Lactobacillus kefiranofaciens ZW3对应激小鼠行为学和体内生物标记物的作用

马乳酒样乳杆菌ZW3是从西藏开菲尔粒中分离得到的一株具有多种益生功能的乳酸菌。文章主要研究了Lactobacillus ke?ranofaciens ZW3(ZW3)对小鼠行为学和体内生物标记物的作用效果。利用行为学模型强迫游泳实验来评估ZW3抗抑郁样行为的能力;利用ELISA方法检测小鼠下丘脑和血清中的生物标记物来观察ZW3对小鼠体内化学物质的作用效果。研究结果显示,补充益生菌ZW3 4周后可以显著降低小鼠在强迫游泳中的不动时间(P0.05);长期口服益生菌ZW3,显著增加小鼠下丘脑中5-羟色胺的水平,提高了44.43%,降低下丘脑中5-羟吲哚乙酸与5-羟色胺的比值和血清中犬尿氨酸与色氨酸的比值,纠正色氨酸代谢途径;血清中皮质酮含量降低了39.88%,恢复HPA轴的过度激活。结果表明,ZW3能明显改善小鼠的抑郁样行为。为马乳酒样乳杆菌ZW3应用在功能食品的研究与开发中提供理论依据。     

马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种ZW3的毒理学安全性评价

为评估马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种ZW3食用安全性及健康风险，对ZW3进行系统的体外和体内毒理学实验，包括SD大鼠急性经口毒性实验、细菌回复突变实验、小鼠骨髓细胞微核实验和仓鼠卵巢细胞染色体畸变实验。急性经口毒性实验表明：ZW3的LD50大于10.0 g/kg体重；细菌回复突变实验结果显示：ZW3对5株测试菌株无诱变特性，在小鼠骨髓细胞微核实验中ZW3不会导致哺乳动物嗜多染红细胞含微核细胞率增加；仓鼠卵巢细胞染色体畸变实验结果表明：ZW3的不同剂量组中染色体异常细胞和染色体畸变率均与阴性对照组无明显差异。综合评价，马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种ZW3属于实际无毒级，并且不存在遗传毒性、致突变和致癌性。     

马乳酒样乳杆菌ZW3多位点序列分型

该研究采用多位点序列分型方法将马乳酒样乳杆菌ZW3与其他同种或近源乳杆菌菌株进行细致的分类鉴定,同时确定马乳酒样乳杆菌ZW3特定的生物遗传标签,使用多位点序列分型方法对马乳酒样乳杆菌ZW3菌株与9株同种或近源乳杆菌一起进行多位点序列分型研究。该研究选取了7个管家基因(rpo A、Hsp60、Leu S、rps B、gly K、pyr G、fus A)对这10株同种或近源乳杆菌菌株进行分型,最终得到8个序列型,马乳酒样乳杆菌ZW3单独拥有一个序列型ST8。这7个基因中,除pyr G外其余6个基因存在连锁不平衡现象,发生过轻微的基因重组现象,发生的变异通常为中性选择。马乳酒样乳杆菌ZW3与马乳酒样乳杆菌an3、shan3、shan4、shan5之间的遗传距离很近,与另外5株菌之间的遗传距离较远。该研究中选取的这7个管家基因可以将马乳酒样乳杆菌ZW3与其他同种或近源乳杆菌菌株进行区别,马乳酒样乳杆菌ZW3菌株的识别有助于在商业制品中确定其特定的益生功能。     

马乳酒样乳杆菌ZW3对酸奶风味及质构的影响

将马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种ZW3（Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefiranofaciens ZW3）与常用的酸奶发酵剂嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌共同发酵,旨在制备酸奶时,不添加任何增稠剂和乳化剂,而是通过乳酸菌的发酵作用,增加酸奶的黏度和适口性。结果表明,ZW3可以缩短酸奶发酵时间,提高持水力,减少乳清析出,增加黏度,改善流变学特性,增加酸奶的硬度、胶着性、咀嚼性、内聚性和恢复性,电子鼻分析及感官评价结果表明,ZW3可提高酸奶中挥发性风味物质的含量,改善酸奶风味及口感。     

