大黄素对实验性自身免疫性甲状腺炎小鼠辅助型T细胞亚群的影响

目的: 研究大黄素对实验性自身免疫性甲状腺炎（experimental autoimmune thyroiditis,EAT）小鼠甲状腺的保护作用和机制。方法: 通过过量碘剂诱导非肥胖型糖尿病（non-obese diabetic,NOD）小鼠建立EAT动物模型,造模4周后各实验组摄入不同剂量的大黄素。造模8 周后检测小鼠血浆甲状腺球蛋白（TgAb）及甲状腺炎症程度以观察大黄素对EAT小鼠的保护作用。流式细胞术检测小鼠外周血、脾脏T细胞亚群,分析大黄素对EAT小鼠外周血、脾脏 Th1、Th2 细胞流式检测频率的影响。ELISA法检测血浆IL-4、IFN-γ水平。结果:（1）甲状腺病理学观察,各大黄素实验组较模型组甲状腺淋巴细胞浸润程度减轻,分级比较差异有统计学意义（P<0.01）;（2）造模后的各组小鼠血浆TgAb水平明显升高,各实验组升高幅度低于模型组,组间有统计学差异（P<0.01）;（3）造模后的各组小鼠血浆IL-4、IFN-γ、外周血单核细胞以及脾脏淋巴细胞中CD+3 CD+ 4IL-4+ 、CD+ 3CD+4IFN-γ+ 、CD+3CD+8IL-4+和CD+ 3CD+8IFN-γ+T细胞频率均较对照组明显增高（P<0.01）,但各实验组升高幅度低于模型组小鼠。结论: 过量碘剂诱导NOD小鼠自身免疫性甲状腺炎造模是可行的;大黄素对造模小鼠甲状腺炎自身免疫反应有一定抑制作用。大黄素通过抑制CD+4CD+8T淋巴细胞分泌IL-4和IFN-γ,从而抑制造模小鼠的自身免疫反应。     

基于肿瘤相关巨噬细胞的宫颈癌免疫学病理机制研究

目的:分析肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）在宫颈癌发病中的作用机制,明确其与Th1/Th2比值、Th17/CD4+CD25+Foxp3+Treg比值的相关性。方法: 以27例宫颈癌患者和53例宫颈上皮内瘤变（CINⅡ22例、CINⅢ31例）患者为研究对象,治疗前抽取患者空腹肘静脉血,采用流式细胞仪测定Th1/Th2、Th17/CD4+CD25+Foxp3+Treg比值,采用ELISA试剂盒测定血清IFN-γ、IL-4、IL-17A、IL-17F、TGF-β1、IL-10水平;术中留取病理组织,采用免疫组化实验测定TAMs CD68表达。结果: 宫颈癌患者外周血Th1/Th2与Th17/CD4+CD25+Foxp3+Treg比值低于CINⅢ,CINⅢ低于CINⅡ,各组之间的差异有统计学意义（P<0.05）。宫颈癌患者血清IL-4、TGF-β1、IL-10水平高于CINⅢ,CINⅢ高于CINⅡ,血清INF-γ、IL-17A、IL-17F水平低于CINⅢ,CINⅢ低于CINⅡ,各组之间的差异有统计学意义（P<0.05）。宫颈癌患者病灶组织TAMs CD68表达水平高于CINⅢ,CINⅢ高于CINⅡ,各组之间差异均有统计学意义（P<0.05）。相关性分析结果显示TAMs CD68表达水平与Th1/Th2比值、Th17/CD4+CD25+Foxp3+Treg比值及IL-17A水平呈负相关性,与IL-10、IL-4水平呈正相关性（P<0.05）。结论:宫颈癌TAMs与Th1/Th2、Th17/CD4+CD25+Foxp3+Treg密切相关,可能通过影响这两大体系的平衡介导宫颈癌的发生与发展。     

