农杆菌介导的优良玉米自交系遗传转化体系的建立

以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系340,4112为材料，用带有质粒pGBIL04(actin.Bt.35S.bar)的根癌农杆菌LBA4404转化其幼胚及其初始愈伤组织，经PPT抗性筛选后分化再生植株，PCR分子检测初步证明Bt基因已整合到再生植株基因组中，转化率为1.68%-4.44%。本实验利用转化受体的抗性筛选频率对转化体系进行了优化，结果表明：比较适宜的感染液浓度为OD600=0.5；预培养有利于幼胚转化，预培养时间以刚刚诱导出新鲜稳定的初始愈伤为宜。适当降低共培养温度到22℃可以提高农杆菌介导的玉米遗传转化的筛选频率和PCR阳性率。     

抗虫基因（CpTI）辣椒转化的初步研究

以辣椒叶片为外植体，通过比较基因型、培养基成分等因素对不定芽分化的影响，建立了具有较高分化频率的再生系统。有农杆菌介导把豇豆胰蛋白酶抑制剂（CpTI）基因导入辣椒。在筛选培养基上获得抗性植株，经Southern斑点杂交检测，初步证实外源基因已整合到辣椒基因组中。     

大豆外源基因遗传转化的研究现状及展望

用于大豆遗传转化的方法有很多，如农杆菌介导法、电击/PEG电击、基因枪、花粉管通道等。本文对这些方法在大豆上近些年的研究和应用现状（大豆品质改良、抗病和抗虫等）进行了阐述，并对各种转化方法存在的不足和今后应解决的主要问题和研究目标作了概述。     

大豆外源基因遗传转化的研究现状与展望

用于大豆遗传转化的方法有很多，如农杆菌介导法，电击／ＰＥＧ电击，基因枪，花粉管通道等。本文对这些方法 在大豆上近些年的研究和应用现状（大豆品质改良，抗病和抗虫等）进行了阐述，并对各种转化方法存在的不足和今后应解决的主要问题和研究目标作了概述。     

用基因枪将P1结构蛋白基因转入玉米及其转基因植株再生研究

在构建口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus，FMDV)结构蛋白P1基因植物表达载体pBIl31SPl的基础上，以玉米自交系8902、340和4112的Ⅱ型胚性愈伤组织为受体，用基因枪轰击法转化玉米，获得抗性再生植株。GUS染色证明外源目的基因在玉米细胞和组织中得到了表达。PCR检测、PCR-Southern杂交、点杂交鉴定证实目的基因P1已整合到再生植株的基因组中，获得了转基因玉米再生植株。     

玉米Ubiquitin启动子的克隆及功能鉴定

根据Cornejo发表的Ubiquitin启动子的序列,设计引物从玉米自交系18红中克隆出该启动子,测序证明与发表的序列具有98%的同源性,并构建了带有该启动子和GUS基因的植物表达载体,将重组质粒导入农杆菌LBA4404,用农杆菌介导法转入烟草和小麦愈伤中,通过GUS染色反应,证明克隆的启动子在单子叶和双子叶植物中均有活性。     

禾本科作物基因枪介导遗传转化研究进展

介绍了禾本科作物基因枪介导遗传转化原理，转化受体，讨论外源基因的整治，遗传和表达，以及今后的前景。     

农杆菌介导的抗除草剂基因Bar转入北方粳稻恢复系的研究

以2个北方粳型恢复系津稻162和津稻18为受体,经农杆菌EHA105/pDSBar1300转化,分别获得77和55个转植株。用0.25%浓度的Basta对转基因在T0代进行了涂布试验,其抗性植株率分别为92%和78%,对除草剂抗性转基因株系做PCR检测,均能扩增出400bp的Bar基因特异条带,证明外源基因已整合到水稻基因组中。对转基因T1代进行潮霉素抗性鉴定,大多数转基因株系表现为3∶1的分离比。     

