云南冬春香料烟曲叶病的侵染循环途径

为有效防治由粉虱传双生病毒引起的香料烟曲叶病(White fly transmitted geminiviruses,WTGs),对云南香料烟曲叶病中间寄主、传毒介体、香料烟曲叶病发病株三者间的关系和相互影响进行了调查,并对云南香料烟曲叶病的侵染循环途径进行了研究.结果表明,WTGs于每年9月下旬至11月上旬,通过烟粉虱活动从中间寄主传播到香料烟烟苗上,引起苗期发病;移栽时无症状的带毒烟苗移栽进入大田,在大田期表现出症状.2月下旬烟粉虱又在香料烟和中间寄主之间活动,并传播WTGs,直到5月份香料烟采收结束.此后WTGs残存于病烟株残体和中间寄主上,至第2年同期引发下一个侵染循环.烟粉虱和中间寄主是侵染循环过程中的关键因素.     

小麦纹枯病

正小麦受纹枯菌侵染后,在各生育阶段出现烂芽、病苗枯死、花秆烂茎、枯株白穗等症状。烂芽芽鞘褐变,后芽枯死腐烂,不能出土;病苗枯死发生在3~4叶期,初仅第一叶鞘上现中间灰色,四周褐色的病斑,后因抽不出新叶而致病苗枯死;花秆烂茎拔节后在基部叶鞘上形成中间灰色,边缘浅褐色的云纹状病斑,病斑融合后,茎基部呈云纹花秆状;枯株白穗病斑侵入茎壁后,形成中间灰褐色,四周褐色近圆形或椭圆形眼斑,造成     

烟稻轮作与烟草土传病害发生关系的初步探讨

烟草青枯病、黑胫病、根结线虫病是广西烟区大田期的主要侵染性病害。其共同特点是病原物均在土壤中和病株残体组织上越冬。而土壤中的病原物便是次年病害初侵染的主要来源,属土壤传染病害的范畴,但这些病原物在水淹下很容易死亡。为此,广大烟农在多年实践中便摸索出一套较为完整的烟稻轮作方式。为了进一步了解该类病害发生危害与烟稻轮作方式之间的关系,1989～1991年我们在玉林、柳城、隆安、荔浦、融安、罗城等县市进行了调查研究,现将初步结果整理如下:     

广东省烟区烟草花叶病主要病原鉴定

为明确广东省烟草病毒病种类及其主要侵染病原,对广东2个主要烟区(韶关地区和梅州地区)进行了病毒病害调查,并对采自田间的62个花叶病样本,通过鉴别寄主、ELISA和RT-PCR法进行了病原种类鉴定。结果表明:在上述2个主要烟区,主要是花叶病危害,很少发现其他病毒种类;病原鉴定方面,在62个花叶病样本中,61.29%为单TMV侵染,20.97%为单CMV侵染,17.74%为TMV和CMV复合侵染。     

蒸汽对烟草漂浮苗干根中烟草花叶病毒的失活效果

为了评价蒸汽用于烟草漂浮育苗旧苗盘残留物中烟草花叶病毒（TMV）的消毒效果，采用枯斑寄主和K326接种方法，测定了蒸汽对烟草漂浮苗花叶病株干根中TMV的失活效果。结果表明，96℃蒸汽蒸3～60min，对病苗干根中TMV失活效果高，可达99．9％。血清学检测结果表明，蒸汽消毒3min能有效破坏病根样品中TMV抗原。推荐旧苗盘TMV蒸汽消毒方法为：苗盘润湿后96℃蒸汽保持不少于3min。但在96℃蒸汽中保持5min后，普通聚苯乙烯泡沫苗盘在冷却过程中变形。     

两株根际促生细菌对TMV的生防作用研究

烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus，TMV）是危害烟草的主要病毒之一，其寄主范围广、侵染力和抗逆性强，尚无有效的抗病毒药剂。利用植物根际促生细菌（PGPR）对寄主的促生以及对病毒的钝化作用进行病毒病早期预防，是控制TMV的有效途径。本文对筛选到的两株PGPR菌株Sa和Sk进行了菌株鉴定及促生和防病作用研究。结果表明:Sa为芽孢杆菌属（Bacillus sp.）、Sk为假单胞菌属（Pseudomonas sp.）。在霍格兰氏营养液中添加Sa、Sk的发酵上清液，能显著促进烟苗的根系发育和茎叶生长；“半叶法”试验结果显示Sa、Sk的发酵上清液能在体外钝化TMV，并且Sa的粗蛋白溶液、去蛋白上清、蛋白失活后的粗蛋白溶液对TMV的抑制效果分别为85.2%、83.1%、36.2%，说明Sa的发酵物中对TMV起钝化作用的活性物质主要包括蛋白和非蛋白两类；Sk的粗蛋白溶液、去蛋白上清抑制TMV的效果分别为88.0%、0%，说明Sk的发酵物中对TMV起钝化作用的活性物质主要为蛋白类。利用TMV30B侵染性克隆，观察到Sa、Sk发酵上清液能显著抑制病毒的初侵染。室内栽培烟株喷施Sa、Sk发酵上清后，对TMV的防效分别为27.71%和18.55%。芽孢杆菌Sa生防效果好于Sk，具备抗病毒剂的开发潜力。      

