不产毒黄曲霉菌对产毒黄曲霉菌产毒抑制效果分析

本实验6株菌分离自广东、山东、辽宁和湖北四省的花生土壤中,通过形态学和分子生物学鉴定均为黄曲霉菌,HPLC测定其产毒能力,其中GZ-6为产毒菌,GZ-15、WF-5、WF-20、JZ-2和YC-8为不产毒菌。分别以花生和玉米为培养基,将不产毒黄曲霉菌和产毒菌(孢子浓度:104:105或105:105)进行混合培养,测定不产毒菌对产毒黄曲霉产毒的抑制效果。结果显示:不产毒菌对产毒菌产毒的抑制率随着其孢子浓度的增加而明显加强,当孢子浓度比为105:105(不产毒菌:产毒菌)时,5株不产毒菌在玉米培养基上对产毒菌产毒的抑制率为34.55%~75.94%,在花生培养基上对产毒菌产毒的抑制率为38.03%~83.03%,其中WF-5、WF-20和GZ-15这三株不产毒菌对产毒黄曲霉产毒的抑制效果均达到75.00%以上,可以作为田间防治黄曲霉毒素污染的候选菌株。     

柠檬醛缓释制剂的稳定性及其对黄曲霉菌的抑制作用

本文旨在研究柠檬醛脂质体（Citral Liposome,CL）和柠檬醛-壳聚糖复合脂质体(Citral Liposome-Chitosan,CL-CS)这两种柠檬醛缓释制剂的稳定性及对黄曲霉菌（Aspergillus flavus）的抑菌效果、抑菌机理,为后期开发绿色、高效、安全的柠檬醛缓释抑菌剂提供数据支撑。通过设定不同的温度及pH条件,以外观、粒径、Zeta电位和保留率为指标探究储藏稳定性;用孢子计数法测定柠檬醛缓释制剂的瞬时抑菌率,并分析抑菌长效性;根据细胞通透性变化揭示柠檬醛缓释制剂的抑菌机理。结果表明,两种柠檬醛缓释制剂均具有纳米级粒径且粒径均一,经壳聚糖修饰后,体系Zeta电位由?16.63±1.67变为35.72±3.29。4 ℃条件下储藏28 d后粒径和Zeta电位变化较小,保留率更高,且CL-CS比CL更稳定;pH为4~6时,两种柠檬醛缓释制剂更稳定,CL和CL-CS的粒径别在150和200 nm左右。CL、CL-CS在48 h内对黄曲霉菌的瞬时抑菌EC₅₀分别为77.88和68.20 mg·L?1,继续培养48 h后CL和CL-CS的抑制率分别为67.69%和82.89%,而柠檬醛只有30.26%,表明CL-CS具有良好的瞬时抑菌效果和长效抑菌效果。这两种柠檬醛缓释制剂处理后黄曲霉菌的胞外电导率和核酸含量均升高,说明细胞膜通透性增加,且所需要的作用时间比游离柠檬醛更短。综上,两种柠檬醛缓释制剂具有良好的稳定性,能通过改变细胞通透性、使内溶物渗出,从而抑制黄曲霉菌的生长,且具有长效抑菌能力,CL-CS比CL性能更好,具有开发成植物源防霉剂的潜能。     

黄曲霉菌株的筛选和产毒能力鉴定

本研究从发霉粮食中分离出数株黄曲霉菌菌株,并进行了形态学和分子生物学鉴定。为了探究分离菌株与黄曲霉标准菌株之间产毒能力的差异,通过对分离菌株和黄曲霉标准菌株进行发酵培养和HPLC测定,分析确定产毒能力。结果表明黄曲霉菌株之间产毒能力差异巨大：黄曲霉菌株3.4408产毒量很高,黄曲霉菌株HDWH产毒量很低,黄曲霉菌株3.2572甚至不产生黄曲霉毒素;产生黄曲霉毒素菌株中部分黄曲霉菌株产生四种黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2,黄曲霉菌株HDWS只产生黄曲霉毒素AFB1、AFB2。     

