正交试验法研究肉座菌(Hypocrea sp.)Z28生长及产纤维素酶工艺

通过设计正交试验,分别对影响肉座菌(Hypocrea sp.)Z28生长与产纤维素酶的4个因子进行了研究.结果表明:在偏酸性,生长60h,高C/N的条件下,Z28长势最好;在优化条件下,CMCase活力为69.8 U/mL.FPA活力为22.0U/mL,β-葡萄糖苷酶活力为15.2 U/mL.     

白腐菌预处理稻草秸秆对Z28产纤维素酶的影响

研究了白腐菌预处理稻草秸秆对Z28产纤维素酶的影响.结果表明:在稻草秸秆上接种黄孢原毛平革菌,经过28d处理后,Z28发酵产纤维索酶,CMCase活力提高了31.4%,FPA活力提高了51.2%,β-葡萄糖苷酶活力提高了60.8%,未灭菌处理组β-葡萄糖苷酶的活力提高率远远大于灭菌处理组.     

高温纤维素酶产生菌的筛选鉴定及其酶性质研究

经过富集培养,用刚果红培养基透明圈法结合滤纸条降解法进行初筛,从堆腐过程中的双孢菇培养基质中分离出3株高温放线菌(A7、A16和A18)。3株高温放线菌进行摇瓶发酵培养后,用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)对其纤维素酶活性、滤纸酶活性和β-葡萄糖苷酶活性进行检测。3株菌中A18菌株产酶能力最强。对A18的羧甲基纤维素酶性质进行初步研究并对其进行生理生化特征研究和分子鉴定。A18羧甲基纤维素酶的最适作用温度为60℃,最适pH为7.0,发酵培养96h后酶活达最高。以16S rDNA序列为基础构建了相关种属菌在内的系统发育树,菌株A18在系统发育地位上属于稀有放线菌-拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis),它和其他菌株的16S rDNA序列相似性最高为97%,可能为一潜在新种。A18可以利用鼠李糖、乳糖、纤维二糖、甘油和肌醇,不能利用阿拉伯糖、木糖和蔗糖作为碳源;在pH=7.0、温度45℃时生长状况最好。菌株A18可作为高温纤维素酶的产生菌进行进一步深入研究。     

肉座菌Z28产纤维素酶工艺研究

采用液体发酵法,对肉座菌(Hypocrea sp.)Z28的最适产纤维素酶条件进行了研究.结果表明:在以稻草粉为碳源,硫酸铵为氮源,接种量2%,发酵时间6d,温度为30℃,pH值6.0,转速为180r/min的条件下,纤维素酶活力最高,其CMCase活力为66.35U/mL,FPA活力为13.75U/mL,β-葡萄糖苷酶活力为14.26U/mL.     

一株高活力纤维素酶产生菌——绿色木霉T2产酶研究

以绿色木霉(Trychoderma viride)T2为实验材料,麸皮和稻草粉为培养基,采用固体发酵法,对其产纤维素酶情况进行了研究。在优化条件下,其羧甲基纤维素酶(CMCase)活力为94.52IU,滤纸酶活力(FPA)为57.4IU,β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase)活力为28.93IU。     

混合纤维素酶对杨木酶解的研究

以风干的杨木为原料,通过蒸汽爆破处理后,用混合纤维素酶降解。采用响应面分析法,对酶解温度、pH、β-葡萄糖苷酶/滤纸酶的比进行研究。研究表明,酶解杨木的最佳工艺参数:酶解温度为50.04℃、pH值为4.99、β-葡萄糖苷酶/滤纸酶的比值为1.39。在最优的条件下,底物质量分数为5%时,使用里氏木霉RutC-30和爪哇正青霉ZN-205制备的混合纤维素酶(15FPU/g底物,β-葡萄糖苷酶/滤纸酶比值为1.39),酶解48h,可产生还原糖为25.54g/l,糖的转化率为78.184%。     

绿色木霉的选育及固态发酵产纤维素酶的研究

从纤维素酶产生菌绿色木霉TY-2出发,通过紫外诱变技术选育出1株遗传稳定性良好的高产菌株H-28,其产纤维素酶的滤纸酶活力稳定在2.67 U/g左右,较出发菌株提高58.08%。以麸皮和蔗渣为主要原料对变异株H-28进行固态发酵研究,单因素优化了培养基、培养条件和表面活性剂对菌株H-28发酵产纤维素酶的影响,最后选取影响产酶较大的4个因素:发酵时间、Mandels营养盐液、蛋白胨、吐温-80做4因素3水平正交试验。最终优化后突变菌株H-28的产酶能力最高值为6.79 U/g,是出发菌株的4.07倍。     

混合固态发酵降解甘蔗渣产糖产乙醇研究

以碱处理甘蔗渣为原料,比较里氏木霉(Trichoderma reesei CICC40359)和斜卧青霉(Penicillium decumbens LSM-1)单菌和混菌固态发酵及转化乙醇效果,研究发酵过程菌体生长、产酶产糖和乙醇转化情况。结果表明:混菌发酵效果优于单菌,在接种量8%,发酵温度30℃,混菌固态发酵(SSF)72h后总糖和还原糖产量最大值为20.21 g/L和12.47 g/L;β-葡萄糖苷酶活力和菌体生物量在144 h后分别达到0.48 IU/m L和0.21 g/g DM;对发酵3 d后底物(包括生成糖、合成酶及未降解基质)接种酵母进行乙醇同步糖化发酵,乙醇浓度在发酵24 h时达到5.83 g/L,发酵效率达到理论值的40.84%。利用多菌混合固态发酵转化底物产乙醇能避免传统乙醇生产过程高成本纤维素酶的应用,为纤维乙醇生产提供一条经济有效的新途径。     

里氏木霉和黑曲霉降解香蕉秆产可发酵糖的研究

研究了里氏木霉和黑曲霉以香蕉秆作为碳源生产纤维素酶的培养特性。采取30℃培养木霉30 h后接种黑曲霉,32℃混合培养,得到FPA和β-Gluase活性互补的酶系组成:FPA为920.6 U/g,β-Gluase为864.2U/g。对发酵曲降解香蕉秆的研究结果表明:当木霉纯培养曲和黑曲霉纯培养曲以2∶1混合酶解时,最大酶解得率达到30.6%,酶解得率比木霉纯培养曲提高16.8%;优化条件下混合培养的酶解得率为31.5%,达到最大酶解得率所需时间比木霉纯培养曲缩短4 h,酶解得率提高20.2%。混合培养不仅优化了纤维素酶系组成,提高了糖化效率,而且可大大简化生产全酶系纤维素酶的工艺。     

富含碳水化合物微藻的筛选、鉴定及其在不同氮浓度条件下的产糖分析

以实验室保存的4株藻株为研究对象,分析了它们的生长速率和淀粉等糖类的含量,其中1株富含碳水化合物的微藻 #3,其生长速率和淀粉含量分别可达0.086 g/(L•d) 和225.2 mg/L。18S rDNA聚类分析表明,其属于栅藻科链带藻属Desmodesmus sp。缺N条件下,微藻生长速率慢,总糖积累快;而在其他不同N浓度条件下,生长速率趋势一致,总糖积累速度不尽相同。