超声波-复合酶耦合法制备花生粕抗氧化肽研究

以花生粕为原材料,花生粕抗氧化肽含量、DPPH自由基清除率为指标,研究不同酶解时间、超声处理时间、超声波功率、酶解温度等处理条件对花生粕抗氧化肽提取效果的影响。研究花生粕抗氧化肽对3种自由基的清除效果。试验结果表明:最佳提取条件为:底物浓度8%,超声波功率为150 W、超声处理时间5 min、酶解温度为45℃、酶解时间为1.5 h,此条件下花生粕抗氧化肽含量7.01 mg/mL,DPPH自由基清除率达到89.22%。超声波-复合酶耦合法制备的花生粕抗氧化肽对3种自由基均有较强的清除能力,且清除醇溶性自由基能力最强。     

亚麻籽粕抗氧化肽制备工艺的响应面法优化

以亚麻籽粕蛋白为原料,酶解制备抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为实验指标,通过单因素实验,筛选最佳蛋白酶并考察底物浓度、酶添加量、温度、pH及时间等对酶解物抗氧化能力的影响。在单因素实验基础上,采用响应曲面法进行酶解工艺条件的优化。结果表明:采用胰蛋白酶作为最适酶,酶解的最佳工艺条件为:底物浓度2%,温度37 ℃,酶解时间3.00 h,加酶量为4000 U/g,pH8.5,在该条件下,1 mg/mL酶解产物的DPPH自由基清除率及超氧阴离子自由基清除率分别为(63.64%±0.023%)和(19.98%±0.098%),0.5 mg/mL酶解产物的ABTS自由请清除率为(88.11%±0.059%)。说明亚麻籽粕抗氧化肽具有良好的抗氧化活性。     

超声辅助复合酶法制备核桃抗氧化肽工艺研究

采用超声辅助复合酶法制备核桃抗氧化肽,超声辅助酶解最佳工艺为复合酶添加量3%,酶解温度50℃,酶解p H 7.5,酶解时间70 min,超声功率150 W。利用混料设计对复合酶配比进行优化,确定复合酶质量比为1.42∶1∶2.66。在最优工艺条件下制备的核桃多肽DPPH自由基清除率为84.94%,其抗氧化能力低于维生素C,与维生素E接近。     

响应面法优化草菇抗氧化肽的酶法制备工艺

以草菇为原料提取蛋白质,蛋白酶酶解蛋白制备抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为指标,在单因素实验基础上,结合响应面法优化草菇抗氧化肽的提取工艺。通过超滤分离纯化获得不同分子量的肽段,采用DPPH自由基清除率、Fe2+螯合率和还原力法测定超滤组分的抗氧化活性。结果表明:中性蛋白酶为最优酶解蛋白酶,最佳酶解工艺条件为酶解时间3.70 h,加酶量3.81%,底物质量浓度3.11 g/100 mL,在此条件下,酶解产物的DPPH自由基清除率为69.85%±2.52%。通过超滤分级制备所得分子量最小的肽段F1（<3 kDa）具有最高的抗氧化活性,其DPPH自由基清除率、Fe2+螯合率和还原力分别为78.81%±1.56%、91.05%±1.65%、0.47±0.02。草菇抗氧化肽可作为潜在的天然抗氧化剂来源得到开发利用。     

水飞蓟粕蛋白的酶解及其酶解物抗氧化活性研究

以水飞蓟粕为原料,研究其蛋白酶解工艺及酶解物的抗氧化活性。结果表明,中性蛋白酶用于制备水飞蓟粕蛋白抗氧化肽具有明显的优势。正交试验确定了制备水飞蓟粕蛋白抗氧化肽的最佳酶解条件为:底物质量分数2%,加酶量14 000 U/g,pH7.0,温度55℃,酶解时间120 min,该条件下制备的水飞蓟粕蛋白酶解物对羟自由基的清除率为88.57%。抗氧化试验显示,水飞蓟粕蛋白酶解物具有一定的清除DPPH自由基和羟自由基能力,IC50分别为0.402 g/L和6.659 g/L,水飞蓟粕蛋白酶解物同样也具有较强的还原能力。     

响应曲面法优化鸭肫酶解制备抗氧化肽工艺

在单因素实验基础上应用响应面法对鸭肫抗氧化肽制备工艺进行优化。在前期筛选酶解鸭肫的最佳蛋白实验中得到木瓜蛋白酶为酶解鸭肫蛋白的最佳作用酶,优化的鸭肫抗氧化肽最佳工艺条件为:酶解时间4.0 h、加酶量0.5%、酶解温度55℃、料液比1∶3 g/m L。在此条件下,酶解鸭肫蛋白的水解度可达28.30%,DPPH·清除率为75.10%。结果表明该鸭肫抗氧化肽工艺制备可行,鸭肫蛋白水解度与DPPH自由基清除能力之间不存在相关性。     

