高效液相色谱法对白酒中的L-乳酸和D-乳酸的手性分离和测定

运用高效液相法和手性分离柱对白酒中的L-乳酸和D-乳酸进行分离和测定。白酒用超纯水稀释后,经0.22μm滤膜过滤后用配备二极管阵列检测器的高效液相系统检测,检测波长为254 nm。检测色谱柱为手性柱Chirex 3126 (D)-penicillami(4.6 mm i.d×250 mm L, 5μm),流动相为0.002 mol/L CuSO_4溶液(溶剂为5%的异丙醇溶液)。L-乳酸和D-乳酸的标准曲线在0.020～0.800 g/L范围线性良好,两者的线性相关系数都为0.999。白酒中L-乳酸和D-乳酸的回收率分别是98.47%～100.75%和100.10%～107.88%。该方法操作简便,精密度和准确度高,适用于白酒中L-乳酸和D-乳酸的测定。     

手性柱色谱法测定酸奶及乳酸饮料中的L-乳酸及D-乳酸

采用手性柱高效液相色谱法测定部分市售酸奶和乳酸饮料中L-乳酸和D-乳酸的质量浓度.结果表明,酸奶中L-乳酸质量浓度为25～100.00 g/L之间.D-乳酸质量浓度为0.00～2.00 g/L之间,绝大多数的酸奶中L一乳酸的质量分数超过98.00%,D-乳酸质量浓度较低;乳酸饮料中L-乳酸质量浓度在10.00～30.00g/L之间,D-乳酸质量浓度为1.00-3.00 g/L之间.     

几种泡菜中的乳酸两种手性对映体和亚硝酸盐的测定

采用高效液相色谱和分光光度计对超市中能够买到的包装和散装泡菜中L-乳酸、D-乳酸和亚硝酸盐含量的测定。结果表明,所测定的泡菜中L-乳酸的含量在80%以上,乳酸总量在1.5 g/L～55.0 g/L之间,根据不同泡菜品种而不同;其中亚硝酸盐的含量都很少,为0.01 mg/L～0.22 mg/L之间,远远低于我国的GB 2714-2003中规定的限量标准。     

苯乳酸的快速检测研究

苯乳酸是一种新型生物防腐剂。文中研究了苯乳酸的薄层层析快速检测方法、反相高效液相色谱分析检测法,并利用手性柱高效液相色谱分析检测D-型和L-型苯乳酸。     

用快速分离柱高效液相色谱法测定生物发酵产物中的乳酸

对用快速分离柱高效液相色谱法测定生物发酵产物中乳酸的方法进行了研究。以ZORBAX Stable Bound(4.6×50mm,1.8μm)C18快速分离柱为固定相,甲醇和0.01mol/L的磷酸5:95为流动相,流速为2.0mL/min。在该色谱条件下,发酵产物中的乳酸在2.0min内可达到基线分离;用紫外二极管矩阵检测器检测,方法标准回收率为97%￣102%,相对标准偏差为0.95%￣1.28%。     

黄水中乳酸检测方法的研究开发

本研究建立了高效液相色谱(HPLC)快速、准确检测黄水中乳酸含量的分析方法。黄水样品经甲醇振荡除杂，离心过滤取上清液稀释后直接进样，采用Venusil ASB C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm×5μm)分离，0.12%H₃PO₄溶液等度洗脱，流速1 mL/min，检测波长214 nm。在25～1000 mg/L的浓度范围内线性关系良好，相关系数R²为1，加标回收率为89.47%～101.14%。该方法满足方法学精密度的要求，且快速简便、易于操作，可用于黄水中乳酸含量的测定。     