Bkt 基因和 crtR-B 基因在集胞藻 PCC 6803 中的 重组表达及功能分析

将雨生红球藻中的 β-胡萝卜素酮化酶基因(bkt)和 β-胡萝卜素羟化酶基因(crtR-B)经密码子优 化后,通过自然转化法分别转入集胞藻 PCC 6803 基因组中。高效液相色谱分析显示：转入 bkt 基因的 细胞产生角黄质的同时,海胆酮含量减少;转入 crtR-B 基因的细胞产生金盏花黄质的同时,玉米黄素 含量减少。实验结果表明,外源的 β-胡萝卜素酮化酶基因将海胆酮转化为角黄质,外源的 β-胡萝卜素 羟化酶基因将玉米黄素转化为金盏花黄质。该文利用代谢工程策略,在集胞藻 PCC 6803 中构建类胡萝 卜素生物合成途径,为通过代谢工程在集胞藻 PCC 6803 中生产虾青素奠定了基础。     

大豆抗疫霉根腐病基因SSR标记

选用感病大豆品种合丰25和抗病大豆品种抗线2号作为亲本配制杂交组合,获得F2种子。种植F2代种子获得F2,3家系,作为分子标记分离群体,进行大豆抗疫霉根腐病基因SSR标记。共筛选覆盖大豆全基因组的350对SSR引物,其中52对引物在亲本间具有多态性,在F2群体中通过BSA法筛选出与抗疫霉病基因相关的多态性差异引物1对,为Seaa003,位于大豆公共遗传图谱的J连锁群。同时该引物在其他10个抗病品种及4个感病品种中抗、感病谱带检出率均为100％,具有一定的检测通用性,可以为大豆疫霉根腐菌1号生理小种抗性材料的辅助选择提供理论依据。     

高粱401—1体细胞突变体遗传研究

以高粱纯系４０１－１为材料,通过幼胚培养,由小盾片细胞产生的再生植株后代出现株形矮小、叶形窄短的突变体＾「１」。到１９９７年该突变体经过１５个世代性状稳定遗传的。突变体与４０１－１杂交,根据Ｐ１,Ｐ２,Ｆ１,Ｆ２,Ｆ３世代群体株高、叶形变异的分析,证明突变体是由两对核基因发生的稳性突变所引起的。一对基因是控制株高的;一对基因是控制各器官形状变小的微型化基因（该基因也起到降低株高的作用）,并且两对基因符合独立遗传规律。     

高等植物异源核酸转化研究 Ⅱ.外源紫菜苔DNA诱导大白菜表型变异

紫菜苔花蕾总 DNA 借助微量核酸注射技术注入大白菜角果。在外源紫菜苔 DNA 作用下,大白菜出现了特异和非特异两种生物学效应。前者表现为叶形和色泽上发生变异;后者表现为出苗率降低,长势减弱,以及叶表面程度不同地出现茸毛等性状。这说明外源 DNA片段似可以通过遗传转化手段导入受体植物生殖细胞乃至表达。     

地衣芽孢杆菌α-耐高温淀粉酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)是产生具有重要工业生产价值的耐高温α -淀粉酶(α -amylase)的优良菌株。在提取地衣芽孢杆菌基因组DNA基础上 ,通过PCR方法克隆了耐高温淀粉酶的全长基因1539bp ,与pUCm -T载体连接转化入克隆菌DH5α中 ,经过酶切鉴定筛选出阳性的克隆菌 ,再提取质粒与表达载体pET-28a( )酶切后连接转化入宿主菌DE3中 ,其阳性重组子在37℃1.0mmol·L-1IPTG诱导下 ,α -淀粉酶的基因得到了较好的表达。表达产物经SDS -PAGE鉴定 ,确定表达蛋白的相对分子量为63000左右 ,与理论推导的分子量相一致。     

