竹叶黄酮对CCl4所致小鼠肝细胞损伤的保护作用

以研究竹叶黄酮对CCl4所致小鼠肝细胞损伤的保护作用为目的,通过建立CCl4损伤肝细胞模型,观察不同剂量的竹叶黄酮对谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）、肝糖元含量的影响,并观察空白对照组、模型组及各剂量组肝组织石蜡切片的病变情况。结果显示,与空白组相比,模型组ALT、AST、MDA显著升高（p<0.05）,肝糖元含量、GSH-Px和SOD活性明显下降（p<0.05）。与模型组比较,在各剂量竹叶黄酮的影响下,ALT、AST和MDA含量下降（p<0.05）,GSH-Px、SOD活性和肝糖元含量显著升高（p<0.05）,并呈剂量依赖性,肝组织病变程度明显低于模型组。本实验证明竹叶黄酮对CCl4所致小鼠肝细胞损伤有较好的保护作用。      

咖啡酸对CCl4诱导BRL大鼠肝细胞损伤的保护作用

采用体外四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl₄）诱导BRL大鼠肝细胞损伤模型,研究咖啡酸（caffeic acid,CA）对CCl₄诱导BRL大鼠肝细胞损伤的保护作用。实验分为对照组、CCl₄模型组（100 mmol/L CCl₄ 损伤3 h）和CA干预组（含0.2、0.4和0.8 mg/mL CA的DMEM溶液预处理4 h,再行CCl₄暴露3 h）,采用全自动生化分析仪检测天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）活力,试剂盒测定胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）、细胞质中细胞色素C（cytochrome C,Cyt c）和8-羟基脱氧鸟苷（8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG）水平, qRT-PCR检测核因子E2相关因子2（nuclearfactor erythroid-2-related factor 2,Nrf2）、谷胱甘肽还原酶（glutathione reductase,GSR）、醌氧化还原酶1(quinine oxidoreductase,NQO1)和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的表达水平。结果显示,CA对CCl₄所致细胞培养液中AST、ALT和LDH活力以及胞内ROS、细胞质中Cyt c 和8-OHdG水平的异常升高均具有显著的抑制作用（P<0.05）;与对照组相比,模型组细胞中Nrf2、GSR、NQO1和SOD基因的mRNA表达水平无显著差异（P>0.05）,而CA干预组中各检测基因的mRNA表达水平显著升高（P<0.05）,且具有剂量依赖效应。结果表明,CCl₄暴露可使BRL大鼠肝细胞发生氧化应激,而CA可激活Nrf2/ARE信号通路、上调抗氧化基因的mRNA水平,从而有效抑制CCl₄对肝细胞的损伤。     

地参结合酚提取物体外保肝作用

目的:通过体外CCl4损伤肝细胞模型,研究地参结合酚提取物的体外保肝作用。方法:采用MTT法测定细胞存活率,全自动生化分析仪测定ALT、AST和LDH的水平。采用试剂盒测定MDA、SOD、GSH、TNF-α、IL-6、IL-8的水平和Caspase-3活化程度,流式细胞仪检测细胞凋亡。同时,采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测线粒体膜电位的变化,并对各检测指标进行相关性分析。结果:地参结合酚在干预剂量(0.2~1.6 mg/mL)范围无细胞毒性,能抑制CCl4导致的细胞存活率、SOD和GSH的降低以及MDA、ALT、AST、LDH、TNF-α、IL-6、IL-8和Caspase-3活化程度的升高;同时,能显著抑制CCl4引起的细胞凋亡和线粒体膜电位的降低。相关性分析结果显示,ALT、Caspase-3、TNF-α、IL-6和IL-8之间具有显著的正相关,GSH和SOD与ALT、Caspase-3、TNF-α、IL-6、IL-8之间具有显著的负相关。结论:地参结合酚通过抗氧化、抑制炎症反应和细胞凋亡及保护线粒体,发挥对CCl4损伤肝细胞的保护作用。     

