当归挥发油联合卡铂对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

目的: 探讨当归挥发油与卡铂联用对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响。方法: MTT比色法检测两药单用及联用对A549细胞的体外杀伤活性;用流式细胞术检测A549细胞凋亡;AO/BE双荧光染色法观察A549细胞凋亡。结果: 当归挥发油单独应用及与卡铂合用对A549细胞的增殖均具有浓度依赖性抑制作用,两药联用IC50较单用IC50下降,说明当归挥发油对卡铂抑制A549细胞增殖的作用具协同效应。流式细胞术检测结果表明,当归挥发油单用及与卡铂合用均可诱导A549细胞凋亡、坏死,两药合用后细胞凋亡、坏死率显著升高。AO/BE双荧光染色法结果显示,联合用药组细胞凋亡、坏死率上升。结论: 当归挥发油与卡铂具有协同诱导A549细胞凋亡的作用。     

小白菊内酯对胰腺癌Panc1细胞的作用研究

目的 研究小白菊内酯对人胰腺癌细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导作用,并探讨其机制。方法 应用MTT法观察不同浓度小白菊内酯对Panc-1细胞增殖的影响;流式细胞术检测药物诱导Panc-1细胞的凋亡;划痕实验观察小白菊内酯对细胞迁移能力的影响;侵袭实验观察小白菊内酯对细胞侵袭能力的影响;Western Blotting检测不同药物处理后Bcl-2和Bax蛋白表达水平的变化。结果 MTT结果显示小白菊内酯可抑制胰腺癌细胞的增殖,且这种抑制作用呈剂量依赖性,IC50约为15μM。流式细胞术提示小白菊内酯可以促进胰腺癌Panc-1细胞的凋亡。划痕实验显示小白菊内酯可影响胰腺癌Panc-1细胞的迁移能力。Transwell小室侵袭实验显示小白菊内酯能抑制胰腺癌Panc-1细胞的侵袭能力。Western Blotting结果显示小白菊内酯可以明显降低Bcl-2的表达量,上调Bax的表达水平。结论 小白菊内酯可以抑制胰腺癌Panc-1细胞的增殖并促进其凋亡,同时也影响肿瘤细胞的迁移和侵袭能力。这过程与其影响一部分Bcl-2家族成员的表达有关,尤其是导致Bcl-2/Bax的表达失衡,促使凋亡。     

氨甲蝶呤对映体对肺癌A549细胞的生长抑制作用研究

摘要 目的 研究氨甲喋呤对映体对肺癌A549细胞的生长抑制作用。方法 倒置相差显微镜观察加入MTX对映体后细胞形态变化,应用MTT法检测MTX对映体对A549细胞的生长抑制作用,应用流式细胞术分析细胞周期分布及凋亡率的变化。 结果 倒置相差显微镜观察加入MTX对映体后细胞形态发生明显变化,MTT法检测表明两种MTX对映体抑制A549细胞的生长呈剂量与时间依赖性,L-（+）-MTX对A549细胞的抑制作用明显强于D-（-）-MTX。流式细胞检测发现两种MTX对映体药物对A549细胞的细胞周期和凋亡具有明显干扰作用。 结论 MTX对映体对A549细胞的作用明显具有手性差异,L-（+）-MTX对A549细胞的抑制作用明显强于D-（-）-MTX。关键词：氨甲蝶呤,对映体,A549细胞,增殖,凋亡     

