基于UPLCQTOF/MS的黑灵芝多糖对大鼠急性肠道炎症作用机制研究

探究黑灵芝多糖（PSG）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠急性肠道炎症的作用机制。本实验将大鼠随机分为正常组（Con）、模型组（LPS）、阳性对照组（DEX）和黑灵芝多糖低、中、高剂量组（PSG）,每组10只。PSG低、中、高剂量组分别灌胃黑灵芝多糖20、40、80 mg/kg。Con组、LPS组与PSG组则每天灌胃等量的生理盐水,连续灌胃7 d。第7 d灌胃结束后,腹腔注射0.8 mg/kg的LPS溶液建立急性肠道炎症模型。通过观察大鼠空肠组织形态、检测细胞因子IL-1β及IL-10含量等指标,结果发现,PSG对LPS诱导的大鼠具有抗炎作用。与LPS组相比,PSG组空肠组织形态明显得到改善,肠道组织中IL-1β和IL-10含量被调节至正常水平。进一步,利用超高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）方法获得了四组大鼠盲肠内容物样品的代谢轮廓图。结果发现,与Con组相比,LPS组大鼠盲肠内容物中存在22种代谢物。同时,PSG干预可回调PC （24:0/20:4（5Z,8Z,11Z,14Z））、DG （16:0/20:3（5Z,8Z,11Z）/0:0）等12种差异代谢物,进而影响甘油磷脂代谢、亚油酸代谢和α-亚麻酸代谢等三条代谢通路,发挥其对LPS诱导大鼠的抗炎作用。综上,PSG可改善LPS所致急性肠道炎症,作用机理与其抑制促炎因子的释放和代谢紊乱有关。     

不同苦荞茶中芦丁和槲皮素含量测定及二者冲泡溶出率比较研究

本文建立了HPLC法测定6款造粒成型苦荞茶、8款全麦(胚)苦荞茶中芦丁、槲皮素含量,并研究两类苦荞茶中芦丁、槲皮素的冲泡溶出率。采用Phenomenex C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以甲醇(A)-0.1%冰乙酸(B)为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长257 nm,柱温30 ℃。在此色谱条件下,芦丁和槲皮素完全分离,线性范围分别为0.00362~0.90613 mg·mL^-1(r=0.9996)、0.01439~0.71947 mg·mL^-1(r=0.9998),平均回收率分别为101.99%(RSD 1.71%)、98.37%(RSD 2.03%)。结果表明,造粒成型苦荞茶中芦丁和槲皮素总量17.34 mg·g^-1,槲皮素占89.10%,其冲泡液中芦丁、槲皮素总溶出率19.41%;全麦(胚)苦荞茶中芦丁、槲皮素总量11.96 mg·g^-1,芦丁占91.39%,其冲泡液中芦丁、槲皮素总溶出率67.86%。苦荞茶冲泡液中芦丁、槲皮素总量:造粒成型苦荞茶<全麦(胚)苦荞茶(P<0.01)。采用SPSS 22.0对14款苦荞茶及冲泡液中芦丁、槲皮素总量和溶出率进行聚类分析,可分为造粒成型苦荞茶和全麦(胚)苦荞茶两类。     

重氮化偶合HPLC法测定食品中的亚硝酸盐含量

探讨了食品中亚硝酸盐含量的重氮化偶合高效液相色谱测定方法.食品样品除去蛋白质、脂肪后,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化,再与N-1-萘基乙二胺偶合,之后进行HPLC分析.以SB-C18柱为分离柱,VWD和DAD为检测器,乙酸溶液(14%)/甲醇(80:20)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为544nm,进样20μL.在10～1000ng/mL范围内,亚硝酸盐含量与峰面积呈良好线性关系(r=0.9997).方法最低检测浓度为40μg/kg.     

