黄连盐酸小檗碱的提取鉴定及抑菌活性研究

采用稀硫酸法提取黄连中的盐酸小檗碱并进行精制,用平板法体外抑菌实验观察不同条件下盐酸小檗碱溶液的抑菌效果以及盐酸小檗碱的最小抑菌浓度。盐酸小檗碱提取率为5.3%,纯度为76.7%。对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)依次为0.2mg/ml、0.3mg/ml、0.6mg/ml。黄连中盐酸小檗碱体外有较强的抑菌作用。     

小檗碱、白屈菜红碱、血根碱的抑菌活性及其机理

生物碱是抑菌物质的重要来源.介绍了生物碱的分类,着重讨论了小檗碱、白屈菜红碱、血根碱的抑菌活性,探讨了其作用机理,提出了生物碱抑菌作用的研究策略.     

超声辅助提取功劳木中盐酸小檗碱工艺研究

为了优化功劳木中盐酸小檗碱的超声波辅助提取工艺,采用单因子实验和L9(34)正交实验设计,研究了超声时间、超声功率、乙醇浓度、提取温度、液料比、筛分目数对功劳木中盐酸小檗碱提取的影响。结果表明,影响盐酸小檗碱得率的主次因素为乙醇浓度,液料比,超声时间,超声功率;经正交实验确定功劳木盐酸小檗碱最佳提取工艺条件为:乙醇浓度80%,超声提取时间为30min,超声功率选择为500W,液料比为9,经5次平行实验验证,该实验工艺稳定可靠,与对照实验相比,盐酸小檗碱得率可提高56.1%。     

黄柏抗菌成分的提取及对真丝的抗菌性研究

采用紫外分光光度法测定黄柏中盐酸小檗碱含量,应用L16(45)正交实验设计及单因素实验优选黄柏中盐酸小檗碱的最佳提取工艺:m(黄柏):m(提取液)=1:18;ψ(乙醇)=70%,75℃提取2次,每次提取110 min.自提盐酸小檗碱对真丝织物的抗菌性能:对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌均具有较好的抗菌性能,抑菌率都能达到70%以上.     

紫叶小檗果小檗碱的提取及抑菌活性研究

研究紫叶小檗果小檗碱的提取条件及其抑菌活性。在单因素实验和正交实验基础上,得到小檗碱的最佳提取工艺。通过平板抑菌实验测定紫叶小檗果小檗碱对马铃薯干腐病菌(Fusarium solani,F.s.)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea,B.c.)、尖孢镰刀病菌(Fusarium oxysporum,F.o.)、苹果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides,C.g.)、水稻稻瘟病菌(Magnaporthe grisea,M.g.)、苹果腐烂病菌(Cytospora sp,C.s.)六种植物病菌的抑制作用;采用滤纸片法评估紫叶小檗果及葛根、紫叶小檗果配伍制剂对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌活性。实验结果表明,小檗碱最佳提取条件为:纤维素酶用量120 mg、酶解时间120 min、料液比1:12 g/mL、浸提时间150 min,得率达到0.198%。在小檗碱浓度为4 mg/mL时,对六种植物病菌抑菌效果由大到小排序如下:尖孢镰刀病菌(F.o.) > 苹果腐烂病菌(C.s.) > 番茄灰霉病菌(B.c.) > 水稻稻瘟病菌(M.g.) > 马铃薯干腐病菌(F.s.) > 苹果炭疽病菌(C.g.),小檗碱对尖孢镰刀病菌具有较好的抑菌活性,抑菌率在小檗碱浓度为4 mg/mL时可达到89.28%;葛根与紫叶小檗果配伍对金黄色葡萄球菌的抑菌活性较强,对大肠杆菌的抑菌活性存在最佳配伍,为葛根:紫叶小檗果质量比6:44。综上所述,本实验所得提取工艺稳定、可行,可用于紫叶小檗果中小檗碱的提取,并且紫叶小檗果中小檗碱具有较强的抑菌活性,可用于食品防腐、农业生物防治等领域。     

