HPLC法测定阿托伐他汀钙含量

目的:建立阿托伐他汀钙原料药含量测定方法。方法:运用HPLC法,采用对照品外标法计算。采用ZORZBAX C18柱,以3.9 g·L~(-1)柠檬酸缓冲盐(氨水调节pH=5.7)-乙腈-四氢呋喃=60∶24:16为流动相A,3.9 g·L~(-1)柠檬酸缓冲盐(氨水调节pH=5.7)-乙腈-四氢呋喃=20∶60∶20为流动相B,梯度洗脱,流速为1.0 m L·min~(-1),检测波长为244 nm,柱温25℃。结果:空白溶剂不干扰主成分检测,主成分与相邻杂质间分离度均大于1.5并达到基线分离。结论:本方法专属性强,准确度,重复性好,本方法可测定阿托伐他汀钙的含量。     

高效液相色谱法对碳酸饮料中着色剂的快速测定

采用高效液相色谱同时测定碳酸饮料中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄4种着色剂的含量。采用C18柱(150mm×4.6mm,10μm),甲醇和0.02mol·m L~(-1)乙酸铵为流动相进行梯度洗脱,10min实现4种着色剂的基线分离。所建立分析方法,检测的线性范围为0.5～50μg·m L~(-1),检出限(3S/N)在0.55～0.95μg·m L~(-1)之间,加标回收率在93.3%～102%之间,测定的相对标准偏差(n=6)在0.5%～1.4%之间。该法操作简便、快速、灵敏、准确,适用于碳酸饮料中常见着色剂剂的快速测定。     

枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶发酵条件的优化

选用玉米粉、豆饼粉、KH_2PO_4及Na_2HPO_4为基础配方,通过单因素实验对枯草芽孢杆菌发酵产中性蛋白酶的发酵培养基、培养条件、发酵条件进行优化。确定了优化的发酵培养基为:20g·L~(-1)甘油,30g·L~(-1)豆饼粉,2mmol·L~(-1)氯化钙,0.3g·L~(-1 )KH_2PO_4,4g·L~(-1 )Na_2HPO_4;优化的培养条件为:培养温度30℃,接种量5%。调控发酵培养基pH值7.0控制发酵,发酵24h酶活达到7 344U·mL~(-1)。进行流加甘油实验,培养温度30℃,发酵过程控制pH值7.0,调整转速和通风量控制溶氧30%～35%,接种量5%,经过30h发酵,酶活达到10 654U·mL~(-1),较未补料提高了45%。     

HPLC法同时测定风湿定片中甘草酸和欧前胡素的含量

建立HPLC同时测定风湿定片中甘草酸和欧前胡素含量的方法。采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Diamonsil-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 m L·min~(-1),检测波长为254 nm,柱温为25℃。甘草酸在0.92~18.4μg·m L~(-1)(r=0.9996),欧前胡素在0.496~9.92μg·m L~(-1)(r=0.9998)范围具有良好的线性关系;平均回收率甘草酸为98.5%,RSD为2.97%(n=6);欧前胡素为99.4%,RSD为1.20%(n=6)。本方法准确,操作简便、重复性好,可用于风湿定片的质量控制。     

HPLC法测定乳舒合剂中4种有效成分的含量

采用HPLC法同时测定栀子苷、王不留行黄酮苷、黄芩苷、连翘苷的含量,C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5μm),乙腈-0.3%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长:238 nm,柱温:30℃,进样量:20μL。栀子苷、王不留行黄酮苷、黄芩苷、连翘苷之间分离度均大于1.5;栀子苷在0.051～102μg·mL~(-1)、王不留行黄酮苷在0.107～42.8μg·mL~(-1)、黄芩苷在0.072～72μg·mL~(-1)、连翘苷在0.093～37.2μg·mL~(-1)范围内线性关系良好,r=0.9990～0.9996;回收率为90.44%～93.16%。方法灵敏准确,可用于测定乳舒合剂中4种有效成分含量。     

QEChERS提取与高效液相色谱-电喷雾电离串联质谱联用法快速检测食品中氯霉素类物质的残留量

本文建立一种QuEChERS提取与高效液相色谱-串联质谱法(high performance Liquid chromatography-mass/mass spectrometry,HPLC-MS/MS)快速测定食品中氯霉素类物质残留量的方法。样品经酸性乙腈提取,经C18色谱柱分离,甲醇-5 mmol乙酸铵溶液梯度洗脱,采用电喷雾负离子模式多反应监测,内标法定量。氯霉素的浓度在0.1～200μg·L~(-1)以内与峰面积呈线性关系,检测定量限可低至0.1μg·kg~(-1)。取空白样品在0.01,0.05,0.1μg·kg~(-1)三个标准加入水平下进行了加标回收和精密度测试试验,回收率在81%～120%范围之间,相对标准偏差在1.5%～3.8%范围之间。该方法快速简便,准确性强,灵敏度高,适合实验室大批量食品中氯霉素类物质残留量的测定。     