恩替卡韦联合苦参素改善HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者Th1/Th2失平衡临床研究

目的: 探讨恩替卡韦联合苦参素对HBeAg阳性慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）患者Th1/Th2失平衡的影响。方法: 将216例HBeAg阳性CHB患者随机分为治疗组和对照组。治疗组112例给予恩替卡韦联合苦参素治疗,对照组104例给予恩替卡韦治疗,疗程48周。治疗48周后,应用ELISA检测患者外周血Th1型细胞因子（IFN-γ、IL-2）和Th2型细胞因子（IL-4、IL-10）的表达水平,应用实时定量PCR检测患者外周血Th1细胞特征性转录因子（T-bet）和Th2细胞特征性转录因子（GATA3）mRNA的表达水平。结果: 治疗48周后,治疗组IFN-γ、IL-2的表达水平较对照组明显升高［（68.32±9.67） pg/mL vs （35.24±7.49） pg/mL,（216.81±31.55） pg/mL vs （115.63±29.13） pg/mL; t₁=27.96, t ₂=24.43; P₁、P₂均<0.01］;而治疗组IL-4、IL-10的表达水平较对照组明显降低［（18.79±5.83) pg/mL vs （22.58±5.32） pg/mL,（133.75±29.21） pg/mL vs （143.17±32.96） pg/mL; t ₃=4.98, t ₄ =2.23; P₃<0.01, P₄ <0.05］。治疗组IFN-γ与IL-4比值IFN-γ/ IL-4较对照组明显增大（3.59±0.76 vs 1.61±0.53, t =22.05, P<0.01）。治疗48周后,治疗组T-bet mRNA的表达水平较对照组明显升高（1.52±0.41 vs 0.83±0.29, t =14.18, P <0.01）;而治疗组GATA3 mRNA的表达水平较对照组明显降低（0.96±0.24 vs 1.05±0.37, t =2.14, P <0.05）。治疗组T-bet mRNA与GATA3 mRNA比值T-bet/GATA3较对照组明显增大（1.60±0.39 vs 0.81±0.32, t =16.20, P <0.01）。结论: 恩替卡韦联合苦参素可以促进HBeAg阳性CHB患者Th1型细胞因子的分泌,抑制Th2型细胞因子的分泌,促使HBeAg阳性CHB患者外周血Th细胞向Th1细胞分化,使其Th1/Th2失平衡得到改善。     

红霉素对解脲支原体肺炎的疗效及对细胞亚群和肝功能的影响

目的: 探讨红霉素对解脲支原体肺炎的疗效及对细胞亚群、肝功能的影响。方法: 收集我院2016年5月至2017年5月收治的41例解脲支原体肺炎患儿作为试验组,静脉滴注10 mg/kg红霉素与适量5%葡萄糖注射液,每天2次,疗程7～10 d,同期选取41例健康体检儿童,比较健康组与试验组治疗前后细胞亚群及肝功能,并分析试验组疗效及安全性。结果: 治疗前,试验组CD4+、CD4+/CD8+分别为（41.95±5.71）%、1.26±0.18,低于健康组的（48.13±7.21）%、1.79±0.20,试验组CD8+为（35.10±4.41）%,高于健康组的（26.56±3.13）%,试验组谷丙转氨酶、乳酸脱氢酶、总胆汁酸、胆红素、总胆固醇、甘油三酯、谷草转氨酶、谷丙转氨酶/谷草转氨酶分别为（136.71±17.20）U/L、（439.67±54.45）U/L、（28.39±3.72）U/L、（68.05±8.95）μmol/L、（7.82±0.95）mmol/L、（1.70±0.24）mmol/L、（113.37±14.25）U/L、1.24±0.14,高于健康组的（45.26±4.88）U/L、（397.98±47.20）U/L、（22.24±2.66）U/L、（36.71±4.83）μmol/L、（4.26±0.46）mmol/L、（1.24±0.17）mmol/L、（62.51±9.19）U/L、0.77±0.12;治疗后,试验组CD4+、CD4+/CD8+显著上升,CD8+、谷丙转氨酶、乳酸脱氢酶、总胆汁酸、胆红素、总胆固醇、甘油三酯、谷草转氨酶、谷丙转氨酶/谷草转氨酶显著下降,且两组比较无统计学差异（P>0.05）。结论: 红霉素对解脲支原体肺炎的疗效肯定,能够利于细胞亚群及肝功能的缓解。     

