妊娠期大鼠补充苏氨酸锌对仔鼠金属硫蛋白基因MT1表达的影响

为了探讨母体补充苏氨酸锌对子代生长性能、金属硫蛋白（metallothionein,MT1）mRNA表达的影响,实验以苏氨酸锌为受试物,将90 只受孕SD大鼠随机分成5 组,并于妊娠期第6～15天进行灌胃补充不同剂量苏氨酸锌。母鼠分娩后将仔鼠进行常规饲养至1 月龄,测量仔鼠的体质量、身长和尾长,将各组仔鼠断颈处死后取肝脏、肾脏、脾脏和胸骨等组织进行RNA的提取并测定MT1基因相对表达量。结果表明：与空白对照组相比,苏氨酸锌各剂量组仔鼠体质量有显著增加（P＜0.05）。与溶媒对照组和空白对照组相比较,苏氨酸锌各剂量组仔鼠的MT1 mRNA表达量高,且差异显著（P＜0.05）,并且1 000 mg/kg苏氨酸锌处理组各组织中MT1的基因表达量要高于其他组。本结果表明：妊娠期补充苏氨酸锌能显著提高仔鼠MT1 mRNA表达水平,并能在一定程度上增加仔鼠体质量。     

奶山羊乳腺中胰岛素样生长因子及其受体的表达与作用

为研究胰岛素样生长因子及胰岛素样生长因子受体在奶山羊乳腺组织青春期、妊娠期、泌乳期及退化期表达的差异及变化,探索其在奶山羊乳腺发育过程中的作用,根据奶山羊乳腺发育特点及生长阶段不同分为青春期、妊娠期、泌乳期及退化期,采用激光共聚焦显微镜检测胰岛素样生长因子在奶山羊乳腺各生长阶段的表达及定位,通过定量分析来比较胰岛素样生长因子在奶山羊乳腺各生长阶段表达的差异,描述其在奶山羊乳腺发育过程中的作用.结果显示:胰岛素样生长因子及胰岛素样生长因子受体在奶山羊乳腺法如各时期均有表达,表达水平与乳腺发育密切相关.     

高剂量苏氨酸锌和硫酸锌对大鼠胚胎-胎仔发育毒性的比较

目的：在胎鼠器官形成期6～15 d对怀孕的Sprague-Dawley（SD）大鼠连续灌胃高剂量锌源,观察苏氨酸锌和硫酸锌对SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性。方法：将苏氨酸锌按1 200 mg/（kg·d）的剂量（以体质量计,下同）,硫酸锌则给予相同剂量的锌（575 mg/（kg·d））,于妊娠第6～15天连续灌胃给药,观察孕鼠基本生活状况。每隔3 d称1 次体质量,妊娠第20天处死孕鼠,记录子宫质量、着床数、死胎数、胎盘质量及胎鼠体质量等,观察活胎仔外观异常与否。每窝1/2 胎鼠放入Bouin’s液固定两周作内脏检查,另1/2 胎鼠作骨骼畸形检查。结果：苏氨酸锌和硫酸锌组部分孕鼠给药初期均出现食欲低下,毛发不顺等,且摄食量明显降低（P＜0.05）,实验结束时孕鼠体质量增加显著减少（P＜0.05）。苏氨酸锌组有18 例胎鼠胸骨缺失,与玉米油组比较有显著差异（P＜0.05）。硫酸锌组有13 例胎鼠胸骨缺失,同时有2 只孕鼠死亡,与玉米油组比较有显著差异（P＜0.05）。结论：两种高剂量的锌源对SD孕鼠都有一定的生殖毒性,但苏氨酸锌相对比较安全。     

3种茶叶对非酒精性脂肪肝细胞中IGF-I基因表达的影响研究

目的 探讨普洱茶(熟茶)、铁观音、红茶对高脂饮食诱发的大鼠非酒精性脂肪肝中胰岛素样生长因子-I (insulinlike growth factor I,IGF-I)表达的影响.方法 将Wistar大鼠随机分为正常对照组、高脂模型组、药物组及低、中、高剂量普洱茶(熟茶)、铁观音、红茶组(0.5,1.0,2.0 g/kg·bw).试验大鼠灌胃授试茶样水浸提物35 d后采血处死,分离血清测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(AST)的活性;用RT-PCR法检测试验大鼠肝脏细胞中IGF-I基因的表达量.结果 与高脂模型组相比,药物对照组,中、高剂量普洱茶组,低、中剂量铁观音组,低、中剂量红茶组TC水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01);药物对照组,低、中、高剂量普洱茶组,低、中剂量铁观音组,低、中、高剂量红茶组TG水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01);低、中、高剂量普洱茶组,低、中剂量铁观音组和高剂量红茶组AST水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01);低、中、高剂量普洱茶组和低、高剂量红茶组ALT水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01);高剂量普洱茶、中剂量铁观音组IGF-I基因表达较高.结论 普洱茶(熟茶)、铁观音、红茶对IGF-I在非酒精性脂肪肝中的基因表达具有不同程度的积极作用,普洱茶(熟茶)的作用更好.     