酶解牡丹籽粕蛋白制备抗氧化肽的工艺优化

利用制备的牡丹籽粕蛋白为原料,对其进行酶解以获得具有抗氧化活性的多肽,为牡丹籽粕的精深加工提供理论依据。首先进行蛋白酶的筛选,选取最佳的碱性蛋白酶对碱溶酸沉法制备的牡丹籽饼粕蛋白进行酶解;以水解度和DPPH自由基清除力为指标进行单因素实验,分别考察底物浓度、酶解时间、加酶量、pH和酶解温度对制备抗氧化活性肽的影响;以DPPH自由基清除力为响应值,对牡丹籽粕蛋白抗氧化肽的制备工艺进行响应面法优化,确定的最佳制备工艺为:底物浓度0.7%、酶解时间2 h、酶用量4.60%、酶解温度56℃和pH8.0。抗氧化实验结果表明,制备的抗氧化肽对DPPH自由基的清除率为52.49%;经17种水解氨基酸组成分析证明,必需氨基酸占水解氨基酸总量的32.24%,具有较高的营养价值。     

酶解黄秋葵籽蛋白制备抗氧化肽的工艺优化

利用制备的黄秋葵籽粕蛋白为原料,采用酶解法以获得具有抗氧化活性的多肽,为黄秋葵籽粕的精深加工提供理论依据。首先进行蛋白酶的筛选,选取最佳的碱性蛋白酶对碱溶酸沉法制备的黄秋葵籽粕蛋白进行酶解;以水解度和DPPH自由基清除力为指标进行单因素试验,分别考察底物浓度、酶解时间、加酶量、pH值和酶解温度对制备抗氧化活性肽的影响;然后应用响应面法,以DPPH自由基清除力为响应值,对黄秋葵籽粕蛋白抗氧化肽的制备工艺进行优化,确定的最佳制备工艺参数为:底物浓度0.7%、酶解时间3.8 h、酶用量6%、酶解温度50℃和pH 8.0。抗氧化试验结果表明,制备的抗氧化肽对DPPH自由基的清除率为50.83%。     

山杏仁多肽的制备及清除自由基能力研究

以DPPH自由基清除率为指标,对风味蛋白酶酶解脱脂山杏仁的工艺进行研究。在单因素实验的基础上,采用二次回归正交旋转组合设计对其酶解工艺进行优化。建立脱脂山杏仁酶解液的DPPH自由基清除率与蛋白酶用量、酶解温度及酶解pH,3个实验因素的正交回归模型方程,通过频率分析法得到酶解最佳工艺条件:蛋白酶用量0.50%,酶解温度55℃,酶解pH7.2,酶解时间4h,最佳条件下酶解液的DPPH自由基清除率为56.8%。在此条件下,山杏仁蛋白酶解液清除DPPH自由基的IC50值为4.18mg/mL。经过超滤分离获得不同分子量的抗氧化多肽,用DPPH自由基清除率评价其抗氧化性,得分子量小于5ku的肽清除DPPH自由基能力最强。     

大米蛋白的提取及抗氧化肽的制备工艺

本文以DPPH清除率为指标,研究不同蛋白酶、酶解温度、酶解时间和加酶量等因素对大米蛋白酶解产物的抗氧化活性影响,并采用L9(34)正交试验优化其酶解工艺。研究结果表明:中性蛋白酶是制备大米蛋白抗氧化肽的最佳水解用酶,其最佳酶解工艺为:酶解时间20 min,酶解温度50℃,加酶量4000 U/g。在此条件下,大米蛋白酶解产物的DPPH自由基清除率可达80.17%。     

马齿苋多糖提取工艺优选及活性初筛

以多糖提取得率为指标,采用正交试验对加酶超声辅助法提取马齿苋多糖的工艺条件进行了优化。方法:以未经酶解和未采用超声处理的传统水提醇沉法得到的多糖做对照,通过近红外光谱分析加酶超声处理对马齿苋多糖结构的影响并对马齿苋多糖的抗氧化活性进行分析。结果表明:在纤维素酶2.5%,超声温度60℃,超声功率70 W,超声时间20 min,多糖提取得率达到18.40%。结论:近红外光谱分析表明,加酶超声对多糖的结构没有显著影响,提高了多糖提取率。体外抗氧化性实验表明,所提取马齿苋多糖具有较强的总抗氧化能力,对.OH和DPPH均有较好的清除能力,活性大小与多糖的浓度呈明显的线性关系。     

