由2-酮基-D-葡萄糖酸直接合成异Vc的研究

以2-酮基-D-葡萄糖酸（2-KG）为原料,在酸催化下直接合成异Vc;用TLC法定量测定异Vc含量;考察了反应温度、反应时间、催化用酸的种类和用量、2-KG浓度等因素对异Vc收率的影响,并从理论上对反应结果进行了探讨。      

工业生产条件下噬菌体对2-酮基-D-葡萄糖酸发酵的影响

考察了工业生产条件下噬菌体对2-酮基-D-葡萄糖酸发酵的危害，并研究了噬菌体侵染后菌体形态、种子培养过程和发酵过程的变化。研究结果表明，噬菌体侵染导致了发酵转化率的下降、发酵周期的延长和发酵液过滤速率的降低。发酵前期、中期和后期的噬菌体侵染所造成的危害差异显著（p〈0．01），侵染时期愈早所造成的危害愈大。     

碘量法测定发酵液中2-酮基-D-葡萄糖酸

在优化样品处理条件的基础上,考察葡萄糖对2-酮基-D-葡萄糖酸测定的影响,改进发酵液中2-酮基-D-葡萄糖酸的碘量法测定技术。结果表明,滴定样品溶液所消耗的I2标准溶液的体积、样品溶液中2-酮基-D-葡萄糖酸质量浓度和葡萄糖质量浓度之间存在良好的线性关系,R2>0.9999;该方法精密度、稳定性和重现性良好,2-酮基-D-葡萄糖酸的平均回收率为95.68%,RSD为1.35%（n=5）。该方法准确、快速,操作简便,可用于发酵液中2-酮基-D-葡萄糖酸的定量检测。     

2-酮基-D-葡萄糖酸发酵生产研究进展

2-酮基-D-葡萄糖酸（2KGA）是合成食品抗氧化剂D-异抗坏血酸钠及D-异抗坏血酸的前体,通常采用细菌发酵的方法由D-葡萄糖转化而来。本文概述了2KGA的生物合成途径、2KGA产生菌的选育、2KGA的发酵条件、2KGA的发酵工艺、2KGA发酵产物的提取、国内2KGA发酵生产中存在的主要问题及改善对策等。     

旋光法测定发酵液中2-酮基-D-葡萄糖酸

通过测定发酵液的旋光度及其葡萄糖质量浓度,计算发酵液中2- 酮基-D- 葡萄糖酸的质量浓度,并考察该方法实际应用的可行性。结果表明：对照品溶液的旋光度、2- 酮基-D- 葡萄糖酸质量浓度和葡萄糖质量浓度之间存在良好的线性关系,R2 ＞ 0.9999;该方法精密度、稳定性和重现性良好,2- 酮基-D- 葡萄糖酸的平均回收率为102.60%,RSD 为2.17%(n=5)。该方法可用于发酵液中2- 酮基-D- 葡萄糖酸的定量检测。     

氧化葡萄糖酸杆菌产2-酮基-D-葡萄糖酸的发酵过程优化

2-酮基-D-葡萄糖酸(2-keto-D-gluconic acid,2-KGA)可作为食品添加剂、照片显影剂、洗涤剂等,也是合成D-异抗坏血酸的重要前体。为提高2-KGA的产量及转化率,对2-KGA发酵生产工艺条件进行优化。从5株野生菌株中筛选出最优菌株Gluconobacter japonicus CGMCC 1. 49,在摇瓶上进行培养基以及培养条件的优化。在此基础上,在3 L发酵罐中进行发酵优化实验,提高2-KGA的产量。当葡萄糖质量浓度为100 g/L,玉米浆粉质量浓度为20 g/L,发酵温度为30℃时,摇瓶水平发酵产量为76. 3 g/L,较优化前提高了120. 0%。在3 L发酵罐上控制恒定p H值为6、溶氧浓度30%条件下,一次性补料发酵产量最高为122. 1 g/L,较摇瓶水平提高了26. 7%,转化率达75. 5%。研究表明,发酵过程优化对提高野生菌株产2-KGA是一种行之有效的方法,优化结果可为后续的放大实验节省发酵成本,为氧化葡萄糖酸杆菌产2-KGA的工业化生产奠定了基础。     

