新型双醛淀粉-SiO_2杂化材料固载纤维素酶及其酶学性能研究

利用溶胶-凝胶原理制备氨基化二氧化硅(Si O2-NH2),表面接枝双醛淀粉制备新型固载酶载体(Si O)2-DAS)。红外光谱(FT-IR)、固体核磁共振波谱(CP/MAS 13C-NMR)、X-射线衍射(XRD)和扫描电镜(SEM)表征Si O2-DAS分子结构。Si O2-DAS固载纤维素酶制备新型固定化纤维素酶,测试固定化纤维素酶的酶学性能,并与经典交联固定化酶(Si O)2-GA)和游离酶的酶学性能进行比较分析。结果表明,成功合成新型Si O2-DAS材料,所得Si O2-DAS固定化纤维素酶与Si O2-GA交联固载纤维素酶和游离酶相比,在较宽的温度和p H范围内保持酶活性。Si O2-DAS和Si O)2-GA两种固定化纤维素酶的米氏常数分别为1.6766 g×L-1和2.3060 g×L-1,游离纤维素酶的米氏常数为1.1856 g×L-1,试验表明Si O)2-DAS对底物的亲和能力更强,并具有良好的重复使用性和贮存稳定性。有关研究可为制备性能优良的杂化基质材料固载酶提供借鉴。     

复合纤维素固定化脲酶的研制

将脉酶吸附在纤维素载体上，再经过交联和包埋双重固定技术制备出活性高和稳定性好的复合纤维素固定化脲酶。     

壳聚糖载体柔性固定化木瓜蛋白酶

用酶柔性固定化模型,以壳聚糖为载体,双醛淀粉为柔性链,对木瓜蛋白酶进行柔性固定化. 通过对固定化条件的优化,得出选用壳聚糖、双醛淀粉制得的柔性载体(Chitosan-DAS50)在酶用量为14.4 mg/g(酶/干球)、pH 8的条件下,固定木瓜蛋白酶18 h,所得的固定化酶活力回收率达72%,相当于采用壳聚糖-戊二醛(Chitosan-GA)手臂载体的3倍. 结果表明,酶的柔性固定化模型可以改善传统共价结合法固定化及手臂固定化酶活力回收率不高的缺陷.     

酸性脲酶的固定化研究

以明胶为包埋材料,戊二醛为交联剂固定化粪产碱菌所产的酸性脲酶。对酸性脲酶的固定化条件(包括明胶含量、戊二醛浓度、吸附时间、交联时间和粗酶液用量)及酶学性质(温度和pH值)进行了研究。结果表明,固定化酶的最适宜条件为：明胶的质量分数15％,戊二醛质量分数0.3％,吸附时间4 h,交联时间20 min,粗酶液用量4 mL。...     

磁性壳聚糖微球的制备及其固定化乳糖酶的研究

采用水热法制备得到磁性Fe_3O_4纳米粒子,以壳聚糖、制备的Fe_3O_4为原料,采用乳化交联法成功制备了磁性壳聚糖微球,并通过SEM、FTIR、VSM、XRD对其进行表征。进一步以制备的磁性壳聚糖微球为载体,采用吸附法制备磁性壳聚糖微球固定化乳糖酶。以酶活力为考察指标,研究了不同固定化条件对制备固定化酶的影响,以及固定化酶的酶学性质。结果表明,乳糖酶的最佳固定化条件为:固定化时间4 h,pH为7.0,乳糖酶酶液浓度为0.6 mg/mL,固定化酶相对于游离酶的pH稳定性和温度稳定性均有一定程度的提高,固定化酶重复使用5次后,酶活仍保留65%以上。     

