多杀菌素分离纯化工艺的研究

利用大孔树脂吸附结合硅胶柱层析技术对发酵液中多杀菌素的分离纯化进行了研究。首先考察了提取溶剂、发酵液pH和料液比对浸提多杀菌素的影响;然后对7种不同极性的大孔吸附树脂进行了静态和动态吸附性能的研究,考察了不同吸附、解吸条件对大孔吸附树脂性能的影响,最后对硅胶柱层析法精制多杀菌素的工艺条件进行了探索。结果表明:当发酵液pH为8.0,料液比1∶3(g∶v)时,乙醇可高效浸提多杀菌素;大孔吸附树脂DM11对多杀菌素的静态吸附量和解吸率分别为12 508μg/g(湿树脂)和93.47%;大孔树脂动态吸附最佳pH为9.0,最佳载样比为多杀菌素质量(mg):树脂体积(mL)=2.5∶1;采用70%~95%乙醇梯度洗脱,多杀菌素洗脱率为97.5%;多杀菌素精制时硅胶柱以石油醚/乙酸乙酯/甲醇(2∶1∶0.2和1∶1∶0.25)为洗脱剂进行分段洗脱。该工艺得到的多杀菌素回收率为67.25%,纯度为90.58%。     

藏红花素Ⅰ的分离制备及抗氧化与稳定性研究

建立硅胶柱层析法分离制备栀子黄色素中藏红花素Ⅰ的方法,并对所得产品进行抗氧化性与稳定性研究。建立了乙酸乙酯-甲醇-水(体积比为100∶20∶15至100∶25∶15)的梯度洗脱体系,以及层析柱硅胶与栀子黄色素的质量比为350∶1的上样量比例,并制备出纯度为98.39%的藏红花素Ⅰ单体样品,其得率为15.58%,回收率为50.42%。抗氧化与稳定性研究结果表明,藏红花素Ⅰ具有优良的抗氧化活性;藏红花素Ⅰ在高温、强光照射、强酸强碱环境中均会产生损失。含藏红花素Ⅰ成分的产品应贮存于低温、避光、pH值为6的环境中,且与适量抗坏血酸联用可以提高其稳定性。     

藏红花素I的分离制备及抗氧化与稳定性研究

建立硅胶柱层析法分离制备栀子黄色素中藏红花素I的方法，并对所得产品进行抗氧化性与稳定性研究。建立了乙酸乙酯-甲醇-水（体积比为100∶20∶15至100∶25∶15）的梯度洗脱体系，以及层析柱硅胶与栀子黄色素的质量比为350∶1的上样量比例，并制备出纯度为98.39%的藏红花素I单体样品，其得率为15.58%，回收率为50.42%。抗氧化与稳定性研究结果表明，藏红花素I具有优良的抗氧化活性；藏红花素I在高温、强光照射、强酸强碱环境中均会产生损失。含藏红花素I成分的产品应贮存于低温、避光、pH值为6的环境中，且与适量抗坏血酸联用可以提高其稳定性。     

大孔树脂-硅胶柱层析法纯化花生根中白藜芦醇

研究了大孔树脂-硅胶柱层析法分离纯化花生根中白藜芦醇的工艺。通过动静态解吸附试验确立大孔树脂最佳分离工艺为:大孔树脂为聚酰胺,上样质量浓度26.58μg/mL,解吸剂为80%乙醇,洗脱流速2 BV/h。通过薄层色谱与硅胶柱层析试验,确定最佳纯化条件为:洗脱剂V(氯仿)∶V(甲醇)=40∶1、流速30 mL/min、m(硅胶)∶m(样品)=1∶1。产物经V(甲醇)∶V(氯仿)=3∶1重结晶后,采用高效液相色谱测定其纯度为97.01%。     

利用大孔吸附树脂吸附分离藏红花细胞培养液中藏红花素和藏红花苦素

目的:研究大孔树脂提取藏红花细胞培养液中藏红花素和藏红花苦素的工艺。方法:对4种大孔树脂提取藏红花素和藏红花苦素的效果进行比较,考察HPD-100A大孔树脂提取藏红花素和藏红花苦素的最佳工艺条件。结果:HPD-100A树脂提取藏红花素和藏红花苦素效果最佳,其最适工艺条件为25℃、色素液pH6、藏红花素和藏红花苦素上样质量浓度分别为1.0mg/mL和24.6mg/mL、溶液处理量1.5BV、吸附流速1.5mL/min、洗脱剂为体积分数40%乙醇溶液、洗脱剂体积1.7BV、洗脱流速1.0mL/min。藏红花素和藏红花苦素的吸附率分别达到94.4%和75.5%,解吸率分别为99.9%和87.5%。结论:采用大孔吸附树脂吸附分离藏红花培养液中藏红花素和藏红花苦素方法可行,前景广阔。     