油橄榄果汁对小鼠焦虑和抑郁行为的影响

目的:评价油橄榄果汁对小鼠焦虑和抑郁行为的影响。方法:以油橄榄果汁浓缩物作为实验材料。选用雄性KM小鼠随机平均分成阴性、阳性、高、中和低剂量组,连续7d灌胃给药,观测对小鼠高架十字迷宫行为实验、小鼠开场行为实验和强迫游泳实验的影响。结果:果汁浓缩物在10.0g/kg剂量的亚急性条件下有稳定而显著的抗焦虑效果(p0.05),在5.0g/kg剂量下,对小鼠的焦虑行为也有显著干预(p0.05)。果汁能够降低小鼠在强迫游泳环境下的不动行为,但这种抗抑郁效应水平还不显著(p0.05)。结论:在亚急性给药条件下,油橄榄果汁能够诱导小鼠的抗焦虑行为,同时也有潜力可以改善小鼠的抑郁状态。     

马奶酒样乳杆菌ZW3在豇豆发酵中的应用

研究了马奶酒样乳杆菌ZW3以不同比例与植物乳杆菌299和乳酸菌723复配用于豇豆的发酵,在接种量一定的情况下,随着马奶酒样乳杆菌ZW3所占比例的增大,酸豆角的pH降低,酸度增加;以感官评分作为指标,确定3种菌以1∶1∶1比例复配发酵时,酸豆角口味最佳。通过有机酸与挥发性风味物质分析,结果显示以1∶1∶1比例接种发酵的酸豆角与自然发酵的酸豆角中的有机酸与挥发性风味物质在种类与含量上基本一致。将马奶酒样乳杆菌ZW3用于发酵泡菜,泡菜pH值下降快、产酸率高、风味纯正。     

“精神益生菌”对慢性应激诱导的抑郁和便秘症状的缓解及机制研究

“精神益生菌”是一类对神经功能和行为具有调节效果的益生菌。近年来,随着“肠-脑轴”理论的成熟,“精神益生菌”的开发也成为防治神经和精神类疾病的热点研究之一。该研究采用慢性不可预知温和刺激(chronic unpredictable midstress,CUMS)建立抑郁小鼠模型,并对小鼠进行为期4周的复合乳酸菌(短双歧杆菌CCFM1025、婴儿双歧杆菌CCFM687、乳酸片球菌CCFM6432)干预治疗。结果表明,复合乳酸菌能够提高慢性应激小鼠的糖水偏好性,减少其在强迫游泳实验中的不动时间,并增加其在高架十字迷宫中开放臂的活动时间;其作用机制与减少血清中皮质酮和大脑前额叶皮质的促炎因子(TNF-α和IL-1β)水平相关。慢性应激小鼠还表现出显著的便秘症状,而复合乳酸菌能够通过提高肠道短链脂肪酸、5-羟色胺(5-hydroxytryptomine,5-HT)及其受体基因表达(Htr4)的水平,增加小鼠的排便速率。此外,益生菌干预小鼠的肠道色氨酸(L-tryptophan,L-Trp)与脑中色氨酸和5-HT的含量具有显著正相关性,这表明对肠道和大脑L-Trp/5-HT合成的调控,可能是益生菌缓解便秘和抑郁的共同机制。研究结果证实了该复合乳酸菌制剂作为精神益生菌的潜力,拓展了益生菌及其发酵制品的营养功能和应用范围,也为抑郁症及其伴随胃肠道功能紊乱的治疗提供了新的思路。     