非脱羧勒克菌wt16对黄曲霉菌生长与产毒的抑制作用

黄曲霉菌及其毒素严重威胁农产品质量安全,本文旨在探寻非脱羧勒克菌对黄曲霉菌及其毒素污染防控效果。从湖北黄陂分离筛选出一株非脱梭勒克菌wt16,将其与黄曲霉菌在液体培养基中共培养后测定非脱羧勒克菌wt16菌株对黄曲霉菌生长及产毒的抑制率。结果表明,在沙氏液体培养基中,非脱羧勒克菌wt16能明显抑制黄曲霉菌的生长及产毒,对其菌丝生长的抑制率为77%~92%,对其产毒的抑制率为90%~96%。通过扫描电子显微镜观察发现,非脱羧勒克菌wt16能改变黄曲霉菌丝的形态,使得黄曲霉菌丝体由规则的球体聚集成不规则形状,单个菌丝会由细长型断裂成小截形态,菌丝表面也变得更为光滑;并且发现wt16在花生粉及未受机械损伤的花生颗粒上对黄曲霉菌的生长及产毒均表现出很强的抑制作用。进一步研究发现,非脱羧勒克菌wt16菌株发酵上清液中含有能抑制黄曲霉毒素合成的有效成分,且该发酵上清液的制备以培养4 d以上为最佳,培养温度为15~40 ℃。     

植物提取物抑制玉米中黄曲霉生长及产毒研究

通过液体培养 直接接触法比较植物提取物肉桂醛、柠檬醛和丁香酚对黄曲霉生长及产毒的抑制作用,选取抑制作用最强的肉桂醛应用到玉米中,研究了添加量、玉米水分含量和储藏温度对肉桂醛抑制黄曲霉生长及产毒的影响。结果表明：液体培养基中,肉桂醛、柠檬醛和丁香酚的最低杀菌浓度与各自完全抑制产毒浓度一致,分别为 100、500和500 μl/L。随着添加量的加大,肉桂醛对黄曲霉生长和产毒的抑制率逐渐升高,挥发浓度为96 μl/L时完全抑制黄曲霉生长,对黄曲霉毒素B1的抑制率为97.98％。在玉米水分为14%~40％时,肉桂醛对玉米黄曲霉污染的抑制率随水分含量的升高显著下降,14％时抑制率最高,为88.24%;对黄曲霉毒素B1始终保持较强的抑制作用,14％时产毒抑制率最高,为97.51％。储藏温度在20~37℃时,肉桂醛对黄曲霉污染的抑制率随温度的升高呈现先升高后降低的趋势,28℃黄曲霉污染抑制率最高,为85.67%;对黄曲霉毒素B1抑制率随温度的升高呈现先降低后升高又降低的趋势,20℃时抑制率最高,达到91.00%。     

黄曲霉菌株的分离、鉴定及产毒能力分析

对几株从发霉粮食中分离出的黄曲霉菌菌株进行形态学和分子生物学鉴定,并进行发酵培养和产毒能力的HPLC测定。结果表明:试验分离菌株均为黄曲霉菌株且含有黄曲霉毒素产生的关键基因aflR;黄曲霉菌株之间产毒能力差异巨大:黄曲霉菌株3.4408产毒量最高,黄曲霉菌株HDWS产毒量最低,黄曲霉菌株3.2572甚至不产生黄曲霉毒素;产生黄曲霉毒素菌株中部分黄曲霉菌株产生4种黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2,黄曲霉菌株HDWH只产生黄曲霉毒素AFB1、AFB2。     

黄曲霉菌在蜜饯、水果罐头上生长及其产毒能力的试验

<正>黄曲霉菌能在花生玉米和其他许多农产品上产生黄曲霉毒素(AFT),引起人和动物的急慢性中毒,并具有明显的致癌力,国内外有关报导甚多,已为人们所熟知。一般食品在制备、储藏、运输和销售过程中,不可避免地受环境中的菌丛,甚至产毒菌株所污染。由于霉菌的生活力强,对高     

