）,且细胞内活性氧含量显著下降（P＜0.01）。结论：木瓜蛋白酶-三氯乙酸联用可有效除去末水坛紫菜多糖中的蛋白。末水坛紫菜多糖有较强的抗氧化能力,能清除细胞内过剩的活性氧,修复H2O2对HeLa细胞的氧化损伤。     

坛紫菜不同溶剂组分的抗氧化活性

为研究坛紫菜酚类化合物的抗氧化活性,通过提取和萃取得到坛紫菜4 种溶剂组分：石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水溶性组分,对其DPPH 自由基清除率和还原力大小进行比较,并研究其中多酚和黄酮类化合物的分布。结果表明：4 种溶剂组分在0.2～1.5g/L 质量浓度范围内与抗氧化活性均存在显著剂量效应关系,其DPPH 自由基清除率和还原力大小均为：乙酸乙酯＞正丁醇＞石油醚＞水溶性组分。在质量浓度为1.5g/L 时,乙酸乙酯组分的还原力吸光度为1.97,大于80% 茶多酚(1.90),接近于BHT(2.00)。对多酚类化合物和黄酮类化合物而言,同样是在乙酸乙酯组分中分布最多(分别为69.84mg GAE/g md 和299.49mg RE/g md),在水溶性组分中最少(分别为11.1mgGAE/g md 和32.36mg RE/g md),因此酚类化合物主要分布在中等极性溶剂中,而不是强极性溶剂中。研究还发现,1g/L 坛紫菜4 种溶剂组分的多酚类化合物含量与DPPH自由基清除率、还原力间的相关系数为：r =0.9311 和r=0.7530,而黄酮类化合物含量与DPPH 自由基清除率、还原力间的相关系数为r=0.8899 和r=0.7211,可见坛紫菜多酚类化合物为其抗氧化的主要活性成分。     

正交试验法优选坛紫菜多糖的提取工艺

目的：对常规法提取紫菜多糖的工艺进行优化；方法：L16（4^4）正交试验及方差分析；结果：影响紫菜多糖热水提取的主要因素为醇沉浓度，其次是浸提时间，再次是浸提温度和料液比；结论：常规法提取紫菜多糖的优选方案为浸提温度80℃、浸提时间1．5h、料液比1：20、醇沉浓度90％。     

坛紫菜多糖的分离纯化及其组成分析

采用热水提取坛紫菜多糖,经分离纯化得到3个多糖组分(分别命名为SP1、SP2及SP3).通过红外光谱和气相色谱对多糖组分进行分析,并用化学法测定多糖组分中的硫酸根、糖醛酸、半乳糖及3,6-内醚半乳糖含量.测定结果表明,SP1的单糖组成中含半乳糖96.53%、鼠李糖1.225%、岩藻糖0.85%、阿拉伯糖1.37%、木糖1.16%;SP2、SP3的单糖组分为半乳糖,而无其它单糖.3种多糖的硫酸基含量分别为(8.54±0.44)%、(10.24±0.23)%及(12.35±0.58)%,糖醛酸含量分别为(15.00±0.23)%、(10.46±0.55)%及(11.50±0.35)%,3,6-内醚半乳糖含量分别为(6.84±0.43)%、(4.99±0.24)%及(4.56±0.36)%.     

紫菜多糖提取工艺技术及抗氧化活性研究

在单因素实验的基础上,对影响紫菜多糖提取得率的因素:提取温度、提取时间、提取料液比设计正交实验。正交实验结果显示:提取温度为80℃、料液比为1∶20、提取时间为2 h,水提醇沉紫菜多糖得率最高。实验中利用Sevag法进行脱蛋白,脱除6次后,蛋白含量从最开始的14.31%降低至6.0%,多糖含量则可以达到87.66%。体外抗氧化活性实验结果表明紫菜多糖具有较强的抗氧化活性,对·OH和DPPH·均有良好的清除效果,并呈现出明显的线性关系。其中当浓度为3 mg/m L时,·OH的清除率可以达到90.9%;当浓度为2.5 mg/m L时,对DPPH·清除率可以达到90%。     

超声波辅助提取坛紫菜多糖的工艺优化

通过单因素试验和L（933）正交试验对超声波辅助提取坛紫菜多糖的工艺进行了优化。结果表明：影响超声波辅助提取坛紫菜多糖的主要因素为超声波功率,其次是超声波提取温度,再次是超声处理时间;优选方案为超声提取温度50℃,超声处理时间45min,超声波功率为400W;超声波辅助提取坛紫菜多糖的效率高于常规提取法。     

