混种固定化细胞发酵海藻豆乳醋酸饮料的研究

以海藻汁液和大豆浆混合液为原料，固定化清酒酵母或产香酵母A-2于25℃或30℃发酵12h，再接种固定化醋酸杆菌于35℃发酵18h，发酵液经过滤后，制成海藻豆乳醋酸饮料，经测定该饮料总酸含量为4．2g／L-4．5g／L，总酯含量为1．6g／L-1．8g／L，乙醇含量为0．83%-0．86％（v／v），碘含量为15mg／L-16mg／L。     

黄酒固定化发酵过程及香气物质形成的研究

将黄酒酵母用海藻酸钙包埋制成固定化酵母,研究游离酵母与固定化酵母的黄酒发酵过程理化指标和香气物质生成量的差异,结果表明:经过主发酵5 d(28℃),后发酵15 d(15℃),固定化酵母发酵过程的酒精度、总糖、总酸变化曲线与游离发酵过程曲线差异不大,固定化酵母发酵性能稳定,杂菌污染可控。用气相色谱(GC)分析乙酸乙酯等9种黄酒特征性香气物质,发现游离发酵黄酒正丙醇、异丁醇、异戊醇、β-苯乙醇的总高级醇含量为680.91 mg/L,固定化发酵第1,2,3,4,5批黄酒的总高级醇含量分别为633.63,649.79,658.17,637.63,614.68 mg/L,说明固定化发酵有利于控制黄酒中的高级醇含量。固定化发酵酯类总量高于游离酵母,且随着固定化酵母发酵批次的增加而递增,即:固定化第5批(115.90 mg/L)>第4批(90.81 mg/L)>第1~3批(80.10~81.81 mg/L)>游离酵母(55.66 mg/L),表明固定化发酵使黄酒的酯类香气愈加浓郁。根据香气阈值计算的固定化发酵酿得的黄酒的香气不比游离酵母酿得的黄酒差,固定化酵母发酵生产黄酒有商业化应用的前景。     

铵盐对紫色红曲霉合成代谢红曲色素及桔霉素的影响

研究紫色红曲霉(Monascus purpureus)Y20液态发酵过程中不同铵盐对目的产物红曲色素及有害物质桔霉素的合成代谢的影响。在发酵培养基中添加不同铵盐,检测M.purpureus Y20发酵液中红曲红色素、红曲黄色素及桔霉素含量,分析其变化及原因。结果表明:M.purpureus Y20发酵过程中发酵液pH值相对较稳定,未添加铵盐的对照组发酵液基本维持在pH4.8;添加CH_3COONH_4、NH_4H_2PO_4、C_6H_5O_7(NH_4)_3的发酵液pH6;添加NH_4NO_3、(NH_4)_2SO_4、NH_4Cl的发酵液初始pH5.5,发酵过程中持续降低至pH2.5左右;含有0.3 mol/L NH_4~+的(NH_4)_2SO_4的发酵液中桔霉素含量降为0.05 mg/L,较对照组降低88.6%;含有0.1~0.3 mol/L NH_4~+的NH_4Cl发酵液中桔霉素含量降为0.05 mg/L;含有0.3 mol/L NH_4~+的NH_4NO_3发酵液未检出桔霉素,红曲黄色素含量较对照组升高31.0%、红曲红色素含量降低11.6%;添加CH_3COONH_4、NH_4H_2PO_4、C_6H_5O_7(NH_4)_3的发酵液无桔霉素检出,但菌体干质量较小,色价较低。因此,添加铵盐可影响发酵液pH值,影响M.purpureus Y20对营养物质吸收和代谢,改变红曲色素的组成比例和抑制桔霉素的生成;添加适量(NH_4)_2SO_4、NH_4Cl、NH_4NO_3有利于促进红曲黄色素的生物合成,阻碍桔霉素的生成。     

加强型刺梨酒的生产

刺梨是营养非常丰富的野生水果。以刺梨鲜果为原料，经清洗、破碎、发酵、调整、贮存、分离、冷冻、过滤制成刺梨酒。刺梨酒是一种滋补健身的饮料酒，含有18种人体所需氨基酸、8种矿物质，对人体生理功能有调节作用。主要工艺要点：1．破碎后的刺梨汁和刺梨渣的混合物中加入SO2，防止果汁腐败，添加量为10mg／L；果胶酶的添加量为2g／100L；2．发酵过程加入二氧化硫30mg／L，然后加入5％-10％的人工培养酵母液，控制发酵温度在15—18℃之间。(孙悟)     

固定化猕猴桃酒酵母发酵条件的研究

采用混合材料作为载体将猕猴桃酒酵母固定化。通过温度、pH、起始糖度、填充量对固定化酵母发酵影响的分析；采用L9(3^4)正交试验对固定化酵母发酵工艺条件进行研究。结果表明，最佳发酵条件为温度25℃，pH3．3，起始糖浓度270g／L，填充量0．4g／ml。在此条件下发酵速度快，发酵的酒果香味浓郁，Vc保存率高。(孙悟)     

硝酸盐和亚硝酸盐对酵母和发酵产物影响的研究

本课题利用离子色谱检测水样中含氮化合物含量，设计不同的硝酸盐和亚硝酸盐浓度梯度，利用发酵栓进行酿造实验，研究硝酸盐和亚硝酸盐对酵母和发酵产物的影响。实验结果表明，酵母对硝酸盐有一定的耐受性，但浓度超过15mg／L也会产生影响；而亚硝酸盐超过0．4mg/L对酵母的影响较显著，酵母死亡率显著上升，发酵性能、风味组成显著变化。     