安徽省烟草病毒种类的血清学鉴定

2007年从安徽亳州、宣城和芜湖等地的烟草产区共采集181个表现明显病毒病症状的病样,采用Tas-ELISA和间接ELISA方法共检测112个病样,其中分别检测宣城黄渡、宣城金坝、芜湖红杨、芜湖三元各16个病样以及亳州陈店48个病样。结果显示,安徽宣城32个病样中,TMV、CMV、PVY的阳性率分别为91%、3%、50%,芜湖32个病样中,TMV、CMV、PVY的阳性率分别为66%、0、75%,说明宣城、芜湖烟区侵染烟草的病毒种类以TMV、PVY为主,CMV为零星侵染;亳州48个病样中,TMV、CMV、PVY的阳性率分别为100%、48%、8%,说明亳州烟区侵染烟草的病毒种类以TMV、CMV为主,PVY侵染发生较少。     

种子携带病毒对烟草苗期病毒病发生的影响

为了有效控制烟草苗期病毒病,进行了种子携带病毒对烟草苗期病毒病发生的影响盆栽试验。取健康烟草种子用不同浓度的TMV、CMV和PVY侵染液浸泡处理后进行漂浮育苗。在烟苗大十字期测定浸种烟苗的病毒携带率及含量。结果表明,种子经TMV、CMV和PVY侵染液浸泡的处理烟苗均不同程度地感染了病毒病。导致烟苗带毒的侵染液最低病毒浓度(阈值)TMV为7.46×10~4copies/μL、CMV为7.44×10~4copies/μL、PVY为7.52×10~4copies/μL。烟苗携带病毒含量与侵染液的病毒浓度不相关。烟草种子表面携带病毒含量高于阈值则导致烟草苗期感染病毒病。     

汽爆烟秆替代基质对烤烟漂浮育苗烟苗素质的影响

为研究汽爆烟秆替代商品基质对烤烟漂浮育苗烟苗素质的影响,以100%商品基质为对照,采用不同配比汽爆烟秆与商品基质混合进行烤烟漂浮育苗试验,结果表明,汽爆烟秆替代商品基质处理烟苗的出苗率在95%以上,与对照无明显差异,成苗率高于对照;成苗时烟苗茎高、叶片数及地上部分鲜干重优于对照,而茎围、根系条数、根鲜干重及叶绿素含量、根系活力、超氧化物歧化酶(SOD)活性和过氧化酶(POD)活性与对照无明显差异;汽爆烟秆替代商品基质处理基质成本比对照降低11.88~47.71元/hm2。总体而言,汽爆烟秆可以代替商品基质进行烤烟漂浮育苗。     

受烟草花叶病毒侵染程度不同的烤烟叶片光合特性的变化

研究了受烟草花叶病毒(TMV)侵染程度不同的烤烟叶片光合特性的变化。结果表明,受TMV侵染的烟株叶片叶绿素和类胡萝卜素含量均有不同程度的下降,同时叶绿素荧光参数Fv/F0、Fv/Fm、ΦPSⅡ、qp和NPQ也有所下降。受TMV侵染的叶片的净光合速率(Pn)明显下降,在轻度感病条件下,引起Pn下降的主要原因是气孔限制;在重度感病条件下,引起Pn下降的主要原因是非气孔限制。     

复合亚氯酸钠灭活烟草花叶病毒的机理分析

为揭示复合亚氯酸钠（500 mg/L）杀灭烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）的机理,采用荧光定量RT-PCR检测药剂处理后的病毒CP基因和Rep基因表达量,并利用间接酶联免疫吸附法测定了TMV CP的破坏程度;同时接种心叶烟,通过枯斑数统计分析了TMV的侵染活性;利用大片段步移RT-PCR检测TMV相关基因片段的损伤,并使用透射电镜观察药剂处理后病毒粒子被破坏的情况。结果显示:①药剂处理30 min可以完全抑制TMV CP基因的表达,处理60 min可完全抑制TMV Rep基因的表达。此时,TMV CP被完全破坏,病毒也完全丧失了对枯斑寄主心叶烟的侵染能力。②药剂处理30 min时,TMV的183kDa-1、183kDa-2、183kDa-3、183kDa-4、54kDa、CP&MP基因编码区等6个区域中的183kDa-2、183kDa-4和CP&MP区域首先被损伤,但接种叶叶脉和接种叶叶柄上的这3个区域可以正常扩增。处理45 min时,接种叶叶脉、接种叶叶柄和接种叶上部叶片的183kDa-1、183kDa-3和54kDa区域可以正常扩增,而其他3个区域不能正常扩增;对照叶、茎、接种叶下部叶片的6个区域均不能正常扩增。处理60 min时,各部位的基因组片段扩增结果均呈阴性。因此,可以确定药剂处理导致的CP损伤是造成病毒侵染性丧失的主要因素,核酸损伤与病毒失活无关。③透射电镜观察发现,药剂处理1.5 h后病毒粒体完全断裂成碎片状。      