乳酸菌素原料中有机酸的测定分析

采用手性柱高效液相色谱法分离并测定乳酸菌素原料中的L-乳酸与D-乳酸,采用气质联用法测定乳酸菌素原料中7种短链脂肪酸(乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸、己酸)的含量,最终对比不同厂家原料中9种有机酸的含量,为原料的质量评价提供科学依据。高效液相色谱法中流动相为2 mmol/L CuSO_4溶液(溶剂为5%异丙醇)、流速1.000 mL/min、柱温35℃、检测波长254 nm,L-乳酸、D-乳酸线性关系良好,重复性试验、稳定性试验的RSD值均小于3%,加样回收率分别为98.90%和100.26%。该方法操作简单,精密度和准确度高,适用于乳酸菌素原料中L-乳酸与D-乳酸的检测。短链脂肪酸的测定中,经过主成分分析,选择2个因子(F_1、F_2)对不同厂家原料进行综合评价,函数为F=72.047F1+27.953F2,结果显示,C厂家原料相对于B、A厂家的较好。三个不同厂家的原料中9种有机酸的含量各有差别,对其含量进行评价,能够为原料的品质建立更全面、科学的评价体系。     

高产纯L-乳酸的乳酸乳球菌的发酵条件探究

为了研究一株分离自新疆牧民家庭自制酸马奶中的乳酸乳球菌KLDS4.0325产L-乳酸的能力,以L-/D-乳酸试剂盒验证该菌种在发酵过程中L-乳酸的光学纯度为100%。在已优化的培养基上,进行产酸条件的探究,研究发现该菌株在最适发酵温度为33℃,最适p H 8.0,最佳发酵转速为120 r/min,在24 h产酸量达到最大值。     

手性色谱法测定L-5-甲基四氢叶酸钙含量

建立手性色谱法测定L-5-甲基四氢叶酸钙(L-5-MTHF-Ca)的分析方法,通过方法学验证评价方法的可行性。使用高效液相色谱系统,色谱柱为CHIRALPAK HSA手性色谱柱(4 mm×150 mm,5 μm),以磷酸盐缓冲溶液∶乙腈(体积比90 ∶ 10)为流动相,流速0.6 mL/min,进样量5 μL,柱温30 ℃,检测波长280 nm。方法学验证结果表明,此方法可很好地分离L-5-MTHF-Ca,分离度达到3.24, 并且在0.016~0.100 mg/mL质量浓度范围线性关系良好,相关系数为0.9997,检出限为3.11 μg/mL,定量限为4.98 μg/mL,精密度0.38%,加标平均回收率103.71%,系统适用性良好,然而,L-5-MTHF-Ca会随时间缓慢降解,需尽快进样分析。方法操作简便,结果准确,可用于各种食品、保健品中L-5-MTHF-Ca含量的测定。     

产高纯度L-乳酸大肠杆菌基因工程菌的初步研究

本文以鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)基因组为模板,扩增出L-乳酸脱氢酶基因ldh,将其连接到表达载体pSE380,转化到D-乳酸脱氢酶及丙酮酸甲酸裂解酶双缺失的大肠杆菌FMJ144中,摇瓶发酵得到3.5g/L的高纯度为99%的L-乳酸。     

高效液相色谱法测定糖汁中没食子酸含量的研究

建立准确测定甘蔗糖汁酚类色素没食子酸含量的高效液相色谱法。采用Hypersil BDSC18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸(5:95),检测波长是280nm,流动相流速为1.0mL/min。没食子酸线性范围为20～100mg/L,回归方程Y=15960X-4749,相关系数0.9991,检出限0.22mg/L,平均加标回收率为101.45%(RSD为1.13%)。样品清汁、清糖浆配成浓度15°Bx后,过0.45微滤膜,测定滤液中没食子酸含量,分别是21.70、17.06mg/L。结论:高效液相色谱测定方法准确、可靠,可用于甘蔗糖汁色素中没食子酸的检测。     

