妊娠期糖尿病中患者miR-138-5p通过调控缺氧诱导因子1α保护β细胞功能

目的:探讨在妊娠期糖尿病(GDM)患者中miR-138-5p对胰岛β细胞功能的影响及其相关作用机制。方法:通过RT-qPCR对比15例GDM患者与15例的正常健康孕妇外周血中miR-138-5p的表达差异;miR-138-5p mimic及inhibitor分别转染入β细胞系INS-1细胞中,过表达或抑制其在该细胞中的表达水平,并通过RT-qPCR验证转染效率;利用MTT增殖实验、Annexin V-FITC凋亡实验及胰岛素释放实验分别检测miR-138-5p对INS-1细胞的增殖、凋亡和胰岛素释放能力的影响;通过miRNA靶基因预测软件TargetScan筛选miR-138-5p的目标靶基因,并利用双荧光素酶基因报告及Western blot实验进行验证;功能挽救实验证实miR-138-5p是否通过靶向调控其目标基因而发挥对INS-1细胞的增殖、凋亡及胰岛素释放能力影响;Western blot实验检测miR-138-5p在INS-1细胞中作用的分子信号通路。结果:与正常健康孕妇相比,GDM患者外周血中miR-138-5p的表达显著低表达;在INS-1细胞中转染miR-138-5p mimic及inhibitor后可显著促进或抑制miR-138-5p的表达;过表达miR-138-5p可明显促进INS-1细胞的增殖,抑制其发生凋亡并促进细胞对胰岛素的释放能力;而下调miR-138-5p的表达,可显著抑制INS-1细胞的增殖,促进其发生凋亡及抑制细胞的胰岛素释放能力;通过miRNA靶基因预测软件TargetScan筛选缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)为miR-138-5p的目标靶基因,双荧光素酶基因报告实验及Western blot实验提示miR-138-5p可抑制INS-1细胞中HIF-1α的表达;功能挽救实验证实miR-138-5p通过调控HIF-1α的表达,影响INS-1细胞的增殖、凋亡及胰岛素释放能力;Western blot实验明确miR-138-5p可能通过靶向调控HIF-1α的表达,影响PI3K/AKT信号通路中PI3K、AKT及其磷酸化后的p-PI3K、p-AKT蛋白而发挥对INS-1细胞的作用。结论:在GDM患者中,miR-138-5p可能通过靶向调控HIF-1α的表达,进而影响PI3K/AKT信号通路,促进β细胞的增殖、抑制其凋亡,并促进其胰岛素释放能力从而保护β细胞的功能。     

卵泡刺激素受体基因多态性对女性卵巢功能影响的研究进展

卵泡刺激素(FSH)是人类重要的生殖激素,被广泛应用于体外受精超促排卵。然而,在临床上发现使用FSH进行卵巢刺激的不孕症患者其卵巢反应不一。FSH通过与卵泡刺激素受体(FSHR)结合介导其生理功能,目前在卵泡刺激素受体基因中发现超过900个SNP位点,其中一些SNP位点可能与FSH刺激引起的卵巢反应差异相关,在辅助生殖超促排卵过程中应该考虑这些SNPs对于卵巢功能的影响。通过预测疾病的遗传因素,为即将进行卵巢刺激的患者测定其基因多态性,以此制定个体化的卵巢刺激方案,达到优化不孕症治疗的临床目的。本文从遗传药理学角度,综述卵泡刺激素受体基因多态性对女性生殖功能的影响,探讨其临床意义。     