明胶膜固定化脲酶的制备及性质

以明胶为载体,戊二醛为交联剂,采用包埋-交联联用法制备了明胶膜固定化脲酶,其酶活力为6 07U/g载体,酶活力收率为66 1%。最优固定化条件是包酶量为10mg酶/g明胶,ρ(明胶)=100g/L,φ(戊二醛)=0 5%。研究了固定化酶的性质,并与游离酶作了比较,游离酶的最适pH=7 0,固定化酶的最适pH=6 5;游离酶的最适温度为60℃,固定化酶的最适温度升至70℃;固定化酶与游离酶的米氏常数Km分别为11 7mM和12 4mM;固定化酶在80℃下180min仍保留初始活力的10%,而游离酶几乎完全失活。固定化酶重复使用20次其活力仅下降15%,4℃下贮存35d后仍保持初始活力的55%。     

用于酶固定化的多胺化壳聚糖基载体的合成及性能表征

以构建性能优良的壳聚糖基固定化酶载体为目的,用反相悬浮交联法制备了壳聚糖微球,以其作为固定化载体基体,进一步制备了多胺化壳聚糖载体,分别优化了壳聚糖微球环氧化及胺化反应条件。最佳环氧化条件为:n(环氧氯丙烷)∶n(壳聚糖结构单元)=10∶1、50℃反应6 h,环氧基含量达3.32 mmol/g;最佳胺化条件为:n(四乙烯五胺)∶n(环氧基)=15∶1、55℃反应6 h,载体氨基含量可达4.55 mmol/g,高于未胺化微球的2.01mmol/g。用IR、SEM、XRD等对最终产物进行了表征。结果表明,制备的多胺化壳聚糖呈单分散球形,粒径220~300μm,表面较光滑,抗酸性能显著增强。采用该载体对木瓜蛋白酶进行固定化,固定化酶表观活力最高达146 U/g,活力回收率达51%,是采用未经多胺修饰的壳聚糖微球固定化的2~3倍。     

远程氩等离子体改性膜固定化脲酶的研究

利用远程Ar等离子体技术引发聚四氟乙烯(PTFE)膜表面接枝丙烯酸,并以此膜为脲酶的固定化载体。研究结果表明:在放电压力20 Pa、放电功率100 W、放电时间100 s的等离子体处理条件和接枝温度70℃、接枝时间50 h、单体体积分数26%的接枝条件下,PTFE膜表面丙烯酸接枝量为131.7μg/cm2;固定化脲酶接枝密度随PTFE膜接枝丙烯酸(AA)量的增加几乎呈线性上升,固定化酶活性开始随PTFE膜接枝AA量的增加而增加,随后趋于平缓增加。同时评价了固定化酶膜的稳定性,并对接枝膜和固定化酶膜的结构进行了表征。     

以壳聚糖为载体固定化青霉素酰化酶的研究

介绍了以壳聚糖为载体固定化青霉素酰化酶需首先制备壳聚糖颗粒 ,使用戊二醛、甲醛、乙二醛 3种活化剂处理所得的壳聚糖颗粒 ,确定了以戊二醛为活化剂交联其上的氨基共价结合青霉素酰化酶的固定化方法。从戊二醛的浓度、pH值、固定化时间、固定化pH值、酶用量等条件摸索了最佳固定化条件 ,获得了酶活力为4 0 0 0 0U/ (g·h)、回收率为 5 0 %左右的固定化青霉素酰化酶。     

固定化纤维素酶水解玉米秸秆的研究

以壳聚糖小球为载体固定纤维素酶,研究了固定化纤维素酶的酶学性质,并以经过蒸汽爆破预处理的玉米秸秆为底物,研究了固定化酶水解的最优条件.结果表明纤维索酶经过固定化后,其米氏常数为0.42 mg/mL,半衰期为162 h;酶解的最佳条件为固定化酶与底物的质量比为1:2.5、固液比为1:2.4(m/V)、温度为50℃,pH为5.0.秸秆水解率可达33%,纤维素水解率可达70%.     

