大肠杆菌一面包酵母种间耦合ATP再生系统中生物合成谷胱甘肽

利用混合悬浮培养的方法，构建了一个由重组大肠杆菌的谷胱甘肽生物合成酶系与面包酵母的糖酵解途径组成的ＡＴＰ再生系统，验证了该系统用于谷胱甘肽（ＧＳＨ）生物合成的可行性。研究了葡萄糖浓度、细胞量对耦合系统合成ＧＨＳ能力的影响，讨论了所构建的ＡＴＰ再生系统的ＧＳＨ合成能力较低的可能原因。     

重组大肠杆菌全细胞催化合成β-丙氨酸

以L-天冬氨酸为原料,利用重组大肠杆菌全细胞合成β-丙氨酸,考察了pH调节剂、温度、底物初始pH、金属离子、辅酶添加量、底物浓度等因素对β-丙氨酸合成过程的影响。结果表明,在以氨水调节底物pH至6.5、温度60℃、底物质量浓度100 g/L的优化条件下,β-丙氨酸产量为24.0 g/L。研究发现反应过程中pH会不断升高,对全细胞转化产生不利影响。通过流加底物L-天冬氨酸,可解除pH升高对酶活性的抑制作用,从而提高生产效率,解决了重组菌生产β-丙氨酸受pH影响的问题。在此条件下转化仅7 h,β-丙氨酸的产量可达到24.2 g/L,生产效率提高了43%。     

柄蓝状菌原生质体的制备与再生条件优化

为了建立以聚乙二醇/氯化钙（PEG/CaCl2）原生质体介导的柄蓝状菌（Talaromyces Stipitatus）高效的遗传转化系统,分别从材料选择,真菌菌龄,不同的渗透压稳定剂,酶的不同种类配比,酶的浓度,酶解时间及不同再生方式对柄蓝状菌EMM原生质的制备与再生条件进行优化。结果表明:以柄蓝状菌EMM 接种生长48 h的菌丝为制备材料,1 mol/L MgSO4作为渗透压稳定剂,菌丝在温度为30 ℃,浓度为50 mg/mL的裂解酶溶液中酶解3 h,得到的原生质体先用再生培养基孵化培养12 h,然后再与PDA培养基混合铺板,以上组合条件下原生质体的释放量可达8.73×108 /mL,再生率可达17.7％。     

CuCl2/Al2O3催化氮杂环的N-芳基化反应

研究了以CuCl2/Al2 O3作为金属铜催化剂高效催化氮杂环与卤代芳烃的N-芳基化反应制备N-芳基杂环化合物.实验结果表明:在无有机配体存在下CuCl2/Al2O3催化剂具有良好的催化活性和重复使用性.以咪唑与碘苯的反应作为模板反应优化反应条件,考察了反应物配比、催化剂种类、碱的种类、溶剂的选择、反应温度以及反应时间等因素对反应收率的影响,确定了最佳反应条件,在此条件下制备N-苯基咪唑的收率达99％.而且,所选择的催化反应体系可应用于合成一系列N-芳基杂环化合物.     

CuCl2/Al2O3催化氮杂环的N-芳基化反应

研究了以CuCl2/Al2O3作为金属铜催化剂高效催化氮杂环与卤代芳烃的N-芳基化反应制备N-芳基杂环化合物.实验结果表明:在无有机配体存在下CuCl2/Al2O3催化剂具有良好的催化活性和重复使用性.以咪唑与碘苯的反应作为模板反应优化反应条件,考察了反应物配比、催化剂种类、碱的种类、溶剂的选择、反应温度以及反应时间等因素对反应收率的影响,确定了最佳反应条件,在此条件下制备N-苯基咪唑的收率达99%.而且,所选择的催化反应体系可应用于合成一系列N-芳基杂环化合物.     

