土壤拮抗细菌对茄病镰孢菌的抑制作用和防治研究

从云南，贵州，河北，吉林，黑龙江，北京，天津等地采集土样２８个，采用常规平板稀释法分离获得的细菌菌株４１４个。以茄病镰孢菌为主要靶标菌，对分离菌株进行抑菌测定，筛选出强拮抗菌１３株，并用附着在茄子，番茄等上９种病原菌对其进行拮抗作用测定，发现所获拮抗细菌具有广谱抗性。筛选出具广谱拮抗作用的生防菌株Ｂ０７３、Ｂ１５３，其发酵淮中活菌在温室内人工接种条件下进行温室接种防病试验，对茄病镰孢菌防治效果分别     

5种植物内生菌的分离及其拮抗月季黑斑病菌的筛选

[目的]获得高效拮抗菌株,防治月季黑斑病.[方法]采用常规方法分离月季、银杏、钩腾、黑老虎、山苍子5种植物内生菌,以月季黑斑病菌作为指示菌,采用平板对峙培养法进行初筛,并对拮抗圈大于5mm的内生菌进行复筛.[结果]5种植物共分离出内生菌69株,其中37株细菌,3株放线菌和29株真菌;初筛出20株菌对月季黑斑病菌有拮抗效果,拮抗圈大于5mm的有8株,其中细菌7株,放线菌1株;复筛表明菌株YJX2与菌株YXF1抑菌效果较好.[结论]研究表明,菌株YJX2与菌株YXF1可作为月季黑斑病生物防治备选菌株.     

烟草赤星病菌的拮抗放线茵筛选

为有效防治烟草赤星病,从烟草赤星病菌感染区和秦岭山区的土壤样品中,采用平板对峙、抑菌率测定及发酵液扩散法,筛选对烟草赤星病菌有拮抗作用菌株．结果表明：有31株初筛放线菌与烟草赤星病菌平板对峙培养后抑制作用较稳定,抑菌率检测有19株菌株抑菌率达到了20％以上,12株菌株抑菌率大于309／6;进一步通过发酵液扩散试验,有9株放线茵能够产生拮抗烟草赤星病菌的活性物质,其中Y26—2和Y82—2抑菌效果最好,且所产抑菌物质较稳定．而且,这2株放线茵对辣椒疫霉菌、黄瓜枯萎菌、苹果轮纹菌三种植物病原真菌也有拮抗作用．     

尖孢镰刀菌拮抗细菌的筛选

报道从土壤中分离到1株对棉花枯萎病致病菌尖孢镰刀菌（Fusrium oxysporum）的菌丝生长及孢子萌发均具有较强拮抗作用的革兰氏阴性细菌J4。并对该菌株进行了形态及部分生理生化鉴定试验。16srRNA序列分析结果表明，该菌株与国际上已报道的溶杆菌属（Lysobacter）中的L．antibioticus细菌的16srRNA序列同源性达到99％。J4菌的培养条件实验结果表明，最佳培养基配方为：葡萄糖10．6g／L，尿素3g／L，NaCl0．5g／L，MgSO4 0．5g／L。在该培养基中J4菌发酵液的抑菌活性最大，J4菌所产生的抗性化合物耐热性较差。     

从环丝氨酸抗性突变株中筛选α—淀粉酶高产菌株

以枯草杆菌ＢＦ－７６５８发出了菌株，采用化学诱变剂甲基磺酸乙酯（ＥＭＳ）诱变，筛选Ｄ－环丝氨酸抗性株，逐步增加环丝氨酸浓度，从中得到α－淀粉酶高产菌株ＮＨ－５。采用往复式摇床和２Ｌ玻璃发酵罐进行发酵试验，ＮＨ－５菌株酶活较出发菌分别提高３０％和４８％。     

芽孢杆菌B15对棉花枯萎病菌的拮抗性能

考察B15菌株对棉花枯萎病菌——尖孢镰刀菌的抑制效果，并对B15的抗菌谱、菌种稳定性、在土壤中菌数及拮抗活性变化以及液体培养基进行研究。结果表明：芽孢杆菌B15对棉花枯萎病菌有较强的抑制作用，抑菌圈达30mm。B15抗菌谱广，拮抗性能稳定，经转接传代10次后无明显衰退。在4℃、28℃、55℃的土壤中放置30d，最高存活率达55．5％，拮抗性能与对照相当。加有黄豆粉的培养基有利于B15增殖和芽孢形成。研究结果表明：B15是一株极具开发潜力的生防菌株。     

产脂肪酶菌株Acinetobacter calcoaceticus UN9的诱变选育

本实验菌株醋酸钙不动杆菌（Acinetobacter calcoaceticus）M1-7的最佳紫外诱变时间为60,s.利用紫外诱变后涂布到添加不同脂肪酶底物和分解产物的分离培养基,筛选出具有抗性的正突变株.其中柠檬酸钠抗性突变菌株UN9最高酶活力达15.960,U/mL,比出发菌株提高了130.97%,远远高于琥珀酸钠、正丁酸、正己酸、三丁酸甘油酯等抗性突变菌株.经5次传代后,菌株UN9遗传性能稳定,平均酶活力为15.866,U/mL.     