补料分批培养生产2-酮基-D-葡萄糖酸的研究

研究了补糖对荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)AR4生产2-酮基-D-葡萄糖酸的影响,并在50kL发酵罐上进行了补料分批培养工业应用性试验。研究结果表明,采用补料分批培养方法,能有效提高发酵液中的产物浓度;开始补糖时发酵液中的残糖浓度以3%～6%为宜;补料分批培养方法及AR4菌株可用于2-酮基-D-葡萄糖酸的工业化规模生产中。     

基于2-酮基-D-葡萄糖酸高产的发酵条件优化研究

为了实现异维生素C前体2-酮基-D-葡萄糖酸在沙雷氏菌Serratia sp. FMME043中的高效生产,在30 L发酵罐中对补料策略和发酵条件进行了优化,建立了补料分批发酵工艺。最终确定发酵策略为:溶氧控制在40%,在发酵16、22 h及28 h时分别补加64、80 g和96 g硫酸铵,并且当残糖浓度降至15～25 g/L时,分五次等量补加801 g葡萄糖,优化后,发酵44 h,2-KGA的产量和转化率分别达到268.5 g/L和1.04 g/g,分别比优化前提高了58.4%和9.9%。本研究结果为目前报道的产量和转化率在国内外属领先水平,为2-酮基-D-葡萄糖酸及异维生素C工业化生产打下了坚实的基础。     

2-酮基-D-葡萄糖酸产生菌荧光假单胞菌A46 抗噬菌体菌株的选育

从2-酮基-D-葡萄糖酸产生菌荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)A46的异常发酵液中分离到1种噬菌体，将其命名为KS461。透射电镜观察表明，KS461呈近球形，直径为52nm。以荧光假单胞菌A46为出发菌株，利用紫外诱变的方法，获得了4株对噬菌体KS461具有抗性的2-酮基-D-葡萄糖酸高产菌株，并研究了这些变异株的遗传稳定性。研究结果表明，经8次传代，这些变异株对噬菌体的抗性及其发酵产酸能力没有改变。     

利用荧光假单胞菌固定化细胞生产2- 酮基-D- 葡萄糖酸

以海藻酸钠为载体固定荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)AR4,考察固定化细胞发酵生产2- 酮基-D-葡萄糖酸的条件。结果表明：利用5.0% 海藻酸钠制备的固定化细胞颗粒稳定性好,可重复利用7 次;发酵培养基中玉米浆的最适质量浓度为0.75g/100mL,固定化细胞的适宜发酵温度为30～36℃;在适宜的培养条件下,固定化细胞与游离细胞的2- 酮基-D- 葡萄糖酸产量及糖酸转化率基本相同,分别可达13.5g/100mL 和90.0% 左右。     

高压液相色谱法同时测定食品中抗坏血酸与异抗坏血酸的含量

目的 建立食品中同时测定抗坏血酸和异抗坏血酸含量的高压液相色谱检测方法。方法 用乙腈?0.1%磷酸水溶液(90∶10, v/v)作流动相和提取液, 以Venusil HILIC色谱柱(250 mm?4.6 mm, 5 ?m, 100 ?)分离抗坏血酸和异抗坏血酸。结果 抗坏血酸的平均回收率为96.61%, 异抗坏血酸的平均回收率为96.53%,异抗坏血酸和抗坏血酸最低检出浓度分别为0.35 ?g/mL和0.42 ?g/mL。结论 该方法准确、灵敏、精密度高, 适用于食品中抗坏血酸与异抗坏血酸的测定。     

UPC~2快速测定葡萄酒中抗坏血酸和异抗坏血酸含量研究

建立了超高效合相色谱法(Ultra Performance Convergence Chromatography,UPC2)分离和测定葡萄酒中抗坏血酸和异抗坏血酸的方法。超高效合相色谱(UPC2)技术集合超临界流体色谱(Supercritical Fluid Chromatography,SFC)和超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLCTM)的技术优点,流动相CO2为主体,0.1%磷酸甲醇为助溶剂。选用Waters BEH色谱柱,流速1.5 m L/min,检测波长为245 nm,方法检出限为2.0 mg/kg,定量限为6.0 mg/kg,线性范围为2.5~80.0 mg/L;加标回收率范围为93.2%~105.9%;相对标准偏差RSD为4.5%~9.8%,该方法操作便捷、检测速度快、准确性高、重复性好、节约成本,能够满足葡萄酒中抗坏血酸和异抗坏血酸的检测。      

Determination of ascorbic and isoascorbic acid in beverages and additives to meat products by capillary isotachophoresis