乳腺癌组织中CD73表达及其与临床病理特征的相关性研究

目的: 探讨乳腺癌组织中CD73表达及其与临床病理特征的相关性。方法: 对2015年4月至2016年10月期间100例乳腺癌的肿瘤组织及60例正常乳腺组织石蜡标本进行切片,采用免疫组化法对切片进行CD73染色检测;同时采用免疫组化法检测乳腺组织雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、癌基因人表皮生长因子受体（HER-2）、P53和Ki-67表达情况。分析CD73表达情况及与组织Ki-67、P53、ER、PR、HER-2表达相关性,与临床病理特征的相关性。结果: 乳腺癌组织中CD73高表达发生率为76.0%,正常乳腺组织中CD73高表达率为21.7%,差异有统计学意义（P<0.05）;CD73高表达与年龄、组织学分级、肿瘤大小、肿瘤位置等临床病理特征无显著相关（P>0.05）,CD73高表达与TNM分期、淋巴结转移、PR、ER、HER-2、Ki-67、P53阳性表达密切相关（P<0.05）;Ki-67、P53、PR、HER 2阳性表达是CD73高表达的影响因素（OR分别为：8.233,5.091,4.670,3.000）,ER阳性表达是CD73高表达的保护因素（OR为：0.291）。结论: 乳腺癌组织中CD73高表达,且与TNM分期、淋巴结转移、PR、HER-2、Ki-67、P53阳性表达相关,对临床治疗及预后判断具有重要意义。     

锰与男性生殖功能

<正> 锰对男性生殖功能的影响主要表现于性功能与性器官两方面: 锰对男性性功能的影响: 锰对性功能的影响主要表现为对男性职业接触者性行为的改变。由于性功能与性生活水平受诸多因素的影响,尤其是社会心理因素,长期吸入较高浓度锰尘或锰烟所致慢性中毒患者出现的性欲减退、早泄     

环境污染导致人类生殖能力下降

<正> 一项大规模的科研调查即将在全国近10个城市与农村地区展开,以探明环境与人类生殖健康状况之间的关联,上海计划生育研究所专家表示:这一研究涉及我国人口生存和繁衍的未来。如果证实我国成年男性精子的数量及质量均呈逐年下降趋势,人们应对生活着的环境进行更深入的反思。     

HPV-DNA整合状态与宫颈癌发生发展及抑癌基因p53、pRb表达的相关性

目的:分析人乳头瘤病毒（HPV）-DNA整合状态与宫颈癌发生发展及抑癌基因p53、pRb表达的关系,为其临床诊治提供新思路。方法: 取本院收治、手术治疗的宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）和宫颈癌患者131例,根据病变程度分为CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌4组,取同期收治的良性瘤患者33例为对照,术中留取病理组织,采用全基因组测序和高通量病毒整合实验观察HPV-DNA整合状态。进一步根据整合状态分为多重整合、单重整合和无整合3组,采用免疫组织化学实验观察抑癌基因p53、pRb的表达水平。结果: 各组HPV-DNA整合率不同,自健康组织、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、宫颈癌的顺序依次升高,且宫颈癌以多重整合为主,健康组织和CIN以单一整合为主,组间差异有统计学意义（P<0.05）。本次考察发现HPV16、HPV58、HPV18、HPV35、HPV31、HPV33、HPV52、HPV51 8种高危HPV整合类型,在各组中的分布趋势大体一致。不同整合状态的p53、pRb阳性率和表达水平明显不同,无整合组高于单重整合组,单重整合组高于多重整合组,其组间差异均有统计学意义（P<0.05）。结论:HPV-DNA整合能抑制p53与pRb的局部表达,促进宫颈癌发展,对宫颈癌鉴别和预后评估有一定的指导作用。     