HBV感染者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子和T淋巴细胞亚群的检测及临床意义

目的: 探讨HBV感染者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子和T淋巴细胞亚群与HBV-DNA的关系及在HBV感染发展中尤其是重症化进程（如慢加急性肝功能衰竭）的作用。方法: 选取浙江大学医学院附属第一医院及浙江省青春医院收治的120例慢性HBV感染者,其中慢性乙型病毒性肝炎（CHB）患者60例,乙肝肝硬化（LC）患者30例,慢加急性肝功能衰竭(ACLF)患者30例。CHB组又分为HBeAg阳性组30例,HBeAg阴性组30例。以同期30例健康体检者为对照组。采用流式细胞术检测各组外周血CD+4和CD+8T细胞表面程序性死亡因子（PD-1）,细胞毒T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4),T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim3),T淋巴细胞（CD+3）,辅助T细胞（CD+4）和抑制T细胞（CD+8)百分比,PCR法检测各组HBV-DNA载量。采用Pearson分析相关性。结果: HBV感染者CD+4CTLA-4和CD+8CTLA-4的表达均低于对照组,其中CHB组CD+4CTLA-4、CD+8CTLA-4、CD+8PD1、CD+4Tim3和CD+8Tim3的表达均高于LC组和ACLF组,差异均具有统计学意义（P<0.05）。HBV感染者CD+3、CD+4、CD+4/CD+8的表达均低于对照组,CD+8的表达高于对照组,CHB组CD+3,CD+4和CD+4/CD+8均高于LC组和ACLF组,CD+8的表达均低于LC组和ACLF组,CHB组HBV-DNA水平高于LC组和ACLF组,差异均具有统计学意义（P<0.05）。CHB组中HBeAg阳性组CD+4CTLA-4、CD+8CTLA-4、CD+3、CD+4和CD+4/CD+8的表达均低于HBeAg阴性组,CD+4PD1、CD+8PD1、CD+4Tim3、CD+8Tim3和CD+8的表达均高于HBeAg阴性组（P<0.05）。HBV感染者HBV-DNA与CD+8PD-1,CD+8Tim3存在显著正相关性（P<0.05）,与CD+4CTLA-4,CD+8CTLA-4,CD+4Tim3,CD+4PD-1,CD+3,CD+4和CD+8不具有相关性（P＞0.05）。与LC组比较,ACLF组患者CD+4 PD-1的表达水平升高,CD+8 CTLA-4的表达水平降低。结论: 外周血T淋巴细胞表面共刺激分子和T淋巴细胞亚群比例与HBV感染发展尤其是重症化进展（如ACLF）相关联,对疾病的疗效和预后判断具有一定的临床应用价值。     

沉默NOTCHI基因对多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞生物学的影响

目的: 探讨沉默NOTCH1基因对多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226增殖和凋亡的影响。方法: 针对人NOTCH1基因序列构建NOTCH1 shRNA真核表达载体,用Lipofectamine^TM2000脂质体转染RPMI 8226细胞,筛选出最佳干扰表达载体。观察NOTCH1 shRNA表达载体对RPMI 8226细胞增殖的影响;使用流式细胞仪分析细胞的周期分布;Western blot 法检测NOTCH1 shRNA转染RPMI 8226细胞后NOTCH1蛋白及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白P27、P21的表达含量变化,ELISA法检测NOTCH1 shRNA转染RPMI 8226细胞后对IL-6分泌量的影响。结果: 沉默NOTCH1基因抑制细胞增殖,阻滞RPMI 8226细胞于G0/G1期,转染组、阴性对照组及空白组增殖率分别为（49.09±2.31）%、（91.73±2.67）%、（98.10±0.41）%,差异具有统计学意义（P<0.05）;三组的G0/G1期细胞分别为（66.23±3.71）%、（42.27±3.65）%、（40.70±0.92）%（P<0.05）;三组S期细胞分别为（31.03±1.49）%、（56.53±1.76）%、（51.83±1.45）%（P<0.05）。NOTCH1 shRNA诱导细胞凋亡,三组凋亡率分别为（46.67±1.31）%、（1.37±0.63）%、（0.85±0.43）%（P<0.05）;转染组NOTCH1蛋白表达下调,P21、P27表达上调。NOTCH1 shRNA可下调与疾病相关的IL-6分泌能力。三组IL-6分泌的吸光度值分别为28.18±3.50、167.08±7.97及185.86±5.61（P<0.05）。结论: NOTCH1 shRNA能抑制RPMI 8226细胞增殖并诱导凋亡,下调与多发性骨髓瘤发病有关的IL-6,有望成为多发性骨髓瘤治疗的一个新靶点。     