柠檬醛抗真菌及抑制黄曲霉产毒的试验报告

采用平板法比较了柠檬醛与合成食用防腐剂苯甲酸钠、山梨酸钾对5种霉菌和5种酵母菌的抗菌效力。结果表明,在培养基pH4.5时,柠檬醛对多数试验真菌的最低抑菌浓度(MIC)为0.10%～0.15%,与山梨酸钾的抗菌效力相近,优于苯甲酸钠。在添加0.15%柠檬醛的麦芽汁摇床试验中发现,鲁氏酵母生长曲线的调整期比对照组延长,对数生长期和稳定期缩短,细胞总数减少了55%。同时,柠檬醛与黄曲霉产毒关系的试验显示,柠檬醛对黄曲霉产生黄曲霉毒素具有较强的抑制作用,可以减少81%以上的毒素产生。     

山苍子精油抑制黄曲霉菌的生长和产毒作用研究

山苍子精油是一种纯天然植物精油,本文研究了其对黄曲霉生长、代谢和毒素产生的抑制作用,探讨了山苍子精油对黄曲霉菌的抑菌能力和作用机理。本研究将花生放置于自然环境染菌并分离纯化目标菌,采用形态学并结合ITS序列法进行菌株分类鉴定;结合抑菌圈、抑菌率和最低抑菌浓度(MIC)的测定探讨山苍子精油对黄曲霉菌的抑制能力;进行了山苍子精油影响黄曲霉孢子萌发率、生长曲线和黄曲霉毒素B1产生的实验研究;从细胞膜渗透性、细胞酶活性的变化探讨了山苍子精油抑制黄曲霉的作用机理。实验结果表明:从腐败花生中分离筛选出菌株HB₂,经ITS序列法鉴定为黄曲霉(Aspergillus flavus);黄曲霉素测定结果显示其含有黄曲霉素B1(AFB1),质量浓度为3.4×10³μg·kg^-1(纯湿菌体);抑菌圈随精油浓度的增大明显变大,对黄曲霉的最低抑菌体积分数(MIC)为0.800μL·mL^-1;孢子萌发率、牙管长度、黄曲霉菌体的生长量和AFB1的浓度随培养液中精油浓度的增大呈显著下降趋势,当山苍子精油浓度为0.100μL·mL     

植酸对黄曲霉菌(Aspergillus flavus)糖化力的影响

该文通过添加不同浓度的植酸于黄曲霉菌(Aspergillus flavus)培养基中，用不同添加方式，于不同生长时刻测定黄曲霉菌糖化力，研究植酸对黄曲霉菌糖化力的影响。结果表明加入植酸后黄曲霉菌糖化力均有很大提高，可为工业生产带来可观的经济效益。植酸最佳作用浓度范围是0．20％～0．25％，发酵24h糖化力最大可提高44．32％。     

肉桂醛、柠檬醛抗黄曲霉作用的研究

目的:研究肉桂醛、柠檬醛的抗黄曲霉作用。方法:在含不同浓度药物的蔡氏培养液中接种一定量的黄曲霉孢子,每隔 4h分别取定量培养液涂布于蔡氏培养皿上进行霉菌计数,直到48h。 26.5℃培养 72h后计数萌发的霉菌孢子;用扫描电镜观察药物作用后黄曲霉的形态、表面结构的变化。结果:与对照组比较,肉桂醛、柠檬醛的浓度分别在≥0.05μg/ml、0.28μg/ml作用4h后,萌发的黄曲霉孢子数明显减少;肉桂醛、柠檬醛作用后黄曲霉孢子菌丝的形态、表面结构明显改变。结论:肉桂醛、柠檬醛对黄曲霉孢子萌发有显著的抑制作用,柠檬醛抑制黄曲霉孢子的萌发更迅速,两者可能通过破坏真菌细胞结构起抗菌作用。     

In vitro effect of some fungicides on growth and aflatoxins production by Aspergillus flavus isolated from Capsicum powder