实时荧光定量PCR法评价甘薯蛋白对结直肠癌移植瘤荷瘤鼠肿瘤相关因子的影响

目的 利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, qPCR)法评价甘薯蛋白(sweet potato protein, SPP)对结直肠癌移植瘤荷瘤鼠肿瘤相关因子的调控作用。方法 12只雄性Babl/c裸鼠腹腔接种人结直肠癌LOVO细胞后经灌胃给予SPP干预21 d, 通过qPCR和免疫组化技术检测肿瘤组织中胰岛素样生长因子1受体(insulin like growth factor 1, IGF1R)、环氧酶2(cyclo-oxygen-ase 2, COX2)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A, VEGFA)、β链蛋白(β-catenin)的表达和分泌情况。结果 所有裸鼠均成瘤, SPP干预后, 肿瘤总重量及个数略减少, HE染色显示, 蛋白干预后肿瘤组织内小血管数量减少, 纤维组织增加。免疫组化检测显示, SPP干预后, IGF1R、COX2、VEGFA、β-catenin表达量均显著减少。qPCR检测显示, 与模型组相比,低剂量SPP干预后, VEGFA mRNA的相对表达量显著降低, 中、高剂量SPP干预后IGF1R、COX2、VEGFA、beta-catenin mRNA的相对表达量均显著降低。结论 SPP具有下调结直肠癌细胞移植瘤荷瘤鼠肿瘤中IGF1R、COX2、VEGFA、β-catenin表达和分泌的作用。     

补充钙、镁、铁、锌等矿物质对妊娠大鼠及胎仔的影响

目的探讨补充钙、镁、铁、锌等矿物质对妊娠大鼠及胎仔发育的影响。方法适应期结束后将孕鼠按体重随机分组,10只已孕大鼠在孕前1 w~0 d即给予样品作为孕前组,40只已孕大鼠分为孕早期(孕0~11 d)、孕中期(孕12~16d)、孕晚期(孕17 d~分娩)实验组和对照组,实验组分别在不同孕期灌胃营养素补充剂软胶囊内容物溶液,对照组灌服大豆油,灌胃量0.94 mL/(kg·d)。观察胎仔数量、异常胎仔数、胎仔生长指标,并采用火焰原子吸收分光光度法测定孕鼠血清及胎仔组织中钙、镁、铁、锌的含量。结果 (1)孕前组、孕早期组孕鼠孕0~11 d体重增加量高于对照组(P0.05);孕中期组孕鼠总增重量高于其他各组(P0.05)。(2)实验组孕鼠产仔数多于对照组(P0.05);各实验组胎仔的身长均小于对照组(P0.05),尾长、体重、头重差异无统计学意义(P0.05)。(3)孕早期组和孕中期组孕鼠血清铁含量高于对照组(P0.05);孕期各组胎仔组织中钙含量均高于对照组和孕前组(P0.05),孕晚期组胎仔组织中锌含量高于其他各组(P0.05),孕早期组和孕中期组胎仔组织镁含量高于对照组(P0.01,P0.05)。结论孕前和孕期补充矿物质可增加孕鼠增重量并可能提高胎仔组织中钙、铁、锌、镁等矿物质的含量。     

妊娠期高果糖膳食对子代胰岛素抵抗的影响

目的:探讨大鼠妊娠期高果糖膳食对子代胰岛素抵抗的影响。方法:正常饮食的成年雄性Wistar大鼠与雌性大鼠进行合笼,孕鼠随机分为5组,分别为正常对照组、正常剂量果糖组、高剂量果糖组、超高剂量果糖组和超高剂量蔗糖组,孕期每日分别给予2m L蒸馏水、2g/kg、6g/kg、18g/kg的果糖溶液以及18g/kg的蔗糖溶液灌胃,连续干预直至分娩,娩出仔鼠基础饲料喂养,并称量仔鼠体质量、检测空腹血糖。于第8周末检测空腹血糖、进行OGTT试验。于次日禁食12h后处死子代大鼠,麻醉、取血,测量血清胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数。结果:孕期连续干预后,娩出仔鼠出生体重:高剂量果糖组、超高剂量果糖组显著低于对照组(P0.05);超高剂量果糖组娩出仔鼠空腹血糖显著高于对照组(P0.05);OGTT试验:在30min处,高剂量果糖组、超高剂量果糖组以及超高剂量蔗糖组血糖值显著高于正常对照组及正常剂量果糖组(P0.05),在120min处,高剂量果糖组、超高剂量果糖组及超高剂量蔗糖组血糖值显著高于正常对照组(P0.05)。高剂量果糖组、超高剂量果糖组及超高剂量蔗糖组的血清胰岛素含量和胰岛素抵抗指数都显著高于正常对照组和正常剂量果糖组(P0.05)。结论:妊娠期高果糖膳食会增加子代胰岛素抵抗及糖代谢的患病风险。     

