食品中磺胺类药物化学发光酶联免疫检测试剂盒的初步研究

在常规酶联免疫法的基础上,将磺胺类母核与牛血清白蛋白合成免疫抗原后免疫小鼠制得磺胺类单克隆抗体,并进一步优化抗体工作浓度、反应时间等实验参数,建立了一种简便、快速、精确的磺胺类残留一步式化学发光酶联免疫检测方法.结果表明该方法最佳检测范围为1.0～81.0 ng/mL,检测IC50达3.047 ng/mL,对猪肉的最低检测限为0.74 ng/g,可检出国际规定的SAs残留标准底限值以下的残留量.与常规ELISA方法相比,检测限和灵敏度基本一致,但反应时间缩短了60 min.证明采用一步式化学发光酶联免疫检测磺胺类残留可以大幅度缩减检测时间,符合快速检测的要求.     

基于上转换免疫层析技术的真菌毒素检测

针对目前检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的常用方法在检出时间或者灵敏度上都存在不足的问题,研究制备出了羧基修饰的核壳结构上转换荧光纳米颗粒,并与DON单克隆抗体偶联,应用于试纸对DON进行定量检测.对麦片中DON含量的最低检测限为0.7 ng/mL.半抑制浓度为9 ng/mL,检测范围为0.7~50.0 ng/mL,回归率在90%~156,.本研究基于上转换免疫层析技术成功建立了一种快速灵敏的检测DON的方法,可为其他包括毒素类的兽药残留检测提供借鉴.     

3-硝基酪氨酸人工抗原的合成与鉴定

通过戊二醛法将3-硝基酪氨酸与卵白蛋白(OVA)偶联,制备人工抗原,并用作免疫抗原。用紫外扫描法和聚丙烯酰胺电泳法对其进行鉴定,用BCA法测定二者结合物的质量体积分数,并测得结合物的偶联率。3NT与OVA结合物的质量体积分数为1.69 mg/mL。SDS-PAGE电泳测定其分子量大于43KD。紫外分光光度法测定二者结合物与游离的3NT与游离的OVA之间存在漂移,说明3NT偶联到结合物上,估算其偶联率为5.4。用结合物免疫BALB/C小鼠,间接ELISA测定多抗上清(pAb)效价,获得了高效价的pAb。     

抗氨甲酰化蛋白抗体的制备及其ELISA检测方法的建立

为了制备抗氨甲酰化蛋白抗体,探讨了氨甲酰化与瓜氨酸化之间的关系,开发氨甲酰化蛋白检测试剂盒。以牛血清白蛋白(BSA)和氰酸钾(KCNO)为原料合成人工完全抗原(Hcit-BSA),然后免疫新西兰大白兔和BALB/c小鼠,获得抗血清,间接ELISA测定抗体效价,用方阵实验确定抗体最佳稀释倍数和包被抗原的最佳包被浓度,间接竞争ELISA检测抗体特异性。结果表明:抗体效价大于1∶8 000,抗体最佳稀释倍数为1∶4 000,包被原最佳包被浓度为0.25μg/mL,抗体能特异性识别氨甲酰化产物(carbamylation-derived products,CDPs)。Hcit-BSA具有较强免疫原性,使BALB/c小鼠产生抗氨甲酰化蛋白抗体,也为建立一种简便、快速、特异性强的免疫分析方法奠定了基础,为一些疾病的早期快速检测提供了可能。     

赭曲霉毒素A的抗原设计及在免疫分析中的应用

赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)是一种重要的生物毒素,其广泛存在于谷物和其他植物性食品中。食品中的OTA残留进入人体后会对健康造成危害。为快速便捷地对OTA进行检测,本文以OTA为原料,设计合成了结构更加合理的新的OTA半抗原(OTA-H1),制备了OTA的完全抗原(OTA-H1-BSA, OTA-H1-OVA),并进行了小鼠免疫实验,建立了OTA间接竞争酶联免疫分析法(ic-ELISA)。采用核磁氢谱、核磁碳谱和高分辨质谱对OTA半抗原结构进行表征,结果表明半抗原结构正确;利用OTA-H1-BSA作为免疫抗原免疫Balb/c小鼠,小鼠血清效价为8 000,表明该免疫抗原对OTA具有一定的抑制作用;利用以OTA-H1-OVA作为包被抗原建立的间接竞争酶联免疫分析法检测小麦样品时,IC₅₀为0.04 ng/mL,灵敏度较原有方法提高了30倍。本方法可用于小麦样品中OTA的快速检测。     