泡桐花多糖的体内外抗氧化活性

以泡桐花为原料水提醇沉法制备多糖,测定泡桐花多糖的体外、体内抗氧化活性。体外抗氧化测定结果显示,泡桐花多糖对超氧阴离子、羟基自由基清除以及抑制H₂O₂溶血有较好的效果,呈剂量依赖性;质量浓度0.5 mg/mL时,对超氧阴离子和羟基自由基清除率分别达到54.36%,74.62%,超过半数效应50%;质量浓度2 mg/mL时,抗H₂O₂氧化溶血率超过阳性对照组Vc（1 mg/mL）。体内抗氧化测定结果显示,泡桐花多糖低、中、高（日剂量5、10、20 mg/mL,0.2 mL）小鼠灌胃28 d对体质量无影响;血清和心脏、肝脏、肾脏、回肠脏器超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量和总抗氧化能力（total antioxidant capacity, T-AOC）检测表明,与空白组相比,不同剂量的泡桐花多糖能够增加或显著增加SOD、GSH含量和T-AOC水平（P<0.05）,同时降低MDA含量,并存在一定的量效关系。研究表明泡桐花多糖具有良好的抗氧化活性,可作为天然抗氧化剂应用于食药工业。     

桃胶多糖体内外抗氧化作用的研究

为了研究桃胶多糖体内外抗氧化的作用,实验采用体外测定桃胶多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、2,2'-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基(ABTS⁺·)、羟基自由基(·OH)和超氧阴离子(O₂^-·)等的清除率及对铁的还原能力,体内通过建立D-半乳糖小鼠氧化损伤模型,给予不同剂量(2、4、6 g/kg)桃胶多糖灌胃,测定血清及肝脏中丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果显示,桃胶多糖体外对DPPH·、ABTS⁺·、·OH和O₂^-·的半数抑制浓度(IC₅₀)分别为6.95、0.56、1.10、0.11 mg/mL,且对铁还原力随着浓度(0.02~0.14 mg/mL)的升高而增大;在体内实验中,与模型组相比,连续服用不同剂量(2、4、6 g/kg)的桃胶多糖能够显著或极显著降低小鼠血清及肝脏中MDA含量、提高T-AOC能力、增强SOD及GSH-Px的活性(P<0.05或P<0.01),同时剂量间存在一定的量效关系。研究结果表明桃胶多糖具有良好的体内外抗氧化活性,可进一步申报成为新型的食品资源,应用于制药与食品工业中抗氧化、抗衰老、降血糖等保健产品的开发。     

条斑紫菜活性肽的抗氧化作用

以条斑紫菜为原料,使用木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶水解紫菜蛋白制备活性肽,采用还原能力、清除羟自由基和二苯代苦味酰基自由基作为抗氧化性评价指标,研究紫菜活性肽的体外抗氧化活性,并测定其分子质量分布。结果表明：3种蛋白酶对紫菜蛋白具有较好的酶解效果,酶解产物具有一定的还原能力;自由基清除率和底物浓度之间具有正相关关系,木瓜蛋白酶酶解活性肽清除羟自由基活性最强,半数清除率质量浓度为0.397mg/mL;胃蛋白酶酶解活性肽清除二苯代苦味酰基自由基活性最强,半数清除率质量浓度为0.261mg/mL;经测定,具有抗氧化活性的小分子肽分子质量分布在148～1963u之间。     

罗非鱼肉蛋白酶解液的制备及体内外抗氧化活性研究

采用木瓜蛋白酶酶解罗非鱼肉蛋白,通过测定不同剂量罗非鱼肉蛋白酶解液的还原力,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-diphenyl-1-（2,4,6-trinitrophenyl）hydrazyl,DPPH）自由基、·OH和O2－·清除率及对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗氧化作用,评价罗非鱼肉蛋白酶解液的体内外抗氧化特性。结果表明：罗非鱼肉蛋白酶解液具有较高的还原力,清除DPPH自由基、·OH和O2－·的半数有效质量浓度分别为1.57、1.68 mg/mL和2.76 mg/mL;罗非鱼肉蛋白酶解液能显著提高小鼠血清和肝脏组织中超氧化物歧化酶活力、谷胱甘肽过氧化物酶活力和总抗氧化能力（P＜0.05）,同时使血清和肝脏组织中的丙二醛含量显著降低（P＜0.05）。罗非鱼肉蛋白酶解液有较强的体内外抗氧化活性。     

