细菌右旋糖酐蔗糖酶研究进展

从右旋糖苷蔗糖酶的分类、酶学性质、分离纯化、基因结构及蛋白质组成等方面综述了右旋糖苷蔗糖酶的研究动态.     

生姜蛋白酶的大分子结合修饰

采用单甲氧基聚乙二醇(mPEG)和右旋糖苷对生姜蛋白酶进行大分子结合修饰。在酶液质量浓度为2.0mg/mL的硼酸缓冲液中,加入三聚氯氰活化的mPEG 或高碘酸钠活化的右旋糖苷,于40℃修饰反应1h,对修饰剂与酶蛋白的质量比和pH 值条件进行优化：mPEG 与酶的质量比为17.5:1.0、pH9.0,mPEG 修饰酶的修饰率为52.6%,相对酶活力(修饰酶活力/ 天然酶活力)为54.0%;右旋糖苷与酶的质量比为42:1、pH6.0,右旋糖苷修饰酶的修饰率为51.6%,其相对酶活力为原天然酶的3.3 倍。两种修饰酶的热稳定性均比天然酶显著增强,且右旋糖苷修饰酶的热稳定性明显高于mPEG 修饰酶。结果表明：右旋糖苷对生姜蛋白酶的修饰效果优于聚乙二醇,适用于酶蛋白的化学修饰与新型酶制剂的开发利用。     

富含右旋糖苷番茄汁发酵饮料研制

肠膜明串珠菌BD1710可在番茄汁蔗糖培养基中代谢合成右旋糖苷,其发酵液可作为主要原料来勾兑制备富含右旋糖苷的发酵饮料,通过正交试验确定了该多糖饮料的配方为:发酵液用量30%(体积分数)、蔗糖添加量6%、柠檬酸添加量0.2%,优选配方制备的发酵饮料中多糖含量可达1.0%以上。     

右旋糖苷修饰玉米SOD研究

为提高玉米SOD的稳定性,利用右旋糖苷对玉米SOD进行修饰.在不同条件下测定玉米SOD的活力,比较修饰前后玉米SOD稳定性.结果表明:修饰后玉米SOD的活性保持率为83%,修饰后玉米SOD的温度稳定性、pH稳定性均有显著提高,半衰期延长,对胃蛋白酶、胰蛋白酶耐受性增强.说明右旋糖苷是一种较好的玉米SOD化学修饰剂.     

产右旋糖苷酸面团对大麦粉添加面包品质的影响研究

研究大麦粉(5%、10%、15%、20%)对直接发酵、酸面团、右旋糖苷酸面团面包品质的影响,评估了酸面团对大麦面包(51%大麦粉)品质的改善效果。大麦粉使直接发酵面包的比容分别减小了8.0%、16.6%、32.1%、35.6%,硬度增大了138.8%、152.9%、168.7%、176.6%,储藏后老化率在高添加量下(15%、20%)明显提高;酸面团促使体积上升、硬度下降,水分损失率和老化率减小;而右旋糖苷的存在使酸面团面包烘焙当天的含水量升高,水分损失率、老化率降低;与未添加大麦粉的直接发酵面包相比,酸面团大麦面包的体积小、硬度大、感官评分较低,但在延缓老化上具有优势,而右旋糖苷提高了其柔软性、感官品质。因此,右旋糖苷酸面团能够有效改良大麦添加面包、大麦面包品质。     

