POR*28基因多态性与中国肾移植患者他克莫司稳定剂量的相关性研究

目的：探讨POR*28单核苷酸多态性（SNP）与中国肾移植患者他克莫司稳定剂量的相关性,为制定该人群个体化剂量调整方案提供参考。方法：共纳入350例中国肾移植患者,CYP3A5*3和POR*28基因检测由生工生物工程（上海）股份有限公司采用Mass ARRAY Analyzer Compac质谱检测。酶放大免疫测定法（EMIT）测定他克莫司血药谷浓度。分析上述基因型与他克莫司稳定剂量的相关性。结果：CYP3A5*3、POR*28等位基因频率均符合Hardy-Weinberg遗传平衡。CYP3A5*3 GG基因型肾移植患者稳定剂量比AG和AA基因型患者显著降低。基于CYP3A5分层分析,在CYP3A5表达与不表达组中,POR不同基因型均与他克莫司稳定剂量有显著相关性。至少携带一个T等位基因的POR*28患者的他克莫司的平均稳定剂量与携带CC野生型的患者之间差异均具有统计学意义（P=0.003 7和P=0.003 1）。多重线性回归分析显示,CYP3A5*3与POR*28基因分别可以解释36.6%与1.7%他克莫司稳定剂量个体化差异。结论：中国肾移植受者CYP3A5*3和POR*28基因型与他克莫司稳定剂量显著相关,移植前进行检测将有助于他克莫司的临床个体化用药。     

细胞色素P4502C19基因多态性及代谢型与ADP诱导的血小板聚集抑制率及氯吡格雷抵抗的关联性研究

目的：探讨细胞色素P450（CYP）2C19基因多态性及代谢型对二磷酸腺苷（ADP）诱导的血小板聚集抑制率和氯吡格雷抵抗的影响。方法：选取皖南医学院弋矶山医院2016年6月至2017年7月接受阿司匹林和氯吡格雷双抗治疗患者163例为研究对象，采用荧光染色原位杂交检测患者CYP2C19*2、*3和*17基因型，依据基因型将CYP2C19酶活性分为快代谢型（RM）、中间代谢型（IM）、慢代谢型（PM）和超快代谢型（UM）。患者给药5 d后，采用血栓弹力图仪检测患者ADP诱导的血小板聚集抑制率（IPAADP），评价CYP2C19*2、*3和*17基因型和CYP2C19酶不同代谢型IPAADP差异性，CYP2C19基因型和代谢型以及在氯吡格雷抵抗组（CR）和非氯吡格雷抵抗组（NCR）分布。结果：CYP2C19*2、*3和*17突变率分别为30.98%、6.75%和1.23%。IPAADP平均为（67.03±26.79）%，其中CR发生率26.99%，其IPAADP为（31.29±12.60）%。CYP2C19*2和*3基因携带者IPAADP明显降低（P<0.001），*17基因携带者IPAADP明显升高（P<0.001）。24例（14.72%）为PM型，各代谢型IPAADP比较差异无统计学意义（P>0.05）。CYP2C19基因型和代谢型在NCR和CR中分布无统计学差异（P>0.05）。结论：CYP2C19基因型对IPAADP有显著影响，但与CR的发生无关联性，相关研究还需进一步验证。     

吸入性糖皮质激素布地奈德相关基因多态性与哮喘疗效的关系

目的：研究糖皮质激素诱导转录因子1（GLCCI1）基因rs37973、促肾上腺皮质激素释放激素受体1（CRHR1）基因rs1876828以及IgE低亲和力II受体基因Fc片段（FCER2）基因rs28364072基因多态性与哮喘患者使用吸入性糖皮质激素（ICS）布地奈德治疗疗效的关系。方法：收集哮喘患者血样152例,提取血液DNA,采用荧光原位杂交法检测GLCCI1、CRHR1与FCER2基因多态性,收集患者进行药物治疗前后的肺功能检测结果,记录用力肺活量（FVC）、第一秒用力呼气容积（FEV1）、第一秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比（FEV1/FVC%）、嗜酸性粒细胞计数（EOS）等指标,并计算FVC、FEV1、FEV1/FVC等差值和改善率。分析GLCCI1、CRHR1与FCER2基因多态性与哮喘患者治疗前后肺功能改变的关系。结果：GLCCI1、FCER2各基因型的分布频率在汉族患者与维族患者中均有统计学差异（P<0.05）,本研究人群中未发现CRHR1 AA基因型,但GA基因型在维族患者中的分布频率明显高于汉族患者（P<0.05）。GLCCI1 AA型与GG型患者治疗前后的FVC差值与FVC改善率变化相近（P>0.05）,但AG型患者的FVC差值与FVC改善率较之GG型明显升高（P<0.05）;FCER2 AA型与AG型相比,药物治疗前后FEV1/FVC的差值变化相近（P>0.05）,但AA型/AG型分别与GG型相比,ICS治疗前后FEV1/FVC的差值均明显升高（P<0.05）。CRHR1 GA基因型患者治疗前后的FEV1/FVC差值比GG型的变化更明显（P<0.05）。FCER2 AA型与GG型的汉族与维族患者经治疗后的各项肺功能指标变化均相近（P>0.05）,而AG基因型的维族患者与汉族患者相比,经ICS治疗后的FEV1改善率、FEV1/FVC差值和FEV1/FVC改善率均有明显升高（P<0.05）。结论：GLCCI1、CRHR1、FCER2各基因型患者经吸入性糖皮质激素布地奈德治疗前后肺功能指标的改变具有明显差异,GLCCI1 rs37973、CRHR1 rs1876828与FCER2 rs28364072基因多态性与哮喘患者ICS治疗疗效存在一定相关性,可能作为预测哮喘患者吸入性糖皮质激素治疗疗效的遗传学指标。     