碳酸酐酶1沉默对肺癌A549细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响

目的:探讨沉默碳酸酐酶1（CA1）对人肺癌A549细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。方法:采用脂质体转染法将CA1特异性siRNA（si-CA1组）及阴性对照（si-NC组）转染肺癌A549细胞，同时以转染空脂质体的A549细胞为空白对照组（Blank组）。采用实时荧光定量PCR（qPCR）和蛋白印迹法（Western blot）检测CA1 mRNA和蛋白表达水平，细胞计数试剂盒法（CCK-8）、流式细胞术、Transwell实验分别检测A549细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力。结果:qPCR和Western blot检测结果显示，转入CA1 siRNA的A549细胞中CA1 mRNA和蛋白的表达水平均明显下调（P<0.05）；CCK-8实验结果显示，沉默CA1后si-CA1组A549细胞在24、48和72 h时光密度（OD）值明显低于si-NC组（P<0.05）；流式细胞术结果发现，si-CA1组A549细胞凋亡率明显高于si-NC组（P<0.05）；Transwell实验结果显示，si-CA1组侵袭和迁移细胞数均明显少于si-NC组（P<0.05）。与Blank组相比，si-NC组以上各指标差异均不显著（P>0.05）。结论:沉默CA1能够抑制肺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移，并促进细胞凋亡。     

PI3K/Akt/FOXO3a信号通路介导的保护性自噬参与肺腺癌获得性顺铂耐药表型重塑

目的：比较顺铂压力下人肺腺癌亲本A549细胞与获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞自噬水平,探寻肿瘤细胞获得性耐药表型重塑的分子机制。方法：不同浓度顺铂（cisplatin, DDP）干预亲本A549细胞及获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞,应用CCK-8法比较两株细胞耐药指数、免疫印迹法比较自噬相关蛋白（Beclin 1、LC3Ⅱ及p62）表达水平;应用10 μmol/L顺铂（相当于亲本A549细胞半数抑制浓度,即A549 IC50值）干预A549及A549/DDP细胞,构建细胞应激状态,CCK-8法比较两株细胞生存活力,免疫印迹法比较自噬相关蛋白（Beclin 1、LC3Ⅱ及p62）、凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3）、转录因子FOXO3a及其磷酸化蛋白（p-FOXO3a）表达水平,免疫荧光法观察FOXO3a亚细胞定位,并利用自噬晚期抑制剂巴弗洛霉素A1（Baf A1）干预A549及A549/DDP细胞,进一步验证顺铂压力下细胞自噬激活情况;利用蛋白激酶抑制剂干预PI3K/Akt信号通路,免疫印迹法检测顺铂压力下A549及A549/DDP细胞Akt、p-Akt及自噬相关蛋白表达水平,以探寻肿瘤细胞获得性耐药表型重塑的分子机制。结果：与亲本A549细胞相比,获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞具有更强的顺铂耐药性及较高的基础自噬水平。在10 μmol/L顺铂压力下,A549/DDP细胞存活率明显高于A549细胞;A549细胞中,顺铂通过抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,上调转录因子FOXO3a表达水平,下调Bcl-2表达、促进Bax及Cleaved Caspase-3活性片段表达增加,诱导细胞凋亡;A549/DDP细胞中,相同浓度的顺铂通过抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,抑制FOXO3a磷酸化,上调Beclin 1及LC3Ⅱ表达、下调p62表达,促进细胞保护性自噬,使耐药细胞获得生存活性。 结论：顺铂诱导亲本A549细胞凋亡可能与抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,上调转录因子FOXO3a表达有关;A549/DDP细胞顺铂耐药表型的获得可能与顺铂抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,抑制FOXO3a磷酸化,上调细胞保护性自噬相关。     

载IGF-1与TGF-β_1明胶微球涂层的多孔钛对MG63细胞功能的影响（英文）

用金属注射成形(MIM)技术制备孔隙度为60%的多孔钛,用改良冷凝聚合交联法制备明胶缓释微球并涂覆于多孔钛表面,体外细胞评价胰岛素生长因子-1(IGF-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)明胶缓释微球涂层多孔钛对MG63细胞功能的影响。结果表明:明胶缓释微球涂层多孔钛无细胞毒性;当IGF-1、TGF-β1明胶缓释微球的载药浓度分别在0.1~10 ng/mg和0.25~2.5 ng/mg范围内时,与MG63细胞共培养,IGF-1和TGF-β1的载药浓度与细胞的增殖和分化呈正相关;当微球的载药浓度IGF-1为10 ng/mg,TGF-β1为2.5 ng/mg时,MG63细胞具有最优的增殖和分化;IGF-1和TGF-β1联合应用对MG63细胞的黏附、增殖与分化作用明显优于单一应用。     