肠膜明串珠菌ATCC 12291蔗糖磷酸化酶的酶学性质及转糖苷分子改造

根据GenBank数据库公布的肠膜明串珠菌ATCC 12291中蔗糖磷酸化酶基因序列,构建重组表达质粒pQE-lmsp。在大肠杆菌Escherichia coli M15/pREP4中诱导表达,镍亲和层析纯化蛋白,进行酶学性质测定和重组酶转糖苷活性的研究。以蔗糖为底物对LMsp进行酶学性质分析,其最适温度和最适pH值分别为40 ℃和6.5;Km值和Vmax值分别为（34.16±1.219）mmol/L和（370.5±6.049）μmol/（mg·min）。当以葡萄糖-1-磷酸为供体时,对于大多数单糖及其糖醇类受体均具有转糖苷活性,尤其对L-阿拉伯糖具有75%的转化效率。然后通过对LMsp进行同源建模和氨基酸序列比对分析,进行分子改造,并比较酶学性质及转糖苷活性的变化。获得7 个单点和联合的突变体T180A、T219V、P236S、T180A-T219V、T180A-P236S、T219V-P236S、T180A-T219V-P236S,其中突变体T180A、P236S对L-山梨糖的转糖苷活性分别有13.7%和15%的提高。本研究通过对LMsp的研究,发现其具有良好的酸碱稳定性和对L-阿拉伯糖的高转糖苷活性,并且获得了对于L-山梨糖转糖苷活性提高的突变体,丰富了有关于蔗糖磷酸化酶的性质,并且对该酶的分子改造提供了经验依据。     

α-糖苷酶抑制剂SH-9766产生菌的筛选和鉴别

为了定向筛选α-糖苷酶抑制剂，建立了抑制α-淀粉酶、蔗糖酶和麦芽糖酶活试验为基础的筛选模型．采用此模型筛选从土壤和植物中分离的放线菌，其中菌株E-3519的发酵液对α-淀粉酶和蔗糖酶有强烈的抑制作用．菌株E-3519无气丝，基丝生长好，偶见孢囊，孢囊孢子游动迟缓；能水解淀粉，硝酸盐还原实验阳性，产生硫化氢，能使牛奶冻化；能利用大多数碳源；对枯草杆菌、大肠杆菌、金色葡萄球菌等无拮抗作用；可产生α-糖苷酶抑制剂阿卡波糖．E-3519主要生化特征及形态学特征与ATCC14539相似，命名为Actinoplanes utahensis var．。     

甜菊糖苷应用研究现状

甜菊糖苷从菊科小灌木甜菊叶中提取出来,被誉为"世界第三糖源"。我国目前是甜菊糖苷最大的生产国和出口国,并且产量还处在不断上升的势头中。甜菊糖苷属于低热值天然甜味剂,其甜度为蔗糖的200倍以上,作为蔗糖替代品被广泛的应用在饮料、高糖类食品、酒类、水产品、乳制品、功能性食品、卷烟、医药卫生、日用产品中,甜菊糖苷本身还具有辅助降血压降血脂、改善酒质、改善食品品质、增加活菌数、抑制人体血糖反应、吸附卷烟香味物质等功能,同时也降低了产品的生产成本。本文综述了甜菊糖苷在食品业及其他工业中的研究和应用现状,并对今后甜菊糖苷的发展方向提出了一些建议,比如在蔗糖的替代比例、消除后苦问题等方面要多做研究。     

采用当地分离出肠粘膜状明串珠菌从蔗糖制备右旋糖苷及其特性

人们很久就知道了细菌多糖,右旋糖苷。它是由五个D—葡萄糖残基重复结合而成的分支聚合物。右旋糖苷的分子量为高,其分子量大小赖于菌种和制备方法。工业上采用右旋糖苷的分子量可达到40,000,000,但可以用酸或酶降解成低分子量片断。已知它在药物上和食品工业上有很多用途。经部分水解或降解的右旋糖苷可用作血浆体积溶胀剂。低分子右旋糖苷铁络合物可用来治疗缺铁贫血症。也可以制备具有不寻常的高粘度的无结晶糖浆。也可以部分代替大麦芽。     

α-糖苷酶抑制剂SH-9766的分离和鉴别

在定向筛选α-糖苷酶抑制剂的实验中，从游动放线菌E-3519发酵液中分离到化合物SH-9766，其对α-淀粉酶和蔗糖酶有强烈的抑制作用．通过理化性质、质谱、红外和核磁共振等图谱数据的分析，证明与阿卡波糖同质．