柴胡解毒汤治疗尖锐湿疣的疗效观察和机制探讨

目的:观察柴胡解毒汤治疗尖锐湿疣（CA）的临床疗效和探讨其部分起效机制。方法:将2015年6月至2017年9月浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院皮肤科门诊就诊的120例CA病例（年龄16～65岁）随机分为A组、B组和C组,每组40例。A组采用柴胡解毒汤治疗（n=40）,100 mL口服,2次/日,连续治疗30 d为1个疗程;B组采用α-2b重组人干扰素治疗（n=39,其中1位病例用药2周后因不良反应退出研究）,300万IU肌肉注射,隔天1次,注射15次为1个疗程;C组不采用任何全身系统治疗方案（n=40）。比较3组病例临床疗效,统计复发率和复发次数,以及药物不良反应情况。检测A组病例口服柴胡解毒汤治疗前后外周静脉血中T淋巴细胞亚群及NK细胞百分率,血清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IL-12、IFN-γ的蛋白表达水平。结果:除B组1位退出研究病例,随访12周复发率和复发次数,总病例中复发率为51.26%（61/119）,平均复发次数为1.6次。其中A组病例和B组病例的复发率和复发次数均低于C组病例（P<0.01）;A组病例和B组病例之间的复发率和复发次数无统计学差异（P>0.05）。与口服柴胡解毒汤治疗前相比,治疗一个月后的CA病例外周血CD4+T淋巴细胞百分率升高,CD4+/CD8+比值升高,NK细胞百分率升高（P均<0.01）;而CD3+T淋巴细胞百分率和CD8+T淋巴细胞百分率的差异均无统计学意义。与口服柴胡解毒汤治疗前相比,治疗后的CA病例外周血清IL-2、IL-12、IFN-γ增多（P<0.01）,IL-10下降（P<0.05）,而IL-4含量的差异无统计学意义（P>0.05）。结论:柴胡解毒汤治疗CA的临床疗效确切,与肌注α-2b重组人干扰素相当,其起效机制可能是通过促进CD4+T淋巴细胞数量和功能改善细胞免疫功能,并通过促进CD4+T细胞分泌的细胞因子IL-2、IFN-γ增加而实现NK细胞数量增多和功能活化。     

参芪扶正注射液干预低糖介导的免疫抑制微环境作用及其机制研究

目的：探讨参芪扶正注射液（Shenqi fuzheng injection, SFI）干预肿瘤免疫作用及初步分子机制研究。方法：采用B16-PKM2-OE建立低糖肿瘤微环境动物模型;采用ELISA试剂盒检测白细胞介素-2（IL-2）,干扰素-γ（IFN-γ）,CD40L和转化生长因子-β1（TGF-β1）的水平;采用Western blot法检测CD4+T细胞葡萄糖转运蛋白（Glut-1）和糖酵解关键酶（HK、PFK和PK）的表达。结果：试剂盒检测结果显示,SFI可以提高肿瘤组织中IL-2、IFN-γ、CD40L水平,降低TGF-β1的水平。Western blot法检测结果发现,SFI能够促进CD4+T细胞细胞膜表面Glut-1蛋白的表达,同时呈剂量依赖性上调糖酵解关键酶的表达。 结论：SFI能够升高肿瘤组织中的IL-2、IFN-γ和CD40L水平并降低TGF-β1水平,同时增加肿瘤组织里活化CD4+ T细胞的数量,促进CD4+T细胞的糖酵解,表明SFI能够改善肿瘤免疫微环境。     