等离子体引发PTFE膜固定化脲酶处理废水研究

采用等离子体引发聚四氟乙烯(PTFE)表面固定化脲酶,并利用固定化酶膜处理含尿素废水.研究发现,固定化酶处理900 mg/L的尿素废水,30 ℃以上的温度下1 h以内尿素转化率能保证在90%以上,并且固定化酶比活力不变.在固定化酶的稳定性测试中,1个月内固定化脲酶酶活保持不变.     

脲酶抑制剂的研究综述

在土壤脲酶的作用下,尿素能迅速水解生成氨和碳酸氢铵,易挥发损失,致使氮利用率低。脲酶抑制剂能有效抑制脲酶活性,延缓尿素分解,提高氮素利用率。本文简单介绍了土壤脲酶概况、脲酶抑制剂的作用机理和种类,综述了脲酶抑制剂的研究进展,并提出存在问题及发展方向。     

Urease activity in soybean meal products

Summary A method which uses direct titration of ammonia as a measure of urease activity was modified for use in the assay of raw and of slightly denatured soybean meal. The modifications which were adopted were the use of glutathione, a presoaking of the sample for 30 min. at 40°C., and making of the assay at 40°C. Data on the urease activity of several varieties of soybeans, and for immature and frost-damaged soybeans were determined. Presented at the meeting of The American Oil Chemists’ Society, Houston, Tex., Apr. 23–25, 1956. In military service. One of the Branches of the Agricultural Research Service, U. S. Department of Agriculture.     

固定化细胞技术应用研究进展

固定化细胞技术是酶工程的核心技术之一,它将酶工程提高到一个新水平.该技术简化了工业分离纯化的步骤,并使酶反应的连续生产成为现实.分析了固定化细胞的优缺点,介绍了固定化细胞的方法及其近年来在食品、发酵和三废处理行业的应用,并对其应用进行了展望.     

不同载体材料在脲酶固定化中的应用

脲酶可广泛应用于农肥科学、医学和环保监控等领域,但游离脲酶在溶液中很不稳定,易失活,不能长期贮存和重复使用,脲酶的固定化可以克服上述缺点.目前,已有很多载体材料用于脲酶的固定化,如多糖、聚合物、无机吸附剂等.对不同载体材料在脲酶固定化中的特点和应用进行了综述,并对脲酶固定化载体材料的发展前景做出展望.     

幽门螺杆菌尿素酶的纯化和鉴定

幽门螺杆菌超声波上清经DEAE SepheroseFastFlow和PhenylSepheroseCL 4B两步柱层析得到纯化的Hp尿素酶 ,免疫印迹显示有良好的抗原性。在pH8.0和 45℃条件下酶比活约为 2 6 5U mg ,SDS PAGE显示有 6 0 0 0 0和 30 0 0 0两个亚单位。经两步柱层析纯化后 ,Hp尿素酶回收率为 30 % ,纯化倍数达 11倍。连续纯化 3批显示工艺稳定 ,为Hp尿素酶基础研究和应用奠定基础。     

Urease immobilized on aminated butyl acrylate-ethylenedimethacrylate copolymer

Urease was covalently immobilized on a new acrylic enzyme carrier: aminated butyl acrylate-ethylenedimethacrylate copolymer. The enzyme retained 56% of its original activity. The properties of the free and immobilized urease were determined and compared. The Michaelis constant was found to be higher for the immobilized urease than for the free one, while maximum reaction rate was lower for the immobilized enzyme. The stability of urease against change in pH was considerably improved by the immobilization. The immobilized urease showed very good storage stability and reusability. Resistance of the enzyme against heat inactivation at 70°C, however, was not found to be improved.     

酶固定化研究进展

从吸附法、交联法、共价结合法、包埋法四个方面介绍了固定化酶的研究进展情况，并对改性载体——磁性高分子微球的研究情况作了总结。指出今后研究的主要方向是对天然高分子载体进行改性，开发新型、高效的固定化酶技术。