阿霉素热化疗诱导A549 细胞凋亡及线粒体跨膜电位的变化

目的 探讨阿霉素(adrimycin, ADM) 热化疗诱导人肺腺癌A549 细胞凋亡及对线粒体跨膜电位(Δψm) 的影响。 方法 不同浓度的阿霉素作用于体外培养的A549 细胞, 42.5 ℃ 作用30 min 后, 37 ℃继续培养, 在不同时间内检测。用电镜、MTT 法、流式细胞仪检测。 结果 阿霉素热化疗明显增强对A549 细胞的抑制作用, 细胞内阿霉素的浓度显著高于化疗组(P < 0.01);阿霉素浓度为1.0,2.0 mg·L^-1时, 热化组与化疗组比较, 凋亡率增高,线粒体膜电位下降(P <0.01)。 结论 线粒体跨膜电位下降可能是ADM 热化疗诱导A549 细胞凋亡的关键。     

三叶青黄酮抑制肺癌A549细胞生长与蛋白酶体活性的关系研究

目的: 探讨三叶青黄酮对非小细胞肺癌A549细胞增殖抑制作用及其机制。 方法: 采用MTT法检测三叶青黄酮对A549细胞增殖的抑制作用;酶标仪检测细胞蛋白酶体和DUB活性;Real time PCR和Western blot法检测细胞泛素-蛋白酶体途径相关蛋白ub prs、USP14、 UCHL5、POH1等表达变化。 结果: 体外实验MTT法检测三叶青黄酮对非小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用,显示三叶青黄酮各浓度组的抑制率比较,差异具有统计学意义,并呈剂量依赖性。酶标仪检测结果显示随三叶青黄酮浓度升高,细胞蛋白酶体和DUB活性逐渐降低,呈明显的量-效关系。Real-time PCR和Western blot法检测表明三叶青黄酮可以上调A549细胞中ub-prs蛋白表达,下调USP14、UCHL5、POH1蛋白表达,呈剂量依赖性。 结论: 三叶青黄酮对非小细胞肺癌A549细胞具有明显抑制增殖作用,其机制可能与调节泛素-蛋白酶体途径有关。     

三叶青总黄酮逆转吉非替尼耐药肺腺癌细胞的耐药性

目的：探讨三叶青总黄酮（FTH）逆转吉非替尼（GEF）耐药肺腺癌细胞的耐药性及其初步机制。方法：采用MTT法,检测FTH对GEF耐药A549/GR细胞增殖的影响;采用流式细胞技术检测FTH对A549/GR细胞凋亡及周期的影响;建立A549/GR细胞荷瘤小鼠模型,观察两药联用后的体内抑瘤效果;采用Western blot法检测瘤组织PI3K/Akt信号通路关键蛋白（PTEN、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT）的表达情况。结果：与单用GEF相比,FTH联合GEF给药可显著抑制A549/GR细胞增殖（P<0.05）,诱导A549/GR细胞凋亡（P<0.05）,使细胞停滞在G0/G1期。体内实验结果表明,两者联合可显著抑制裸鼠A549/GR移植瘤的生长（P<0.05）,并显著降低瘤组织p-PI3K和p-AKT表达（P<0.05）,升高PTEN蛋白表达（P<0.05）。 结论：FTH可逆转A549/GR细胞对GEF的耐药性,其作用机制可能与调控PTEN/PI3K/AKT通路有关。     