三七根腐病原菌拮抗菌的筛选与活性分析

中药材三七的种植产业发展受根腐病影响十分严重,通过筛选高效、稳定的三七根腐病原菌拮抗菌株可对三七进行生物防治。采用平板对峙试验,从三七植株中筛选出2株拮抗细菌菌株WZZ-6和WZZ-25,并对其进一步的活性测定。结果表明:WZZ-6和WZZ-25菌株对柱孢菌(Ilyonectria mors-panacis)病原真菌有较好的抑制活性,病菌菌丝的生长抑制率都超过50%,其中菌株WZZ-6抑菌率高达72%;对三七离体块茎、植株的根腐病均具有较强的拮抗作用,防治效果高达100%。16SrDNA鉴定结果显示:WZZ-6和WZZ-25分别为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和枯草芽孢杆菌(B.subtilis),序列相似度分别为100%和99%。拮抗菌株WZZ-6和WZZ-25有望成为三七根腐病生物防治的新材料。     

357菌株对植物白粉病拮抗作用的超微结构研究

本研究发现,拮抗菌357对小麦、大豆及十大功劳白粉病菌分生孢子的萌发及菌丝端部的生长均有一定的抑制作用;在超微结构上,357菌株使病原菌菌丝顶端发育畸形,细胞内线粒体退化解体。另一方面,357菌株的产物也可诱发小麦细胞产生抗性。     

冬枣储藏期致腐真菌分离鉴定及广谱拮抗菌株的筛选

从不同腐烂病症的冬枣中分离得到致腐真菌4株,经鉴定分别为根菌索菌(RhizomorphaRoth.ex Fr)、细极链格孢(Alternaria tenuissima)、橄榄色盾壳霉(Coniothyrium olivaceum)、扩展青霉(Penicillium expansum);采用稀释分离法从样品中分离得到细菌菌株142株,采用对峙培养法从中筛选到对4种致腐真菌均具有明显拮抗作用的细菌菌株7株,其中菌株LM2303的广谱拮抗效果最佳,其对上述4种致腐真菌的抑菌带宽度分别为(8.5±0.5)mm、(8.0±0.3)mm、(10.3±0.6)mm和(7.5±0.9)mm;通过形态学观察、生理生化特性分析及16S rDNA序列比对,菌株LM2303应为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).菌株LM2303对冬枣主要致腐真菌均具有显著的拮抗作用,为冬枣储藏期致腐真菌生物防控奠定了基础.     

土壤拮抗放线菌的筛选及YYHS-2菌株的分类

采用平板分离法从抚顺东部山区不同植被类型土壤中分离出627株放线菌,对其进行皿内琼脂平板、发酵液及拮抗菌的拮抗性筛选。结果表明,YYHS-2等菌株对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillius subtilis)、大肠杆菌(Escherichia coli)、变形链球菌(Streptococcus mutans)等4种供试病原真菌具有强烈的拮抗作用。根据YYHS-2菌株的形态特征、培养特征、生理生化特征及细胞壁化学成分分析,均符合阎逊初放线菌分类系统中关于链霉菌的定义,可确定YYHS-2菌株归属于链霉菌属(Streptomyces)。     

一株生防酵母菌的筛选与生理生化特性的研究

在腐败玉米中分离到多株有生防效果的酵母菌，从中最终筛选到拮抗效果最好的一株酵母菌，经对其细胞形态的观察和生理特征测定，初步鉴定为间型假丝酵母（Candida intermedia)。     

来源于酸马奶的植物乳杆菌Bx6-2抑制甜瓜疫霉菌的研究

采用生长速率法测定植物乳杆菌Bx6．2的发酵液对甜瓜疫霉菌菌丝生长的影响,并对抑菌活性物质的理化性质进行了研究．结果表明,该菌的发酵液对甜瓜疫霉菌菌丝的生长有抑制作用．发酵液中的活性物质有较好的热稳定性,在pH6．0时抑菌效果较好,对酸性蛋白酶敏感,对中性蛋白酶不敏感,常温下10d的稳定性较好．通过调节pH、酶处理和加热处理实验,说明其抑菌活性物质不是乳酸,蛋白质类物质起了一定的抑菌作用,但其抑菌现象可能是与其他物质共同作用的结果．     

枯草芽孢杆菌对有害真菌的生防作用及最佳发酵条件研究

运用平板对峙法初步研究了枯草芽孢杆菌BS-02对部分有害真菌的拮抗效果,结果显示:BS-02菌株对砖红镰刀菌的拮抗作用明显,对黑曲霉、黄曲霉、青霉等有害真菌无拮抗作用.显微观察结果表明:BS-02对砖红镰刀菌的生防机制主要是分泌抗菌物质抑制病原菌生长.通过单因素试验和正交试验,得到BS-02最佳拮抗活性的发酵条件为:12 h种龄、1.0%蔗糖、1.0%酵母膏、0.5%NaCl、初始pH 5.0、5%接种量、装液量50 mL/250 mL、210 r/min、31℃、48 h.     