黑豆多肽对超负荷训练小鼠肝细胞损伤影响的研究

为探究黑豆多肽对超负荷运动小鼠肝脏细胞的保护机制,实验以黑豆为原料采用酶解法联合超滤萃取法制取了分子量区间分别为<3、3~5、5~10 kDa的黑豆多肽,以上述黑豆多肽饲喂小鼠并建立超负荷运动模型,以探究不同分子量区间黑豆多肽对运动性肝细胞损伤的保护作用。结果显示:经超负荷训练后模型组小鼠肝功能出现异常,表现为肝指数水平上升,血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性下降,而饲喂黑豆多肽的剂量组肝功能得到了不同程度缓解;实验进一步对肝脏组织T-SOD、GSH-Px酶活测定的数据分析得出,黑豆多肽通过提高抗氧化物酶的活性从而降低机体氧化应激水平,达到抗过氧化损伤的功效并表现为MDA含量显著下降;为明晰黑豆多肽对小鼠肝脏细胞的保护机制,对血清中TNF-α含量以及NF-κB相对表达量进行了测定,其中分子量<3 kDa能够显著降低血清TNF-α的分泌以及NF-κB的相对表达量。结论:黑豆多肽能够有效缓解由超负荷运动导致的肝脏功能异常,并提高抗氧化物酶活性,减弱肝脏氧化应激水平,降低TNF-α的释放以及NF-κB的表达,从而防止由过氧化损伤致使细胞膜裂变而引起的肝细胞损伤。     

地参结合酚提取物对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶的抑制作用

目的:探讨地参结合酚提取物对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶活性的抑制作用。方法:采用X-5大孔树脂纯化地参结合酚提取物,并用Folin-酚法测定地参结合酚提取物酚含量;同时,采用HPLC对地参结合酚提取物的组成进行分析;以抑制率为考察指标,测定地参结合酚提取物对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶活性的抑制作用。结果:地参结合酚提取物酚含量为155.55~164.95 μg GAE/mg,主要的酚类化合物单体为咖啡酸(40.67~72.18 μg/mg EDW)和迷迭香酸(22.01~46.22 μg/mg EDW);抑制α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶的IC₅₀值范围分别为2.0275~3.7538和1.4438~3.1030 mg/mL。结论:地参结合酚提取物对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶抑制剂具有显著的抑制作用,可作为α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶抑制剂。     

不同比例LA/ALA对HepG2细胞炎症因子的影响

选取植物油中典型的多不饱和脂肪酸亚油酸(LA)和α-亚麻酸(ALA)为原料,分为7个不同摩尔浓度配比实验组(组1,LA;组2,10∶1 LA/ALA;组3,5∶1 LA/ALA;组4,1∶1 LA/ALA;组5,1∶5 LA/ALA;组6,1∶10 LA/ALA;组7,ALA)体外评估不同比例n-6/n-3 PUFAs对HepG2细胞炎症因子的影响。结果表明:60μmol/L各实验组均可降低HepG2细胞产生的促炎因子TNF-α和IL-6水平,提高抗炎因子IL-10和抗炎介质LXA4水平,其中组4(1∶1 LA/ALA)作用最显著。     