验证并比较华法林稳定剂量预测模型对中国心脏瓣膜置换术后患者预测准确性

目的 验证并比较12个华法林稳定剂量预测模型及目前国内常用固定剂量给药方案(2.5 mg/d)对本院心脏瓣膜置换术后患者的预测准确性。方法 收集已达华法林稳定剂量的804例人工心脏瓣膜置换术后患者完整临床资料,采集每位患者外周血 2 mL,焦磷酸测序法检测其VKORC1-1639G>A和CYP2C9^*3基因型。Pubmed检索出符合筛选条件的12个华法林稳定剂量预测模型。采用绝对误差均值(MAE)和预测百分比两个指标评价并比较各模型预测准确性。结果 共有9个预测模型及固定剂量方案计算的MAE小于±1.0 mg/d,其中MAE最低的三个模型分别为Gage、Wen和Ohno。共有8个模型及固定剂量方案计算理想预测百分比大于40%,其中理想预测百分比最高的三个模型分别为Wen、Huang和Gage。敏感性分析表明预测模型对中剂量(稳定剂量>1.88,且<4.38 mg/d)和高剂量(稳定剂量≥4.38 mg/d)患者预测准确性较好,但对低剂量患者(稳定剂量≤1.88 mg/d)预测较差;固定剂量方案对高、低剂量患者预测准确性均为0。结论 基因导向的华法林稳定剂量预测模型可以较好预测大部分患者,具有临床应用价值。     

TNFAIP3基因遗传变异对食管鳞癌患者预后的影响

目的: 探讨重组人肿瘤坏死因子α诱导蛋白3（TNFAIP3）基因的遗传变异对食管鳞癌（ESCC）患者预后的影响。方法: 本研究纳入175例食管鳞癌根治术患者。在手术前收集患者的外周血5 mL用来提取基因组DNA,对rs583522位点进行基因分型,并对基因型和基线临床资料,以及患者的长期预后情况进行关联性分析。结果: 野生型AA型相对于AG/GG型患者者来说具有明显较晚的肿瘤分期（P<0.001）。AA型的患者更容易复发（P=0.022）。生存分析结果表明AA型患者相对于AG/GG型患者具有明显较差的总生存期（OS）,两种基因型患者的中位OS分别为38.2和48.5个月（P=0.017）。结论: TNFAIP3多态性位点rs583522可能通过影响了该基因的功能,进而使得不同基因型的ESCC患者具有不同的恶性程度。因此TNFAIP3基因rs583522位点可以作为评价食管鳞癌患者预后的生物标记物。     

以CYP2C19基因多态性指导经皮冠状动脉介入治疗术后抗凝临床疗效观察

目的: 对进行经皮冠状动脉介入治疗术（PCI）的患者体内CYP2C19的基因多态性进行分析,并根据基因分型对术后患者进行不同的抗凝治疗,以观察临床疗效。方法: 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测技术对进行PCI手术患者体内CYP2C19的基因型进行分析并分组,分为快、中、慢三种代谢型组,快代谢型组和中间代谢型组在术前24 h内给予负荷剂量氯吡格雷300 mg,之后分别服用氯吡格雷75 mg/d和150 mg/d;对于慢代谢型组起始单次负荷剂量替格瑞洛180 mg,维持量90 mg,bid;上述三组患者术后均联合服用阿司匹林100 mg/d,均连用12个月;观察术后一年内患者主要不良心血管事件的发生率。结果: 178例患者中共检测出5种CYP2C19的基因分型,分别为*1/*1型、*1/*2型、*1/*3型、*2/*2型和*2/*3型;其中快代谢型（*1/*1型）67例,占37.6%,中间代谢型（*1/*2型和*1/*3型）99例,占55.6%,慢代谢型（*2/*2型和*2/*3）12例,占6.8%;术后一年主要不良心血管事件的发生率在三组之间相近（P>0.05)。 结论: CYP2C19基因分型可以用于PCI术后患者的用药指导,对于快代谢型的患者可以给予常规剂量的氯吡格雷,对于发生突变的患者可以考虑增加氯吡格雷的剂量或更换其他抗凝药物。     