高效液相色谱法分析N-月桂酰基苏氨酸

采用两相滴定法对N-月桂酰基苏氨酸(C_(12)Thr)进行纯度分析时,发现有严重的乳化现象,对滴定终点判断产生明显干扰。为解决这一问题,建立了高效液相色谱法分析C_(12)Thr。采用示差折光检测器检测,以Hedera ODS-2 C_(18)反相柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱、甲醇为流动相(流速为0.6 mL·min~(-1)),进样量为40μL,柱温35℃。结果表明:C_(12)Thr在质量浓度6.07×10~(-2)～1.62 g·L~(-1)范围内时,色谱流出曲线峰面积(A)与C_(12)Thr浓度(c, g·L~(-1))之间存在良好的线性关系:A=2.41×10~5 c+1.98×10~3 (R~2=0.9985),检测限为4.12×10~(-3) g·L~(-1),加标回收率为(99.55±0.18)%;同时,该分析条件对未反应的原料月桂酸(LA)也有很好的分析效果,LA和C_(12)Thr彼此间能够实现基线分离,LA浓度在6.49×10~(-3)～8.64×10~(-2) g·L~(-1)范围内存在良好的线性关系:A=2.14×10~5 c+4.43×10~2 (R~2=0.9993),检测限为4.32×10~(-3) g·L~(-1),加标回收率(99.47±0.16)%。     

HPLC法同时测定石榴皮中4种多酚类成分的含量

建立同时测定石榴皮中没食子酸、石榴皮鞣素、安石榴苷和鞣花酸的含量的高效液相色谱法。方法:色谱柱为Thermo ODS-2 Hypersil柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液梯度洗脱,流速为1.0 m L·min-1,检测波长为272 nm,柱温为室温。结果表明:没食子酸在2.448~19.58μg·m L~(-1)(r=0.9998)的浓度范围内、石榴皮鞣素在20.80~166.4μg·m L~(-1)(r=0.9998)的浓度范围内、安石榴苷在80.00~640.0μg·m L~(-1)(r=0.9997)的浓度范围内,鞣花酸在40.10~320.8μg·m L~(-1)(r=0.9995)的浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.8%、100.1%、99.5%、和99.9%,RSD分别为0.87%、1.2%、1.2%和1.3%。本文所建立方法快速准确,专属性强,重复性好,可为全面控制石榴皮质量提供依据。     

高效液相色谱法同时测定竹叶椒中4种成分含量

建立高效液相色谱法同时测定竹叶椒中桉脂素、N-甲基脱水四氢小檗碱A、芝麻素和planispine A4种成分的含量。采用Diamonsil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱,流速1 m L/min;柱温30℃;检测波长236 nm。桉脂素在6.25~100μg·m L~(-1)(r=0.9996)范围内、N-甲基脱水四氢小檗碱A在6.25~100μg·m L~(-1)(r=0.9995)范围内、芝麻素在11.25~180μg·m L~(-1)(r=0.9995)范围内、planispine A在9.38~150μg·m L~(-1)(r=0.9998)范围内均线性良好。平均回收率分别为99.31%(RSD=1.47%)、101.34%(RSD=1.39%)、98.03%(RSD=1.97%)、100.39%(RSD=2.10%)。本方法简便、可靠、准确度高、重复性好,可用于竹叶椒多成分质量控制研究。     

高效液相色谱-二极管阵列检测器法测定青霉素亚砜酯含量

建立高效液相色谱-二极管阵列检测器法测定青霉素亚砜酯的含量。采用Agilent Eclipse Plus C18(3.0 mm×100 mm, 3.5μm)色谱柱;柱温30℃;以25 mmol·L~(-1)的醋酸铵水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱;流速为0.5 mL·min~(-1);检测波长267 nm。青霉素亚砜酯在0.01～0.80 mg·mL-1(R~2=0.999 9)范围内线性较好,精密度RSD为0.15%。方法操作简单,结果准确,特异性强,稳定性好,适用于青霉素亚砜酯的含量测定。     