一株马乳酒样乳杆菌胞外多糖的理化性质

ZW3胞外多糖是由分离自西藏开菲尔粒中的马乳酒样乳杆菌马乳酒亚种ZW3分泌产生,文中针对此多糖进行了理化特性的分析与表征。实验中,傅立叶变换红外光谱表明此多糖存在羧基、羟基和酰胺基,与典型的异型多糖结构相一致。气相色谱分析表明此多糖仅由半乳糖和葡萄糖构成。ZW3胞外多糖絮凝能力与黄原胶相似,比瓜尔胶的絮凝能力要强。相对于商业用途亲水胶体黄原胶、瓜尔胶和刺槐胶来说,ZW3胞外多糖具有更强的乳化能力,因此它具有作为商业用乳化剂的潜力。以上特性表明ZW3胞外多糖在工业应用方面特别是食品工业上拥有广阔的前景。     

短链脂肪酸-酰化淀粉对小鼠抑郁样行为的缓解及机制

大量研究证实“微生物-肠-脑轴”在抑郁症的发生发展中发挥重要作用,而肠道微生物产生的短链脂肪酸(short chain fatty acids,SCFAs),更是参与神经调控作用的关键分子。该研究首次采用SCFA-酰化淀粉在大肠定点释放5类短链脂肪酸,探究其对慢性应激诱导的抑郁症状的缓解及机制。以雄性C57BL/6 J小鼠为研究对象,通过为期5周的慢性不可预知温和应激构建抑郁小鼠模型,通过旷场实验、高架十字迷宫实验和强迫游泳实验对小鼠的抑郁样行为进行评价。同时对小鼠应激激素、神经递质水平及相关酶的表达水平进行检测。结果显示,乙酸、异丁酸和丁酸能在不同程度上减轻小鼠抑郁样行为,其可能机制与SCFAs修复下丘脑-垂体-肾上腺轴反馈调节障碍、恢复5-羟色胺的正常代谢相关。该研究为抑郁症的营养干预提供了新的理论依据。     

新疆传统发酵乳品中乳酸菌与酵母菌生长的相互影响

对新疆传统发酵乳酪乳清中的优势菌株:马乳酒样乳杆菌、乳酸乳球菌、瑞士乳杆菌、植物乳杆菌、东方伊莎酵母菌在驼乳中的生长特性进行了研究。探讨了4株乳酸菌与东方伊莎酵母菌之间的相互作用。结果表明,在发酵过程中东方伊莎酵母菌显著促进马乳酒样乳杆菌和乳酸乳球菌的生长(p0.05),对瑞士乳杆菌的生长促进作用不明显(p0.05)。同时,4株乳酸菌抑制东方伊莎酵母菌的生长(p0.05)。此外,乳酸菌与东方伊莎酵母菌共同接种发酵有利于保持发酵乳冷藏期间活菌数的稳定及缓解乳酸菌的过度产酸。综上所述:乳酸菌与酵母菌之间可能存在相互作用的关系。     

可降胆固醇的优势乳杆菌筛选

为丰富降胆固醇、降血糖的益生菌资源,以实验室10株潜力益生菌株为实验对象,进行体外降胆固醇能力、胆盐水解酶(BSH)活性及α-葡萄糖苷酶抑制率试验,测定菌株对人工胃液和胆盐的耐受性,评价优势菌株的细胞黏附性能及对抗生素的耐药安全性能。结果表明,植物乳杆菌LH-511、植物乳杆菌10-12、植物乳杆菌10-4对胆固醇的降解率在50%以上,显著高于商业菌株植物乳杆菌299V(p<0.05)。植物乳杆菌10-12、植物乳杆菌SD-H9对α-葡萄糖苷酶的抑制率高达41.7%、40.1%。植物乳杆菌LH-511、植物乳杆菌10-12、植物乳杆菌10-4、植物乳杆菌10-14、卷曲乳杆菌OF48-2pH5这5株菌具有较好的BSH活力、α-葡萄糖苷酶抑制性、抗逆性以及对HT-29细胞的黏附能力。但仅植物乳杆菌LH-511和卷曲乳杆菌OF48-2pH5通过了10种抗生素的安全性试验。综上所述,植物乳杆菌LH-511和卷曲乳杆菌OF48-2pH5具有较好的降胆固醇、降血糖潜力,且通过了抗逆性、黏附性、安全性试验,可用于进一步的开发和应用。     