灯盏花素对非小细胞肺癌A549细胞的促凋亡作用

目的: 分析灯盏花素对非小细胞肺癌细胞的促凋亡作用以及对移植瘤生长的影响及初步机制探讨。方法: 检测25、50、100 μmol/L灯盏花素处理后A549细胞凋亡、Caspase-3活性及促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2表达的改变,用A549细胞构建裸鼠皮下移植瘤模型,每日腹腔注射10 mg/kg和20 mg/kg灯盏花素,每周观察肿瘤的大小、裸鼠体质量,第21天时处死小鼠,获取瘤体,Western blot检测Bax和Bcl-2的表达,分析Bax/Bcl-2比值变化;免疫组化法检测组织内Caspase-3表达变化,TUNEL染色检测肿瘤组织内细胞凋亡情况。结果: 灯盏花素增加A549细胞凋亡率;酶标仪检测结果显示灯盏花素处理后,Caspase-3活性较对照组显著增加;Western blot结果显示灯盏花素能够显著抑制抗凋亡蛋白Bcl-2表达,增加促凋亡蛋白Bax表达,致Bax/Bcl-2比值显著增加。体内实验中,第14和21天时,肿瘤大小较对照组明显减小;而裸鼠的体质量无明显降低。Western blot检测结果显示灯盏花素能够上调Bax的表达,下调Bcl-2的表达,而Caspase-3的表达明显增加。TUNEL染色结果显示灯盏花素处理后,细胞凋亡比例较对照组明显增加。 结论: 灯盏花素能够在体内外诱导A549细胞凋亡,其机制可能是灯盏花素通过上调Bax的表达和抑制Bcl-2的表达,增加Bax/Bcl-2的比值,激活Caspase-3,达到促凋亡作用。     

丹酚酸A抗肿瘤作用及对逆转A549/MTX肿瘤多药耐药的影响

目的: 探究丹酚酸A的抗肿瘤作用及逆转人肺癌耐药细胞株A549/MTX肿瘤的多药耐药性的作用。方法: 将体外培养人肺癌细胞A549及A549/MTX细胞分别分为3组：空白对照组(只加培养基)、阴性对照组(细胞+培养基)及实验组(细胞悬液+ 3种化疗药)。丹酚酸A以5个浓度(4、8、16、32、64 μg/mL)对A549细胞作用,MTT法检测丹酚酸A在24、48、72 h对A549细胞的抑制作用;同时,检测甲氨喋呤(MTX)、顺铂(CDDP)、吉非替尼(GEF)这3种化疗药对A549、A549/MTX细胞株及丹酚酸A干预后的A549/MTX细胞株的半数抑制浓度(IC50) ,观察丹酚酸A对耐药细胞株的药敏性及药物逆转的作用。结果: 丹酚酸对A549细胞24 h抑制率从(9.16±3.64) %(4 μg/mL)上升至(52.93±5.21)% (64 μg/mL),当浓度增加至64 μg/mL,并分别作用24 h、48 h、72 h后,抑制率为(54.93±5.21)%、(63.83±2.74)%、(72.91±4.06)%,丹酚酸A对A549细胞具有显著的增殖抑制作用,并呈现时间-剂量依赖性。4 μg/mL丹酚酸A对A549细胞及A549/MTX细胞的生长抑制率均低于10%(9.16%,7.38%),说明对两者没有明显的毒性。经4 μg/mL丹酚酸A干预A549/MTX细胞后,甲氨喋呤对A549/MTX细胞株的IC50由(105.72±4.62) μg/mL降低至(26.13±1.36) μg/mL,逆转倍数为4.05倍;顺铂对A549/MTX细胞株的IC50由(174.92±6.86) μg/mL下降至(49.89±1.73) μg/mL,逆转倍数为3.51倍;吉非替尼对A549/MTX细胞株的IC50由(251.38±8.64) μg/mL降为(116.93±5.22) μg/mL,逆转倍数为2.15倍。与对A549细胞的作用相比较,MTX、CDDP、GEF对A549/MTX细胞作用差异均有统计学意义(P<0.01) 。经丹酚酸A干预后,三种化疗药物对A549/MTX细胞作用差异均有显著统计学意义(P<0.01)。结论:丹酚酸A能够抑制A549细胞及A549/MTX细胞的生长,此外,丹酚酸A在体外能够部分逆转A549/MTX的多药耐药性。     

