透明质酸发酵过程控制的研究

进行了兽疫链球菌NW-162高密度发酵HA的工艺研究,通过优化了发酵过程中不同饱和度的溶解氧和不同PH调控方法对该菌株发酵生产透明质酸的影响。试验表明:采用30%饱和度的溶解氧和在发酵过程的0～30小时,调pH 7.2,发酵后期调pH 6.8的调控方法,OD660可达0.84,透明质酸产量为0.532 g/L。在此条件下,有利于细胞生长和产物表达,降低乙酸等有害代谢副产物积累。     

透明质酸发酵过程控制的研究

进行了兽疫链球菌NW-162高密度发酵HA的工艺研究,通过发酵过程中不同饱和度的溶解氧和不同pH调控方法对该菌株发酵生产透明质酸的影响进行了研究。实验表明,采用30%饱和度的溶解氧和在发酵过程的0~30 h,调pH 7.2,发酵后期调pH 6.8的调控方法,OD660可达0.84,透明质酸产量为0.532 g/L。在此条件下,有利于细胞生长和产物表达,降低乙酸等有害代谢副产物积累。     

兽疫链球菌NW-162发酵生产透明质酸的研究

在摇瓶中进行了兽疫链球菌诱变株NW-162发酵生产透明质酸的工艺研究,通过正交实验优化了最佳培养基组成,并考察了发酵过程中发酵温度、培养时间、pH值、装料系数等条件对该菌株发酵生产透明质酸的影响。实验表明:碳源及氮源对发酵过程影响最显著,优化所得最佳培养基组成为:葡萄糖40 g/L,复合氮源20 g/L,MgSO42g/L,钠盐3 g/L;在36℃、pH值7.0、装料系数为0.4的工艺条件下,发酵至27—30 h时达到最优发酵效果,收率可达0.464 g/L,比优化前提高2倍。     

透明质酸产生菌发酵培养基及培养条件优化

透明质酸具有保湿能力以及润滑等功效,在软骨、皮肤、脐带和鸡冠中含量极高,且在化妆品和护肤品方面、控制癌症以及新型药物载体设计方面的应用极其广泛。为了继续探究微生物摇瓶发酵下提高透明质酸产量的营养和培养条件,实验对一株兽疫链球菌菌株通过单因素和正交实验法进行发酵培养基及培养条件优化,最终确定兽疫链球菌的最佳发酵条件为：发酵温度37℃、初始pH值7.4、发酵时间为16 h,最佳培养基配比为葡萄糖3%,牛肉膏4.5%,MgSO₄·7H₂O 0.03%,异甘草素0.09%。     

兽疫链球菌NW-162发酵产生的透明质酸分离纯化研究

对兽疫链球菌诱变株NW-162发酵液中透明质酸(HA)的分离提取工艺方法进行了对比研究。采用乙醇沉淀分离透明质酸、链霉蛋白酶酶解结合氯仿除去蛋白质及经氯代十六烷吡啶分级分离工艺,结果表明:乙醇与上清液的体积比为2.5∶1.0时沉淀透明质酸25 h最为经济;酶解结合氯仿去除蛋白质较氯仿单独作用时,透明质酸产量及纯度均有一定提高,再经氯代十六烷吡啶分级分离后,可得纯度为71.5%、蛋白质质量分数2.8%、产量0.747 g/L、相对分子质量725×103的透明质酸产品。     

搅拌与混合对兽疫链球菌发酵生产透明质酸的影响

研究了透明质酸的流变学特性以及搅拌和混合对兽疫链球菌发酵生产透明质酸的影响。结果表明：透明质酸溶液属于典型的非牛顿凯松流体;搅拌转速和透明质酸浓度对气液传氧速率有很大影响;在较高的搅拌速率下发酵时可以得到较高的透明质酸产量,650 r·min^-1时透明质酸产量为4.1 g·L^-1,产率系数为0.08 g·g^-1;用有效搅拌模型分析发酵过程发现,只有在高搅拌转速时发酵体系才处于全部混合状态。     

添加表面活性剂促进兽疫链球菌高产透明质酸

研究了不同类型表面活性剂对兽疫链球菌Streptococcus zooepidemicus H24菌体生长和透明质酸发酵的影响,在此基础上,进一步研究了2.5 L发酵罐中阳离子型表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）的添加对透明质酸发酵的影响。研究结果表明：摇瓶发酵时,发酵中后期（12 h）添加离子型表面活性剂有利于透明质酸产量的提高,在摇瓶中添加20 mg/L阳离子型表面活性剂CTAB使HA比对照组提高20%;发酵罐上8～12 h流加CTAB可使兽疫链球菌细胞荚膜脱落,促使透明质酸的产量由5.1 g/L提高到5.7 g/L,增加11.8%。本研究结果为进一步提高发酵法生产其他黏多糖的产量提供了一定的借鉴。     

秸杆发酵工艺条件的优化

采用混合菌株对秸杆发酵进行了正交实验,对发酵工艺进行了优化,确定了较佳的发酵工艺条件,即尿素添加量0．5％、麦麸3％、KH2PO4和MgSO4分别为0．1％和0．15％。发酵液初始pH值为8．0,接种量为15％,发酵温度为30℃。     