 A isotachophoretic method with conductivity detection was developed to directly determine ascorbic acid in food samples. The leading electrolyte contained hydrochloric acid (10 mmol/l), β-alanine (pH 3.0), and methylhydroxyethylcellulose (0.1%). The terminating electrolyte was 5 mmol/l caproic acid. The method is suitable for determining ascorbic acid in juice, beers, and as additives to meat products. The method was also applied for the determination of isoascorbic acid in additives to meat products. Received: 21 February 2000 / Revised version: 15 May 2000     

活性炭固载磷钨酸催化合成顺丁烯二酸二异辛酯

利用颗粒状活性炭固载磷钨酸和聚乙二醇(400)为混合催化剂，以顺丁烯二酸酐和异辛醇为原料，合成渗透剂T的中间体顺丁烯二酸二异辛酯．研究了反应中的催化剂用量、醇酐量比及反应时间对酯化率的影响．确定了合成该酯的最佳工艺条件为n(醇)：n(酐)：3：1，反应温度为120℃，反应时间为2h．在此条件下酯化率超过95％．此法催化剂用量少，酯化率高，反应时间短，工艺简单．副反应少，无废酸排放，有利于环保。     

蓖麻酸(酯)合成共轭亚油酸研究进展

蓖麻酸(酯)是蓖麻油的最主要成分,其结构决定了它很容易转变成共轭亚油酸(CLA).综述了由蓖麻酸(酯)合成CLA的研究进展,并对CLA的合成发展进行了展望,以期为CLA的高效合成提供参考.     

食用香料4-乙基辛酸的合成概况

4-乙基辛酸是国内外允许使用的食用香料,它存在于煮羊肉、烤羊肉、羊脂肪、山羊奶酪、绵羊奶酪、弗吉尼亚烟草中。4-乙基辛酸具有强烈的羊膳气息,是调配羊肉香精的重要原料。文献报道的合成4-乙基辛酸的方法主要有以2-乙基己醛和丁酮为原料制备4-乙基辛酸、采用丙二酸酯烷基化反应制备4-乙基辛酸、利用Knoevenagel反应制备4-乙基辛酸、γ-乙基-γ-辛内酯裂解法制备4-乙基辛酸、采用腈制备4-乙基辛酸、采用偶联反应制备4-乙基辛酸、以己醛为起始原料制备4-乙基辛酸、以醛和Witting试剂为起始原料制备4-乙基辛酸。通过对比每种方法的优缺点,认为丙二酸酯烷基化法制备4-乙基辛酸和利用Knoevenagel反应制备4-乙基辛酸是比较可行的合成方法。     

利用重组枯草芽孢杆菌L-氨基酸连接酶合成丙谷二肽

利用大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE 3)克隆并表达来源于枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis ATCC 15245的L-氨基酸连接酶(L-amino acid ligase,Lal)基因,采用Ni-NAT亲和层析法分离纯化得到重组的Lal,并以L-丙氨酸和L-谷氨酰胺为底物制备L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(丙谷二肽).Lal属于ATP依赖酶,研究结果表明其最适反应温度和pH值分别为37℃和9.0,连续催化反应14 h可催化等摩尔的底物氨基酸(30 mmol/L)生成22.4 mmol/L的丙谷二肽,最高摩尔转化率可达74.7％.成功克隆表达了枯草芽孢杆菌的L-氨基酸连接酶,并将其应用于丙谷二肽的酶法合成,研究结果可为丙谷二肽的生物制造奠定理论基础.     

Optimisation of kojic acid monolaurate synthesis with lipase PS from Pseudomonas cepacia

To improve the instability of kojic acid in food and cosmetic use, the esterification of kojic acid catalysed by lipase from Pseudomonas cepacia (Amano PS) to synthesise kojic acid monolaurate (KAML) was investigated in this study. Response surface methodology (RSM) with a five‐level/five‐factor central composite rotatable design (CCRD) was employed to evaluate the effects of synthesis parameters such as reaction time (8–24 h), temperature (35 55 °C), enzyme amount (10–50%), substrate molar ratio of lauric acid to kojic acid (1:1–3:1) and added water content (0–20%) on the percentage molar conversion to KAML by direct esterification. Reaction time and added water content were the most important variables, while substrate molar ratio had less effect on percentage molar conversion. Based on canonical analysis and ridge maximum analysis, optimal synthesis conditions were reaction time 19 h, temperature 44 °C, enzyme amount 38%, substrate molar ratio 2:1 and added water content 10%. The predicted value was 85% and the actual experimental value 82% molar conversion. © 2002 Society of Chemical Industry