益气活血汤通过miR-21/PTEN信号通路抑制肺癌细胞恶性生物学行为

目的:探讨益气活血汤(Yiqi Huoxue decoction)对肺癌细胞恶性生物学行为的抑制作用及其机制。方法:以不同浓度益气活血汤含药血清(5%、10%、15%)处理人肺癌A549细胞,CCK-8(Cell Counting Kit-8)法、Transwell小室实验、流式细胞术、Western blot法和定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)法研究益气活血汤含药血清对细胞增殖、迁移和侵袭能力、细胞凋亡、第10染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten, PTEN)蛋白和miR-21表达的影响。结果:与无药血清组相比较,不同剂量的益气活血汤含药血清处理后,A549细胞存活率降低、迁移和侵袭能力下降;细胞凋亡率上升、细胞内PTEN mRNA及其蛋白表达增加、miR-21表达下降,且10%含药血清组的效果最佳。转染miR-21 mimics后,A549细胞中miR-21表达上调,PTEN蛋白表达下调;10%含药血清处理后PTEN蛋白表达上调。结论:益气活血汤可有效抑制人肺癌A549细胞恶性细胞生物学行为,且可能与miR-21/PTEN信号通路的调控有关。     

右美托咪定对A549细胞缺氧/复氧损伤时JNK的影响

目的: 观察右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对缺氧/复氧所致的A549细胞损伤的干预作用以及对c-Jun氨基末端激酶(JNK)的影响。方法:培养A549细胞株,将细胞随机分为4组（n=10）：正常对照组（N组）,DEX组（D组）,缺氧/复氧损伤组（H组）,缺氧/复氧损伤+DEX干预组（HD组）。造模结束后,在倒置显微镜下观察细胞形态学的变化。CCK-8法检测A549细胞活力。原位末端标记（TUNEL）法检测A549细胞的凋亡指数（AI）。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞内葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、p-JNK、caspase-3蛋白的表达水平,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测GRP78、JNK mRNA的表达水平。结果:与N组比较,H组贴壁细胞数量明显减少,细胞形态发生改变。A549细胞的吸光度（OD）值明显下降（P<0.01）,AI值升高（P<0.01）,凋亡细胞数明显增加（P<0.01）。HD组与H组相比,细胞损伤减轻,OD值上调（P<0.01）,凋亡细胞数相对减少,AI值下调（P<0.01）。p-JNK、caspase-3蛋白和JNK mRNA表达下降（P<0.01）。结论:DEX可有效减轻A549细胞缺氧/复氧损伤,机制可能与其抑制JNK通路激活所致的细胞凋亡有关。     

钛植入体表面多级孔结构的构建及体外生物学评价

采用两步阳极氧化法在不同的电解液体系和阳极氧化模式下构建钛表面多级孔氧化层。对样品的表面组成、结构和形貌等表面特性进行了表征。通过对MG63细胞在多级孔表面共培养来评价其对成骨细胞粘附、增殖和分化的影响。结果表明:两步阳极氧化法可以在钛表面制备出兼具生物活性和微米/亚微米多级孔结构的晶型TiO2层;与喷砂酸蚀钛表面相比,经两步阳极氧化处理的钛表面更有利于细胞的附着、生长和促进细胞的增殖。     

氯美昔布诱导肺癌细胞凋亡的作用机制

目的: 探讨氯美昔布诱导肺癌细胞凋亡的可能作用机制。方法: 人肺癌细胞株A549和NCI-H460 细胞先加入终浓度IL-1β₁ 1μg/L刺激 24 h,再加入不同浓度氯美昔布继续培养 24 h,采用Western blot 法检测ERK2、p-ERK及Bcl-2表达水平。氯美昔布体外处理A549、NCI-H460后,采用Western blot法检测Bcl-2、Bax表达水平。结果: 氯美昔布作用后肺癌细胞中ERK2及p-ERK的磷酸化水平均下降,并伴有Bcl-2水平的下降,差异有统计学意义(P<0.01)。并且随着氯美昔布浓度的增大, Bcl-2蛋白表达量逐渐下降,而Bax蛋白表达在A549细胞中增强,在NCI-H460细胞中不变,Bcl-2/Bax的比值下降。结论: 氯美昔布诱导肺癌细胞凋亡的机制可能与通过ERK信号转导途径调节肺癌细胞产生Bcl-2,进而诱导Bcl-2/Bax的比值下降有关。     