大豆疫霉根腐病菌诱导下SSH文库构建及初步分析

大豆疫霉根腐病是危害大豆生产的毁灭性病害之一,研究利用抑制性消减杂交技术（Suppression Subtractive Hybridization,SSH）成功构建了疫霉菌诱导的大豆抗病品种绥农10差异表达的cDNA消减文库,从文库中共筛选到2067个阳性克隆,PCR鉴定插入片段大部分集中在100—800bp之间,利用BLAST在GenBank数据库进行序列相似性比对,获得有功能的EST375个,分析表明这些EST功能涉及大豆的抑制病原菌生长、细胞自身保护、信号传导、系统获得抗性、蛋白质合成、呼吸作用等。     

玉米不同外植体愈伤组织的诱导及植株再生的研究

以玉米自交系18红和18白为材料，取其幼胚、茎尖、成熟胚和下胚轴为外植体，对愈伤组织的诱导和植株再生进行了研究。结果表明：上述4种外植体均可诱导出愈伤，但仅从幼胚和茎尖诱导出胚性愈伤组织．转入分化培养基后获得了再生植株，而成熟胚和下胚轴不能获得再生植株。     

基于数据基因的P2P文件共享平台

定义了适用于P2P文件共享的数据基因模型,并给出了基于数据基因模型的P2P文件共享平台的体系结构。这一文件共享平台利用文件的数据基因组来组织和管理共享文件。由于同一文件的不同版本拥有不同的基因信息,它们可同时存在于系统中供用户使用,因此数据一致性问题得到简化。由于可利用文件数据基因组中对相关文件的记录进行查询处理,系统查询实现更高效。文中还给出了此文件共享平台的数据查询算法与更新策略。     

基于遗传算法的组卷设计与实现

遗传算法作为一种基于进化过程中的信息遗传机制和优胜劣汰的自然选择原则的搜索算法,可以为组卷问题的求解提供有效的途径。在充分借鉴背包问题的设计思想基础上,将试题转化为基因编码,通过遗传算法对基因进行编码,将实际问题中的试题转化为计算机可以识别的变量,然后采用二进制编码方法设计一套在线考试系统,并通过数值实验说明该系统具有很好的可行性和有效性。     

六倍体小麦基因组注释流程构建与优化

野生小麦是异源六倍体,基因组规模较大（约14 GB）,且包含大量重复序列.为了培育具有优良性状的新品种,首先要定位控制目标性状的基因,因此建立一个完整准确的基因组注释软件流程至关重要.传统的基因组注释方法基于数据库比对,具有三个明显的缺点：一是比对速度慢;二是难以发现新基因;三是软件选择没有统一标准.本文提出了一种新的生物信息学注释流程,结合了基因数据库比对、转录组高通量测序数据分析、全长转录组单分子测序数据分析等多种技术手段,实现了六倍体小麦科农9204基因组完整准确的注释,为揭示小麦生长发育规律和培育新品种提供了重要参考和软件技术支撑.     

遗传模拟退火算法在约束求解中的应用

将遗传模拟退火算法应用于约束求解中 ,提高了约束系统求解的鲁棒性和效率 .与 Newton- Raphson数值方法相比 ,由于遗传模拟退火算法是一种单纯的数值迭代方法 ,不涉及到矩阵求逆 ,因此克服了 Newton- Raphson法对初始值敏感的缺点 ,具有很强的鲁棒性 ;与其他利用 BFGS的优化算法相比 ,由于遗传模拟退火算法是在一个初始的解空间中搜索所有可能的解 ,因此克服了 BFGS优化算法对良约束多解情况只能求出一个解的缺点 ;由于遗传模拟退火算法是将约束问题转化为优化问题后才进一步求解 ,因此其可以处理过约束一致和欠约束的问题     

用于光遗传技术的体外细胞光刺激系统

光遗传技术具有在毫秒水平上精细调控某种特定细胞亚群活性的优势,对神经回路和某些神经系统疾病的发病机制和干预治疗等基础研究提供了一个崭新的生物工程学工具。文章基于光遗传技术的特点,研发了一套针对光感基因改造过体外培养细胞与离体脑片LED光刺激系统,实现远程无线控制LED整列的刺激时间、频率、占空比等参数,并同步检测培养细胞的理化特性。