紫黑吸水链霉菌( Streptomyces violaceoniger-hygroscopicus)发酵代谢产物对几种常见果蔬病原菌的拮抗活性

从南昌地区不同土质中采得约300份土样，用平板分离法筛选得到8株放线菌，经分类鉴定，其形态、培养特性、生理生化特性与紫黑吸水链霉菌形似．命名为紫黑吸水链霉菌Streptomyces violaceoniger-hygrowopicus S-1、S-2、S-3、S-4、S-5、S-6、S-7和S-8,用其代谢产物对果蔬病原真菌——青椒疫霉病菌Phytophthora capsici、番茄灰病菌Botrytis cinerea、黄瓜枯萎病菌Fusarium axysporum f.sp.cucumerinum、黄瓜灰霉病菌Botrytis cinerea Pets、苹果黑腥病菌Venturia inaeualis、白菜黑斑病菌Alternaria brassicae等进行拮抗实验研究，结果表明有2株菌株的代谢产物对青椒疫霉病菌有明显的抑制作用，1株对黄瓜枯萎病菌有较好的抑制作用，1株对番茄灰霉病菌有一定的抑制效果。     

几种重金属对紫背萍的过氧化氢酶(CAT)活性的影响

通过测定试验植物的过氧化氢酶（ＣＡＴ）分解过氧化氢后所放出氧气的量（体积），确定紫背萍（Ｓｐｉｒｏｄｅｌａｐｏｌｙｒｒｈｉｚａ）的过氧化氢酶的活性。结果表明，紫背萍在暴露到镉，锌，铜和铁的不同浓度时，其ＣＡＴ活性明显升高，这表明４种重金属对紫背萍的ＣＡＴ活性均有刺激作用。结果还表明，紫背萍在有铁存在的两种金属的复合作用下（Ｃｄ－Ｆｅ，Ｚｎ－Ｆｅ），其ＣＡＴ活性明显降低。这表明Ｆｅ对Ｃｄ和Ｚｎ均有一定的拮抗效应。在Ｃｕ－Ｆｅ的复合作用下，Ｆｅ对高浓度的ＣＵ有拮抗效应而对低浓度的Ｃｕ有一定的协同作用。     

4种方法对7种桑黄菌的种性分析

采用形态学、拮抗试验、酯酶同工酶及RAPD技术对7种桑黄菌株进行了种性分析,并比较了4种方法分析结果的异同,虽稍有差异,但总体分类一致．由于单一方法存在局限性,且不同菌丝生长阶段对实验结果影响较大,所以还需对其亲缘性从DNA分子水平进行考察．根据RAPD扩增结果,构建反映了菌株间亲缘关系的聚类图,可将7个菌株划分为4大类,直观准确地揭示菌株间的差异性并加以鉴别．     

几株灰树花菌株液态发酵产多糖性能的比较

通过固体斜面培养和液体摇瓶培养,对收集到的、现可大规模种植的5株灰树花菌株的固体斜面菌丝生长特性以及液态发酵产多糖性能进行了比较研究,并以产多糖性能为指标对液态发酵菌株进行筛选.结果表明:在固体斜面培养中,菌株Gf-5和Gf-1表现出了较快的菌丝长速和较好的菌丝长势,其他菌株表现一般;但在液体摇瓶培养时,菌株Gf-3的菌球直径最小、菌丝生物量最高,其胞外多糖、胞内多糖及总多糖产量分别可达11.07 mg/100 mL、28.68mg/100 mL、39.75 mg/100 mL,均高于其他供试菌株,说明菌株Gf-3液态发酵的产多糖性能最好,较适合用于液态发酵生产.     

荧光假单胞菌RB5产嗜铁素的发酵条件

荧光假单胞菌RB5是从土壤中分离得到的一株对禾谷丝核菌有拮抗作用的细菌.通过CAS法检测分析,发现RB5菌株能产生嗜铁素.为明确荧光假单胞菌RB5产嗜铁素的发酵条件,采用摇瓶培养发酵,利用特异光谱吸收法,研究了不同培养条件对RB5菌株嗜铁素产量的影响.最终得出RB5产嗜铁素的最佳发酵条件:起始pH 7.0,接种量2％,瓶装量90 mL/250 mL,发酵时间48 h,Fe3+质量浓度为0.8 mg/L.抑菌试验表明,优化发酵条件后的RB5发酵液(OD400值2.35)有很显著的抑菌效果,抑制率达65.28％.