黄孢原毛平革菌选择性合成木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶

在黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)的限氮浸没式培养中，研究了不同条件对选择性合成木质素过氧化物酶(LiP)和锰过氧化物酶(MnP)的作用. LiP只在很窄的氮源浓度范围内(0.8~1.8 mmol/L)才能测到，而MnP在较宽浓度范围内(0.4~1.8 mmol/L)表现出较高的酶活水平. 培养基中缺乏Mn2+不能合成MnP，但可以得到活力较高的LiP. [Mn2+]在0.06~0.84 mmol/L时可获得LiP. 添加微量Mn2+即可获得较高活力的MnP，此后增加Mn2+对MnP的活力影响不大，直至浓度为3.36 mmol/L才表现出明显的抑制作用. 通纯氧可使LiP活力提高50%，但对MnP影响不大.     

曝气式反应器中木质素过氧化物酶的合成及对印染废水配制液的脱色处理

比较了黄孢原毛平革菌在3种生物反应器(搅拌式反应器、鼓泡式反应器、曝气式反应器)中合成木质素过氧化物酶(LiP)和锰过氧化物酶(MnP)的差异. 结果表明，曝气式反应器对酶的合成(尤其是LiP)最为有利. 考察了曝气式反应器中半连续培养和连续培养两种方式下酶的合成和橙I脱色情况，发现半连续培养可使培养体系长时间保持较高酶活力，置换比例为1/2时染料废水可连续脱色5批，脱色率达到90%以上，比脱色率在46.7 g/(g×d)以上. 连续培养条件下酶很快失活，废水的脱色率迅速下降. 在曝气式反应器中用半连续培养的方式(置换比例1/2)对实际印染废水进行处理，可处理废水4批，前3批脱色率达到90%以上，第4批有明显下降.     

白腐菌木素过氧化物酶发酵条件及其酶液对稻草降解的研究

研究营养条件对白腐菌合成木素过氧化物酶(ligninperoxidase,LiP)的影响。在最适培养条件下,第6天获得7560U/L的酶活。利用LiP粗酶液在体外直接降解稻草,3天后Klason木素的降解率为8.7%,经红外光谱分析其降解产物,推断LiP粗酶液在体外降解稻草的反应主要是氧化反应。     

白腐菌预处理对稻草化学组分及酶水解的影响

采用5株白腐菌预处理稻草,对预处理过程中产生的木质纤维素降解酶系以及稻草化学组分变化进行了分析,研究了预处理对后续纤维素酶水解效率的影响。研究结果表明,5株白腐菌在预处理期间(0~50天)均能检测到漆酶(Lac)、锰过氧化物酶(MnP)和纤维素酶(Cel)活性,但未检测到木质素过氧化物酶(LiP)活性。其中凤尾菇培养第20天Lac活性达到最高,为2244 U/L;平菇培养40天MnP活性最高,达771 U/L;凤尾菇和平菇的木质素降解选择性指数(SI)随着预处理时间延长呈上升趋势,培养至50天时平菇的SI达到1.87,比其它4株白腐菌表现出更好的选择性降解木质素能力。云芝4号、平菇和凤尾菇表现出良好的预处理效果,经此3菌株预处理50天的稻草粉,在每克底物20 FPU酶用量条件下用纤维素酶水解48 h,酶水解总糖转化率分别达到59.6%、56.3%和54.4%。     

碳源和Mn(Ⅱ)对白腐菌Panus conchatus产木素降解酶的影响

研究了碳源及二价锰离子Mn（Ⅱ）对白腐菌Panusconchatus产木素降解酶的影响。结果表明碳源的种类对标过氧化物酶（MnP）和漆酶（laccase）产生的影响有明显的差异。Mn(Ⅱ）对P．conchatusMnP和laccase的产生有明显调节作用。不加Mn(Ⅱ)条件下，P.cochatrus几乎不分泌MnP，而laccase在木素降解醇中占据了主导地位。加入并提高Mn（Ⅱ）浓度，MnP活力随之提高，而laccase活力却相应降低。     