人参皂苷Rb1单克隆抗体的制备与鉴定

用人参皂苷Rb1分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)反应合成了交联抗原GRb1-BSA(GRb1与BSA的结合比为10∶1)和GRb1-OVA(GRb1与OVA的结合比为8∶1)。以GRb1-BSA为免疫原,分5次免疫3只BALB/C小鼠,取免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合,Hat筛选,有限稀释法克隆。建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系。采用ELISA(酶联免疫吸附测定)间接法和竞争法检测抗体的特异性。结果获得了一只小鼠分泌抗体效价达1∶16000,并获得两株分泌GRb1的单克隆抗体的细胞系,分别命名为1F7和1G3,单抗检测显示在0.01~1μg/mL呈线性关系,GRb1的检测范围达50~350 ng/mL,两株单抗针对相同的抗原决定簇,制备的单克隆抗体可用于GRb1含量的检测和分离。     

克伦特罗酶免检测试剂盒的评价

以自制克伦特罗酶免检测试剂盒与德国r-B iopharm公司生产的试剂盒对比,从稳定性、重复性、特异性、灵敏度、精度、检测范围、IC5和检测时间多个角度对本产品进行了质量评估,结果显示,各项参数均接近于德国r-b iopharm公司的试剂盒。批间C.V.%<15%,批内C.V.%<10%,检测灵敏度可达到0.096ng/mL。ED50稳定在1.22ng/mL左右。检测精度在80~110%之间;检测范围为0.24~9.45ng/mL;检测时间小于2h。     

PD-1抗体表达载体的构建以及其功能的探究

通过构建含PD-1抗体基因的重组腺病毒表达载体Ad35-anti-PD-1,表达的PD-1抗体以探究其对细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)抗肿瘤功能的影响。用ELISA实验检测Ad35-anti-PD-1在293细胞中PD-1抗体的表达量;利用Protein G亲和层析法纯化PD-1抗体;通过体外杀伤实验研究PD-1抗体阻断PD-1信号通路的CTL杀伤肝癌细胞能力的变化。显示成功构建重组腺病毒载体Ad35-anti-PD-1,滴度为1×1010 pfu/mL;ELISA实验检测在72h时293细胞上清中PD-1抗体的表达量约在600ng/mL;Westernblotting实验证明PD-1抗体包含正确的重链(50kD)和轻链(25kD);ELISA实验检测从100mL细胞上清中得到1mL浓度在40μg/mL的PD-1抗体;体外杀伤实验证明CTL在添加PD-1抗体的环境中杀伤肝癌细胞的能力显著增强。     

大豆球蛋白兔源多克隆抗血清的制备及其免疫学特性鉴定

为建立大豆球蛋白致敏原检测方法和蛋白致敏性亚基的表位定位,从脱脂豆粉中分离纯化大豆球蛋白,制备多克隆抗血清,并进行免疫学特性分析。大豆球蛋白等电点pH值为6.4,采用碱溶酸沉法对大豆球蛋白进行粗提,用Sepharose CL-6B层析纯化大豆球蛋白粗提物,用SDS-PAGE检测蛋白纯度,免疫新西兰兔制备多抗血清,并对血清进行免疫学特性鉴定。结果表明:1号兔效价达到1∶6×10^4,由间接竞争ELISA抑制曲线可知,半数抑制率IC50为527 ng/mL,1号兔的多抗血清敏感性最高。特异性测定结果表明,该多抗血清除了与β-伴大豆球蛋白和花生蛋白的交叉反应率为8.6%和4.6%,与其他蛋白交叉反应率均小于0.2%。制备的兔源多抗血清效价高、敏感性强、特异性好,为大豆球蛋白单克隆抗体的制备及大豆蛋白致敏性亚分子结构的定位奠定了基础。     