精准麻醉对机器人辅助腹腔镜前列腺癌根治术患者围术期细胞免疫功能的影响

目的: 探讨精准麻醉方法对机器人辅助腹腔镜前列腺癌根治术患者围术期细胞免疫功能的影响。方法: 56例择期行机器人辅助腹腔镜下前列腺癌根治术的患者随机分为试验组（A组）和对照组（B组）,每组28例。A组丙泊酚以脑电双频谱指数（BIS）值45～55为目标靶控输注,用肌松监测仪闭环输注顺式阿曲库铵,用Vigileo监测调控液体输注;B组根据患者的生命体征及麻醉经验进行麻醉深度的维持和管理。抽取两组患者麻醉前（T0）、麻醉诱导后手术前（T1）、麻醉后1 h（T2）、术后2 h（T3）、术后24 h（T4）、术后72 h（T5）外周静脉血,采用流式细胞术检测血T细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+值以及FoxP3-Treg值）、NK细胞值。结果: 与B组比较,T1、T2、T4、T5时A组CD4+升高,T2时A组NK细胞升高（P<0.05）。与T0时相比较,A组T1时CD4+、CD4+/CD8+均升高,B组CD4+、NK细胞均下降（P<0.05）,T2时B组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、NK细胞均明显下降（P<0.05）;T3时A、B组CD3+、CD4+均明显下降,B组CD4+/CD8+下降（P<0.05）,T5时A组CD4+升高,A、B组Treg水平均明显降低（P<0.05）。结论: 精准麻醉可以减轻全麻对机器人辅助腹腔镜下前列腺癌根治术患者围术期细胞免疫功能的抑制作用。     

丹皮酚对FSL-1与IL-4共刺激诱导树突状细胞成熟及细胞因子表达的影响

目的: 研究牡丹皮提取物丹皮酚对TLR2配体FSL-1刺激诱导慢性前炎因子释放的分子机制,为天然药物治疗慢性皮炎提供新的思路。方法: 将小鼠髓源性树突状细胞（DCs）分成5组,对照组、FSL-1刺激组、丹皮酚低、中、高剂量干预组（25、50、100 μg/mL）,所有组均给予10 ng/mL rmIL-4环境培养,ELISA法检测树突状细胞培养上清液中IL-10、IL-12的含量,流式细胞术检测树突状细胞表面MHC-II、CD40和CD86分子表达的水平。结果: 各组树突状细胞表面分子表达水平：刺激组与对照组相比,树突状细胞表面MHC- II、CD40和CD86表达量明显增加（P<0.05）。丹皮酚干预组与刺激组相比,DCs表面MHC- II、CD40和CD86表达量均降低,且高、中剂量组具有统计学差异 （P<0.05）。细胞因子分泌水平：刺激组与对照组相比,抗炎性细胞因子IL-10的水平明显降低（P<0.05）,而前炎细胞因子IL-12的水平明显升高（P<0.05）;丹皮酚干预组与FSL-1刺激组相比,各个干预组的IL-10的分泌水平显著上升（P<0.05）,丹皮酚干预组中IL-12的分泌水平均有下降,但仅高、中剂量组具有统计学差异（P<0.05）。结论: TLR2配体FSL-1可以和IL-4共刺激DCs,促进DCs活化并成熟,促进前炎性因子IL-12释放,抑制IL-10等抗炎细胞因子分泌,诱导CD4+T细胞向Th1分化,导致了Th1极化状态,诱导慢性皮肤炎症;而天然药物丹皮酚可抑制TLR2配体介导TLR2通路活化DCs这一过程,具有抑制皮肤慢性炎症的潜力。     