酶促合成鱼油多烯脂肪酸维生素E酯的研究

以维生素Ｅ和鱼油为原料制备的ω－ＰＵＦＡ为底物,对脂肪酶Ｌｉｐｏｚｙｍｅ酶促合成鱼油多烯脂肪酸维生素Ｅ酯的反应进行了研究。结果表明：在正己烷溶剂反应体系中,当底物质量分数配比（ＶＥ／ＰＵＦＡ）为２：１时,３７℃下搅拌速率为２００ｒ／ｍｉｎ,加入４Ａ分子筛,反应４ｈ,酯合成转化率可达７８．５０％。     

酶解淡水鱼鳞制备水解胶原蛋白的研究

测定了几种常见淡水鱼鳞的基本成份和氨基酸组成,研究了酶解鱼鳞制备水解胶原蛋白的工艺,并采取正交实验对水解条件进行了优化.结果表明淡水鱼鳞主要由蛋白质和灰分组成,粗蛋白含量高达55%以上;氨基酸组成显示淡水鱼鳞羟脯氨酸含量丰富,是制备水解胶原蛋白的良好原料.正交实验结果表明:55℃、酶与底物比(E/S)为3%、酶解2h、底物浓度100g/L时水解效果最好,此时,水解产物分子量较小,且分布集中.     

分光光度计法测定磷脂酶A1酶活条件优化

优化了分光光度计法测定Lecitase Ultra的磷脂酶A1活力的相关参数。根据单因素实验结果选择底物浓度、酶稀释倍数、pH值3个因素进行正交实验,经分析得到酶活测定的最佳条件为:酶稀释倍数为1 250倍,缓冲体系pH值为6.5,离子强度为50 mM,底物浓度为6%,终止酶反应方式为加入0.4M TCA溶液。优化后酶活最高值为4 876.9 U/mL,较原工艺提高了18.42%。     

双水相体系中甾类化合物6-甲基氢化可的松的生物转化研究

双水相体系作为一种新型生物反应体系,与其他反应体系相比,双水相体系具有生物相容性高、反应条件温和以及实现生物反应-产物分离耦合等优点.利用简单节杆菌Arthrobacter sim-plexUR016在PEG/Dextran双水相体系中对6-甲基氢化可的松进行Δ1脱氢制备6-甲基泼尼松龙,对双水相体系的组成进行了选择和优化,研究得到的最佳转化体系组成和配比为16%PEG20000/4?xtran40000.在构建的此双水相转化体系中最适6-甲基氢化可的松底物加入量为4.5 g/L,转化48 h,6-甲基氢化可的松的转化率可达到95.72%,较水相脱氢转化率提高了25%~30%.     

水解松仁蛋白用酶的最佳工艺条件

为了充分利用松仁中的蛋白质，将其酶解制备活性多肽，分别对7种蛋白酶进行水解实验。用pH-stat法控制水解度，用福林-酚法测定吸光度，计算氮溶指数。通过正交实验得出如下结果：最佳用酶是Asl．398中性蛋白酶。最佳水解条件为：温度50℃，pH=7．0，底物浓度1．2％，酶与底物比4000U／g蛋白。     

营养蛋白奶粉的研究

本文根据动植物蛋白质互补的原理研究优质的营养蛋白食品。利用花生、大豆和鲜奶生产的营养蛋白奶粉是一种优质营养食品。文章较详细地介绍了营养蛋白奶粉生产的理论依据、配方设计及生产过程。     

质构化蛋白及仿肉食品研制

本研究利用分子重组技术使低温脱溶蛋白粉发生质构化,使其具有瘦肉状纤维组织结和一定的咀嚼感,并通过添加调味料和风味物质,制成口感好、营养价值高的各种仿肉食品,并进行灭菌和货架期研究,从而加工成方便的袋装食品,贷架期达6个月以上.     

不同蛋白质含量的同品种大麦中热稳定蛋白质及泡沫蛋白质的变化

利用Bradford法和SDS-PAGE电泳技术进行分析,直观地比较了不同蛋白质含量的同品种大麦中热稳定蛋白质与萌发过程中泡沫蛋白质的含量及组成.结果显示,大麦中热稳定蛋白质含量与大麦总蛋白质含量呈正相关,同品种大麦在热稳定蛋白质及泡沫蛋白质含量上虽然存在差异,但其蛋白质组成基本相同;在发芽过程中,高蛋白质含量大麦中的...     