云南烟草漂浮苗主要病毒病种类的检测

采用三抗体夹心法和双抗体夹心法对云南省烟草漂浮苗移栽前后样本进行了病毒种类的检测。苗期采集的1400多个样本的检测结果表明:云南省为害烟草漂浮苗的病毒种类主要为烟草普通花叶病毒(TMV),占95%以上;黄瓜花叶病毒(CMV)和马铃薯Y病毒属病毒(包括PVY和TEV等)较少见,占5%以下。感染TMV的育苗池,烟苗带毒率大多比较高(15%~80%);管理良好的育苗棚,烟苗TMV带毒率为零或很低(低于0.5%)。在移栽后团棵期对花叶型病毒病发病率高(20%以上)的取样点采集的697个烟草花叶症状样本的检测结果显示,烟草病毒病害仍以TMV为主,检出率48.1%~100%,CMV和马铃薯Y病毒属病毒较少见,检出率0%~12.2%。因此,漂浮育苗苗期和移栽后大田前期病毒病的综合防治应以TMV为重点。     

菌克毒克防治烟草普通花叶病毒(TMV)及对病程相关蛋白的诱导作用研究

１９９８～１９９９年在室内进行了菌克毒克防治ＴＭＶ药效试验。室内结果表明,使用菌克毒克１５０倍液、２００倍液、２５０倍液预防烟草花叶病毒的防效依次为８２．２％、７０％、６１．１％。抗病毒剂菌克毒克注射于珊西烟（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ ｖａｒ．Ｘａｎｔｈｉ ｎｃ）下部叶片,上部叶片接种ＴＭＶ,结果菌克毒克诱导上部未注射叶片对ＴＭＶ侵染的抗性对侵染的抑制率为６５．５％～８２．６％,对菌克毒克处理叶片及上部叶未处理叶片细胞间液中的病程相关蛋白进行电泳分析,结果表明,菌克毒克可系统地诱导珊西烟产生７种健康植株所设有的ＰＲ蛋白,ＰＲ蛋白的诱导与抗病性、耐病性的诱导相一致。     

壳寡糖膦酸酯对烟草花叶病毒抗性及其机理的初步研究

为开发新的生物源抗烟草花叶病毒(TMV)剂,对合成的5种壳寡糖膦酸酯进行了抗性盆栽试验研究,通过心叶烟的鉴定发现,5种药剂对TMV都具有显著的抗病效果,其中浓度为200 μg·mL-1的COS-P-3处理效果最佳,达到了90.79％的枯斑抑制率,分别比市售药剂二(辛基胺乙基)甘氨酸盐和宁南霉素提高51.8％和24.0％,显著提高了预防效果.用筛选出的抗病毒剂处理豫烟5号,烟草叶片的叶绿素含量比接种对照明显提高,而同时超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性均有不同程度的提高.结果表明,新型壳寡糖膦酸酯COS-P-3通过诱导烟草防卫反应、提高防御酶活性,保护叶片中叶绿体合成,从而减轻病毒的侵害.     

不同有机肥与无机肥配施对烤烟生长及铅、镉含量的影响

为降低烟叶中的重金属含量,提高烟草及其制品的安全性,采用盆栽试验的方法,研究了不同种类的有机肥与无机肥配施对烤烟生长发育及重金属含量的影响。结果表明,在施氮量相同条件下,有机肥与无机肥配施的处理在后期促进烤烟的生长发育,提高烟叶生物量;商品有机肥与无机肥配施显著降低烟株铅含量,烟叶铅含量比 CK 减少了43.83%;农家肥与无机肥配施显著降低烟株镉含量,烟叶镉含量比 CK 减少了33.29%;各处理烤烟不同器官对铅、镉吸收与分配分别为根＞叶＞茎与叶＞茎＞根,根系铅分配率达46.48%～60.91%,烟叶镉分配率为78.03%～81.39%。     

Kinetin increases chromium absorption, modulates its distribution, and changes the activity of catalase and ascorbate peroxidase in Mexican Palo Verde