响应面法优化坛紫菜抗氧化肽酶法制备工艺

以坛紫菜为原料,通过酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶和纤维素酶酶解制备活性肽,以DPPH自由基清除率和多肽得率为评价指标,研究坛紫菜水解肽的抗氧化能力。结果表明:5种酶的酶解产物都具有抗氧化能力,中性蛋白酶酶解产物DPPH自由基清除率最高,选择它为最佳工具酶。通过单因素和响应面试验优化酶解工艺,得到最佳酶解工艺:酶解时间3.6 h、酶解温度47℃、酶用量16362 U/g、底物浓度3.0%、pH7.0。此条件下制备得到的水解肽具有较强抗氧化能力,DPPH自由基清除率可达(91.83±0.81)%。     

桑葚多糖超声提取、脱色工艺优化及其抗氧化活性分析

本文研究桑葚多糖超声提取工艺、树脂脱色工艺和体外抗氧化活性。以桑葚粗多糖得率为指标,通过单因素实验、正交试验考察超声提取温度、料液比、超声时间、超声功率的影响;以脱色率为指标,通过单因素实验、正交试验考察脱色时间、多糖溶液浓度、脱色温度的影响;通过ABTS法、DPPH法、邻二氮菲法、邻苯三酚法考察其抗氧化能力。结果表明,超声提取桑葚多糖的最佳工艺为:超声温度50 ℃、料液比1:30 g/mL、超声时间70 min、超声功率500 W,该条件下多糖得率为4.59%±0.25%;AB-8大孔吸附树脂脱色的最佳工艺为:脱色时间5 h、桑葚粗多糖溶液浓度4 mg/mL、脱色温度25 ℃,该条件下脱色率为62.34%±1.27%;桑葚多糖清除ABTS+自由基、DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的IC₅₀分别为0.14、0.68、0.19和3.14 mg/mL。     

复合酶辅助超声提取西藏芜菁总黄酮工艺优化及抗氧化活性分析

以西藏芜菁为原料,研究复合酶辅助超声法提取芜菁中总黄酮的最佳工艺条件及其抗氧化活性。以总黄酮得率为考察指标,通过Plackett-Burman实验筛选出对得率影响最显著的三个因素:复合酶配比、料液比及超声功率。随后通过响应面法优化芜菁总黄酮的提取工艺,同时通过DPPH自由基和ABTS+自由基清除实验评估了芜菁总黄酮的抗氧化活性。结果表明,复合酶辅助超声法提取芜菁总黄酮的最佳工艺条件为:复合酶配比为1.9:1 g/g,复合酶用量为2%,料液比为1:38 g/mL,乙醇浓度为75%,酶解温度为50℃,酶解时间为55 min,超声功率为204 W,超声时间为60 min,在此条件下总黄酮得率达到最大值1.458%。抗氧化实验结果表明芜菁总黄酮对DPPH自由基清除的IC₅₀为185.6 μg/mL,对ABTS+自由基清除的IC₅₀为164.3 μg/mL,说明芜菁总黄酮具有体外抗氧化活性。综上,本研究得到了复合酶辅助超声法提取芜菁总黄酮的最佳工艺条件,且提取得到的芜菁总黄酮具有较强的抗氧化活性,为西藏芜菁的开发及利用提供了一定的科学依据。     

超声辅助核桃饼脱脂和多肽制备工艺的优化

采用超声辅助核桃饼脱脂,并以脱脂核桃粉为原料制备核桃蛋白,采用碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备多肽。通过单因素实验和正交实验对超声辅助核桃饼脱脂和核桃多肽制备工艺条件进行优化,并对最优条件下制备的核桃多肽的特性进行分析。结果表明:超声辅助核桃饼脱脂最优条件为料液比1∶20、超声功率500 W、超声时间140 min,在最优条件下脱脂率为91.23%,蛋白损失率为11.32%;酶解制备核桃多肽的最优工艺条件为酶解温度50℃、酶解pH 9、加酶量3.0%、酶解时间5.0 h,在最优条件下水解度达到22.63%,多肽得率为88.24%。核桃多肽粗蛋白质含量约为95%,相对分子质量小于1 000 Da的多肽占比达91.61%。     

鲍鱼内脏蛋白的提取及水解肽的抗氧化活性研究

以鲍鱼加工下脚料鲍鱼脏器为原料,探讨脏器蛋白的提取工艺及蛋白水解肽的抗氧化效果。以鲍鱼内脏蛋白提取率为指标,通过响应面法优化提取工艺;对蛋白进行酶解,以水解度和抗氧化能力为指标筛选抗氧化效果最好的工具酶,酶解得到具有较强抗氧化能力的肽段,进一步对抗氧化肽进行性质测定。结果表明,得到最优工艺:碱浓度为1.5%,超声波时间为14.5 min,提取时间35.5 min,提取温度81.5 ℃,该工艺条件下鲍鱼脏器蛋白提取率高达81.01%±0.43%;筛选得到木瓜蛋白酶为最适工具酶并对制备的蛋白进行酶解;水解肽分离纯化得到最强抗氧化能力肽段P1的羟基自由基清除率、DPPH自由基清除率及还原力分别为79.25%±1.12%、(90.45%±0.46%、0.598±0.05。综上,鲍鱼脏器水解肽具有较强抗氧化能力,可用于制备天然抗氧化剂。     

