假单胞菌Y8产壳聚糖酶的培养条件

对假单胞菌Y8产壳聚糖酶培养条件进行研究，得到一个比较优化的培养条件为：pH值6．5，温度32℃，壳聚糖3g／L，酵母膏质量分数0．3％，培养时间3d．不同金属离子及不同诱导物对酶合成的影响表明：Fe^2 激活作用显著，而Mg^2 ，Zn^2 ，Mn^2 则具有一定的抑制作用，壳聚糖和氨基葡萄糖对壳聚糖酶的产生都有较好的诱导作用。     

海洋壳聚糖酶高产菌株的筛选和鉴定

从采自连云港连岛海域的海泥中通过透明圈平板筛选法（以胶体壳聚糖为唯一碳源）筛出28株壳聚糖酶产生菌,经过复筛,选取了其中产酶能力最高的菌株为目的菌株,其酶活力达到3.89U/mL。经过形态观察、生理生化和16S rDNA鉴定,将该菌初步鉴定为交替假单胞菌（Pseudoalteromonas sp.）。     

产壳聚糖酶菌株的单因素及复合条件诱变育种

以产壳聚糖酶菌株M2为出发菌株,分别采用紫外线诱变、亚硝酸钠诱变及两者的复合诱变方式对其孢子悬液进行诱变处理,以获得高产壳聚糖酶的突变菌株为目的。结果表明,突变株的酶活力高达8.135 U/mL,比原始出发菌株提高了1.381倍。经比较分析验证,复合诱变的方法是寻找高活力突变菌株的较好方法,而单因素的紫外诱变方法也具有简单快捷的优势,复合诱变比紫外线诱变后的产壳聚糖酶菌株酶活力提高了25.15%,比亚硝酸钠诱变后的菌株酶活力提高了32.82%。     

产壳聚糖酶菌株的诱变育种及其产酶条件研究

通过在培养基中加入不同种类的抗生素,对壳聚糖酶产生菌株Penicillium sp.ZD-Z1进行筛选,再经紫外诱变得到一株产酶活力较强的菌株,活力为0.58 U/mL.采用三因素(温度、pH、转速)四水平正交分析,所得到菌种最适产酶培养条件为:28℃、培养基初始pH4.5、摇瓶培养转速190 r/min.用发酵粗酶液对4%壳聚糖(相对分子质量290 000)水溶液进行降解实验,水解24 h后测得黏均相对分子质量为1 920,降解效果显著.     

固定化Penicillium sp.ZD-Z1降解壳聚糖的研究

采用六种不同的载体对Penicillium sp.ZD-Z1菌进行了固定化,多孔聚氨酯泡沫固定化效果最佳.在固定化生物反应器中同时产酶和降解壳聚糖,确定了菌体固定化的最佳条件为: 载体用量为0.4g载体/50 mL培养基、pH为5.0、摇瓶培养48h;在30℃、通气量为0.1m3/h条件下,连续进行18批同时产酶降解试验.结果发现,壳聚糖酶活力和壳聚糖降解效率保持稳定,每批产生的壳聚糖酶活力可达0.128 U/mL以上,壳聚糖的黏均分子量可以降解到4 kDa以下.     

壳聚糖酶产生菌的筛选、鉴定及其产酶条件优化

从15份土样和5份水样中筛选到一株产酶能力较高的细菌,经鉴定归为假单胞菌属(Pseu-domonas sp.),该菌产生的壳聚糖酶为诱导酶.产酶条件优化实验结果表明,产酶培养基组成为:壳聚糖10 g/L,MgSO4·7H2O 0.5 g/L,KH2PO4 2.0 g/L,K2HPO4 1.0 g/L,NaCl 0.5 g/L,CaCl20.2g/L;最佳培养条件为:培养温度30 ℃,摇床转速180 r/min,培养基起始pH 6.0,培养时间60 h,添加0.2%的蔗糖或酵母浸膏有利于产酶,在优化的培养条件下产量可达1.35 U/mL.     

细菌BK2产壳聚糖酶的发酵条件及壳寡糖的制备

优化了菌株BK2发酵产壳聚糖酶的条件:葡萄糖20 g/L,壳聚糖0.3 g/L,硝酸铵15 g/L,接种量1.5%(107cell/mL),发酵起始pH 6.0,发酵温度30℃,培养时间48 h.BK2发酵液中的壳聚糖酶活力可达到1.29 U/mL.用酶液降解壳聚糖,分离提取粗产品,采用薄板层析法进行组分分析.分析结果表明,壳聚糖已被降解成含有不同分子质量的壳寡糖混合物.     

细菌BK2产壳聚糖酶的发酵条件及壳寡糖的制备

优化了菌株BK2发酵产壳聚糖酶的条件：葡萄糖20g／L，壳聚糖0．3g／L，硝酸铵15g／L．接种量1，5％（10^7 cell／mL），发酵起始pH6．0．发酵温度30℃．培养时间48h．BK2发酵液中的壳聚糖酶活力可达到1．29U／mL．用酶液降解壳聚糖，分离提取粗产品，采用薄板层析法进行组分分析．分析结果表明．壳聚糖已被降解成含有不同分子质量的壳寡糖混合物，     

产脂肪酶细菌的筛选及产酶条件优化

从富油土壤中分离到9株产脂肪酶杆菌,其中BD3菌株产脂肪酶能力较强,通过测定其生理生化特征,初步鉴定该菌为假单胞菌属.对BD3菌株的发酵培养条件进行了优化,以橄榄油作碳源,蛋白胨为氮源,其发酵最佳温度为40℃,最佳pH值为6.5.     

假单胞菌H3壳聚糖酶的固定化研究

分别采用纳米CaCO3吸附法、聚丙烯酰胺(PAG)包埋交联法和DEAE-22纤维素交联法固定化假单胞菌H3壳聚糖酶,结果表明:以DEAE-22纤维素为载体、戊二醛为交联剂的固定化方法较优,酶活保留率达91.4%;此外,还确定了DEAE-22纤维素交联法的固定化条件为:DEAE-22纤维素载体0.5 g,3.5%戊二醛交联剂20 mL,给酶量为15 mg,固定化温度为4℃,固定化时间为12h;壳聚糖酶在经固定化后,最适温度为50℃,最适pH为4.5,并表现出比游离酶更高的热稳定性,固定化酶的米氏常数Km值为14.29 g/L;将该固定化酶重复使用12次,固定化酶的活力降低到75%,具有较好的操作稳定性.