This report shows, for the first time, the effectiveness of the phytohormone kinetin (KN) in increasing Cr translocation from roots to stems in Mexican Palo Verde. Fifteen-day-old seedlings, germinated in soil spiked with Cr(III) and (VI) at 60 and 10 mg kg(-1), respectively, were watered every other day for 30 days with a KN solution at 250 μM. Samples were analyzed for catalase (CAT) and ascorbate peroxidase (APOX) activities, Cr concentration, and Cr distribution in tissues. Results showed that KN reduced CAT but increased APOX in the roots of Cr(VI)-treated plants. In the leaves, KN reduced both CAT and APOX in Cr(III) but not in Cr(VI)-treated plants. However, KN increased total Cr concentration in roots, stems, and leaves by 45%, 103%, and 72%, respectively, compared to Cr(III) alone. For Cr(VI), KN increased Cr concentrations in roots, stems, and leaves, respectively, by 53%, 129%, and 168%, compared to Cr(VI) alone. The electron probe microanalyzer results showed that Cr was mainly located at the cortex section in the root, and Cr distribution was essentially homogeneous in stems. However, proven through X-ray images, Cr(VI)-treated roots and stems had more Cr accumulation than Cr(III) counterparts. KN increased the Cr translocation from roots to stems.     

几个烤烟种质的抗病性比较鉴定

对9个抗花叶病烤烟品种进行综合农艺性状比较与抗病性鉴定.结果表明,9个品种对烟草普通花叶病表现出较强的抗性,其中Coker176、NC567、CV85、CV87为高抗(发病率与病情指数均为0).农艺性状与原烟外观质量以HT-5最为理想,可在生产上示范种植.     

马里兰烟病毒病症状类型、毒源种类及病毒侵染构型研究

湖北五峰县是中国唯一的马里兰烟种植区。2011年在湖北马里兰烟产区进行病毒病发生情况大田调查,发现主要有花叶、畸形、脉坏死、蚀刻等4种症状类型,幵采用指示植物法对主要症状类型所含病毒的种类进行了鉴定;对采集的57份病毒病样本采用DAS-ELISA进行病毒种类的鉴定。结果表明,发生在马里兰烟上的烟草病毒种类包括TMV、CMV、PVX、PVY 和 TEV,TMV 检出率最高,PVY 次之;以2种或2种以上病毒复合侵染方式为主,其中 TMV＋PVY、TMV＋CMV＋PVY共存方式较为常见。     

紫茎泽兰提取物对烟草疫霉菌的抑制作用研究

  目的  为探讨紫茎泽兰提取物对烟草疫霉菌的抑制作用，为其进一步的开发和利用奠定理论基础，  方法  采用室内抑菌试验研究了紫茎泽兰叶、茎、根3个器官的乙醇提取物对烟草疫霉菌丝生长、孢子囊产生及游动孢子释放的影响。  结果  结果表明:紫茎泽兰叶、茎、根3个器官的乙醇提取物均可显著地抑制烟草疫霉菌丝的生长、孢子囊的产生以及游动孢子的释放，抑制效果随处理浓度的增大而增强；叶、茎、根乙醇提取物对烟草疫霉菌的抑菌中浓度(EC₅₀)分别为7.74 mg/mL、13.63 mg/mL和16.38mg/mL；在处理浓度为10mg/mL时，叶、茎、根3个器官乙醇提取物对孢子囊产生及游动孢子释放的抑制率均在50%以上。  结论  紫茎泽兰不同器官乙醇提取物均对烟草疫霉菌均表现出显著的抑制效果，其中以叶片的乙醇提取物的抑菌效果最佳，茎和根次之。      

普通烟草NtNAC055基因的克隆、鉴定及表达分析

NAC家族是植物中最大的转录因子家族之一，在植物生长发育以及应对环境胁迫中起着至关重要的作用，克隆和验证烟草中NAC相关基因可为烟草抗性育种提供理论依据。本研究采用RT-PCR方法从普通烟草K326根部cDNA中克隆到NtNAC055基因，对NtNAC055及其编码蛋白进行了生物信息学分析、表达模式分析、亚细胞定位和转录激活等相关试验。结果发现，NtNAC055基因的CDS序列全长为1032 bp，NtNAC055蛋白具有典型的NAC结构域，编码一个具有343个氨基酸的NAC转录因子；通过进化分析发现，烟草NtNAC055与拟南芥ANAC055同源性较高，同属于RD26亚家族；通过亚细胞定位分析以及转录激活分析发现，NtNAC055蛋白在细胞核中且具有转录激活活性；运用qRT-PCR技术，对该基因不同组织和胁迫处理后的表达进行了分析，结果显示，NtNAC055基因在根、茎、叶、花和腋芽中均有表达，且在根部表达量最高；同时，该基因受干旱和热胁迫的诱导，表明烟草NtNAC055基因可能参与了烟草的非生物胁迫应答反应。