The aim of this study was to determine the effect of some pre-harvest fungicides on growth and aflatoxin (AF) production of three Aspergillus flavus strains found in Capsicum powder. Each isolate, previously isolated from paprika, chilli and smoked paprika, was inoculated on yeast extract sucrose agar and on a 3% paprika extract agar medium supplemented with different fungicides and incubated at 20 and 30°C during 7 days. Growth measurements were obtained on days 3, 5 and 7, and the AF production was determined on day 7. The significance of the effects of the factors (strain, medium, temperature, time and fungicides) and their interaction over colony diameter and AF production was determined. Temperature constrained the effectiveness of fungicides in reducing growth, the fungicides being most effective at 20°C. The efficacy of the fungicides over AF production depended on the medium used and temperature. The most effective fungicides in inhibiting growth and AF production, regardless of the strain tested or applied conditions, were tebuconazole 25% and mancozeb 80% applied at a concentration of 0.75 and 3.5?g?l^?1, respectively. Care should thus be taken in the choice of a suitable fungicide because their effectiveness may depend on intra-specific variation and temperature. Moreover, it is necessary to take into account that the most efficient fungicide in reducing growth is not always the best choice for pre-harvest treatments because it may promote AF production. Thus, the best fungicide is the one that can simultaneous prevent growth and AF production.     

Inhibitory effect of Aspergillus niger on the growth of Aspergillus ochraceus and Aspergillus flavus,and on aflatoxin formation

Aspergillus ochraceus and A flavus were grown on synthetic media (SM) supplemented with 50 or 200 ml litre^?1 SM on which A niger had been grown previously ( ‘A niger medium’ = ANM). Controls included SM acidified to pH 6.0 or 4.4, SM diluted with 50 or 200 ml litre^?1 water, and diluted-acidified SM. For both fungi, higher growth inhibition was recorded on ANM-containing SM than in the controls. Aflatoxin formation was markedly inhibited on SM to which 20 ml litre^?1 ANM extract (in methanol/chloroform, 2:1 v) had been added, although the growth of A flavus on that medium was almost the same as that in the control. It is concluded that the inhibitory effect of A niger on the growth of fungi should not be attributed merely to pH reduction, but also, mainly, to metabolites produced by the fungus in the growth medium, even at early stages of its growth.     

吲哚对黄曲霉生长及产毒的抑制作用

本文研究了吲哚对黄曲霉的生长以及产毒的抑制作用。通过96孔板微量法发现吲哚能够抑制黄曲霉的生长,其最小抑制浓度(MIC)为100μg/m L;进而采用差量法测定了吲哚对黄曲霉菌丝生长量的抑制作用,结果表明200μg/m L的吲哚处理可以完全抑制黄曲霉的菌丝生长。此外,通过高效液相色谱分析发现吲哚浓度达到50μg/m L时,尽管对菌丝生长量没有明显影响,但是可以有效地抑制黄曲霉毒素B1的产生。这些结果说明吲哚抑制毒素产生并不是通过抑制生长来实现的。为了进一步了解吲哚对毒素产生的抑制机制,本研究通过RT-PCR分析了吲哚对黄曲霉产毒相关基因表达的影响。结果显示吲哚对产毒调控基因afl R的影响与其对毒素的作用趋势相同,同时吲哚还能够下调其他一些产毒相关基因afl K和alf D的表达。我们的研究结果表明吲哚具有很高的开发价值应用于粮食和饲料中黄曲霉毒素污染的控制。     

植酸对黄曲霉菌糖化酶活力的影响

通过添加不同浓度的植酸于黄曲霉菌（Aspergillus flavus)02-6-58培养基中，于不同生长时间、不同添加方式测定黄曲霉菌糖化酶活力，研究植酸对黄曲霉菌糖化酶活力的影响。结果表明：(1)加入植酸后其糖化酶活力均有很大提高。其最佳作用浓度范围是0．20％-0．25％，最大可提高44．32％；(2)在黄曲霉菌生长麸曲中添加植酸比在连续培养3代的斜面培养基中加入植酸糖化酶活力提高幅度更大；(3)比较黄曲霉菌生长曲线及产酶曲线，加入植酸后，其对数生长期提前3～4h，平衡期延长，从而提前进入产酶高峰期。     