萝卜硫素介导Akt/p70S6K信号传导诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡

目的:研究萝卜硫素对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡的影响及其对Akt/p70S6K信号传导的作用。方法:采用CCK-8实验分析萝卜硫素对CNE-2细胞生长增殖的影响，流式细胞仪检测萝卜硫素对CNE-2细胞凋亡率及细胞周期分布的影响，Western blot技术检测CNE-2细胞中调控细胞周期的相关蛋白及Akt/p70S6K信号通路关键蛋白的表达水平。结果:采用萝卜硫素干预CNE-2细胞后，细胞增殖抑制率及凋亡率相对于对照组呈浓度依赖的方式显著增高，差异有统计学意义（P<0.05）；流式细胞仪分析提示，萝卜硫素干预能够将细胞停留在S期及G2/M期，并且萝卜硫素还能抑制细胞周期蛋白Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E以及CDK/p34的表达水平，与对照组相比差异有统计学意义（P<0.05）；此外，萝卜硫素还能抑制Akt/p70S6K信号通路关键蛋白p-Akt及p70S6K蛋白表达水平（P<0.05），但萝卜硫素与Akt激动剂IGF-I共同处理细胞后，上述蛋白表达量与对照组相比没有统计学差异（P>0.05）。结论:萝卜硫素可能通过干扰CNE-2细胞中Akt/p70S6K信号传导而发挥有效的抗增殖及促凋亡的作用。     

顺铂对人肺腺癌细胞作用与ERCC1、Bcl-2表达的相关性研究

目的: 探讨ERCC1、Bcl-2表达与顺铂作用的关系,进而推测ERCC1、Bcl-2在顺铂耐药中的作用。方法: 选择人肺腺癌细胞A549及其耐DDP细胞株A549/DDP作为研究对象,采用MTT法检测A549/DDP细胞耐药指数;免疫细胞化学方法、RT-PCR方法检测不同浓度、不同作用时间干预后细胞中ERCC1、Bcl-2的表达。结果: 10 μg/mL DDP作用 12 h,A549细胞中ERCC1、Bcl-2 mRNA表达开始增高,随着作用时间的延长,ERCC1、Bcl-2 mRNA的表达逐渐增高,在 72 h 表达最强。浓度为 5 μg/mL 的DDP即可刺激A549细胞中ERCC1、Bcl-2 mRNA表达水平上升,随着DDP浓度的增加,其表达水平逐渐上升,ERCC1民mRNA表达水平在 20 μg/mL 组达到高峰。与亲本细胞相比,A549/DDP中ERCC1、Bcl-2表达明显增高。结论: 随着顺铂作用时间的延长和浓度的增加,A549细胞中ERCC1、Bcl-2 mRNA和蛋白的表达量增加,推测ERCC1、Bcl-2 可能参与了顺铂继发耐药的形成。     