益生菌干酪的工艺研究

将植物乳杆菌MA2及Kefir发酵剂应用于益生菌干酪生产中,并对干酪的理化指标、感官进行了测定、评价,结果显示:成熟45 d后,相比于普通干酪,添加了植物乳杆菌MA2及Kefir的新型益生菌干酪的可溶性氮及不饱和脂肪酸的含量显著升高;并且具有良好的风味和质地,其中MA2干酪具有明显的酸奶味,提高了干酪的适口性,更加符合国人的口味习惯,具有良好的生产开发前景;而Kefir干酪具有Kefir发酵乳的特有风味,带有适宜的酒香味,可以被开发成个性化干酪,丰富了干酪的品种。     

Kefir peptides exhibit antidepressant-like activity in mice through the BDNF/TrkB pathway

Depression is a prevalent, stress-related mental disorder that can lead to serious psychiatric diseases with morbidity and high mortality. Although some functional fermented dairy drinks have promising anxiolytic and antidepressant effects, the mechanism is still not clear. To determine the antidepressant-like effect and the potential molecule mechanism of kefir peptides (KP), various behavioral tests, including the elevated plus maze test, open field test, forced swimming test, and tail suspension test, were used. Administration of 150 mg/kg KP in mice reduced the duration of immobility in the forced swimming test and tail suspension test, elevated the time spent in the open arm and center zone in the elevated plus maze test, and increased the total distance traveled, average speed, and time spent in the center zone in the open field test compared with the mock group. These results indicated that KP dramatically ameliorated the depression-like behaviors. Kefir peptides were further isolated and identified using high-performance liquid chromatography and liquid chromatography–tandem mass spectrometry, from which 3 peptides were identified and designated KFP-1, KFP-3, and KFP-5. Among these peptides, administration of KFP-3 (15 AA residues) remarkably decreased immobility time in the forced swimming test and increased mobility time in the tail suspension test. Therefore, KFP-3 may be the major active peptide with antidepressant activity in KP. Overexpression of brain-derived neurotrophic factor, phosphorylated tropomyosin receptor kinase B, and phosphorylated ERK1/2 protein levels could be detected in the hippocampus under KP administration. Therefore, we suggest that KP improves depressive-like behaviors by activating the brain-derived neurotrophic factor–phosphorylated tropomyosin receptor kinase B signaling pathway. Kefir peptides may serve as a new type of antidepressant dairy product and may provide potent antidepressant effects for clinical use.     

植物乳杆菌MA2的生物学特性研究

对Kefir源植物乳杆菌MA2的生物学特性进行了研究,结果显示,MA2菌株在MRS培养基初始pH为6.60,接种量为4%,37℃厌氧条件下培养18 h,活菌数可达到1.2×109cfu/mL。乙酸和乳酸为发酵液中的优势有机酸,且厌氧条件下发酵液中的有机酸的含量较高,厌氧发酵液中检测出的6种脂肪酸中C18∶1的含量最高。降胆固醇试验证明,低聚葡萄糖(GOS)可以促进MA2的胆固醇移除能力,移除率可达到70%;菌体细胞脂肪酸的测定结果显示MA2菌株降胆固醇的机理主要是吸附、吸收同化机理。MA2菌株的牛乳发酵试验结果显示其具有良好的产黏特性,在乳清培养基中胞外多糖产量可达380 mg/L。结合其良好的耐酸、耐胆盐特性,植物乳杆菌MA2具有良好的益生菌应用潜力。     