一种HPLC同时测定大鼠血浆中CYP450五种同工酶探针药物浓度的新方法

目的:建立HPLC法同时测定大鼠血浆中5种同工酶探针药物浓度的方法。方法采用氯仿提取五种探针药物,Topsil C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm 5μm),流动相以甲醇-磷酸氢二铵缓冲液(pH值3.4)梯度洗脱。检测波长230nm,流速1.0mL·min~(-1),柱温35℃。结果:5种探针药物在0.2～50μg·m L~(-1)范围内线性关系良好,方法提取回收率咖啡因98.08%～98.25%,美托洛尔97.81%～101.61%,氯唑沙宗99.92%～102.53%,甲苯磺丁脲98.83%～105.82%,咪达唑仑96.58%～101.47%.结论:该方法样品处理简便,专属性好,快速、准确、经济,可应用于五种同工酶探针药物的同时测定,适合进行药物对CYP450酶同工酶(CYP1A2、2D4、2E1、2C11和3A2)活性的影响及药物相互作用研究。     

HPLC测定不同干燥方法亳菊中5种成分的含量

通过高效液相色谱法建立测定不同干燥方法亳菊中绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草素、木犀草苷和金合欢素的含量的方法。采用菲罗门C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速:1.0m L·min~(-1),检测波长325 nm,柱温30℃。绿原酸41.50~0.83×103μg·m L~(-1)木犀草苷2.45~122.50μg·m L~(-1)、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸15.78~1.58×103μg·m L~(-1)、木犀草素327.33~1.96×103μg·m L~(-1)、金合欢素7.62~762μg·m L~(-1)浓度范围内呈良好线性关系,回归方程分别为y=3.3257x-10.6227(r=1.0000)、y=0.9865x+0.1356(r=1.0000)、y=3.6681x-27.6275(r=0.9999)、y=1.2538x-4.3563(r=1.0000)和y=3.6216x-1.2515(r=1.0000)。加样回收率分别为97.97%、97.49%、97.79%、98.27%、98.90%,RSD均小于5%。该方法快速,简便,重复性好,适合于同时测定亳菊中绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草素、木犀草苷和金合欢素的含量。     

HPLC法测定维格列汀原料中R型异构体的含量

建立了用高效液相色谱测定维格列汀原料中R型异构体的方法。以直链淀粉-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)键合硅胶为填充剂(CHIRALPAK IE,250mm×4.6mm,5μm),以正己烷-乙醇-甲醇-二乙胺-三氟乙酸(72∶24∶4∶0.05∶0.05)为流动相,检测波长为215nm,流速为0.8m L·min~(-1),进样体积为10μL,柱温为35℃。在上述色谱条件下,维格列汀与R型异构体的分离度良好,空白溶剂不会干扰R型异构体的检测。R型异构体的检测限和定量限分别为0.62μg·m L~(-1)和1.5μg·m L~(-1),R型异构体在1.5～15μg·m L~(-1)范围内呈良好线性关系(r=0.9999),平均回收率为100.1%(RSD=0.6%,n=12)。该方法的专属性强,灵敏度高,准确度良好,适用于维格列汀原料中R型异构体的含量测定。     

高效液相色谱-串联质谱法测定菌渣有机肥中红霉素残留量

建立了高效液相色谱-串联质谱法测定菌渣有机肥中红霉素残留量的方法。以Waters Symmetry-C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,3.5μm)分离,以0.1%甲酸-甲醇为流动相进行梯度洗脱,采用外标法进行定量分析。结果表明,红霉素在1~1 000μg·L~(-1)范围内线性关系良好(R~2=0.9992),该方法的检出限为0.2 ng·L~(-1),加标回收率为70.3%~90.7%,相对标准偏差(RSD)低于5.0%(n=5)。采用该方法检测大豆和玉米不同生育期(播种期、出苗期、开花期、成熟期)土壤中红霉素残留量,其中A1地块四个时期均未检出,A2地块大豆和玉米出苗期均有检出,残留量分别为0.3 ng·g~(-1)和0.2 ng·g~(-1)。该方法准确、灵敏,可用于菌渣有机肥中红霉素残留量的测定。     

高效液相色谱法检测中成药中非法添加的布洛芬

建立了高效液相色谱法快速检测中成药中非法添加的布洛芬的方法。以乙醇为萃取溶剂,采用超声溶剂萃取法进行前处理,配合高效液相色谱法,C18色谱柱,流动相:乙腈-0.02mol·L~(-1)乙酸铵溶液(0.1%乙酸,60/40,V/V),用冰醋酸调节pH=6,在检测波长263nm、流速0.5mL·min~(-1)条件下进行检测。此方法下,含有布洛芬的样品制剂在10 min内快速出峰,且不同浓度的标准品中,布洛芬在1～200μg·L~(-1)范围内具有良好的线性关系,相关系数R~2≥0.9988,最低检出限为2.9μg·L~(-1),最低定量限为4.1μg·L~(-1)。不同浓度水平的布洛芬,平均回收率为84.8%～92.4%,变异系数≤13.6%。检测了网购的3种中成药,检出了2批非法添加的阳性样品。本方法可简便地对中成药中的布洛芬进行有效提取并快速分离,可作为中成药中违禁添加布洛芬的有效检测方法。     

