降解秸秆的纤维素酶产生菌的筛选及产酶条件研究

从土壤、霉变的农产品和实验室保存的真菌中筛选到15株产纤维素酶的菌株,其中绿色木霉T206产酶能力最强。利用液体发酵,研究了碳源、氮源、接种量、起始pH值、培养时间等对菌株产酶的影响,以及该菌株所产纤维素酶的种类。在最适条件下菌株培养96h后,羧甲基纤维素酶活(CMCA)最高达到7654.33U,是优化前酶活的1.7倍,滤纸酶活(FPA)达到1675.12U。     

秸秆纤维素降解菌的筛选及其产酶特性研究

为研究微生物对秸秆纤维素降解的影响,从腐化秸秆样品中分离出微生物菌株,经透明圈试验和酶活力测定得到了2株高效的秸秆纤维素降解菌,通过革兰氏染色镜检显示两株菌均为阴性菌,其中菌株(1)的16S rDNA与Pelomonas.序列比对相似度高达99%,而菌株(2)的16S rDNA与Curvibacter.序列比对相似度高达100%;由此可得,菌株(1)为Pelomonas.属并命名为Pelomonas gx.,菌株(2)为Curvibacter.属并命名为Curvibacter zj.。经拮抗实验可知,两菌株间具有很好的兼容性,并对复合菌系(Pelomonas gx.+Curvibacter zj.)的产酶特性进行了初步研究。研究结果表明,复合菌系Pelomonas gx.+Curvibacter zj.在温度35℃、pH为6.5、蛋白胨为氮源的条件下培养4d产酶最优,产酶能力明显高于单一菌株,其在结合10%Na OH预处理后秸秆降解率最高,秸秆干粉失重率可达78.10%。     

一株聚乙烯醇降解酶产生菌的产酶条件优化

枯草芽胞杆菌WSH-062在摇瓶培养中能产生胞外的PVA降解酶。通过单因素及正交实验对其进行了发酵条件的优化。研究结果表明:该菌产生的PVA降解酶为诱导型酶;2 g/L的复合氮源(NaNO3和酵母粉的配比为1∶1)就能满足细胞生长和产酶的营养需要。正交实验分析得到最优的发酵培养基为:PVA 30 g/L,酵母粉12.2 g/L,NaNO3 10.1 g/L,MgSO4.7H2O 0.35 g/L,KH2PO4 3 g/L,pH值7.2。优化之后的PVA降解酶酶活达到5.00 U/mL,比优化前提高了4.75倍,并且重复性较好。     

PLA降解菌的分离鉴定及其产酶和降解特性

以山东潍坊使用聚乳酸/聚己二酸-对苯二甲酸丁二酯共混物(PLA/PBAT)地膜的土壤为样本，采用以聚乳酸(PLA)为唯一碳源的无机盐培养基筛选PLA降解菌。使用形态学观察、生理生化实验、16S rRNA基因序列分析及构建系统发育树等方法鉴定降解菌。通过水解圈法确认产蛋白酶活性高的降解菌为研究对象，并采用福林酚法结合单因素及响应曲面法对外源营养源与产酶条件进行了优化。采用SEM、FTIR和XRD等方法分析了降解前后PLA的形貌和结构变化，研究了降解菌对PLA的降解情况。结果表明：从土壤中筛选获得了一株产蛋白酶的PLA降解菌(门多萨假单胞菌Pseudomonas mendocina)；优化得到的最佳产酶条件为：在100 mL筛选培养基中，加入质量分数为2%的葡萄糖和质量分数为1%的胰蛋白胨作外源营养源，pH为7.4，接种量为1.4 mL及培养温度32 ℃。在此条件下，蛋白酶活性最高为32.15 U/mL，较未优化前提高约26倍；PLA降解菌产蛋白酶可催化降解PLA材料中的酯键，5 d内PLA降解率可达29.35%。     

聚乳酸降解菌的分离鉴定及其产酶和降解特性

以山东潍坊使用聚乳酸/聚己二酸-对苯二甲酸丁二酯共混物(PLA/PBAT)地膜的土壤为样本,采用以聚乳酸(PLA)为惟一碳源的无机盐培养基筛选PLA降解菌。使用形态学观察、生理生化实验、16Sr RNA基因序列分析及构建系统发育树等方法鉴定降解菌。通过水解圈法确认产蛋白酶活性高的降解菌为研究对象,并采用福林酚法结合单因素及响应曲面法对外源营养源与产酶条件进行了优化。采用SEM、FTIR和XRD等方法分析了降解前后PLA的形貌和结构变化,研究了降解菌对PLA的降解情况。结果表明:从土壤中筛选获得了一株产蛋白酶的PLA降解菌(门多萨假单胞菌Pseudomonas mendocina);优化得到的最佳产酶条件为:在100 mL筛选培养基中,加入质量分数为2%的葡萄糖和质量分数为1%的胰蛋白胨作外源营养源,pH为7.4,接种量为1.4 mL,培养温度32℃。在此条件下,蛋白酶活性最高为32.15 U/mL,较未优化前提高约26倍;PLA降解菌产蛋白酶可催化降解PLA材料中的酯键,5 d内PLA降解率可达29.35%。     