木瓜三萜抗吲哚美辛诱导RGM-1细胞凋亡的作用

目的:观察木瓜三萜对吲哚美辛诱导RGM-1细胞凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法: 用吲哚美辛诱导RGM-1细胞建立细胞损伤模型,MTT法检测不同浓度木瓜三萜对RGM-1细胞增殖、流式细胞术和Hoechst33258染色分析木瓜三萜对吲哚美辛诱导细胞凋亡的影响,JC-1染色法测定细胞线粒体跨膜电位水平,Caspase试剂盒检测RGM-1细胞中Caspase-9和Caspase-3的活性,Real-time PCR检测RGM-1细胞中TFF1、p53、Bcl-2及Bax mRNA表达,Western blot检测RGM-1细胞中TFF1和p53蛋白表达。结果: 当木瓜三萜浓度低于100 μg/mL时,木瓜三萜对RGM-1细胞的生长无明显的影响;当木瓜三萜浓度低于50 μg/mL时,木瓜三萜与吲哚美辛联用对RGM-1细胞的生长有促进作用;木瓜三萜可显著增加吲哚美辛诱导RGM-1细胞损伤的活性(P<0.05,P<0.01),升高线粒体膜电位,抑制细胞凋亡和改善细胞形态,上调TFF1蛋白表达及TFF1、Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2与Bax的比值,下调p53蛋白表达及p53和Bax mRNA表达,降低Caspase-9及Caspase-3活性(P<0.05,P<0.01)。结论:木瓜三萜可有效抑制吲哚美辛诱导RGM-1细胞凋亡,其作用机制可能与上调TFF1、Bcl-2,下调p53、Bax、Caspase-3、Caspase-9表达有关。     

前列腺癌细胞内TMPRSS2-ERG融合基因产物转录调控机制研究进展

前列腺癌在欧美国家男性中是最常见的恶性肿瘤,但前列腺癌的发生发展机制还未完全明确。在前列腺癌中,TMPRSS2-ERG融合基因具有较高的发生率,其促进ERG过表达,引起相应的靶基因和信号通路改变,如雄激素受体、斑点型锌指结构蛋白、Notch通路等。深入了解前列腺癌细胞中TMPRSS2-ERG融合基因产物转录调控机制,可以为前列腺癌的治疗提供新的药物作用靶点。     

miRNA在肠缺血再灌注损伤中作用及机制的研究进展

microRNA（miRNA）是一类广泛存在于动植物的由19～25个核苷酸组成的具有高度保守性的单链非编码RNA，其生物学效应是通过与mRNA互补配对在转录后水平负调控靶基因的表达。肠缺血再灌注（I/R）损伤在临床实践中较为常见，缺血再灌注后会导致肠黏膜屏障损伤，且与临床上众多疾病的发生、发展与转归都有一定的联系。目前有众多研究显示，miRNA的亚型基因miR-34a-5p、miR-351-5p、miR-682、miR-21等在一定程度上通过调控一系列信号转导进而影响肠I/R损伤的发生、发展。因此，揭示miRNA在肠I/R损伤中作用机制，并可为肠I/R损伤的临床诊断及治疗提供新的方向。     

Hydralazine逆转胃癌细胞株p16基因甲基化及增强其表达的研究

目的: 通过使用甲基转移酶抑制剂肼屈嗪(Hydralazine)作用于胃癌细胞株BGC-823,观察Hydralazine对MTS1/p16基因启动子区CpG岛甲基化、p16 mRNA、p16蛋白表达及细胞增殖的影响;分析p16基因启动子区CpG岛甲基化与p16基因表达两者间的关系,以此考察胃癌细胞株BGC-823 p16基因的失活机制是否与启动子区CpG岛甲基化有关。方法: 对体外培养的胃癌细胞株BGC-823进行分组实验,实验组加入水溶性的Hydralazine,浓度0、10、30、100 μmol/L,对照组不加Hydralazine,96 h 后对两组分别行甲基化特异性PCR法(MSP)、RT-PCR及Western blot检测,以观察p16基因甲基化状态、mRNA、蛋白表达的变化;应用6种不同浓度的水溶性Hydralazine(0、3、10、30、100、300 μmol/L)处理胃癌细胞BGC-823,72 h 后行MTT检测,以观察对细胞增殖的影响。结果: P16基因在胃癌细胞株BGC-823中,启动子区CpG岛呈高甲基化状态,mRNA及蛋白呈低水平表达。Hydralazine阻断甲基转移酶作用后,p16基因启动子区CpG岛呈去甲基化状态,Hydralazine浓度越高,CpG岛去甲基化越明显。Hydralazine阻断甲基转移酶作用后,用药后p16 mRNA表达较前明显增强(P<0.05)。Hydralazine阻断甲基转移酶作用后,用药后p16蛋白表达较前明显增强(P<0.01)。MTT检测到不同浓度的Hydralazine(0、3、10、30、100、300 μmol/L)对细胞增殖的抑制率差异有统计学意义(P<0.05),其量效关系反映出抑癌基因p16去甲基化程度越高,对胃癌细胞株BGC-823的增殖抑制越显著。结论: P16基因动子区CpG岛甲基化是p16基因失活的重要机制。     