薄荷精油对黄曲霉生长的抑制作用研究

目的 研究薄荷精油对黄曲霉生长及其毒素B1合成的抑制作用。方法 在培养基中加入不同体积浓度的薄荷精油,以不加薄荷精油作为对照,通过测定其对产毒黄曲霉的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)、孢子萌发、菌丝干重、菌落直径、微观结构及黄曲霉毒素B1合成量的影响,探究薄荷精油对黄曲霉的抑制效果。结果 薄荷精油对产毒黄曲霉的MIC为1.6μL/mL; 2.0 MIC薄荷精油处理对黄曲霉孢子萌发抑制率、黄曲霉菌丝干重抑制率及黄曲霉毒素B1合成抑制率均达到99%以上,且扫描电镜结果表明,薄荷精油会影响黄曲霉菌丝形态;同时,通过熏蒸处理,薄荷精油能够有效抑制花生中的霉菌增长,防止霉菌侵染花生。结论 薄荷精油对黄曲霉具有良好的抑制作用,在粮食储藏、食品防霉等方面具有进一步开发成安全防腐抑菌剂的潜力。     

含水量对玉米粉贮藏期黄曲霉生长及黄曲霉毒素B1积累的影响

目的 研究含水量对玉米粉贮藏过程中黄曲霉生长及黄曲霉毒素B1积累的影响。方法 将初始水分含量10.42%、13.26%、16.35%、19.88%的玉米粉在28 ℃, 相对湿度75%的模拟环境中储藏30 d; 测定贮藏期间玉米粉含水量、黄曲霉生长量及黄曲霉毒素B1的积累量。结果 贮藏期间玉米粉中含水量呈现先上升后下降的变化趋势, 黄曲霉生长量及黄曲霉毒素B1的积累量随贮藏时间的延迟先快速升高, 后趋于平稳。初始含水量较高的玉米粉贮藏期间含水量、黄曲霉生长量及黄曲霉毒素B1含量始终处于较高的水平。相关性分析表明, 玉米粉含水量、黄曲霉生长量和毒素积累量之间均呈极显著的正相关(P<0.01)。结论 含水量是影响玉米粉贮藏过程中霉菌生长和毒素积累的关键因素, 降低玉米粉初始含水量可以有效减轻贮藏期间真菌危害。     

Effects of microwaves on the reduction of Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus on brown rice (Oryza sativa L.) and barley (Hordeum vulgare L.)

ABSTRACT

Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus are primary pathogen moulds on brown rice and barley. This study investigated the effects of microwave irradiation (MWI) (2450 MHz, 700 W, 10–50 s) on inactivation of A. flavus and A. parasiticus on brown rice and barley and the quality of these samples. The counts of both strains were significantly (p < 0.05) reduced by the stepwise increase in MWI treatment time. The log reductions of A. flavus on brown rice and barley were 0.05 and 0.04 after 10 s; 1.06 and 1.05 after 20 s; 1.59 and 1.52 after 30 s; and 3.04 and 2.78 after 40 s. The log reductions of A. parasiticus on brown rice and barley were 0.06 and 0.10 after 10 s; 1.20 and 1.00 after 20 s; 2.04 and 1.61 after 30 s; and 2.89 and 2.90 after 40 s. Moreover, neither strain survived after 50 s of MWI. The Hunter colour ‘L’ gradually increased with increasing MWI treatment time. However, there were no significant differences in the ‘L’ of brown rice after 10–40 s of MWI treatment and of barley after 10–30 s of MWI treatment. The Hunter colour ‘a’ and ‘b’ gradually increased with increasing microwave time. No significant change was observed in the moisture content of either cereal treated with 10–20 s of MWI. The differences in the sensory quality (colour, appearance, flavour, texture and overall acceptability) after 0–30 s of MWI were not significant. However, values for colour, appearance, texture and overall acceptability were significantly reduced when treated with 40–50 s of MWI. Therefore, with 20 s of MWI at 2450 MHz, 700 W could be effective for > 90% reduction of mould without causing deleterious changes to the colour, moisture content and sensory qualities of these cereals.