腈水解酶重组菌发酵产酶条件的优化及应用

优化了重组菌E.coli BL21(DE3)/pET28b(+)-NIT发酵产腈水解酶的条件,确定最适发酵培养基为:玉米浆粉25g.L-1,酵母浸出汁5g.L-1,NaCl 10g.L-1,Fe3+0.5mmol.L-1,初始pH值7.5;最适诱导产酶条件为:诱导剂乳糖0.5g.L-1,诱导剂加入时间为接种6h后,诱导温度30℃,诱导时间28h,在此条件下产酶量达到6161.46U.L-1。所得菌体用于不对称转化R,S-扁桃腈生成R-(-)-扁桃酸,转化率达92.02%,产物e.e.值达99%。     

一株产聚乙烯醇降解酶的紫色杆菌的发酵条件研究

从聚乙烯醇(PVA)污染环境中筛选出一株产聚乙烯醇降解酶活力较高的菌株WSH04-01,该菌株能够利用聚乙烯醇作为唯一碳源进行生长.通过一系列生理生化试验和16S rDNA序列分析结果,鉴定该菌株属于紫色杆菌属(Janthinobacterium sp.),实验室编号WSH04-01.这是目前国内外有关紫色杆菌产生PVA降解酶的首例报道.首先对菌株合成PVA降解酶的营养条件进行了考察,通过单因素试验和正交试验确定了菌株最优培养条件为PVA10 g·L-1,葡萄糖3 g·L-1,酵母膏6 g·L-1,K2HPO4 2 g·L-1,KH2PO4 0 25 g·L-1,MgSO4 0.05 g·L-1,CaCl2 0.05 g·L-1,FeSO4·7H2O0.02 g·L-1,NaCl 0.02 g·L-1.最适发酵温度为30℃,培养基初始pH为7.2,装液量为30 mL培养基(250mL摇瓶)-1,接种量为8%.在最优条件下,PVA降解酶酶活可以达到4.94 U·mL-1,略高于正交试验中的最高酶活(4.83 U·mL-1).同时利用凝胶渗透色谱得到分子量分布图,对最优发酵条件下发酵过程中聚乙烯醇的降解进行了验证.     

木薯渣超低酸预处理后的酶水解及乙醇发酵

为提高木薯渣的酶解糖化效率,降低原料处理成本,采用超低酸(ULA)对木薯渣进行预处理,并对预处理后的木薯残渣(CR_(ULA))进行纤维素酶酶解糖化,同时探究木薯残渣附着酶的再利用以及回用过程抑制物的累积对发酵产乙醇的影响。结果表明,CR_(ULA)采用70 FPU/g_(底物)纤维素酶水解12 h后,获得47.22 g/L葡萄糖和60.61 g/L总糖。附着于CR_(ULA)上的纤维素酶循环利用5次,纤维素酶添加量从70 FPU/g_(底物)(RUN 1)下降到42 FPU/g_(底物)(RUN 5),节省了40%的新鲜酶,RUN 5的葡萄糖和总糖浓度分别为48.00 g/L和60.92 g/L。RUN 1和RUN 5的酶解液分别用于乙醇发酵,得到乙醇浓度和得率分别为21.67 g/L和0.46 g/g_(葡萄糖)、21.52 g/L和0.45 g/g_(葡萄糖),与葡萄糖培养基所得结果接近。附着酶再利用过程中抑制物乙酸、5-HMF和糠醛浓度有累积增加,而甲酸无明显的变化。由物料衡算可知,木薯渣经ULA预处理及酶水解后,葡萄糖得率为80.64%,乙醇产率为13.84%。     

蛋白酶生产菌的产酶条件研究

由南京紫光精细化工厂污水中筛得一株耐有机溶剂蛋白酶生产菌,经菌种鉴定,确认其为盐芽孢杆菌。对其进行了蛋白酶生产条件优化的研究,结果表明,该菌的最适产酶条件为:蛋白胨为最佳有机氮源,甘油为最佳有机碳源,硫酸铵为最佳无机氮源,氨基酸对蛋白酶的分泌有抑制作用,FeCl_2为最佳无机盐,最优pH=8.0,最优发酵温度37℃,最优发酵产酶时间72 h,最佳摇床转速180 r/min,在最优发酵条件下所产粗酶为3 424个酶活单位。     

β-葡萄糖苷酶产生菌产酶条件研究

本文研究了β-葡萄糖苷酶产生菌黑曲霉3．350菌株（Aspregillusniger3．350）的产酶温度、pH值、碳源等条件及其它影响产酶的有关因子，确定了黑曲霉3．350菌株产酶的最适温度为25～30℃，pH＝7.0～8.0，并发现在本实验条件下Cu2＋、Mg2＋对酶活力提高有明显作用。     

黑毛茶中产单宁酶真菌的筛选及产酶条件研究

采用富含单宁酸的平板培养基对黑毛茶中产单宁酶的真菌进行筛选,经纯化后初步鉴定该菌为黑曲霉,并对其中一株黑曲霉WC-2产单宁酶的发酵条件以及发酵培养基的组成进行了优化。优化后的条件为:五倍子渣含量80%,外加碳源为α-乳糖、添加量1%,外加氮源为硝酸铵、添加量0.5%,发酵温度37℃,发酵时间72h。在此条件下,单宁酶活力最高达到27.06U·g-1。     