不同蛋白质含量的同品种大麦中热稳定蛋白质及泡沫蛋白质的变化

利用Bradford法和SDS-PAGE电泳技术进行分析,直观地比较了不同蛋白质含量的同品种大麦中热稳定蛋白质与萌发过程中泡沫蛋白质的含量及组成。结果显示,大麦中热稳定蛋白质含量与大麦总蛋白质含量呈正相关,同品种大麦在热稳定蛋白质及泡沫蛋白质含量上虽然存在差异,但其蛋白质组成基本相同;在发芽过程中,高蛋白质含量大麦中的泡沫蛋白质含量略高于低蛋白质含量的大麦。此实验数据及方法可为评估大麦以及预测麦芽和啤酒泡沫的品质提供借鉴。     

非格子模型的蛋白质设计方法

为了克服双重蒙特卡罗方法用于较大分子体系及非格子模型的困难,提出了一个基于相对熵的蛋白质设计的简单方法.利用非格子模型,以16个处于天然稳定态的真实蛋白质为目标结构进行测试,成功率可达75.9％.与其他利用Monte Carlo方法搜索序列空间的方法相比,该方法更为快速有效,在很大程度上节省了对序列空间的搜索.     

酶法制取棉籽蛋白乳化剂的探索

在棉籽蛋白水解过程中,影响水解物乳化性能的主要因素是酶浓度、底物浓度(常用固液比表示),温度、反应时间和反应体系的pH值。中性蛋白酶水解可以显著提高棉籽蛋白的乳化能力。在45℃,pH6.5～7.0,酶浓度20.0×10~(-3)g/g粉(活力21000IU),固液比1:6的条件下水解6.5小时,乳化度可以从56％增加到82％,乳化稳定度从6.4％增加到23.4％。     

动态-静态混合的时序蛋白质网络构建方法

目前已公开的蛋白质网络多为静态网络,不能有效描述细胞中蛋白质的动态活动特点.通过融合基因表达数据,研究人员可以构建出描述蛋白质动态性的时序蛋白质网络.现有方法假设所有蛋白质都是动态变化的,而事实上除动态蛋白质外细胞中还包含相对稳定的静态蛋白质.为此,提出了一种基于动态-静态蛋白质混合的时序网络构建新方法.该方法根据基因表达变化情况将蛋白质分为动态和静态两类,并在构建各时刻网络时考虑动态与静态蛋白质之间的相互作用关系.实验结果表明,利用本文方法构建的时序蛋白质网络可以提高蛋白质复合体识别的准确性,从而验证了本文方法的可行性.     

前处理工艺对蚕蛹蛋白纤维性能的影响

研究了染整加工前处理工艺条件对蚕蛹蛋白纤维长丝性能的影响.分析了不同pH值溶液中蚕蛹蛋白长丝的强力变化;研究NaClO漂白和H2O2漂白的工艺参数（pH值、温度、漂白剂质量浓度）对蚕蛹蛋白长丝强力及蛋白质含量的影响.实验结果表明,蚕蛹蛋白纤维在热定型温度范围内,稳定性较好;pH=5时,纤维的强力损失最小,pH在4-10时,纤维的损伤较小;蚕蛹蛋白纤维较适合用H2O2漂白,较适合的漂白工艺参数为：温度不宜超过80℃,pH为10左右,H2O2（30%）质量浓度在4-6 g/L.     

影响棉子蛋白酶法水解的因素

棉子蛋白酶法水解的效果取决于酶的相对活力(RA).影响相对活力的主要因素是酶浓度、蛋白质浓度、温度、p~H值和时间.本文研究了这些因素与微生物蛋白酶相对活力的相互关系.     

酶促水解对大豆蛋白热凝结性的影响

酶促水解可以显著提高大豆分离蛋白的热凝结性。本课题采用微生物蛋白酶部分水解方法，使大豆分离蛋白的热凝结度从９．３％增加到３５．６％，酸性溶液中的氮溶解率从５．７％增加到４８．１％。拓宽了大豆分离蛋白的应用范围。