黄花草总黄酮超声辅助提取工艺优化及抗氧化活性研究

采用超声辅助法提取黄花草总黄酮,通过单因素试验和正交试验确定了总黄酮的最佳提取工艺条件,并研究了黄花草总黄酮对羟基自由基(·OH)、DPPH自由基(DPPH·)和亚硝酸盐的清除效果。结果表明:黄花草总黄酮的最佳提取工艺条件为料液比1:15 (g/mL),乙醇浓度50%,提取功率40 W,超声时间50 min,提取温度50℃,该条件下黄花草总黄酮得率为(2.711±0.002)%。黄花草总黄酮对·OH和亚硝酸盐具有明显清除能力,对DPPH·具有较强清除能力,最大清除率分别为(52.48±0.88)%,(95.58±0.28)%,(57.27±0.15)%,表明黄花草中的总黄酮具有较好的抗氧化能力。     

桑葚籽黄酮超声酶解提取工艺优化及其抗菌、抗氧化活性

采用复合酶超声辅助提取法提取葚籽黄酮,并分析其抗氧化活性和抑菌活性。通过单因素实验和Box-Behnken响应面分析法考察不同生物酶比例、复合酶酶添加量、酶解温度、酶解时间和超声时间对黄酮得率的影响,检测提取物对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除作用,并通过牛津杯法检测其抑菌活性。结果表明:最佳酶为2:1的果胶酶和纤维素酶组合的复合酶,最佳提取工艺条件为:复合酶添加量0.3 mg/mL、酶解温度55 ℃、酶解时间80 min、超声时间20 min。此条件下桑葚籽黄酮的提取得率为5.32 mg/g。提取所得黄酮具有较高的抗氧化活性,且抗氧化活性与黄酮质量浓度呈一定效量关系。桑葚籽黄酮对羟自由基的清除效果最强,当黄酮质量浓度为1.00 mg/mL时,其对DPPH自由基和羟自由基的清除率分别为 83.90%和87.27%,抗超氧阴离子自由基活力为165.51 U/L。桑葚籽黄酮对沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和酵母菌均具有抑制作用,且最低抑制浓度分别为0.75、1.50、1.00和2.00 mg/mL。     

中华绿螂抗氧化肽的提取及其抗氧化性

利用响应面法和超滤法对中华绿螂中抗氧化肽的木瓜蛋白酶水解提取工艺条件进行优化。在单因素试验基础上,利用响应面法分析建立二次回归模型。以酶与底物浓度比值([E]/[S])、酶解温度、酶解p H和酶解时间为自变量,DPPH自由基清除率为响应值,研究各因素及其交互作用对自由基清除率的影响。根据响应曲面图及其等高线图,确认木瓜蛋白酶水解中华绿螂制备抗氧化肽的最优工艺条件:底物浓度6%、pH 4.11、酶解温度40℃、酶解时间3.09 h。在此条件下,中华绿螂抗氧化肽对DPPH自由基清除率为97.64%。所得回归模型高度显著(p<0.0001),与理论预测值基本吻合。根据超滤试验可知,超滤膜截留分子质量3000~1000 Da时抗氧化性最佳,超滤所得可溶性蛋白酶解物的抗氧化性为94.96%。     

大鲵肽酱香酒酶解工艺优化及抗氧化活性研究

为研发一种具有抗氧化活性的大鲵肽酱香酒,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率为主要指标,多肽含量为辅助指标,比较酸水解、酶水解和直接浸泡等不同预处理方式对大鲵肽酱香酒抗氧化活性的影响,并在单因素试验基础上采用响应面法对大鲵肽酱香酒酶解条件优化。结果表明,酶水解法优于酸水解法和直接泡制,其最佳酶解工艺为木瓜蛋白酶添加量6 126 U/g、酶解时间4 h、酶解温度55 ℃、酶解pH 4.5。在此优化条件下,大鲵肽酱香酒多肽含量为（14.20±0.11） mg/mL,对DPPH自由基的清除率为（77.98±0.99）%,羟自由基清除率为（70.66±0.70）%,还原能力（吸光度值A700 nm）为0.651,表明大鲵肽酱香酒具有一定抗氧化性。