透明质酸生产中生物发酵工艺过程

本文介绍了透明质酸产品的实际用途及其生产中生物发酵的过程。主要阐述了生产过程中的发酵工艺流程,及发酵液在种子培养罐,种子发酵罐,主发酵罐,混料罐以及补料罐中的物理、化学变化和具体操作过程。     

絮凝菌MBF03发酵条件的优化

以絮凝菌MBF03为材料,探讨了碳源、氮源、初始pH值、培养时间、接种量和金属离子对絮凝剂的产生及絮凝效果的影响,并对其絮凝活性分布进行了分析.结果表明:絮凝菌MBF03的最适碳源为葡萄糖、最适氮源为硝酸铵、最适初始pH值为6、最适接种量为4％;培养24 h时MBF03菌达生长平台期,培养48 h时絮凝活性达到最大值,二者存在时间延迟;Ca2+的助凝效果明显优于Mg2+;絮凝活性成分主要分布在发酵上清液中.     

发酵法生产医药用透明质酸

山东临朐华元生物工程有限公司通过对菌株的筛选培育、发酵原料配方和工艺的改进、提纯工艺和设备的优化、制粉工艺和设备的改进、生产环境的改造,利用生物工程技术发酵法研制生产出医药用透明质酸,并形成1.5t/a的生产规模。产品应用于眼科手术、滴眼液、手术防粘连等方面,改变了国内医药用透明质酸依赖进口或动物器官提取法微量生产自用的局面,为国内以透明质酸为基质的制剂产品发展打下了基础。     

透明质酸的产需情况及市场分析

介绍了透明质酸的性能、生产方法、用途和市场情况。透明质酸(HA)是近年来较为热点的生化产品之一,由于具有优良的保湿、润滑和生物相容性能,被应用于日化、医药、保健食品等领域。目前,全球透明质酸的年生产能力达到20t/a,2006年国内发酵法透明质酸的生产厂家达到8家,年生产能力约8t/a,大约40%的产品出口美国、日本等地。     

丙酸高产菌株的选育及发酵培养基优化

通过环境压力筛选获得了一株耐受30 g/L丙酸的产酸丙酸杆菌菌株(Propionibacterium acidipropionici WY320),降低了发酵过程中丙酸的反馈抑制作用,采用正交实验设计优化了发酵培养基. 结果表明,发酵培养基最适的玉米浆、酵母膏和(NH4)2SO4浓度分别为60, 10和7.5 g/L. 该条件下,摇瓶培养耐酸菌株的发酵周期为240 h,丙酸产量为49.35 g/L,较优化前提高72.98%,产率为0.21 g/(L×h); 5 L发酵罐培养的发酵周期为168 h,丙酸产量达51.96 g/L,产率为0.31 g/(L×h),较摇瓶培养提高47.62%,优于文献报道水平.     

发酵透明质酸蛋白脱除方法的比较研究

以发酵的透明质酸(HA)粗品为纯化对象,以改良的咔唑法和考马斯亮蓝法为检测手段,比较了Sevage法、固定化蛋白酶-Sevage法、Sevage-CPC法、冻融-Sevage法脱除HA粗品中蛋白的效果.研究了有机相比例、振摇时间、HA粗品浓度对Sevage法脱除蛋白的影响,结果表明,Sevage法脱除蛋白的最优条件为:HA粗品浓度10 g·L-1、正丁醇和三氯甲烷的体积比1:4、振摇时间30 min.通过比较,发现Sevage法HA损失率低但蛋白脱除效果差;固定化蛋白酶-Sevage法蛋白脱除效果好,操作简便,适于工业化;冻融-Sevage法操作简单,蛋白脱除效果好,但成本高,适于小批量生产;Sevage-CPC法可得到最纯的HA,但成本高、工艺繁琐, CPC不能回收,有待于进一步的研究.     

生物表面活性剂鼠李糖脂发酵条件的优化及绿色提取新工艺研究

通过正交实验对铜绿假单胞杆菌产鼠李糖脂（RL）的发酵条件进行了优化,并采用预处理酸沉淀冷冻干燥法新工艺提取RL。在最优发酵条件下RL的产量可达56 g/L以上。提取后的RL由二鼠李糖脂和单鼠李糖脂两种同系物组成,可将去离子水的表面张力降至29.01 mN/m。该RL提取工艺是一项绿色工艺。     

长川霉素发酵条件的优化

考察了发酵过程中接种、培养基、搅拌速度、通气量对长川霉素(Changchuanmycin)发酵的影响，通过实验确定了250L发酵罐的批式发酵条件为，以5％～10％的接种量在36～40h时接种，搅拌速度发酵前期为200rpm，然后逐步提高至400rpm；通气量发酵前期为0．6vvm，中期为1．0vvm，后期为0．6vvm；发酵过程中溶氧控制在30％以上，可以使发酵单位达到380μg/ml。