氯沙坦钾片的生物等效性及CYP2C9*3基因多态性对氯沙坦药代动力学的影响

目的: 评价试验制剂氯沙坦钾片(杭州民生药业)与参比制剂氯沙坦钾片(杭州默沙东制药)的生物等效性及CYP2C9^*3基因多态性对氯沙坦药代动力学的影响。方法: 采用PCR测序法对健康中国汉族受试者CYP2C9^*3(rs1057910 A>C)位点进行基因分型,筛选36名受试者入组本试验,其中CYP2C9^*1/^*1(AA)基因型个体32例,CYP2C9^*1/^*3(AC)基因型个体4例。本研究为两制剂、两周期交叉设计,单次、开放口服给药的单中心试验,给药剂量为氯沙坦钾片(50 mg/片)1片。通过液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中氯沙坦钾及其代谢产物E-3174的浓度,采用DAS3.2.2非房室模型药动学参数计算的方法求算药动学参数。结果: 受试试剂对参比制剂的相对生物利用度分别为氯沙坦(101.5±20.2)%、E-3174(100.0±13.8)%;同CYP2C9^*3为AA基因型受试者相比,AC基因型受试者中氯沙坦的药代动力学参数AUC_0-12、AUC_inf以及C_max升高,其中AUC_0-12、AUC_inf差异有统计学意义;E-3174的药代动力学参数AUC_0-48和AUC_inf降低,不同基因型间差异无统计学意义。结论: 两种制剂生物等效; CYP2C9基因1075A>C突变可导致氯沙坦代谢减慢,但氯沙坦临床剂量可能不需要根据CYP2C9基因型进行调整。     

CYP3A4*1G、CYP3A5*3基因多态性对肾移植后高血压患者他克莫司血药浓度/剂量比的影响

目的: 探讨肾移植后高血压患者中CYP3A4*1G、CYP3A5*3基因多态性对他克莫司血药浓度/剂量比（C/D）的影响。方法: 以70例肾移植后高血压患者为研究对象,使用PCR-RFLP法和测序法检测患者CYP3A4*1G、CYP3A5*3基因型,患者连续服用他克莫司至少达3 d后,采用微粒子酶免疫分析法（MEIA）测定患者的他克莫司血药谷浓度（C₀）,比较CYP3A4*1G和CYP3A5*3基因多态性对患者他克莫司血药浓度/剂量比（C/D）的影响。结果: 肾移植后高血压患者中,携带CYP3A4*1G野生型（*1*1）患者的他克莫司C/D明显高于CYP3A4突变杂合子（*1*1G）和CYP3A4突变纯合子（*1G*1G）携带者（P<0.05）;CYP3A5*3突变纯合子（*3*3）患者的他克莫司C/D明显高于CYP3A5野生型（*1*1）和CYP3A5突变杂合子（*1*3）基因型患者（P<0.05）。要达到相同的目标血药浓度,CYP3A4*1G 的*1*1G和*1G*1G患者比*1*1患者需要更高剂量的他克莫司,CYP3A5*3的*1*1和*1*3患者比*3*3患者需要更高剂量的他克莫司。结论: CYP3A4*1G、CYP3A5*3基因多态性与肾移植后高血压患者的他克莫司C/D显著相关。     

缺血性脑卒中伴高血压病患者个体化精准治疗的研究

目的：通过对缺血性脑卒中伴高血压病的患者进行CYP3A5基因检测,探讨基因多态性对钙通道阻滞剂降压疗效的影响。方法：纳入108例缺血性脑卒中伴高血压病的患者,分为试验组和对照组,各54例,试验组根据基因检测结果分别选择苯磺酸氨氯地平片和苯磺酸左旋氨氯地平片,对照组全部选择苯磺酸氨氯地平片,考察两组患者降压疗效。结果：两组患者从一般资料和实验室检查指标来看,具有可比性。两组的有效率比较显示,试验组有效率77.78%,对照组有效率57.41%（P<0.05）。试验组基因型为GG型和AG型的患者在服用苯磺酸氨氯地平片后降压疗效明显高于AA型患者,且GG型的患者较AG型患者在服用苯磺酸氨氯地平片后降压效果更强。结论：检测CYP3A5的基因多态性,对缺血性脑卒中伴高血压病的患者个体化服用钙通道阻滞剂控制血压具有指导意义。     