苯酚降解菌的筛选与降解特性研究

以沈阳北部废水处理厂活性污泥为菌源,经过驯化、培养、筛选出一种降解能力较强的菌株GP6,该菌为球菌,革兰氏染色阴性,能以苯酚为唯一碳源和能源生长,降解苯酚的最佳条件为：温度30℃,pH7．0,振荡转速150r／min,好氧。进而研究了氮源和碳源等因素对苯酚生物降解的影响。     

木薯渣多级逆流厌氧发酵产酸条件的探讨

比较了木薯渣逆流厌氧发酵产酸过程中不同底物浓度和不同底物停留时间的产酸效果和底物降解率。在底物浓度为 80 g/L,底物停留时间在 12 d 时为最佳,挥发性有机酸浓度达到 6.75 g/L,乙酸占总挥发性有机酸中的比例达到 75.9% 和底物降解率达到 27.1%。     

木薯干原料同步糖化发酵生产乙醇

提出了用木薯干为原料,同步糖化发酵(SSF)开发燃料乙醇的新工艺. 对各个影响条件进行了研究,获得了最佳的工艺条件：原料粉碎粒度0.45 mm,加水比2.8, 100℃下蒸煮30 min,a-淀粉酶、糖化酶的添加量分别为10, 180 U/g, 30℃下发酵48 h. 并与普通的先糖化后发酵(SHF)生产模式进行了对比,认为SSF具有工艺简单、能耗低、发酵迅速、醪液酒精度高等众多优点,值得工业推广.     

PHB产生菌发酵条件的研究

从神农架林区采集的土样中分离出了可以在细胞内积累聚-β-羟丁酸( Poly-β-hydroxybutyrate,PHB)的菌株,分析其产生PHB的能力,并对其中3个菌株的生长曲线和PHB产量进行了比较,其中SNJD-3-I和SNJD-3-Ⅱ的PHB积累量均在第6d达到最大,第7d明显下降,而SNJD-3-Ⅲ的PHB产量...     

木薯酒精发酵工业废水的工艺研究

木薯蒸馏废液数量大,污染负荷高,一直是乙醇生产比较难以解决的问题。通过了解木薯酒精废水特性,进而开发工艺处理技术和设计进水参数及处理出水指标。研究中进一步说明了具体废水处理工艺,着重考虑整个工程投资及占地面积、废水的治理效果、沼气回收的经济效益等。初步设计整个处理系统采用全糟厌氧法处理工艺,分为五个部分:简单预处理、厌氧处理、好氧处理、物化处理、污泥及沼气处理单元。     

胶质芽孢杆菌培养条件及发酵工艺的研究进展

对胶质芽孢杆菌在微生物肥料、矿物分解和生物絮凝领域中培养条件及发酵工艺的研究进展进行了综述. 在微生物肥料方面综述了以高产量芽孢为目的的培养工艺及生物反应器发酵的研究;在矿物分解方面综述了以分解矿物和浸出矿物元素为目的的土壤矿物分解和矿石分解条件的研究;在生物絮凝方面综述了以提高絮凝率为目的的培养工艺和絮凝环境条件的研究. 在对现有研究总结的基础上,指出通过发酵模型的建立、流变学特性的研究指导发酵过程调控及将胶质芽孢杆菌应用于土壤改良是进一步研究和探索的方向.     

白腐真菌处理阿维菌素废水优势菌种筛选研究

建立了白腐真菌处理阿维菌素废水优势菌种的筛选方法.经富集、分离、纯化、筛选得到4株优势菌株,并对优势菌株进行了生理生化特性的研究.     

一株微生物絮凝剂产生菌产絮凝剂的条件及其发酵生理研究

通过正交实验研究了絮凝剂产生菌F00产絮凝剂的条件及其发酵生理.结果表明,F00产絮凝剂的最佳条件为:初始pH值为6.5,培养温度为30℃,通气量为80 r·min-1,C/N为10;培养72 h絮凝剂活性最高达到72%.F00发酵过程中,絮凝剂生物合成最多是处于菌体快速生长之后、菌丝停止生长到开始进入繁殖阶段大量产生分生孢子的时期,因此可在此时收获絮凝剂.     

一株含盐污水降解菌的分离鉴定及其降解特性研究

从塘沽海滩泥样中分离筛选出1株海洋细菌,标记为NY0935,该菌株对含盐污水中有机物有较好的去除效果.通过形态特征、生理生化特征和16S rDNA序列分析,鉴定该菌株为卓贝尔氏菌属（Zobellella sp.）.将菌株NY0935投入到大生活用海水中,在温度为25～37℃、pH值为6.0～10.0、NaCl浓度为0～6％的条件下,菌株可以正常生长,且对COD保持较好的去除效果.当培养条件为37℃、摇床转速为160 r·min-1时,菌株NY0935在大生活用海 水中培养48 h后对COD去除率达到75.99％.