人脐带来源间充质干细胞对佐剂性关节炎大鼠巨噬细胞功能的影响

目的:研究人脐带来源间充质干细胞(hUC-MSCs)对佐剂性关节炎大鼠巨噬细胞（macrophage，Mφ）功能影响的初步机制。方法:完全弗氏佐剂法建立佐剂性关节炎大鼠模型(adjuvant arthritis,AA)，分离AA大鼠炎症高峰期腹腔中Mφ，体外以Transwell小室法与hUC-MSCs不同比例（1∶1，1∶5，1∶10，1∶50）共培养48 h，流式细胞术检测Mφ的极化情况、中性红法检测Mφ吞噬功能，ELISA法检测共培养上清中细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10水平。结果:hUC-MSCs(1∶10，1∶5，1∶1)与Mφ共培养后，与模型组比较，M2型Mφ百分比均值明显增加［(34.0±2.6)%、(33.0±1.9)%、(47.0±7.3)% vs. (24.0±1.9)%］(P<0.01)，M1型Mφ的百分比显著降低［(31.0±2.5)%、(30.0±2.7)%、(30.0±1.9)% vs. (39.0±7.1)%］(P<0.01)，M2/M1的比值均值相应随共培养hUC-MSCs细胞数的增多而增大(1.2±0.1、1.2±0.2、1.5±0.2 vs. 0.8±0.1)(P<0.05)；与模型组比较，hUC-MSCs 不同比例(1∶50，1∶10，1∶5，1∶1)与Mφ共培养还可明显降低Mφ的吞噬指数(2.10±0.18、2.00±0.16、1.50±0.11、1.40±0.11 vs. 2.40±0.20) (P<0.05)，明显降低Mφ共培养上清中TNF-α［（143.0±15.0）、(128.0±12.0)、(95.0±8.5)、(44.0±5.9) pg/mL vs. (157.0±14.0) pg/mL］(P<0.01)、IL-1β［(70.0±9.9)、(66.0±5.9)、(54.0±5.2)、(41.0±6.4) pg/mL vs. (84.0±12.0) pg/mL］(P<0.01)和IL-6［(95.0±5.8)、(73.0±4.5)、(65.0±5.1)、(52.0±4.7) pg/mL vs. (109.0±7.6) pg/mL］(P<0.01)的水平，促进IL-10的分泌［(228.0±34.0)、(445.0±55.0)、(568.0±49.0)、(858.0±77.0) pg/mL vs. (85.0±14.0) pg/mL)］(P<0.01)。结论:hUC-MSCs体外可抑制AA大鼠Mφ从M1型向M2型极化，抑制Mφ吞噬功能，降低TNF-α、IL-1β和IL-6水平，升高IL-10水平，对AA大鼠Mφ功能有调节作用。     

参苓白术散联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎的疗效及对NLRP3炎症小体的影响

目的:探讨参苓白术散联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）的临床疗效及对NOD样受体-3(Nod-like receptor pyrin domain 3,NLRP3)炎症小体的影响。方法:入选UC患者100例，随机分为对照组和观察组，各50例。对照组给予美沙拉嗪1.0 g qid，观察组给予美沙拉嗪1.0 g qid+参苓白术散6.0 g tid。疗程8周。比较两组患者的临床疗效；检测肠黏膜中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（caspase）-1 mRNA表达水平；检测外周血血清中C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)的情况。 结果:治疗后，观察组的临床症状改善总有效率（86.00%）显著优于对照组（73.00%），差异有统计学意义（P<0.05）。观察组肠黏膜NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA表达(4.08±0.85、3.75±0.91、3.86±0.93)较对照组(5.26±0.96、4.66±0.95、4.97±0.99)明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。观察组血清中CRP、ESR、IL-1β、IL-18［（6.74±2.45） mg/L、（11.63±4.58） mm/h、（44.27±8.58） pg/mL、（263.37±60.34） pg/mL］较对照组［（15.32±5.68） mg/L、（18.45±5.12） mm/h、（51.11±9.26） pg/mL、（371.18±61.25） pg/mL］明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论:参苓白术散联合美沙拉嗪治疗UC具有良好的临床疗效，其作用机制可能与抑制NLRP3炎症小体的形成，进而抑制炎症反应有关。     