Polyphenols Extracted from Black Tea (Camellia sinensis) Residue by Hot‐Compressed Water and Their Inhibitory Effect on Pancreatic Lipase in vitro

Abstract: Polyphenols, retained in black tea wastes following the commercial production of tea beverages, represent an underutilized resource. The purpose of this study was to investigate the potential use of hot‐compressed water (HCW) for the extraction of pancreatic lipase‐inhibiting polyphenols from black tea residues. Black tea residues were treated with HCW at 10 °C intervals, from 100 to 200 °C. The resulting extracts were analyzed using high‐performance liquid chromatography‐mass spectrometry and assayed to determine their inhibitory effect on pancreatic lipase activity in vitro. Four theaflavins (TF), 5 catechins, 2 quercetin glycosides, quinic acid, gallic acid, and caffeine were identified. The total polyphenol content of extracts increased with increasing temperature but lipase inhibitors (TF, theaflavin 3‐O‐gallate, theaflavin 3′‐O‐gallate, theaflavin 3,3′‐O‐gallate, epigallocatechin gallate, and epicatechin gallate) decreased over 150 °C. All extracts inhibited pancreatic lipase but extracts obtained at 100 to 140 °C showed the greatest lipase inhibition (IC₅₀s of 0.9 to 1.3 μg/mL), consistent with the optimal extraction of TFs and catechins except catechin by HCW between 130 and 150 °C. HCW can be used to extract pancreatic lipase‐inhibiting polyphenols from black tea waste. These extracts have potential uses, as dietary supplements and medications, for the prevention and treatment of obesity. Practical Application: Active forms of lipase inhibitors can be recovered from black tea residues. They could be used as dietary supplements or medications.     

皮革中多菌灵等三种防霉剂的检测方法研究

应用固相萃取及高效液相色谱技术,建立了同时测定皮革中多菌灵、百菌清和甲基托布津含量的方法。皮革样品经乙腈超声提取后,由弗罗里硅土固相萃取小柱净化,以Agilent Eclipse Plus C18(4.6×250 mm,5μm)色谱柱为分析柱,乙酸铵水溶液一甲醇为流动相,线性梯度淋洗,紫外二极管矩阵检测器检测,波长为240或270nm。结果表明,多菌灵、百菌清和甲基托布津在0.5~15.0 mg·L-1范围内有良好的线性关系,方法的定量下限(S/N=10)分别为0.06、0.8、0.5 mg·kg-1,加标回收率为90.2%~97.7%,变异系数(CV)不大于7.9%。     

基于滋味成分HPLC指纹图谱的判别分析及相似度评价在信阳毛尖茶分等定级中的应用

采用高效液相色谱方法分别建立信阳毛尖7 个等级茶汤滋味特征指纹图谱。基于15 种特征成分,采用判别分析技术对2 个系列41 个信阳毛尖茶样进行了良好的等级判别,判别正确率近100%;通过建立7 种指纹图谱相似度计算方法发现,各相似度计算方法均能反映茶叶等级间的差异大小,其中以新改良程度相似度法最佳。采用相似度计算方法对茶叶分等定级的结果与其实际等级相一致,并可实现对等级差异的量化分析。     

高效液相色谱法测定动植物油脂中苯并（a）芘的方法改进

采用GB／T24893--2010（（动植物油脂多环芳烃的测定》中的液液萃取方法提取动植物油脂中的苯并（a）芘,用中性氧化铝固相萃取柱净化,用反相高效液相色谱法-荧光检测器定量检测试样中的苯并（a）芘含量。实验结果表明植物油的平均加标回收率为91．44％,动物油的平均加标回收率为91．69％。以茶油为试样,测定结果的相对标准偏差（RSD）为1．48％（n=7）。改进方法简单、操作易控制、方法精密度好、回收率高,适合测定动植物油脂中的苯并（a）芘含量。     

信阳毛尖茶指纹图谱分级标准样品的研制方法

建立一套基于指纹图谱分级的茶叶标准样品研制方法,研制3 个级别（120 个样,每样50 g）的信阳毛尖茶标准样品。依据国标方法制备茶汤,采用高效液相色谱法进行茶汤滋味成分指纹图谱分析,并采用新改良程度相似度法进行相似度计算。以指纹图谱的相似度作为评价指标,按照《标准样品工作导则》的要求,对所研制标准样品进行均匀性检验（F检验）、稳定性检验（t检验）和8 家实验室联合定值。结果表明,所研制的各级茶样均匀性、稳定性良好,对各级茶样的指纹图谱相似度的定值结果和不确定度（95%置信度）分别为0.918±0.027（一级）、0.662±0.033（二级）、0.400±0.074（三级）,且与感官评审等级一致。该标准样品具有量化分级的特征,是国内首套指纹图谱分级茶叶标准样品。已获得全国标准样品技术委员会颁发的有证标准样品证书,可用于信阳毛尖茶的分等定级。     