下调lncRNA LINC00176对肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药和自噬的影响

目的：研究下调lncRNA LINC00176对肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药和自噬的影响及机制。方法：qRT-PCR方法测定正常支气管上皮16HBE细胞和肺癌A549、A549/DDP、NCI-H1299、SK-MES-1细胞中LINC00176的表达。将A549/DDP细胞分成对照组、si-NC组、si-LINC00176组、si-LINC00176+Anti-miR-NC组、si-LINC00176+Anti-miR-138-5p组。MTT实验检测顺铂对A549/DDP的半数抑制浓度（IC50）。流式细胞术测定细胞凋亡。Western blot测定LC3-I、LC3-II、Beclin 1、C-Caspase-3蛋白表达。利用荧光素酶报告系统鉴定LINC00176和miR-138-5p的靶向关系。结果：与16HBE细胞比较，A549、A549/DDP、NCI-H1299、SK-MES-1细胞中LINC00176表达水平显著升高（P<0.01）。与A549细胞比较，A549/DDP细胞中LINC00176表达水平显著升高（P<0.01）。与对照组、si-NC组比较，si-LINC00176组A549/DDP细胞IC50显著降低（P<0.01），LC3-II/LC3-I、Beclin 1蛋白表达显著降低（P<0.01），凋亡率、C-Caspase-3蛋白表达、miR-138-5p表达水平显著升高（P<0.01）。LINC00176与miR-138-5p直接结合。与si-LINC00176+Anti-miR-NC组比较，si-LINC00176+Anti-miR-138-5p组A549/DDP细胞IC50显著升高（P<0.01），LC3-II/LC3-I、Beclin 1蛋白表达显著升高（P<0.01），凋亡率、C-Caspase-3蛋白表达显著降低（P<0.01）。 结论：下调lncRNA LINC00176通过靶向上调miR-138-5p能够抑制肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药，抑制细胞自噬，诱导细胞凋亡。     

白杨素衍生物dFMAChR体外抗乳腺癌作用及其可能机制

目的 研究白杨素衍生物6,8－二－三氟甲基－5－羟基－7－乙酰氧基白杨素（dFMAChR）对体外培养人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响,并对其体外抗乳腺癌作用机制进行初步探讨。方法 MTT法测定dFMAChR对MCF-7细胞增殖活性的影响;Hochest染色观察dFMAChR诱导MCF-7细胞凋亡的形态学改变;进一步DNA凝胶电泳证实dFMAChR确有诱导MCF-7细胞凋亡作用;Western Blot检测凋亡相关蛋白PPARγ、PTEN、p-Akt、Caspase-3的表达水平。结果 dFMAChR可剂量依赖性抑制人乳腺癌细胞的增殖,IC50值为8.51μM;3.0,10.0,30.0 μM dFMAChR处理人乳腺癌细胞48 h后Hochest染色镜下可见核浓缩的凋亡细胞,10.0,30.0 μM dFMAChR处理人乳腺癌细胞48 h后DNA凝胶电泳显示“梯形”条带,说明dFMAChR可诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡;Western blot结果表明不同浓度的dFMAChR可浓度依赖性上调PPARγ、PTEN、 Caspase-3蛋白表达,下调p-Akt的表达。结论 dFMAChR具有体外抗乳腺癌作用,其诱导凋亡机制与激活PPARγ/PTEN信号通路,最终增加Caspase-3蛋白表达有关。     

腺苷A1受体拮抗剂对异丙酚诱导脑缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响

目的: 观察异丙酚预处理对局灶性缺血再灌注损伤大鼠脑皮质半暗带区细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达水平的影响,并探讨腺苷A1受体拮抗剂对异丙酚抗凋亡作用的影响。方法: 通过阻塞大脑中动脉建立局灶性脑缺血再灌注模型（MCAO）,异丙酚预处理采用经股静脉持续泵注30 min至缺血即刻。SD大鼠24只随机分为4组：假手术组（S组）、模型组（M组）、模型+异丙酚组（P组）、模型+异丙酚+腺苷A1受体拮抗剂组（D组)。拮抗剂组在异丙酚输注前30 min腹腔注射,1 mg/kg。再灌注24 h 后,观察损伤后大脑皮质半暗带区组织形态学（HE染色）、Bcl-2蛋白表达量,凋亡细胞数（TUNEL法）。结果: P组与M组比较,神经元损害明显减轻;而D组与P组比较神经元明显出现核固缩或溶解,细胞水肿,差异具有统计学意义（P<0.01）;P组BCL-2蛋白表达量高于M组(P<0.01),而D组BCL-2蛋白表达量明显较P组减少,差异具有统计学意义(P<0.01);P组凋亡细胞数明显少于M组(P<0.01）,而D组与P组比较,凋亡细胞数明显增加,差异具有统计学意义(P<0.01）。结论: 异丙酚预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑皮质半暗带区细胞具有抗凋亡作用,机制可能与腺苷A1受体有关。