麦芽中原花青素的提取纯化

为更好地研究麦芽来源的原花青素性质,建立了麦芽中原花青素的提取方法,用AB-8大孔吸附树脂对提取液分离纯化,进行动态吸附解吸实验,得到以乙醇为萃取剂的有机溶剂萃取佳条件为:乙醇体积分数60%,提取温度85℃(乙醇处于沸腾状态),料液比为1∶25(g∶mL),提取时间1.5 h。AB-8大孔吸附树脂动态吸附条件:样品质量浓度0.57 mg/mL,上样流速0.5 mL/min。动态解吸条件:洗脱剂乙醇体积分数60%,洗脱流速为1 mL/min,洗脱剂体积为65 mL,麦芽原花青素回收率可达95.2%,干基含量(纯度)为67.58%。     

HPD-400大孔吸附树脂分离纯化栀子黄色素的研究

文章研究了吸附树脂法精制栀子黄色素的工艺条件.实验结果表明:大孔树脂HPD-400比较适合吸附和分离栀子黄色素,其吸附率为96.88％,pH对吸附率的影响不大,在25℃温度条件下,以适宜的乙醇浓度和速度洗脱,得到的栀子黄色素色价＞400,OD值＜0.4.     

大孔树脂分离纯化栀子黄色素的研究

本文研究了几种大孔吸附树脂对栀子黄色素的静态吸附特性,筛选出一种吸附性能较好的树脂,并对其进行了栀子黄色素的分离纯化研究。实验结果表明HPD100树脂对栀子黄色素的静态吸附率达到98.0%。适当的提取液浓度、流速及盐浓度均可增大树脂对栀子黄色素的吸附量;采用70%乙醇水溶液洗脱时,只需96ml就可以达到97.6%的洗脱率,但温度对吸附率和洗脱率的影响都不大。经过HPD100树脂分离纯化,得到的栀子黄色素色价>400,OD值<0.4。     

超声波辅助提取月柿原花青素及其纯化

研究了超声波辅助提取月柿生理落果原花青素工艺。适宜工艺条件为:超声波功率150 W、提取溶液乙醇体积分数70%、料液比(g∶mL)1∶12、提取时间15 min、提取温度45℃。通过对9种大孔吸附树脂的研究,确定LS300树脂为优选纯化树脂。研究了原花青素在LS300树脂上的吸附行为,静态吸附研究表明,其吸附等温曲线符合Freundlich等温吸附方程,吸附平衡的时间约为5h。乙醇浓度梯度洗脱试验表明,原花青素主要易被体积分数20%、40%乙醇溶液洗脱,两部分原花青素质量分数分别为86.5%、92.3%。     

栀子苷的精制纯化研究

应用6种大孔吸附树脂进行静态实验,筛选得到最佳树脂;通过动态实验确定最佳树脂对栀子苷纯化的最佳工艺参数。结果显示,D1300树脂为最佳树脂,其最佳工艺条件为上样液栀子苷废液吸光度值A238nm为1.683 0,吸附流速1.5 mL/min,洗脱流速2 mL/min,梯度洗脱,2 BV水洗,4 BV体积分数为30%乙醇洗脱。收集体积分数30%乙醇洗脱液,浓缩干燥后得到纯度为82.23%的固态栀子苷产品。     

柱色谱分离制备无酯儿茶素

目的:探索制备无酯儿茶素的工艺。方法:在前人研究的基础上,以绿茶碎末为原料,用乙醇树脂法制备无酯儿茶素产品。先用80%乙醇,按照料液比1:20、浸提50min、温度70℃的浸提工艺对茶叶进行浸提,并在树脂筛选实验和柱效实验的基础上,设计动态吸附及解吸实验,优化动态吸附与解吸儿茶素的工艺条件。结果:在该浸提条件下,儿茶素的提取率为20.16%;筛选出聚酰胺树脂来纯化儿茶素,纯化的最佳工艺条件为:上样流速1BV/h、料液浓度为20mg/mL;解吸流速为1BV/h,分别用1.2BV的水、1BV25%的乙醇以及1BV80%的乙醇溶液进行梯度洗脱;制得的无酯儿茶素其儿茶素总量≥80%、EGCG≥60%、CAF≤0.5%、得率≥7%。结论:通过本实验的最佳工艺条件制备的无酯儿茶素完全符合无酯儿茶素的要求。     