不同分子质量小麦胚芽多肽的体内抗氧化活性

研究不同分子质量小麦胚芽多肽的体内抗氧化活性。利用超滤和纳滤技术对通过复合酶法制备的小麦胚芽多肽进行分级分段和纯化。通过建立小白鼠的氧化损伤模型,将170只小鼠随机分成17组(正常对照组、模型对照组、不同分子质量以及不同剂量的小麦胚芽多肽实验组),除正常对照组外,其余各组进行腹部注射600mg/(kg·d)D-半乳糖建立氧化损伤模型,5种不同分子质量的多肽组灌胃低、中、高剂量的小麦胚芽多肽,实验周期40d,眼球取血处死小鼠,测定血清、肝脏中的超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC),研究不同分子质量小麦胚芽多肽的体内抗氧化活性。结果表明：小麦胚芽多肽能够使小鼠血清和肝脏中SOD、GSH-Px以及T-AOC的指标升高,降低小鼠血清和肝脏中脂质过氧化物的MDA含量,具有良好的抗氧化活性。总体来说,随着多肽质量浓度的升高,抗氧化活性也随之增强,分子质量在2000D以下的小麦胚芽多肽具有较强的抗氧化活性。     

不同工艺提取葡萄籽油对体内抗氧化特性的影响

本文研究两种不同方法提取的葡萄籽油对衰老模型小鼠体内抗氧化功能的影响。首先采用纤维素酶浸提和超声波辅助提取葡萄籽油,精炼后灌胃由D-半乳糖诱导的亚急性衰老模型小鼠,测定小鼠心脏、肝、脑和血清中T-AOC、SOD、GSH-Px和MDA的含量。结果显示,与空白对照组相比,模型组小鼠心脏、肝、脑和血清中T-AOC、SOD、GSH-Px均有不同程度的降低,MDA含量有不同程度的升高,说明小鼠衰老模型构建成功;与模型组相比,两种葡萄籽油各剂量组均能对小鼠脑、肝、心脏和血清中的T-AOC、SOD、GSH-Px活性均有不同程度增强,对MDA值有不同程度的降低;纤维素酶辅助提取的葡萄籽油在增强小鼠体内总抗氧化能力和增强小鼠血清中GSH-Px活力方面稍优于超声波提取的葡萄籽油。结果表明,葡萄籽油能够显著增强衰老小鼠的抗氧化能力;纤维素酶辅助提取的葡萄籽油体内抗氧化能力稍强于超声波辅助法所提葡萄籽油。     

条斑紫菜蛋白提取与抗氧化活性

以条斑紫菜为原料,探讨超声波辅助提取紫菜蛋白的超声时间、温度、料液比3个因素对提取率的影响,用响应面法优化后的紫菜蛋白提取工艺条件为超声时间10min、温度50℃、料液比10:1(mg/mL),在此条件下的实际提取率为37.6%。采用Superdex 200凝胶过滤层析和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法,分离纯化紫菜蛋白并测定其分子质量和抗氧化活性。结果表明:紫菜蛋白由3类分子质量分别为55、22、17ku的蛋白质(亚基)组成,这3类分子质量蛋白质都有明显的抗氧化活性,抗氧化活性随分子质量的降低而增大;实验测得紫菜蛋白清除羟自由基的IC50为1.481mg/mL,清除DPPH自由基的IC50为0.452mg/mL,紫菜蛋白具有较强的抗氧化活性。     

海参脏器多糖体外抗氧化活性研究

研究海参脏器多糖HPS1、HPS2在体外对羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-·)、以及1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH·)自由基的清除能力.结果表明,HPS1、HPS2对·OH、O2-·和DPPH·自由基均有一定清除作用,且随着多糖质量浓度的增大,其抗氧化活性逐渐增加.HPS1对·OH、O2-·和DPPH.自由基清除能力IC50分别为0.89、0.98、0.31mg/mL;HPS2对·OH、O2-·和DPPH·自由基清除能力IC50分别为0.64、0.78、0.24mg/mL.2种多糖对DPPH.自由基的清除活性尤其明显.HPS2对于3种自由基的抗氧化活性均强于HPS1.     

3 种方法提取的雨声红球藻多糖的理化性质及抗氧化活性比较

以雨声红球藻（Haematococcus pluvialis）为原料,研究超声辅助酸提取、超声辅助碱提取、超声辅助水提取3 种不同提取工艺对雨声红球藻多糖提取效率和产品理化特性的影响,在此基础上对3 种多糖抗氧化活性进行比较分析。结果表明,3 种提取方法所得多糖提取率大小依次为：超声辅助碱提法（9.52%）＞超声辅助酸提法（1.50%）＞超声辅助水提法（1.29%）。傅里叶红外变换光谱分析结果表明,3 种多糖的组成单糖中均包含吡喃糖,成苷的半缩醛羟基主要为α构型,其中以酸提多糖的吸收峰最强。扫描电子显微镜证实了超声辅助碱提法对雨声红球藻细胞壁的破坏程度最大,胞内多糖溶出最多。通过对还原力、1,1-二苯基-2-苦基肼自由基清除能力和·OH清除能力等抗氧化活性的测定,表明3 种多糖均具有一定的抗氧化能力,其中以碱提多糖的综合抗氧化能力最优。由此可见,超声辅助碱提法是一种提取藻多糖较好的方法。