类伽腺苷中肼的测定

建立了衍生化高效液相色谱法测定类伽腺苷中的肼。以苯甲醛为衍生化试剂,使用Phenomenex Gemini C18色谱柱,流动相为0.02mol·L~(-1)磷酸二氢钠缓冲液和甲醇,梯度洗脱;检测波长360 nm。肼0.500~1.200μg·ml~(-1)浓度范围内线性关系良好,平均加样回收率为102.2%,其RSD为1.3%,检测限为0.18 ng。该方法快速、准确,适用于类伽腺苷中肼的检测。     

棒状链霉菌产克拉维酸发酵培养基优化

以克拉维酸生产菌株Streptomyces clavuligerus K6为研究对象,考察了不同氮源对克拉维酸产量的影响,并通过二水平析因实验、快速爬坡实验和响应面法对发酵培养基碳源进行优化。确定最佳氮源为大豆蛋白,最佳发酵培养基碳、氮源配方为:甘油18.19 g·L~(-1)、糊精11.22 g·L~(-1)、三油酸甘油酯30.80 g·L~(-1)、大豆蛋白粉40 g·L~(-1)。在此发酵培养基配方下,克拉维酸产量可达5 220 mg·L~(-1),较出发配方提高58.1%。     

快速溶剂萃取-GC/MS法检测地表水中的环氧七氯、对硫磷、甲基对硫磷和溴氰菊酯残留量

目的建立一种快速溶剂萃取-气相色谱质谱联用技术检测地表水中的环氧七氯、对硫磷、甲基对硫磷和溴氰菊酯残留量的分析方法。方法地表水样品过滤后,滤液采用加速溶剂萃取仪对农药进行提取、净化,选用丙酮∶乙腈(V∶V,1∶1)进行洗脱,残渣用1mL丙酮溶解后进样气相色谱质谱仪测定,外标法定量。结果4种农药残留浓度在0.04～2.0μg·mL~(-1)范围内呈良好的线性关系,相关系数(R~2)均大于0.995。检出限如下:环氧七氯:0.012μg·L~(-1)、对硫磷0.010μg·L~(-1)、甲基对硫磷0.012μg·L~(-1)和溴氰菊酯0.018μg·L~(-1)。4种农残在3个不同浓度水平的加标回收值在83.5%～97.2%之间,精密度测试(n=6)相对标准偏差(RSD)在2.61%～4.86%(n=6)。结论该方法操作简单、定性及定量测定准确可靠,适用于地表水中农药残留的监测。     

固相萃取-气相色谱法测定水中邻苯二甲酸酯类化合物

建立了固相萃取水中6种邻苯二甲酸酯类化合物,结合气相色谱质谱法定性定量分析的方法,并将其应用于实际水样的监测。比较了硅胶柱、C18、Qasis HLB和Si/PSA玻璃柱对6种PAEs回收率的影响。结果表明,Si/PSA玻璃柱回收率最稳定,平均回收率在92.5%～102.3%之间,Qasis HLB次之,回收率在85.9%～104.7%之间,C18的回收率为76.7%～88.3%,硅胶柱的回收率为71.8%～102.1%。水样加入经Si/PSA玻璃小柱富集净化,用乙腈洗脱后浓缩近干,用正己烷定容至1mL,采用内标法定量。6种PAEs在20.0～500.0μg·L~(-1)浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.998,在3个加标水平下,回收率在89.4%～99.6%之间,精密度在1.11%～4.75%之间,方法检出限均低于0.2μg·L~(-1)。采用该方法分析6个实际水样中的PAEs,发现所有水样中均有邻苯二甲酸酯类物质残留,回收率在85.9%～101.3%。该法回收率稳定,抗干扰能力强,灵敏度高,适用于水中痕量PAEs的批量监测。     

电感耦合等离子体发射光谱法检测废水中重金属离子

采用电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)检测实验室废水中7种重金属离子,对方法学进行了研究。结果表明,ICP-OES法检测重金属离子的准确度和精确度均较高,相对误差为0.07%～0.25%,相对标准偏差为0.000 2～0.000 8。采用ICP-OES法对实验室废水进行检测,铜离子、铁离子、铬离子、锰离子、钯离子、镉离子、锌离子的浓度分别为9.399 mg·L~(-1)、23.100 mg·L~(-1)、6.230 mg·L~(-1)、2.960 mg·L~(-1)、4.680 mg·L~(-1)、5.950 mg·L~(-1)和55.900 mg·L~(-1)。