Production and Isolation of an Antibiotic from Monascus purpureus and its Relationship to Pigment Production

The cultural conditions and isolation methods for Monascidin A, an antibiotic from Monascus purpureus, are reported. A static liquid culture medium consisting of yeast extract (0.8%) and glucose (10%) is most suitable for antibiotic production in that most of the pigments accumulated within the mycelium while the antibiotic dissolved in the culture medium. Silica gel adsorption chromatography was used to separate major pigment components from the biologically active fractions, using an eluting solvent of benzene: methanol:chloroform (30:10:9, v/v/v). Further purification using silica gel TLC plates developed with benzene:methanol:chloroform (30:20:9, v/v/v) separated the active fractions into two components, a fluorescent yellow pigment and the pale yellow antibiotic. The dose response of Bacillus subtilis to the purified antibiotic was determined and the minimum effective dosage was about 1.5 μg per 6 mm paper assay disc.     

大孔树脂法纯化茶皂素研究

为了提高茶皂素的纯化效率以实现工业化生产,采用静态吸附试验与动态吸附试验相结合的方法筛选合适的大孔树脂,并在单因素试验的基础上,采用正交试验优化工艺参数.重点考察了上样速度、溶剂乙醇体积分数、上样液质量浓度对动态吸附率的影响以及洗脱剂乙醇体积分数、洗脱剂流速、洗脱剂体积对动态解吸率的影响.优化出D4020大孔树脂的动态吸附工艺参数为:上样速度0.9 mL/min,溶剂乙醇体积分数20％,上样液质量浓度27 mg/mL;动态解吸工艺参数为:洗脱剂乙醇体积分数60％,洗脱剂流速1.8 mL/min,洗脱剂体积2.0 BV.     

大孔吸附树脂分离纯化芦荟苦素的工艺研究

研究比较了六种大孔吸附树脂HZ-801、HZ-806、HZ-818、HZ-841、HZ-830、HZ-816对芦荟苦素的吸附和解吸性能,从中筛选出适合芦荟苦素分离纯化的最佳树脂即HZ-830,并对该树脂的静态和动态吸附条件进行了研究,确定了树脂纯化芦荟苦素的最佳工艺条件,即:在25℃下,最佳上样浓度为0.5321mg/mL左右,吸附流速2BV/h,上样量为10BV,上样后分别用6BV的水和4BV的5%的乙醇洗脱,洗脱流速为3BV/h,经树脂一次柱纯化后芦荟苦素的纯度由9.58%提高到56.01%,回收率为75.9%,经过同一柱纯化体系进行二次上柱纯化后芦荟苦素的纯度由56.01%提高到85.8%,回收率为66.5%,二次纯化产品再经无水乙醇结晶的产物纯度可达95%以上。     

大孔吸附树脂分离纯化茶叶籽饼粕中的茶皂素研究

目的对采用大孔吸附树脂法分离纯化茶叶籽饼粕中茶皂素的工艺进行优化,为进一步开发利用茶叶籽资源提供依据。方法以茶皂素吸附率与解吸率为指标,通过静态吸附与解吸实验筛选最优树脂。通过单因素实验、正交实验及验证性实验,优化最优树脂动态吸附与解吸茶皂素的工艺参数。结果D101树脂的静态吸附量与解吸率分别为142.974 mg/g和98.02%,为分离纯化料液中茶皂素的最优树脂;当主要考虑茶皂素得率时,其最优动态吸附与解吸工艺参数为上样质量浓度10 mg/m L、上样流速3 BV/h、上样体积6 BV、乙醇洗脱体积浓度80%、洗脱流速3 BV/h、洗脱剂体积5 BV,在该工艺参数条件下,茶皂素得率为74.25%,纯度为84.30%;当主要考虑茶皂素纯度时,最优动态吸附与解吸工艺参数为上样质量浓度10 mg/m L、上样流速4 BV/h、上样体积7 BV、乙醇洗脱体积浓度70%、洗脱流速3 BV/h、洗脱体积5 BV,在该工艺参数条件下,茶皂素纯度为97.7%,得率为72.04%。结论 D101大孔吸附树脂是一种可应用于茶叶籽饼粕中茶皂素分离纯化的较好树脂。     