环状RNA的功能及在结直肠癌中的研究进展

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是人体常见的消化系统恶性肿瘤,其发病率和死亡率处于各类疾病的第三位。结直肠癌的发病受年龄、生活方式、肥胖、吸烟等的影响,近年的研究表明非编码RNA包括环状RNA的表达异常也参与结直肠癌的发生发展。环状RNA是一种新型的内源性非编码长链RNA,不同于常见的线性非编码RNA,其自身构成3' 端与5'端共价结合的封闭环状结构。环状RNA能作为RNA的海绵体以及调节剪切和转录。环状RNA也能调节蛋白与蛋白之间的作用以及影响核糖体成熟。越来越多的证据表明环状RNA通过对肿瘤细胞生长、转移、侵袭的调控直接参与结直肠癌的疾病进程。本文对环状RNA的功能及其在结直肠癌中的最新研究作一综述。     

Full structure building and docking of NifS from extremophile Acidithiobacillus ferrooxidans

The gene iscS-2 from extremophile Acidithiobacillus ferrooxidans may play a crucial role in nitrogenase maturation. To investigate the protein encoded by this gene, a reliable integral three-dimensional molecular structure was built. The obtained structure was further used to search binding sites, carry out the flexible docking with cofactor pyridoxal 5＇-phosphate（PLP） and substrate cysteine, and identify its key residues. The docking results of PLP reveal that the residues of Lys203, His100, Thr73, Ser200, His202, Asp177 and GlnlS0 have large interaction energies and/or hydrogen bonds fixation with PLP. The docking results of cysteine show that the amino group in cysteine is very near His100, Lys203 and PLP, and the interaction energies for cysteine with them are very big. These identified residues are in line with the experimental facts of NifS from other sources. Moreover, the four residues of Asn152, Val179, Ala102 and Met148 in the PLP docking and the two residues of Lys208 and Alal02 in the cysteine docking also have large interaction energies, which are fitly conserved in NifS from all kinds of sources but have not been identified before, According to these results, this gene encodes NifS protein, and the substrate cysteine can be effectively recruited into the active site. Furthermore, all of the above detected key residues are directly responsible for the binding and/or catalysis of PLP and cysteine.     

miR-1-3p/206/613对LXRα和OATP1B1蛋白表达的影响及其机制研究

目的: 探究miR-1-3p、miR-206和miR-613对肝X受体α (LXRα)和有机阴离子转运多肽1B1（OATP1B1）蛋白表达及OATP1B1转运能力的影响及其机制研究。方法:通过生物信息学数据库预测可靶向作用于LXRα和OATP1B1 mRNA 3'-UTR的miRNAs;采用RT-qPCR、Western blot方法检测miR-1-3p/206/613及LXRα和OATP1B1 蛋白水平;采用LC-MS/MS方法检测HepG2细胞中瑞舒伐他汀（RSV）的含量;应用双荧光素酶报告基因法,研究miR-1-3p/206/613影响LXRα和OATP1B1表达的分子机制。结果: 预测结果表明miR-1-3p/206/613与LXRα和OATP1B1 mRNA 3'-UTR互补配对,且具有较高的特异性、保守性及结合稳定性。与对照组相比,miR-1-3p/206/613 mimics能明显下调HepG2细胞中LXRα蛋白表达水平16.5%、16.0%、25.1%,OATP1B1蛋白30.4%、30.5%、44.4%;相反,miR-1-3p/206/613 inhibitors明显上调LXRα蛋白表达水平13.3%、13.3%、16.0%,OATP1B1蛋白25.0%、25.6%、30.4%。当RSV浓度为5、60、125 μmol/L时,miR-1-3p/206/613 mimics显著减少HepG2细胞对RSV的摄取至对照组的0.50、0.19、0.30倍,0.49、0.24、0.23倍和0.64、0.48、0.31倍;与之相反,miR-1-3p/206/613 inhibitors上调1.26、1.59、2.07倍,1.97、2.44、2.63倍,2.22、2.86、2.93倍。与对照组相比,miR-1-3p/206/613 mimics或miR-1-3p/206/613 inhibitors,pGL/LXRα-WT报告基因荧光素酶活性分别下降38.5%、32.5%、32.8%或升高137.0%、75.8%、55.7%,而pGL/LXRα-Mut报告基因荧光素酶活性未见明显改变;同上,pGL/OATP1B1-WT报告基因荧光素酶活性下降24.3%、28.9%、32.1%或升高33.5%、48.3%、61.6%,而pGL/OATP1B1-Mut报告基因荧光素酶活性也未见明显改变。结论: miR-1-3p/206/613既可通过直接靶向作用于OATP1B1 mRNA 3'-UTR而调控OATP1B1的蛋白表达和转运功能,也可通过靶向作用于LXRα mRNA 3'-UTR而发挥间接调控作用。     