火麻仁油及大麻二酚对抑郁模型小鼠行为及炎症反应的影响

目的:探究火麻仁油及大麻二酚（Cannabidiol,CBD）对慢性不可预测的轻度应激（Chronic unpredictable mild stress,CUMS）模型小鼠行为学及炎症因子的影响。方法:将50只雄性C57BL/6小鼠随机分成5组:空白组、模型组、火麻仁油组（3 mL/kg）、CBD低剂量组（15 mg/kg）、CBD高剂量组（30 mg/kg）,试验周期8周,测定小鼠抑郁、焦虑、学习认知能力及炎症因子（肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1（IL-1β）和诱导NOS（iNos））的mRNA表达及小胶质细胞的离子化的钙结合衔接分子1（IBA-1）的蛋白表达。结果:与空白组相比,模型组在抑郁和焦虑行为及学习和认知功能有显著差异（P<0.05; P <0.01）;与模型组相比,CBD剂量组均显著改善模型小鼠的抑郁焦虑行为并提高了学习认知功能（P<0.05; P<0.01),火麻仁油组显著改善小鼠的蔗糖偏好指数和新物体识别能力（P<0.05）。与空白组相比,模型组小鼠的皮层和海马组织中TNF-α、IL-1β和iNos mRNA表达量显著升高（P<0.05; P<0.01）;与模型组相比,CBD剂量组的皮层和海马TNF-α、IL-1β和iNos mRNA表达量均显著降低（P<0.05; P<0.01）;火麻仁油组皮层、海马TNF-α和iNos无显著性差异（P>0.05)。免疫组化结果显示,火麻仁油和CBD均抑制炎症介质小胶质细胞的离子化的钙结合衔接分子1（IBA-1）的表达。结论:CUMS小鼠建模成功,火麻仁油能够提高小鼠的抑郁行为及认知能力,并且降低IL-1β表达,CBD可改善小鼠的焦虑症状、提升学习和认知功能,抑制脑组织皮层和海马的炎症反应,从而证明火麻仁油和CBD对CUMS模型小鼠具有一定的作用。     

几种多酚化合物对H2O2和CCl4诱导人肝细胞损伤的保护

以α- 生育酚作为对照,研究茶多酚、没食子酸、槲皮素、山奈素、芹菜素五种多酚化合物对H2O2 和CCl4 诱导的人肝细胞损伤的保护作用。结果表明,不同浓度的多酚化合物(5、10、20 mg/L)与肝细胞预先作用1h,再进行诱导损伤,可以提高肝细胞的细胞活率和还原型谷胱甘肽(GSH)含量水平,降低乳酸脱氢酶(LDH)渗出率和丙二醛(MDA)生成量。显示它们对H2O2 和CCl4 诱导的肝细胞损伤有保护作用,保护能力大小顺序为没食子酸>槲皮素>茶多酚>芹菜素>α- 生育酚>山奈素。其保护作用可能与多酚化合物具有较强的清除自由基能力有关。     

三种黄酮醇化合物对H2O2 和CCl4 诱导的人肝细胞体外损伤的保护作用比较

黄酮醇是一类广泛存在于植物界中的多酚物质,并具有许多生理作用,在食品中具有较大的应用潜力。通过一些生化实验方法,研究了3 种黄酮醇(山奈素、槲皮素、杨梅黄酮)对由H2O2 和CCl4 诱导的人肝细胞(HL-7702细胞系)体外氧化损伤的保护作用,并研究了3 种黄酮醇的化学结构与其细胞保护作用之间的关系。结果表明,3种黄酮醇(20、40、60μmol/L)与肝细胞预先作用30min,再进行诱导损伤,可以提高肝细胞的细胞活率和还原型谷胱甘肽(GSH)含量水平,降低乳酸脱氢酶(LDH)渗出率和丙二醛(MDA)生成量。3 种黄酮醇的细胞保护能力大小顺序为槲皮素>杨梅黄酮>山奈素。结果显示,黄酮醇的细胞保护能力大小与其分子结构中B 环上羟基数目的多少无关。     

挤压膨化温度对棉粕游离棉酚及营养成分的影响

本文研究了不同挤压膨化温度(90、100、110、120和130℃)对棉粕中游离棉酚和营养成分的影响。结果表明棉粕挤压膨化脱酚的最佳温度是120℃,超过这一温度后游离棉酚的降解速率不再随温度的升高而增加。随着挤压膨化温度升高棉粕蛋白氮溶解指数(NSI)迅速降低,棉粕中粗纤维、有效赖氨酸和总赖氨酸的含量也随温度升高而显著降低,但当温度达到120℃时,总氨基酸(AA)和必需氨基酸(EAA)的含量达到最大值。此外,120℃时,棉粕中支链氨基酸(BCAAs)的含量也最高。所以,挤压膨化温度在120℃时,既可以显著降低游离棉酚的含量又可较好的保持棉粕的营养价值。