细叶小檗碱的抑菌稳定性及其对细菌蛋白质的影响

通过滤纸片法测定细叶小檗碱对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌与大肠杆菌的抑菌圈直径（DIZ）,使用二倍稀释法测定其最低抑菌浓度（MIC）,评估其抑菌活力。通过分析温度、pH值以及紫外线照射对小檗碱抑菌活力变化率的影响,研究其稳定性。此外,测定菌体细胞内外蛋白质浓度,聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析小檗碱对细菌蛋白质的影响。结果表明：小檗碱对4种供试菌种均有一定的抑菌效果,对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌以及沙门氏菌的抑菌圈直径分别为（11.6±0.11）,（10.1±0.18）,（10.2±0.14）mm和（9.8±0.14）mm,最低抑菌浓度分别为2.40,3.60,3.30和3.945 mg/mL,对大肠杆菌的抑菌效果较显著。紫外线照射对小檗碱的抑菌活力几乎没有影响,强酸、强碱及高温破坏部分小檗碱的结构,抑菌活力降低。加入小檗碱的细菌细胞内蛋白浓度降低,而细胞外蛋白浓度增加。通过计算细胞蛋白总浓度以及SDS-PAGE分析表明小檗碱能够抑制蛋白的合成。     

盐酸小檗碱结肠定位肠溶片的制备与质量控制

目的研制盐酸小檗碱结肠定位肠溶片的制备工艺和处方,考察其体外释放度并制定该剂型的质量评价标准。方法模拟服药后该剂型在胃肠道中的生理释药过程,用3种不同p H值溶液作为释放介质,在其最大吸收波长263 nm处检测盐酸小檗碱的吸收度,并根据特定时间的药物吸收计算出累计释放度。结果药片在人工胃液、pH 6.8人工肠液不释药;在pH 7.8人工结肠液中,释放度高于标示量的70%。结论盐酸小檗碱结肠定位肠溶片的体外释放度检测结果合格。     

鱼肉中盐酸小檗碱和盐酸氯苯胍残留的快速测定

传统的固相萃取和过膜技术存在操作繁琐、耗时长等问题。本文通过优化相关技术参数,整合通过式固相萃取(PRiME)和微孔滤膜技术,实现进样前操作步骤一体化。利用液相色谱串联质谱建立鱼肉中盐酸小檗碱和盐酸氯苯胍的定量检测方法。方法验证试验结果显示:盐酸小檗碱和盐酸氯苯胍在质量浓度0.5~100μg/L范围内线性关系良好,检出限(LOD)分别是0.51μg/kg和0.53μg/kg,定量限(LOQ)分别是1.67μg/kg和1.68μg/kg,日内精密度相对标准偏差范围分别为4.09%~4.48%和3.84%~3.90%,日间精密度相对标准偏差范围为5.17%~5.73%和4.23%~5.29%。在5,10,50μg/kg 3个水平下,盐酸小檗碱和盐酸氯苯胍的回收率范围分别为91.2%~93.2%和91.3%~92.4%;RSD范围分别为4.5%~4.6%和1.8%~5.2%。采用液相色谱串联质谱法测定市售活鱼中目标化合物残留,未检出阳性样品,说明盐酸小檗碱和盐酸氯苯胍在水产养殖方面使用情况良好,该检测方法符合痕量分析的要求。     

细叶小檗果小檗碱抑菌性能及机理

本实验采用滤纸片法测定细叶小檗果实中的小檗碱对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌以及沙门氏菌的抑菌活性,以平板涂布法确定其对4种供试菌的最低抑菌浓度,评价其抑菌能力;同时通过测定生长曲线、电导率、核酸含量、细胞膜Na~+/K~+-ATP酶活力以及进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,进一步探究小檗碱抑菌机理。结果表明,小檗碱对4种供试菌均有一定的抑菌效果,对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌以及沙门氏菌的最低抑菌浓度分别为2.40、3.60、3.30 mg/mL和3.95 mg/mL,对大肠杆菌的抑菌效果较显著;扫描电子显微镜结果显示,小檗碱使菌体的形态受损、细胞破裂、细胞内物质外泄,导致菌悬液中核酸含量和电导率增大;聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明小檗碱能够抑制蛋白的合成;此外,小檗碱能使细胞膜Na+/K+-ATP酶活力降低。因此,小檗碱能通过破坏细胞膜结构抑制菌体蛋白表达,导致菌体死亡,具有良好的抑菌能力。综上,细叶果实小檗碱可作为天然防腐剂,抑制食品中腐败菌的生长,延长食品货架期。     