西黄丸对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及其机制研究

目的：研究西黄丸对H22荷瘤小鼠的抑制作用及相关作用机制。方法：采用H22荷瘤小鼠模型分析西黄丸对肿瘤抑制作用;流式细胞仪测定血中CD3+、CD4+、CD8+细胞含量;酶联免疫法测定相关因子含量。网络药理学预测其抑制肝癌的相关通路,并用蛋白免疫印迹法（Western blot）对关键蛋白靶点验证。结果：西黄丸给药组可降低H22荷瘤小鼠的肿瘤重量（P<0.05）;升高胸腺指数、脾脏指数（P<0.05）,升高CD4+/CD8+水平（P<0.05）;升高IL-2、IFN-γ的水平,降低IL-6、IL-10的水平（P<0.05）。网络药理学筛选得到77个重要有效成分,28个核心靶点,Western blot验证显示,西黄丸对PI3K-Akt-MMP9通路关键蛋白靶点有显著调节作用。 结论：西黄丸具有抑制肝癌移植瘤的作用,纠正患瘤小鼠的免疫紊乱,其作用机制与多成分多靶点的整合调节效应有关。     

乌司他丁联合氢化可的松治疗重症脓毒血症休克的疗效及对血清因子的影响

目的:探讨乌司他丁联合氢化可的松治疗重症脓毒血症休克的疗效及对血清因子的影响。 方法:选择2015年12月至2017年12月我院接诊的87例重症脓毒症继发休克患者作为研究对象，通过随机数表法分为对照组43例，试验组44例。对照组给予常规治疗，试验组在对照组基础上，联合乌司他丁20万U加入5%葡萄糖溶液250 mL中静脉滴注+200 mg氢化可的松加入5%葡萄糖溶液250 mL中静脉滴注，1次/d，均连续治疗2周。比较2组临床疗效、实验室指标、血清降钙素原（PCT）、IL-6、IL-10、机械通气时间、住院时间、药物不良反应及28 d死亡率。 结果:治疗后，试验组和对照组临床疗效总有效率分别为86.36%（38/44）、67.44%（29/43），差异具有统计学意义（P＜0.05）；治疗后，试验组和对照组收缩压（SBP）分别为（85.82±6.25）、（78.80±9.26） mmHg，C反应蛋白（CRP）分别为（34.78±4.79）、（46.76±5.93） mg/L，白细胞计数（WBC）分别为（7.85±2.02）、（12.49±2.14）×109/L，PCT分别为（1.50±0.22）、（2.70±0.46） ng/mL，IL-6分别为（59.13±12.73）、（82.32±18.40） pg/mL，IL-10分别为（10.04±1.25）、（14.41±1.88） pg/mL，急性生理和慢性健康评分（APACHEⅡ）分别为（10.30±1.41）、（14.51±1.68）分，差异具有统计学意义（P＜0.05）；试验组机械通气时间和住院时间分别为（10.02±1.65）、（16.00±1.36） d，对照组分别为（17.58±2.54）、（24.00±1.69） d，差异具有统计学意义（P＜0.05）；治疗期间，2组均未出现严重不良反应，试验组出现1例注射部位皮疹，2组不良反应发生率差异无统计学意义（P＞0.05）；试验组和对照组28 d死亡率为4.55%（2/44）、20.93%（9/43），差异具有统计学意义（P＜0.05）。 结论:乌司他丁联合氢化可的松用于重症脓毒症继发休克患者中效果显著，可有效缓解病情、降低死亡率，且药物不良反应少，安全性高。     