三聚氰胺单克隆抗体的制备及鉴定

制备了抗三聚氰胺(melamine)单克隆抗体,鉴定了其免疫学特性并建立三聚氰胺标准抑制曲线。以人工合成抗原Melamine-BSA免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术建立分泌抗三聚氰胺单克隆抗体的细胞株,以体内诱生腹水法生产三聚氰胺单抗,用硫酸钠盐析法提纯,以直接竞争ELISA法建立三聚氰胺标准抑制曲线。获得了1株能稳定分泌抗三聚氰胺单克隆抗体的杂交瘤细胞株H2C6。用间接ELISA方法测定腹水单抗效价为2×10-7。经金标免疫层析实验鉴定单抗与三聚氰胺特异性结合,H2C6杂交瘤细胞株单抗对三聚氰胺的半数抑制浓度(IC50)为4.15μg/mL。除与三聚氰酸交叉反应性为72%外,与三嗪及各类抗生素等交叉反应性都小于5%。体外多次传代培养和反复冻存复苏后抗体分泌稳定。     

《安徽建筑工业学院学报》引文分析

根据《安徽建筑工业学院学报》２８８篇文章的引文数量、类型、语种的统计分析,从中看出《学报》作者利用专业文献的特点及规律,为图书情报部门做好文献服务工作提供了可靠的参考依据。     

氯氧化镁生成热的测定

利用氧化镁与2.5mol/L氯化镁溶液反应制备氯氧化镁(A)和(B)。在微量量热计上测得样品在2.163mol/L盐酸中的溶解热,据溶解热与比值n的关系求得(A)和(B)的溶解热,进而获得它们的生成热。     

桑茄蒂公司面粉气力压运系统设计计算方法的分析

通过对桑茄蒂公司气力压运系统设计计算方法的分析，归纳出该方法的适用范围，并得到实际工艺的验算证明。     

砌体结构弹性模量取值方法

砌体结构中的一个重要力学参数是弹性模量。本文总结了国内外砌体结构弹性模量取值,评述了其取值原则,指出了进一步研究砌体弹性模量的方向及应考虑的问题。     

一类LP问题算法的改进

对单纯形法的基本理论进行了简化处理,并给出了更加直观的证明,从而,总结出单纯形法迭代的“二看一算”规则。     

智能小区实验室设计

本文通过我院智能小区实验室设计方案的论述,着重讨论了智能小区实验室的建设模式.     

五种桉木制浆性能的比较

对5种桉木进行了原料分析，同时在用碱量(Na2O)17％、硫化度25％、液比1：4、升温时间2h、保温2h、最高温度170℃的优化工艺条件下进行了蒸煮实验，进而对其综合制浆性能进行了比较。     

Rastrites guizhouensisMuetal.的胞管形态

利用扫描电镜观察Ｒａｓｔｒｉｔｅｓｇｕｉｚｈｏｕｅｎｓｉｓ的超微形态,胞管孤立部分直管状,中部稍膨胀,向末端收缩变小并向腹侧弯曲成小钩状,背部末端弯曲时形成膝弯,腹侧则形成加厚的下口唇和三角形的凹陷唇口窝。Ｒａｓｔｒｉｔｅｓｇｕｉｚｈｏｕｅｎｓｉｓ胞管的形态与一些孤立的：Ｍｏｎｏｇｒａｐｔｕｓｃｏｎｖｏｌｕｔｕｓ,Ｍｏｎｏｇｒａｐｔｕｓｄｅｎｔｉｃｕｌａｔｕｓ．的胞管可以对比。     

对建筑设计中美学原理的分析

凡符合艺术性的建筑都必须遵守形式美的规律,建筑师通常称之为建筑构图原理,它的产生、发展和形成,是人类通过长期反复实践、认识而总结出来的.从建筑形式美的基本规律入手,进一步分析和探讨了建筑师们所关注的建筑构图原理以及通常运用的表达手法.     

覆盖数的一类关系

本文研究了图及其补图的覆盖数、边覆盖数与全覆盖数之间的关系。