反相高效液相色谱法同时测定黄连花薹及黄连花茶中6种生物碱的含量

目的采用反相高效液相色谱法,建立盐酸药根碱、非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱共6种生物碱的同时测定方法,并测定其在黄连花薹和黄连花茶中的含量。方法采用反相高效液相色谱法。Xtimate~(TM)C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm、);流动相A相30 mmol/L碳酸氢铵水溶液(含有0.7%氨水、0.1%三乙胺),B相乙腈,体积比为72:28,流速为1 mL/min;检测波长345 nm;柱温为25℃;进样体积为20μL。结果在一定的浓度范围内,6种生物碱浓度与峰面积之间的线性关系良好,其检测精密度、稳定性、重复性及加样回收率的RSD值均在3%以内。测得两个品牌黄连花茶中6种生物碱含量差异不大,对4个不同来源的黄连花薹样本而言,其中盐酸黄连碱和盐酸巴马汀的含量差异也不大,但盐酸药根碱、非洲防己碱、盐酸表小檗碱和盐酸小檗碱的含量却有较大差异。结论该方法具有分析速度快、灵敏度高、重现性好等特点,该方法的普及和应用将会为黄连花茶等系列深加工产品提供一个从原料到产品的质量控制方法。     

植物源农药防治烟草病虫害

2002～2004年通过田间试验研究了几种植物源农药对烟草病虫害的防治效果。结果表明:藜芦、博落回、苦参对烟蚜有强的杀灭作用;苦皮藤、博落回对烟青虫的防治效果明显;藜芦、博落回、苦参、艾对烟草赤星病均有防治效果,其中苦参和4种药剂的复配剂效果较好;商陆对烟草普通花叶病(TMV)有较强的抑制作用。     

高速逆流色谱法分离制备博落回血根碱与白屈菜红碱

本文旨在建立一种使用常规高速逆流色谱技术分离制备高纯度博落回血根碱和白屈菜红碱的方法。通过分析型高速逆流色谱对六种溶剂体系进行快速筛选,确定以三氯甲烷-甲醇-0.2 mol/L 盐酸水溶液（4:2:2,V/V/V）为两相溶剂体系并放大到制备型高速逆流色谱上,以上相为固定相,下相为流动相,流速8 mL/min,转速为455 r/min,进样量1000 mg,温度为25 ℃条件下分离制备博落回血根碱和白屈菜红碱。实验结果表明:此方法一次性能够从1000 mg博落回生物碱粗品分离得到博落回血根碱盐酸盐505 mg和白屈菜红碱盐酸盐435 mg。经超高效液相色谱(UPLC)检测,按照外标法计算,两者纯度分别为99.77%、99.73%。采用标准品对照法、1H NMR和13C NMR对目标产物进行了结构鉴定。分离所得产物的结构数据与文献一致。该方法具有后处理简单、成本低廉、分离产物纯度高、实用性强等特点,适用于血根碱和白屈菜红碱的大量制备。     

鱼腥草丁香普鲁兰多糖复配保鲜剂对柑橘青霉病及贮藏品质的影响

为开发新型安全的植物源柑橘保鲜剂,对5种中草药水提液进行抑菌试验,筛选出对柑橘青霉菌有较好抑制作用的中草药,并探讨鱼腥草丁香普鲁兰多糖复配保鲜剂对柑橘采后青霉菌抑制效果。丁香和鱼腥草水提液对柑橘青霉菌有较好抑制作用,抑菌率分别为73.45%和49.85%,对柑橘青霉菌的MIC分别为0.60 mg/mL和1.20 mg/mL,丁香和鱼腥草混合水提液抑制毒力较单一水提液的高,EC50为0.36 mg/mL。复配保鲜剂可有效抑制柑橘的发病率,在柑橘贮藏第9 d,比对照组CK发病率降低16.67%（p<0.05）,但对失重率抑制效果不显著（p>0.05）。复配保鲜剂组有效延缓了果实可溶性固形物含量和可滴定酸度含量的增加,维持了较稳定的抗坏血酸含量,抑制了柑橘的呼吸强度。总之,丁香和鱼腥草水提液能有效抑制柑橘青霉菌菌丝体生长和孢子萌发,鱼腥草丁香普鲁兰多糖复配保鲜剂能提高柑橘对柑橘青霉病的抗性,该研究为开发新型安全的植物源柑橘保鲜剂提供理论支持。     

纳米金属氧化物对食品污染菌的杀、抑能力研究

本文选择5种纳米级金属氧化物，针对5种常见的食品污染菌，分别采用杯碟法和试管双倍稀释法进行抑菌效果研究，检测出几种纳米金属氧化物对各种细菌的抑菌圈直径，并检测出抑菌性能最好的纳米ZnO对各种细菌的MIC值。探讨了纳米氧化锌抗菌机理及在食品抗菌包装领域的应用前景。     