CYP3A5和MDR1基因多态性对沙格列汀疗效的影响

目的: 探讨P450酶CYP3A5和P-糖蛋白MDR1基因多态性对沙格列汀降糖疗效的影响。方法: 98例2型糖尿病患者及84例健康对照抽取静脉血并提取DNA,用PCR-RFLP方法进行CYP3A5和MDR1基因分型。患者均口服二甲双胍8周后加用沙格列汀继续8周治疗,测定沙格列汀用药前后的空腹血糖、餐后血糖、糖化血红蛋白等临床指标。运用SPSS软件结合临床资料进行统计分析。结果: CYP3A5与MDR1各基因型的一般情况如年龄、性别、体重指数、腰臀比、空腹血糖、餐后血糖等均无统计学差异（P均>0.05）。二甲双胍和沙格列汀8周治疗后比较治疗前后不同基因型临床指标的差异发现：CYP3A5*3/*3基因型患者的空腹血糖、餐后血糖、餐后血清胰岛素、空腹血清胰岛素、糖化血红蛋白在用药前后改变显著大于CYP3A5*1/*1和*1/*3基因型患者（P均<0.05）。MDR1 C3435T多态性CC基因型患者空腹血糖、餐后血糖、餐后血清胰岛素、胰岛素抵抗稳态模型评估糖化血红蛋白在用药前后改变显著大于MDR1 C3435T的CT和TT基因型患者（P均<0.05）。结论: CYP3A5*1、*3基因型与MDR1 C3435T多态性能够影响2型糖尿病患者沙格列汀降糖疗效。其中,CYP3A5*3/*3基因型与MDR1 C3435T CC基因型患者降糖疗效更好。     

CYP2D6*10和CYP2C19*2基因型多态性与接受他莫昔芬治疗乳腺癌患者生存率的相关性研究

目的: 研究CYP2D6^*10和CYP2C19^*2基因型多态性与接受他莫昔芬(tamoxifen, TAM)治疗乳腺癌患者生存率的相关性研究。方法: 选择2009至2004年本院甲乳外科和肿瘤内科收治的171名术后服用TAM治疗的雌激素阳性乳腺癌患者,调查TAM使用情况和生存状态等相关资料;收集相关的石蜡组织切片用于DNA提取;用PCR技术检测CYP2D6^*10和CYP2C19^*2基因型多态性;查明CYP2D6^*10和CYP2C19^*2基因型多态性与患者生存率的相关性。结果: 本次研究中,CYP2D6Wt/Wt、CYP2D6Wt/^*10和CYP2D6^*10/^*10基因型的总生存率(overall survival,OS)类似,差异无统计学意义(P>0.05)。CYP2C19^*2/^*2基因型的5年OS明显优于CYP2C19 Wt/Wt,差异具有统计学意义(P<0.05);CYP2C19^*2/^*2基因型的10年OS明显优于CYP2C19 Wt/Wt和CYP2C19 Wt/^*2,差异具有统计学意义(P<0.05);但是CYP2C19Wt/Wt与CYP2C19 Wt/^*2的5、10年OS差异无统计学意义(P>0.05)。结论: 研究结果显示,CYP2D6^*10基因型多态性与服用TAM治疗乳腺癌患者的生存率之间不存在相关性;CYP2C19^*2基因型多态性与接受TAM治疗乳腺癌患者的生存率之间存在相关性,CYP2C19^*2/^*2接受TAM治疗乳腺癌患者的生存率最高,CYP2C19 Wt/^*2生存率较高,CYP2C19 Wt/Wt较低。     