氯过氧化物酶催化过氧化氢氧化水溶性偶氮染料的降解

水溶性偶氮染料的脱色降解是印染行业废水处理的技术瓶颈。研究水溶液中加入H₂O₂,氯过氧化物酶高效催化氧化偶氮染料（橙黄Ⅳ和皂黄）的主要发色基团的性能,探讨影响染料降解率的主要因素pH、温度、H₂O₂用量、氯过氧化物酶用量、染料初始浓度和反应时间等。结果表明,加入H₂O₂,氯过氧化物酶对橙黄Ⅳ和皂黄具有较好的脱色降解效果,橙黄Ⅳ在5 min的脱色率达91.02%,皂黄在7 min的脱色率达88.83%。通过液质联用技术测定了橙黄Ⅳ染料降解的中间产物及最终产物,并以此对降解途径进行初步推测。     

白腐真菌产锰酶及对酸性蓝45的脱色

为提高白腐真菌在自由悬浮条件下锰过氧化物酶(MnP)的产量,在培养液中投加打结棉线载体,通过载体投加量和培养条件的调整,在载体投加量370 g·L-1、转速130 r·min-1、温度37℃,葡萄糖和酒石酸氨的质量浓度分别为10 g·L-1和0.8 g·L-1条件下,MnP产量从自由悬浮培养的7.10提高到24.5 mkat,初始MnP也提前3 d出现.以370g·L-1载体投加体系为例,考察其对不同含量酸性蓝45的脱色效果,2 d内各含量染料的脱色率均超过94%,同时该体系对酸性蓝45具有一定重复脱色能力,重复脱色次数与染料的含量有关.     

云芝、脉射菌产木质素降解酶的比较研究

对两种白腐菌——云芝(Coriolus versicolor)和脉射菌(Phlebia radiata)在静置液体培养条件下最适产漆酶和赖锰过氧化物酶(MnP)的培养液组成进行了比较研究,同时,还对此二菌在产酶过程中还原糖的消耗与蛋白质积累变化进行了检测分析。     

外源调控对白腐真菌生物膜反应器的影响研究

研究了碳源、氮源及诱导物调控对白腐真菌生物膜反应器处理活性黑KNB染料废水的锰过氧化氢酶(MnP)活性及脱色率的影响。结果表明:葡萄糖、酒石酸铵和Mn~(2 )浓度分别为10g/L、0.2g/L和0.2mmol/L时,MnP活性及脱色率达到最高,分别为92.1 U/L及98.9%。MnP活性与脱色率之间有较好的正相关性,表明MnP是该体系的降解功能主体。     

灰树花漆酶的酶学性质及其脱色作用研究

通过对液体发酵灰树花漆酶的酶活、Km常数、温度和p H值的测定,探讨了Cu2+、Fe3+、Ca2+对漆酶酶活的影响,观察了漆酶对5种染料的脱色作用效果。结果表明:灰树花发酵液中漆酶氧化ABTS的Km为1.35×10-5mol·L-1,在p H值2~6的范围内均表现酶活,最适p H值为3.0,在25~70℃温度时范围内均有酶活,在50~55℃时酶活性最高。Cu2+、Fe3+、Ca2+对漆酶的活性均有抑制作用,Ca2+离子的抑制作用较弱。灰树花漆酶对甲基橙、甲基红、溴甲酚绿、甲基蓝和亚甲基蓝染料的脱色率分别为85.77%,81.10%,72.68%,22.02%和4.22%。介体ABTS对漆酶处理甲基蓝的脱色有促进效果,而对亚甲基蓝、溴甲酚绿和甲基红的脱色促进效果较弱,对甲基橙的脱色无促进作用。结论:本研究中灰树花漆酶最适p H值为3.0,在50~55℃时酶活性最高;灰树花漆酶对甲基橙、甲基红、溴甲酚绿染料的脱色效果理想。     