载锌沸石对肉鸡生产性能、抗氧化功能及其相关基因表达的影响

研究载锌沸石(Zn CP,锌含量为15.5 mg/g)对肉鸡生产性能、肝脏锌沉积、抗氧化功能及其相关基因表达的影响,探讨Zn CP作为抗生素替代品的可行性。300只1日龄AA(Arbor Acres)肉鸡随机分成5组,每组6个重复,每个重复10只鸡,试验期为42 d。试验日粮:1)对照组,基础日粮(含Zn SO4,锌含量为60mg/kg);2)基础日粮+抗生素(40 mg/kg金霉素);3)基础日粮+0.1%Zn CP;4)基础日粮+0.2%Zn CP;5)基础日粮+0.4%Zn CP。结果表明,与对照组相比,不同剂量Zn CP显著提高肉鸡前期体增重(P0.05),0.1%和0.2%的Zn CP显著提高21 d肝脏T-SOD和Cu Zn-SOD的活性(P0.05),0.2%的Zn CP显著降低21 d肝脏MDA含量(P0.05),抗生素组和Zn CP组均能显著提高21 d肝脏T-AOC(P0.05);与抗生素组相比,0.1%和0.2%的Zn CP显著降低21 d肝脏MDA含量(P0.05),显著提高21 d肝脏T-SOD的活性(P0.05),0.1%的Zn CP显著提高42 d肉鸡肝脏Nrf2 mRNA的相对表达量(P0.05)。与对照组和抗生素组相比,0.2%的Zn CP显著降低42 d肉鸡肝脏MDA含量(P0.05)。结果提示,肉鸡日粮中添加Zn CP能提高生产性能,效果等同或优于抗生素;Zn CP可能通过提高Keap1/Nrf2/ARE/抗氧化酶信号通路关键基因Nrf2的表达量来提高肉鸡的抗氧化能力;本试验条件下,日粮中Zn CP以0.1%和0.2%的添加量较好。     

早期给予膳食槲皮素对大鼠母代生殖及其子代生长发育的影响

目的:研究早期给予槲皮素对母鼠生殖及其子代发育的影响。方法:孕鼠随机分为4组:空白对照组、槲皮素低、中、高剂量组(从孕0d至断乳21d灌胃给予槲皮素,剂量分别为16、160、480mg/(kg.d))。定期检测母鼠和仔鼠的生长指标、繁殖能力、幼仔存活及幼仔肛殖距(AGD),产后第21天处死母鼠和仔鼠,计算母鼠和幼仔脏器指数。结果:与空白对照组相比,槲皮素组对母鼠体质量、繁殖能力、幼仔存活率没有影响;槲皮素低、中剂量组中雄性仔鼠AGD和体质量显著降低;槲皮素组对雌性仔鼠AGD和体质量没有影响;槲皮素高剂量组降低母鼠和雄性仔鼠的脾脏指数,中剂量组增加雌性仔鼠肾脏指数。结论:槲皮素具有雌激素及抗雌激素作用,对雄性仔鼠影响较大,无生殖与发育毒性。     

甘薯sporamin蛋白对结直肠癌的抑制作用 研究进展

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是结肠和直肠粘膜上皮在环境或遗传等致癌因素作用下发生的恶性病变。高脂、高能量、低纤维膳食、久坐不动的生活方式及肥胖等都是CRC的危险因素。Sporamin蛋白是甘薯块根中特有的一种胰蛋白酶抑制剂,具有抑制脂肪细胞分化和降低CRC细胞血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶表达的作用。近年来,胰岛素样生长因子(insulin-like growth factors,IGFs)家族信号分子在肥胖及CRC发展过程中的作用引起了人们的重视。肥胖可导致IGF结合蛋白基因甲基化,并引起IGF1、IGF2等促癌因子分泌增多。反之,限制热量、减肥和增加体力活动则能逆转IGFs通路信号分子的不利改变,产生抑癌作用。本文分析了甘薯sporamin蛋白抑制CRC的可能机制,并将重点放在IGFs通路信号分子所起的作用上,为进一步阐明sporamin蛋白抗CRC的作用机制提出了新的研究方向。     

Uterine and hepatic gene expression in relation to days postpartum, estrus, and pregnancy in postpartum dairy cows