染料木素临床不良反应与CYP1A2、UGT1A7基因多态性研究

目的:探讨染料木素临床不良反应与CYP1A2、UGT1A7基因多态性的相关性。方法:114例健康志愿者随机分为试验组与对照组,试验组分别口服染料木素一个剂量50、100、200mg,每人服药1次,观察3d了解有无不良反应发生;用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(RFLRPCR)扩增基因片段并酶切电泳观察分析CYP1A2G2964A、C734A和UGT1A7Trp208Arg的多态性。结果:试验组及对照组的基因型及等位基因分布差异无统计学意义(P>0.05)。试验组受试者根据有无不良反应的出现分为两组基因,CYP1A2G2964A基因:不良反应组14例受试者中有10例的基因型为G/A(占71.43%),而无不良反应组41例受试者中有22例的基因型为G/G(占53.66%);CYP1A2C734A基因:不良反应组13例受试者中有7例的基因型为C/A(占53.85%),而无不良反应组32例受试者中有16例的基因型为A/A(占50.00%);UGT1A7Trp208Arg基因:不良反应组15例受试者中有12例的基因型为Trp/Trp(占80.00%),并且无不良反应组53例受试者中有32例的基因型也为Trp/Trp(占60.38%)。结论:染料木素不良反应组中CYP1A2G2964A基因以G/A型较高,CYP1A2C734A基因以G/G型较高;UGT1A7基因以TrpTrp型较高。     

CYP2D6 PCR 基因型与DXT表型和基因芯片检测的比较1

目的: 为了评价 CYP2D6 的基因型和表型的联系以及基因芯片在 CYP2D6 多基因分析中的应用。方法: 242 健康志愿者, 口服 dextromethorphan 后收集尿液测定其代谢率, 收集 20 ml 血提取DNA, 并通过基 因 特 异性 PCR 和/(或) 基 因芯 片 分 析CYP2D6 *2———*11, *17 和多拷贝 CYP2D6 基因, 其中 5 个基因(*3、*4、*6、*7 和 *9) 用 PCR和CYD450 基因芯片同时分析。 结果: CYP2D6 基因型比表型更富有信息和更能反映 CYP2D6 酶的表达。 CYP2D6 *3、*4、*6、*7 和*9 的基因检测在CYP450基因芯片和基因特异性 PCR 中显示高度的一致性。结论: 基因芯片在检测基因多位点的多基因中是一个有发展前途和可靠的方法。     

CNR1基因遗传变异对利拉鲁肽治疗早期2型糖尿病患者临床疗效的影响

目的:近年来研究结果表明大麻素受体1基因（cannabinoid receptor 1,CNR1）在2型糖尿病及其并发症中发挥重要作用，而利拉鲁肽在2型糖尿病患者中具有积极的治疗意义。本研究旨在探讨CNR1基因遗传变异对利拉鲁肽治疗早期2型糖尿病患者临床疗效的影响。方法:本研究从2016年3月到2018年12月收集确诊为早期2型糖尿病的患者230例作为研究对象，给予利拉鲁肽进行治疗，16周后评价临床疗效。另外，收集患者外周血及部分新鲜外周血标本分别用来进行CNR1基因标记多态性位点的基因分型及CNR1基因mRNA的表达测定。CNR1基因多态性位点的基因型和其他变量的关联分析通过卡方检验或非参检验进行。不同基因型患者的CNR1基因mRNA表达通过非参检验进行分析。结果:纳入研究的230例接受利拉鲁肽治疗的患者均可以进行疗效评价，治疗16周后的BMI、空腹血糖（FPG）、餐后2 h血糖（2 h PG）和HbA1c指标均下降明显，且与治疗前相比差异存在统计学意义（P<0.05）。CNR1基因多态性分析方面，只发现rs1049353位点的临床意义。rs1049353位点在纳入研究的糖尿病患者中的分布频率为：GG型188例（81.7%），GA型39例（17.0%），AA型3例（1.3%），最小等位基因频率为0.10，三种基因型分布频率符合哈迪温伯格平衡（P=0.551）。由于AA基因型患者相对较少，后期分析将GA和AA基因型患者合并为一组。疗效分析方面，其中GA/AA基因型患者的BMI指数平均下降了（3.4±0.9）kg/m2，FPG指标平均下降了（5.1±0.9）mmol/L，HbA1c平均下降了（2.7±0.5）%，而GG基因型患者的BMI指数平均下降了（3.0±1.5）kg/m2，FPG指标平均下降了（4.7±1.3）mmol/L，HbA1c平均下降了（2.6±0.5）%，两种基因型患者的各项指标变化值具有显著的统计学差异（P<0.05）。另外，在125例具有合适标本的CNR1基因mRNA表达分析中发现，相对于GA/AA基因型患者，GG基因型患者的mRNA的相对表达明显较高［（4.2±1.3）vs.（2.8±1.2）］，二者差异具有统计学意义（P<0.05）。不良反应方面，治疗过程中不良反应发生率较低，且停药后逐渐消失。和CNR1基因rs1049353位点无显著的相关性。结论:利拉鲁肽在早期2型糖尿病患者治疗中安全有效。CNR1基因rs1049353位点可能通过影响该基因mRNA的表达进而影响利拉鲁肽对2型糖尿病患者的临床效果。