高效液相色谱-质谱法测定输韩泡菜中的甜蜜素

建立输韩泡菜中禁用甜味剂甜蜜素的高效液相色谱-质谱测定方法。泡菜样品用水提取,离心后采用液相色谱柱分离,质谱检测器检测,外标法定量。色谱条件:Agilent ZORBAX SB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈-体积分数0.1%甲酸溶液(25:75,V/V),流速0.6mL/min。采用负离子模式的电喷雾质谱检测,以特征离子峰[M-Na]-m/z 178.1进行选择性离子分析检测,对实验条件进行优化,线性范围为0.1～5.0mg/kg,相关系数R2为0.99987,定量检测限为0.1mg/kg。添加标准回收实验表明:本方法在添加水平分别为0.10、0.15mg/kg和0.20mg/kg时样品平均回收率在82.0%～97.3%之间,相对标准偏差在2.59%～4.82%之间(n=6),说明本方法准确可靠。     

高效液相色谱一步法快速测定10种有机酸

目的 建立一种同时检测10种有机酸的高效液相色谱检测方法.方法 采用Agilent ZORBAX SB-Aq液相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),优化分析条件:流动相KH2PO4溶液浓度、甲醇含量和柱温,同时检测草酸、酒石酸、丙酮酸、苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、丁二酸、富马酸和戊二酸的含量.结果 流动相为4...     

柱前衍生-高效液相色谱法测定酒中的氰化物

目的建立柱前衍生-高效液相色谱法测定酒中氰化物含量的方法。方法采用异烟酸-巴比妥酸柱前衍生,高效液相色谱法测定。采用菲罗门Gemini C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以1%乙酸-乙腈(50:50)为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为600 nm。结果氰化物的衍生产物的线性范围为0.5~40μg/L,相关系数大于0.9998。仪器检出限为0.5μg/L,白酒、啤酒、葡萄酒中氰化物的平均回收率分别为96.7%,95.7%,96.3%(n=9)。结论该方法准确可靠、灵敏度高、稳定性好,有较好的样品适用性,可为酒中氰化物的测定标准提升提供参考。     

1株高产L-乳酸菌株的分离鉴定及其发酵培养基优化

从辣白菜样品中筛选出1株高产乳酸的菌株LB-103,经L-/D-乳酸试剂盒检测该菌株发酵产L-乳酸的光学纯度为100%。通过形态学观察、VITEK 2生理生化鉴定和16S r DNA序列分析,确定该菌株为鼠李糖乳酸杆菌(Lactobacillus rhamnosus),将其命名为鼠李糖乳酸杆菌DLF-15038。对其发酵培养基进行初步优化,发现廉价的棉籽饼粉可以部分替代酵母粉,采用15 g/L棉籽饼粉和10 g/L的酵母粉为复合氮源,L-乳酸的产量得以维持且明显降低成本,最适无机盐质量浓度分别为CH_3COONa 3 g/L、KH_2PO_4 2 g/L、MnSO_4 0.3 g/L、MgSO_4 0.2 g/L。在该优化条件下,进行了5 L发酵罐中的批式流加发酵实验,发酵72 h,L-乳酸产量为165.15 g/L,生产强度为2.29 g/(L·h),糖酸转化率为93.34%。     

高效液相色谱法测定成熟龙眼各部位游离鞣花酸含量

采用高效液相色谱法测定石峡、储量两个品种成熟龙眼各部位游离鞣花酸含量。鞣花酸提取条件为80%甲醇溶液,70℃回流2h。色谱条件为:C18色谱柱(250mm×4.5mm,5μm)、柱温35℃、进样体积10μL、检测波长254nm、流速1mL/min,流动相为甲醇-水-冰乙酸(50:49.7:0.3,V/V)。鞣花酸在1～200μg/mL范围内与峰面积呈线性关系,相关系数为0.999。取5个样品瓶分别进样,得到样品保留时间相对标准偏差(RSD)值为1.0%,峰面积RSD值为0.8%。对同一瓶样品连续进样10次,保留时间和峰面积的RSD值分别为0.15%和0.2%。加标回收结果表明平均加标回收率为95.97%～101.9%。测定结果表明石峡和储量各部位鞣花酸的含量大小顺序均为果核>果皮>果肉,其中果皮和果核中鞣花酸远大于已报道的其他水果中的含量。     