The somatotropic axis consisting of growth hormone, the growth hormone receptor (GHR) insulin-like growth factor (IGF)-I, and IGF binding proteins changes with the stage of lactation and nutrition of the cow and may be 1 mechanism through which lactation and nutrition affect the establishment of pregnancy. The objective of this study was to quantify GHR, IGF-I, and IGF binding protein-2 (IGFBP-2) mRNA in liver and uterine endometrial tissue at 4 stages of lactation (40, 80, 120, and 160 days in milk) and around the time of artificial insemination. Estrus was synchronized with GnRH and PGF_2α, and cows were inseminated 12 h after estrus. Uterine biopsies were collected immediately before the second injection of PGF_2α (before estrus), at the initiation of standing estrus, and 4 d after estrus. Liver biopsies were collected once on 4 d after estrus. The abundance of GHR, IGF-I, and IGFBP-2 mRNA in liver and uterus was determined by real-time quantitative PCR. The amount of liver IGF-I mRNA was positively correlated with plasma IGF-I concentrations. Cows that became pregnant after AI had more GHR and IGFBP-2 mRNA in their liver than cows that did not become pregnant. There was no effect of DIM or pregnancy status on abundance of uterine mRNA; however, uterine GHR and IGF-I mRNA was most abundant at estrus. In summary, cows at different stages of lactation or with different pregnancy statuses had similar quantities of uterine mRNA. In contrast, liver quantities of mRNA differed relative to pregnancy status. These data provide evidence that liver indices of metabolic state may be indicative of pregnancy success.     

Relationships between the concentration of insulin-like growth factor-1 in serum in dairy cows in early lactation and reproductive performance and milk yield

The objective of this study was to evaluate the relationships of different insulin-like growth factor-1 (IGF1) measures [5 distinct IGF1 concentrations on particular days, area under the curve (AUC), and linear regression coefficient] in the postpartum period in lactating dairy cows and reproductive performance. A total of 417 healthy multiparous Holstein-Friesian cows were enrolled in the study. Serum samples for the determination of the concentration of IGF1 were collected on d 0, 4, 10, 20, and 40 postpartum (pp). The concentration of total IGF1 in serum was determined by immunometric chemiluminescence immunoassay. All cows were examined for vaginal discharge as a sign of clinical endometritis at 20 d pp by external inspection and rectal palpation. The mean concentration of IGF1 ranged from 57 ± 18.9 ng/mL within the first 12 h pp to 74 ± 19.9 ng/mL at 40 d pp. On d 10 pp, first and all artificial insemination conception rates were greater in cows with IGF1 concentrations above the median compared with cows with IGF1 concentrations below the median. Cows with greater AUC (second to fourth quartile) conceived earlier (11.4, 16.0, and 18.8 d) than cows in the first IGF1 quartile (117.0 ± 43.6). Proportion of cows pregnant within 200 d pp increased significantly from the first to the third IGF1 quartile of AUC (58.7, 66.7, and 74.0%). The proportion of cows culled decreased from the first to the fourth IGF1 quartile. Correlations between IGF1 measures and days to pregnancy were significant (except for the linear regression coefficients) but low (R² = 0.0009 to 0.025). Differences between single or composite measurements of IGF1 were not significant. We could also demonstrate a statistically significant correlation between the concentration of IGF1 in serum and the average 10-d milk production (31.6 to 44.0 kg). In conclusion, our study indicates that single or multiple measurements of IGF1 concentration in the postpartum period have very limited value to predict individual fertility in dairy cows.     

蛹虫草对糖尿病大鼠肾脏病程发展的抑制作用

目的：研究蛹虫草(Cordyceps militaris)对糖尿病大鼠肾脏病程发展的抑制作用。方法：采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立糖尿病大鼠模型。经蛹虫草(400mg/kg,以体质量计)灌胃8周后,分别检测大鼠空腹血糖值和肾脏指数;并收集大鼠24h尿液,检测尿液中微量白蛋白( mAlb)、β-N乙酰葡萄糖苷酶(NAG)含量;测定血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)含量;通过RT-PCR法测定肾脏中转化生长因子β1(TGF-β1)及其Ⅱ型受体(TβRⅡ)、结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达;Western blotting检测肾脏中TGF-β1蛋白表达;免疫组化法检测肾脏中Ⅳ型胶原表达。结果：蛹虫草能显著降低糖尿病大鼠空腹血糖(P＜0.05)、肾脏指数(P＜0.01)、24h排尿量(P＜0.01)、尿微量白蛋白排泄率(UAER) (P＜0.01)和NAG排泄率(P＜0.01);同时能够降低血清中BUN、Cr、UA含量(P＜0.05);下调TGF-β1、TGFβRⅡ和CTGF的mRNA表达(P＜0.01),减少TGF-β1及Ⅳ型胶原的蛋白表达(P＜0.01)。结论：蛹虫草具有良好的降血糖及改善肾脏滤过功能的作用,其机制可能与抑制TGF-β1、TGFβRⅡ和CTGF等基因表达,减少胶原物质在肾脏中的积累有关。