醉马草提取物的抑菌特性研究

用95％食用乙醇采用回流浸煮法提取醉马草各成分，提取物分为总生物碱和非生物碱两部分，总生物碱部分按极性大小又分4个部分。以此为供试液对大肠杆菌等6个菌种做抑菌谱、不同pH值下抑菌活性的变化和提取物热稳定性等实验。结果表明供试液对供试菌均有不同程度的抑制作用，得到的各供试液的最低抑菌浓度（MIC），提取物热稳定性比较好，各供试液不同pH值下的抑菌活性发生一定的变化。     

聚六亚甲基盐酸胍在造纸工业中的应用

研究了聚六亚甲基盐酸胍(PHGC)对造纸工业常见的微生物的杀抑菌性能和应用效果。结果表明：30 mg/L用量的PHGC在白水水样中的静态杀菌试验中,8 h内的杀菌率都保持80％以上。PHGC同时具有消除胶黏物质的功能,5％用量PHGC可以使残留在滤网上的胶黏物质减少50％以上,同时滤液也变得更加澄清。在纸机生产应用中,使用PHGC作为造纸杀菌剂和沉积物控制剂,可有效降低白水的微生物水平,延长了纸机清洗周期,实验过程中纸机稳定运行,没有因为腐浆出现断纸等现象,效果优于进口杀菌剂。     

棉织物用有机胍类抗菌整理研究

探讨了有机抗菌剂盐酸聚六亚甲基胍整理到棉织物上的最佳工艺条件，确定了抗菌剂的浓度、pH值，交联剂的种类及其用量，还对抗菌织物的白度和强力等服用性能进行了测试。实验结果表明在1％的抗菌整理液中加入1％的柠檬酸，pH8～9，浴比1：15时可以获得抗菌效果优良的抗菌织物，且具有好的耐洗性。     

茶黄素抑菌作用的研究

通过体外试验研究茶黄素(纯度40％)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉、变形链球菌和远缘链球菌的抑菌作用.采用牛津杯测定法及最低抑菌浓度(MIC)测定法研究茶黄素的抑菌作用及对变链菌产酸能力的影响.结果表明,茶黄素对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有较强的抑菌作用,并与其浓度呈正相关,而对黑曲霉无抑菌作用;荼黄素能明显抑制口腔中主要的致龋菌变形链球菌和远缘链球菌的生长及产酸(P＜0.05),提高菌液pH值,具有一定的防龋效果.荼黄素是一种天然抗菌剂,作为食品添加剂可以提高食品的安全、卫生.     

氦气等离子体改性技术对壳聚糖材料结构与抗菌性能的影响

考虑到微生物污染引起的相关安全性问题,为了改善壳聚糖材料的抗菌性能,提高壳聚糖基抗菌材料的进一步应用,本文利用等离子体技术,在氦气氛围下对壳聚糖材料进行改性处理,设计得到改性壳聚糖抗菌材料,并通过抗菌实验、游离蛋白/核酸等的测定,探讨改性壳聚糖材料的抗菌性能与作用机制。通过改性壳聚糖结构分析,壳聚糖材料经氦气等离子体改性后,光斑区和非光斑区表面均变得粗糙,但光斑区的粗糙程度更加明显,材料表面的-NH₂比例下降（83.32%下降到72.10%）,而-CONH₂的比例上升（16.68%上升到27.90%）,这与改性过程中带电粒子的碰撞及壳聚糖材料中化学键的断裂有关。抗菌实验结果表明,相比于未改性材料,等离子体改性壳聚糖材料显著提高大肠杆菌的抗菌性能（P<0.05）,而对于金黄色葡萄球菌,改性前后并没有显著性差异（P>0.05）。改性壳聚糖材料表面的化学基团变化,其与细菌接触时,能明显改变细菌细胞膜通透性,并局部形成不利于细菌生长的环境,从而达到抗菌的效果。     

聚六亚甲基双胍盐酸盐在棉织物上的静电自组装及其抗菌性能

 将聚六亚甲基双胍盐酸盐(PHMB)和聚苯乙烯磺酸钠(PSS)通过静电自组装构筑在棉纤维表面,赋予纤维抗菌性能。扫描电镜表明纤维的表面形态发生明显变化,组装后纤维表面粗糙,有沉积物质覆盖。Zeta电位和染色着色深度证实表面电位及K/S值随纤维表面沉积物质不同呈有规律的"层层交替振荡"现象,揭示了纤维表面层层静电自组装的构筑机制。组装后棉织物的抑菌率达到99.51%,显示出优异的抗菌性能,且组装整理后的棉织物耐水洗牢度较好。