稀土镧掺杂LiFePO4正极材料的物理与电化学性能研究

利用固相法合成了镧离子掺杂的Li1-xLaxFePO4正极材料，采用XRD，SEM和充放电性能表征了材料的晶体结构、微观形貌和电化学性能。研究表明，少量La^3＋的掺杂未影响到LiFePO4的晶体结构，但显著改变了粉体的微观形貌，降低颗粒粒度至纳米级，改善了可逆容量和循环性能。得到的最佳配比正极材料Li0.99La0.01FePO4，在C／20的充放电速率下，其初始可逆放电容量达到理论容量的73％——123mAh/g，20次充放电循环后表现出良好的容量可循环性，容量没有衰减。引入稀土离子是提高磷酸铁锂新型锂离子正极材料电化学性能的有效方法。     

羟基脲对大鼠Sertoli-germ 细胞共培养的影响

目的:观察羟基脲(Hydroxyurea, HU) 对雄性大鼠Sertoli-germ 细胞共培养的细胞毒性作用。方法:在Sertoli-germ 细胞共培养模型中分别加入不同浓度HU(0、 10^-3、 10^-2、 10^-1 mol/L) 后, 孵育96 h; 以及加入10^-2 mol/L HU 后分别孵育24、 48、 72、 96 h 。结果:在各给药组, 96 h 时HU 导致germ细胞从Sertoli 细胞层的脱落增加, 呈现量效关系。在10^-3 mol/L 以上浓度组, 细胞活性逐渐下降, 细胞脱落增加。同样, 随着给药时间的增加, germ细胞脱落率和乳酸脱氢酶(LDH) 的漏出逐渐增加, 细胞活性逐渐下降。结论:HU 对雄性大鼠睾丸Sertoli-germ 细胞共培养模型的germ 细胞具有明显毒性作用。     

黄体酮防治大鼠缺血再灌注脑损伤中细胞凋亡及p53蛋白的变化

目的: 探讨黄体酮对缺血再灌注损伤脑的保护机制。方法: 采用SD 大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(transient middle cerebral artery occlusion,MCAO),将大鼠随机分为6 组:假手术组、缺血再灌注组、二甲基亚砜溶剂(dimethyl sulfoxide, DMSO) 对照组、黄体酮(progesterone, PROG) 预防组、PROG 治疗组、PROG 预防治疗组, 应用免疫组织化学和细胞死亡原位末端标记(Insitu end labeling, ISEL) 法研究脑组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白p53 的表达情况。结果: 高倍视野下p53 蛋白阳性细胞数, 各药物处理组凋亡细胞数与缺血再灌注组和对照组之间差异有显著的统计学意义(P <0.05)。结论: PROG 可减轻局灶性缺血再灌流脑损伤, 减少大鼠脑缺血再灌注后的脑细胞凋亡。抑制脑神经细胞中p53 蛋白表达可能是其发挥保护作用的分子机制之一。