高效液相色谱手性拆分法分析生物体内虾青素光学异构体

建立一种高效液相色谱手性拆分法分析不同生物中3种虾青素光学异构体含量的方法。以Chiralpak IC色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)为固定相,以甲基叔丁基醚-乙腈(95∶5,V/V)为流动相,采用等度洗脱,流速1.0 m L/min,二极管阵列检测器检测波长为476 nm,选用雨生红球藻、红法夫酵母、南美白对虾、中国对虾、日本对虾、三文鱼、梭子蟹7种生物样品为研究对象,分析其虾青素光学异构体,线性范围为0.1~50 mg/L,相关系数为0.999 9,回收率为86.2%~98.3%,方法稳定性良好。结果表明,该方法可行、快速简便、准确可靠。     

加压毛细管电色谱测定甘蔗中三种多酚类化合物

为建立加压毛细管电色谱(pCEC)分离检测甘蔗中多酚类化合物绿原酸、阿魏酸、表儿茶素的方法,采用C₁₈毛细管色谱柱,以NaH₂PO₄和甲醇为流动相,优化了流动相比例、缓冲盐pH、缓冲盐浓度、分离电压、流速等色谱条件。结果表明,在流动相为15.0 mmol/L NaH₂PO₄+12.5 mmol/L庚烷磺酸钠(pH5.0)/甲醇(50:50,V/V)、分离电压为1 kV、流动相总流速为0.06 mL/min、检测波长为220 nm的色谱条件下,绿原酸、阿魏酸、表儿茶素分离较好,在20~320 μg/mL线性关系良好,相关系数分别为0.9978、0.9922、0.9971,检出限分别为0.14、0.75、1.65 μg/mL,相对标准偏差分别为2.82%、2.69%、1.18%,平均回收率分别为96.79%、100.71%、99.01%。该方法快速、准确、重复性好,适用于甘蔗中多酚类化合物的分离检测。     

四川泡菜中产γ-氨基丁酸微生物的系统发育与表达能力评估

为拓展产γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric,GABA)微生物资源,以四川泡菜为分离源,从中分离产GABA的乳酸菌和酵母,并对其GABA表达能力进行评估。通过分离纯化,从四川泡菜中获得了338株乳酸菌和67株酵母。采用纸色谱测定,筛选获得12株乳酸菌和3株酵母菌具有产GABA的能力。生理生化和系统发育研究揭示12株乳酸菌分别被鉴定为Lactobacillus acidophilus(占比8.3%)、Lactobacillus fermentum(8.3%)、Lactobacillus kimchii(8.3%)、Lactobacillus suebicus(8.3%)、Lactobacillus brevis(16.7%)、Lactobacillus parafarraginis(8.3%)、Lactobacillus similis(8.3%)、Lactobacillus plantarum(25.2%)和Lactobacillus pentosus(8.3%);3株酵母中,2株被鉴定为Saccharomyces cerevisiae;1株被鉴定为Candida tanzawaensis。进一步采用高效液相色谱对菌株GABA的表达能力评估发现,乳酸菌Lactobacillus plantarum BC114和Lactobacillus brevis BC237发酵产GABA的能力较强,分别达1 720 mg/L和1 080 mg/L;酵母菌Saccharomyces cerevisiae JM037发酵产GABA的能力较强,达670 mg/L。     

高效液相色谱法同时测定乳粉中烟酸、烟酰胺和维生素B_6

介绍了高效液相色谱法同时测定配方乳粉中烟酸、烟酰胺和维生素B6的方法。方法采用C18柱(5μm,250mm×4.6mm),以甲醇、辛烷磺酸钠、三乙胺配制的流动相,流速1.0m L/min进行等度洗脱,16min内可以实现对待测组分的基线分离。结果表明,待测组分在各自浓度范围内线性良好,线性相关系数均大于0.999,平均加标回收率为88.6%~109.8%,相对标准偏差为0.33%~2.25%。该方法准确、快速、灵敏度高,适合配方乳粉中烟酸、烟酰胺和维生素B6含量的同时测定。