灯芯草纤维素黄原酸盐用于脱除蜂胶中铅的研究

研究自制的灯芯草纤维素黄原酸盐用于吸附去除蜂胶中重金属铅的可行性和适应性。考察灯芯草纤维素黄原酸盐对蜂胶中铅的去除效果,探讨了静态吸附反应中铅离子浓度、吸附时间、初始溶液pH和吸附温度四个因素对铅去除率的影响,确定最佳吸附反应条件;并利用高效液相色谱法(HPLC)对脱铅处理前后蜂胶中黄酮类物质的成分和含量进行比较。结果表明,当向20mL含铅浓度为200μg/L的蜂胶溶液中加入0.2g的灯芯草纤维素黄原酸盐,并调节蜂胶液的pH为4.0～4.5,恒温(30℃)条件下振荡吸附10min,该吸附剂对蜂胶中铅离子的去除率为61.64%;根据高效液相色谱的检测结果,脱铅处理前后蜂胶中最主要活性成分芦丁的含量仅损失8%左右,表明灯芯草黄原酸盐对铅具有良好的选择性,而对蜂胶中黄酮类物质的影响不大。这既为控制蜂胶中重金属铅含量提供了新的处理技术,同时还为废弃中草药灯芯草的资源化及深度利用创造了新的思路。     

己烯雌酚残留的三种检测方法比较研究

己烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)是一种在畜牧业生产中广泛应用的人工合成的非甾体类雌激素。在己烯雌酚长期生产实践中研究发现,己烯雌酚具有以生殖毒性为主的严重毒副作用。本实验就高效液相色谱法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)的、荧光分光光度计法(fluorescencespectrophotometer,FS)、毛细管电泳法(capillaryzoneelectrophoresis,CZE)三种检测方法作比较。旨在寻找一种快速、高效、可行的动物组织中己烯雌酚残留检测方法。实验表明高效液相色谱法最小检出量为6.25×10-3mg/ml,荧光光度法的最小检出量8.04×10-3mg/ml,毛细管区带电电泳法的检测所用时间为4min,具有较快的检测速度,仪器便宜、方法简便、准确、试剂用量小,而且废液容易处理、污染小。可见CZE法在基层实际检测中是一种有效、可行的检测方法。     

分光光度法检测昆仑雪菊总黄酮络合显色体系适应性研究

本研究以选择最适合的分光光度络合显色体系检测昆仑雪菊总黄酮(Coreopsis tinctoria flavonoids,CTFs)含量为目标,采用60%乙醇(v/v)回流对雪菊总黄酮进行提取,依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对雪菊总黄酮提取物进行萃取,得石油醚、乙酸乙酯(EAE)、正丁醇(n-BuOH-E)萃取物。分别以芦丁、槲皮素、表儿茶素(EC)为对照品,采用经典络合显色体系包括NaNO₂-Al(NO₃)₃/AlCl₃-NaOH和KAc-Al(NO₃)₃/AlCl₃对EAE、n-BuOH-E中黄酮含量进行检测。为确定最佳对照品种类及络合显色体系,实验同时采用高效液相色谱(HPLC)对EAE、n-BuOH-E中黄酮含量进行测定。HPLC法结果表明EAE和n-BuOH-E中黄酮含量分别为48.43%和43.19%,经筛选,分光光度法中采用芦丁KAc-AlCl₃体系测得EAE和n-BuOH-E黄酮含量与HPLC法最为接近。因此,确定该方法为测雪菊乙酸乙酯、正丁醇萃取物及雪菊总黄酮提取液黄酮含量的最佳方法,采用该方法对雪菊总黄酮提取液中黄酮含量进行检测,结果为10.65%。