一株植物乳杆菌体内降胆固醇的作用机制

目的:通过构建高胆固醇血症模型小鼠评价该菌株对小鼠体内胆固醇代谢及相关基因表达的影响。方法:以健康C57BL/6雄性小鼠为对象,设置空白组、模型组、低剂量组、高剂量组、普伐他汀对照组,分别以生理盐水、KLDS1.0386悬浊液和普伐他汀连续灌胃4周,检测小鼠血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白水平;采用Western blotting法检测小鼠肝脏胆固醇几个关键基因(HMGCR,LDLR,SREBP2,CYP7A1,FXR)表达水平的变化。结果:灌胃KLDS1.0386后,高剂量组小鼠血清甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白水平明显降低(P<0.05);HMGCR和FXR的表达明显受到抑制(P<0.05),CYP7A1的表达量增加(P<0.05)。结论:获得一株在体内具有高效降胆固醇能力的植物乳杆菌KLDS1.0386,该菌可用作降胆固醇的益生菌。     

植物乳杆菌KLDS 1.0318对小鼠免疫调节作用初步研究

目的:探讨植物乳杆菌KLDS 1.0318对小鼠免疫调节功能的影响。方法:将健康的BALB/c小鼠随机分为4组,即正常对照组、乳酸菌低剂量组、乳酸菌中剂量组、乳酸菌高剂量组。灌胃不同剂量植物乳杆菌KLDS 1.0318菌悬液后,分别测定各组脾脏指数和胸腺指数,脾淋巴细胞增殖、NK细胞活性、巨噬细胞能量代谢水平,巨噬细胞吞噬能力。结果:与正常对照组相比,植物乳杆菌KLDS 1.0318中、高剂量组能够显著提高小鼠的脾脏和胸腺指数,同时能够促进脾淋巴细胞增殖,增强小鼠NK细胞活性,提高小鼠巨噬细胞吞噬中性红能力及其能量代谢水平。结论:植物乳杆菌KLDS 1.0318可以通过促进机体的特异性免疫和非特异性免疫功能来增强机体的免疫作用。     

乳酸菌BC299的鉴定及其对免疫抑制小鼠肠道菌群的影响

以传统发酵泡菜中分离得到的乳酸菌BC299为研究对象,通过形态观察、生理生化、16S rDNA基因序列分析等方法对其进行鉴定,研究其耐酸、耐胆盐、耐抗生素能力,并以环磷酰胺（CTX）诱导免疫抑制小鼠,研究菌株BC299对小鼠粪便中肠道细菌的多样性和相对丰度的影响。结果表明,菌株BC299被鉴定为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,其对pH2.0和0.3%胆盐具有良好的耐受性;对常见抗生素敏感;能改善CTX诱导小鼠的小肠绒毛和组织形态的破坏,对免疫抑制小鼠的肠道菌群具有调节作用,能正向调节与免疫相关菌群的相对丰度,使小鼠肠道内毛螺菌科（Lachnospiraceae）和瘤胃球菌科（Ruminococcaceae）的相对丰度显著降低（P＜0.05）,拟杆菌科（Bacteroidaceae）的相对丰度显著增加（P＜0.05）。     

新疆传统乳品中产胞外多糖乳酸菌的筛选及益生特性的研究

以新疆塔城地区酸奶、酸马奶、鲜马奶样品为研究对象,采用传统的分离方法对样品中的乳酸菌进行分离,通过16S rRNA分析样品中微生物多样性,在优势菌株中通过苯酚-硫酸法筛选出高产胞外多糖的乳酸菌,测定菌株潜在的益生特性。结果显示,3份酸奶、4份酸马奶和3份鲜马奶共10份样品中分离鉴定出147株乳酸菌,优势菌株为屎肠球菌（Enterococcus faecium）、发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum）和植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）。筛选出3株高产胞外多糖的植物乳杆菌（菌株1-3,1-6,4-1）。潜在益生特性试验结果显示,3株菌均表现出一定的益生特性,其中菌株1-3较其他菌株有较强的肠道定植、降胆固醇能力和胆盐耐受性,其可作为潜在益生菌应用于功能性产品的开发。