金线莲苷的硅胶柱层析分离

为进一步提高金线莲苷的分离纯化效率,该研究以深度共熔溶剂提取的金线莲苷粗品为基础,比较了大孔树脂法和硅胶柱层析法分离金线莲苷的效果,并优化了硅胶柱层析法分离金线莲苷的条件。实验结果表明,DM130型大孔树脂对金线莲苷的吸附量仅为24.69 mg/g,解吸率为17.89%,且无法选择性的分离金线莲苷,而硅胶柱层析法对金线莲苷的分离效果较好;硅胶柱层析法分离金线莲苷的最佳条件为：洗脱溶剂为乙酸乙酯:乙醇:乙酸=6:4:0.2（V/V/V）,上样量为0.60 g,洗脱速率为1.25 mL/min,在此条件下,金线莲苷的回收率可达79.29%;硅胶柱层析分离组分经半制备型高效液相色谱纯化所得的金线莲苷纯度大于99.00%。该研究建立了一种简单高效的金线莲苷分离纯化流程,有利于金线莲产业的发展,为后续的研究工作提供理论支持。     

大孔树脂分离纯化发酵液中虫草素的研究

采用大孔树脂富集纯化北冬虫夏草发酵液中的虫草素,通过比较发现6种大孔树脂中NKA-Ⅱ型大孔树脂对虫草素的吸附与解吸效果最好。静态和动态参数优化结果表明,NKA-Ⅱ型树脂纯化虫草素的最佳吸附平衡时间为6 h,解吸平衡时间为3 h。优化后的动态参数为:以1 BV/h流速上样吸附,体积分数10%乙醇除杂,70%乙醇以4 BV/h的流量洗脱。该工艺所得样品虫草素质量分数达35%,纯度提高了10倍,虫草素回收率达90%以上,经反复结晶后得到纯度大于98%的虫草素。     

红松子种皮中多酚成分的分离纯化研究

研究AB-8大孔树脂对红松子种皮中多酚成分的吸附特性,通过静态吸附及动态吸附试验,确定适合于红松子种皮多酚分离纯化的条件。结果显示,提取物样品液浓度为1.5mg/mL,进样速度为2.0BV/h,以30%乙醇作为洗脱剂,洗脱速度为1.5BV/h,红松子种皮多酚纯度可达70.2%。     

大孔吸附树脂纯化花生根中白藜芦醇工艺及其动力 学研究

以花生根白藜芦醇提取液为原料,对选取的5种大孔树脂进行静态吸附试验,确定DA-201树脂为最优吸附树脂.通过DA-201树脂吸附白藜芦醇的动力学试验、DA-201树脂等温吸附试验、上样量试验与动态洗脱试验以及考察上样流速、洗脱流速和洗脱溶剂浓度的三元二次通用旋转组合设计柱层析试验等研究发现:DA-201树脂等温吸附白藜芦醇过程符合Langmuir和Freundilch方程.在上样质量浓度为0.7 mg/mL,上样液pH 3,上样体积为20 mL,洗脱体积为15 mL的条件下,进行DA-201大孔吸附树脂柱层析纯化试验,建立了大孔吸附树脂柱层析纯化白藜芦醇的数学模型.经回归与方差分析,对方程进行局部寻优得出:在上样流速1.00 mL/min,洗脱流速1.60 mL/min,乙醇体积分数75%,其纯化后白藜芦醇的得率为(80.13±0.01)%,经HPLC检测其纯度可以达到39.61%.     

红曲发酵液中水溶性红曲黄色素的吸附分离

本文考察不同极性大孔树脂、离子交换树脂、活性炭及硅胶等吸附介质对红曲菌深层发酵液中水溶性红曲黄色素的吸附分离性能。结果显示非极性大孔树脂DA201-C效果最好，该吸附过程符合Freundlich方程，吸附动力学符合准一级动力学模型，表明吸附不受单层吸附的限制；液膜扩散是吸附主要限速步骤，扩散速率常数为0.16 min-1。通过静态和动态吸附洗脱条件优化，运用SPSS对数据进行分析，发现静态吸附、解吸料液比为1:2，吸附、解吸时间15 min，解吸液100%乙醇，酸性条件解吸效果较好；动态吸附解吸流速为0.25 BV/min条件下，可得到高回收率（96.99%）、脱盐率（99.44%）和脱糖率（92.52%）的水溶性红曲黄色素，经初步扩大实验显示吸附解吸性能稳定。大孔树脂DA201-C分离纯化发酵液中水溶性红曲黄色素操作简单、快速、放大性能好，具有很好的工业化生产应用价值。