曲普利啶胶囊联合复方麻黄碱色甘酸钠膜治疗变应性鼻炎疗效及其对血清炎性因子影响

目的:研究曲普利啶胶囊联合复方麻黄碱色甘酸钠膜治疗变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）的临床疗效及其对患者血清炎性因子的影响。方法: 将2015年5月至2016年5月本院收治的106例AR患者作为研究对象,随机分为对照组和观察组,每组53例。对照组患者给予复方麻黄碱色甘酸钠膜治疗,观察组在对照组基础上另给予曲普利啶胶囊治疗。观察两组患者治疗效果,鼻痒、鼻塞、喷嚏、流涕及头痛等症状消失的时间。治疗前后分别检测两组患者血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素17（IL-17）、白细胞介素13（IL-13）、白细胞介素8（IL-8）及白细胞介素4（IL-4）等炎性因子含量;观察两组患者不良反应情况。结果: 观察组总有效率为92.5%,明显高于对照组的79.2%（P<0.05）;观察组鼻痒、鼻塞、喷嚏、流涕及头痛等症状消失的时间分别为（1.61±0.22）、（1.83±0.26）、（4.34±0.54）、（2.37±0.24）、（1.51±0.19）d,均明显短于对照组（P<0.05）;治疗后,观察组患者血清TNF-α、IL-17、IL-4、IL-8及IL-13含量分别为（0.83±0.22）、（43.15±5.21）、（35.42±10.65）、（113.12±18.53）、（5.44±1.05）ng/mL,均明显低于对照组（P<0.05）。治疗期间所有患者均未发生严重不良反应,两组不良反应发生率基本一致（P>0.05）。结论:曲普利啶胶囊联合复方麻黄碱色甘酸钠膜治疗AR疗效确切,具有深入研究的价值。     

Rho激酶抑制剂对脓毒症肝损伤的影响

目的：探讨Rho激酶抑制剂Y-27632对脓毒症急性肝损伤的作用。方法：健康成年雄性SD大鼠32只,随机分为假手术组（Sham组）、假手术＋Y-27632组（Sham+Y组）,盲肠结扎穿孔组（CLP组）和CLP+Y-27632组（CLP+Y组）,每组8只。采用CLP方法制备大鼠脓毒症模型,造模24 h心脏采血后安乐死大鼠,收集血清及肝脏组织。苏木精-伊红（HE）染色观察各组大鼠肝组织病理学变化;蛋白质免疫印迹（Western blot）检测各组大鼠肝组织ROCK1和下游NF-κB蛋白的表达情况;免疫组织化学法（ICH）检测大鼠肝脏组织ROCK1蛋白表达;酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组大鼠血清肝功能指标ALT、AST水平及肝组织匀浆IL-18、IL-10和谷胱甘肽（GSH）含量变化。结果：与Sham组相比,Sham+Y组肝脏组织病理学无明显变化,CLP组肝细胞排列紊乱,有大量炎症细胞浸润,CLP+Y组炎症细胞浸润较少,肝细胞条索逐渐恢复。与Sham组相比,CLP和CLP+Y组ROCK1蛋白表达增加（P<0.05）;与CLP组相比,CLP+Y组ROCK1蛋白表达减少（P<0.05）。与Sham组相比,CLP和CLP+Y组NF-κB蛋白表达增加（P<0.05）;与CLP组相比,CLP+Y组NF-κB蛋白表达减少（P<0.05）;ICH检测到Sham组肝脏ROCK1少量表达,CLP组和CLP+Y组大量表达;与Sham组相比,CLP和CLP+Y组血清ALT、AST水平升高（P<0.05）,与CLP组相比,CLP+Y组ALT、AST水平降低（P<0.05）。与Sham组相比,CLP和CLP+Y组肝组织匀浆IL-18含量升高（P<0.05）,CLP组肝组织匀浆IL-10和GSH含量降低（P<0.05）,CLP+Y组IL-10和GSH的变化相近（P>0.05）;与CLP组相比,CLP+Y组IL-18含量降低（P<0.05）,IL-10和GSH含量升高（P<0.05）。 结论：Rho激酶抑制剂可以减轻脓毒症大鼠急性肝损伤,可能与抑制Rho/ROCK/NF-κB信号通路及其下游的炎症因子,减轻肝脏炎症反应,同时降低肝脏氧化应激水平有关。