固定化黄孢原毛平革菌木素过氧化物酶的研究

用大孔吸附树脂进行黄孢原毛平革菌来源的木素过氧化物酶固定化试验,筛选出固定化效果较好的XAD7HP大孔树脂,研究了其固定化条件。结果表明,当树脂1.0g,酶液pH4.5,加酶量87.2U,吸附温度25℃,吸附4h,戊二醛质量分数0.2%,戊二醛处理时间120min,可获得最佳的固定化效果,固定化酶活力可达到16U/g(对载体)。     

活性染料染色废水的日光脱色降解

在太阳光照射条件下，使用铁(Ⅲ)-草酸盐络合物／H2O2对存在于水中三种中温型活性染料进行光催化降解研究，重点考察了太阳光的强度和活性染料的浓度对脱色降解反应的影响结果表明：太阳光的强度低于50001ux，染料的脱色率低于40％；在高于400001ux、照射60分钟脱色率高于98％，在高于900001ux时，照射10分钟，可使活性蓝MS脱色率接近100%，太阳光的强度越高，溶液中的染料浓度越低。     

Characterization of recuperating talent of white-rot fungi cells to dye-contaminated soil/water

This study was purposed to explore the decolorization of dyes by fungi on either a soil or in a liquid medium and to determine the application through batch shaking system. Two commercial dyes were decolorized and studied with four fungal strains in three media. Fungal growth is the best in malt extract/glucose medium for all organisms. Decolorization of reactive blue 220 and methyl red was investigated in soil medium by Trametes versicolor. These dyes were removed 91% and 80% for methyl red and reactive blue 220 respectively(dye concentration; 100 mg·L~(-1)) by both organisms. Enzymatic activities were monitored. Laccase(Lac) and manganese peroxidase(Mn P) were detected. MnP enzyme had important role for the dye decolorization. This study demonstrates that it is possible to decolorize some synthetic dyes, which would be highly advanced for dye containing wastewater and soil. These applications could be used for dye bioremediation.     

白腐真菌Hyprocrea lixii AH的产酶特性研究

为了确定白腐真菌(H.lixii AH)在SMA培养基中的最佳产酶条件,利用正交试验研究了藜芦醇、Cu2+以及表面活性剂(吐温)的用量对真菌H.lixii AH生长和产酶的影响.发现吐温80和低浓度Cu2+对真菌的生长有促进作用,过氧化物酶和多酚氧化酶受Cu2+影响最大,优选浓度均是0.2g/L.LiP、MnP和Lac...     

炉渣对3种染料的脱色作用

利用炉渣对活性藏青、酸性品红和碱性品红3种染料进行了吸附试验,研究了温度、炉渣的加入量、时间、pH等条件对炉渣脱色作用的影响。结果表明,炉渣对3种染料均表现出了较好脱色效果。     

Production and characterization of laccase and manganese peroxidase from the ligninolytic fungus Fomes sclerodermeus

Fomes sclerodermeus was grown on semi‐defined media based on yeast extract, peptone and glucose (YPG). The fungus produced a minimum basal level of laccase activity irrespective of culture medium. The highest laccase production (20 U cm^?3) was obtained in cultures supplemented with CuSO₄. Manganese peroxidase (MnP) could only be detected when MnSO₄ was added to the medium. None of the aromatic compounds tested stimulated further laccase or MnP production. Laccase and MnP stimulated by Cu²⁺ or Mn²⁺ respectively were purified. Two different laccase isoenzymes with the same molecular mass (67 kDa) and N‐linked carbohydrate content (3%) and a slight difference in their pI values (3.41 and 3.48) were characterized. In addition, two different MnP isoenzymes with the same molecular mass (47 kDa) and N‐linked carbohydrate content (4%) and different pI values (3.35 and 3.45) were characterized. Both enzymes showed good stability at 25 °C and over a wide range of pH. Both laccases oxidize ABTS (2,2′‐azino‐bis(3‐ethylbenzthiazoline‐6‐sulfonic acid) more efficiently than 2,6‐dimethoxyphenol (DMP) with similar efficiency values (K_cat/K_m) while the MnP I, the major peroxidase isoenzyme in the studied conditions, oxidizes the Mn²⁺ and Mn‐mediated activity on DMP more efficiently than MnP II. Copyright © 2006 Society of Chemical Industry