阿片肽酿酒酵母工程菌摇瓶发酵工艺

研究了发酵培养基成分、补加方式及外源氨基酸对酿酒酵母发酵和表达的影响．结果表明，发酵前在液体发酵培养基中一次性补加酵母抽提物（YE）有利于目的产物的表达，发酵过程中补加YE不利于目的产物的表达，发酵中后期补加适量的葡萄糖有利于阿片肽的表达．添加外源氨基酸对酿酒酵母工程菌的生长有一定的促进作用，而且可以明显地影响阿片肽的表达．通过正交实验对酿酒酵母生长和表达条件进行优化，确定最优工艺参数为：培养基中酵母抽提物质量浓度为25g／L，C：N比2．8，培养基初始PH5．0，摇床转速220r／min．在最优条件下研究了酿酒酵母表达目的产物的情况，总蛋白质质量浓度为614．50mg／L．SDS-PAGE电泳和双波长凝胶扫描结果表明：目的阿片肽约占总分泌蛋白质的5％，其表达量为30．7mg／L，是优化前的1．49倍。     

离子色谱电导法检测白酒、红酒、啤酒和多种黄酒中的6种阳离子

为探讨不同的酿造原料、发酵程度(乙醇体积分数)、酿造方式及酒龄等因素对黄酒中阳离子浓度水平的影响,特别是黄酒中的NH4+含量。采用离子色谱抑制电导法检测并对比黄酒、白酒、啤酒、葡萄酒4种酒样类型(共27个样品)中阳离子含量变化。色谱分离选用Ion Pac CS16分析柱(5 mm×250 mm)和Ion Pac CG16保护柱(5 mm×50 mm),淋洗液为30 mmol/L甲基磺酸溶液。结果表明:方法回归系数良好(r~2≥0.999 0),相对标准偏差不大于5.52(n=6),在检测的18种黄酒中,NH_4~+的质量浓度范围为137.00～284.01 mg/L,在啤酒及葡萄酒中为28.29～42.88 mg/L,在白酒中未检出。进一步研究表明,黄酒中高含量NH_4~+与原料中粗蛋白含量有关,NH_4~+的含量与发酵程度有关;其次黄酒中阳离子的含量与酒龄没有明显规律。作为蒸馏酒的白酒中整体阳离子含量普遍较低,葡萄酒由于葡萄原料的K~+含量较高,导致葡萄酒中K~+含量远高于其他类型酒样。     

红酵母产β-胡萝卜素发酵条件研究

从土壤、水果、空气等自然环境中分离出35株产β-胡萝卜素的红酵母(Rhodotorula),经过初步筛选,得到一株β-胡萝卜素产量较高的菌株。在实验室条件下,对该菌株的摇瓶发酵培养基配方(如碳源、氮源、无机盐和NH_4Cl浓度)和发酵条件(包括pH、温度、接种量、光照、转速和发酵时间)进行了研究。研究表明,红酵母的生长和产β-胡萝卜素受培养基和发酵条件的影响。葡萄糖是好碳源,蛋白胨是最佳氮源,NH_4Cl、MgSO_4和K_2HPO_4能促进红酵母的生长和β-胡萝卜素的产生。生产β-胡萝卜素的最佳pH是6.0,发酵温度30℃。光照对β-胡萝卜素的产生影响很大。在光照下β-胡萝卜素产量比不光照增加100％,但不影响细胞的生长。发酵时间和摇床转速对β-胡萝卜素产量也有影响。结果表明:以3％葡萄糖、1％蛋白胨、0.5％NH_4Cl、0.05％MgSO_4、0.05％K_2HPO_4、pH值为6.0的培养基中,在光照、30℃摇床振荡恒温培养96h,摇床转速为180r/min的发酵条件下,该菌株β-胡萝卜素总产量可达9.196mg/L,比该菌株的初始产量(4.460mg/L)提高了106％。     

影响果酒酵母甘油产量主要因素的研究

发酵果酒时,酵母生成甘油的量受多种因素的影响。试验选取6种果酒酵母,研究了酵母菌株(Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6)、发酵温度(15℃和20℃)及添加铵态氮源(100 mg/L(NH4)2HPO4与不同剂量的SO2(100mg/L和150 mg/L)对苹果酒中甘油产量的影响。同时研究了这6种酵母发酵不同果汁(苹果汁和梨汁)的甘油产量的不同。试验结果表明:(1)不同酵母发酵苹果酒的甘油含量具有极显著差异(P>0.01),6种酵母于15℃下发酵苹果酒的甘油含量为(4.42±0.02)-(6.18±0.07)g/L;(2)6种酵母于20℃发酵的苹果酒的甘油含量均高于15℃,但Y2甘油产量差异不显著(P2>0.05);(3)添加100 mg/L的(NH4)2HPO4,Y1、Y2、Y3和Y4发酵苹果酒的甘油含量较对照显著增加(P<0.05),Y5与对照相比显著降低(P5<0.05),Y6与对照相比降低不显著(P6=0.312>0.05);(4)与100 mg/L的SO2添加量相比,添加150 mg/L的SO2,Y2和Y4发酵的苹果酒的甘油含量显著增加(P<0.05),Y1、Y3和Y6增加不显著(P>0.05),而Y5显著降低(P5<0.05);(5)梨汁不添加氮源,添加100 mg/L的SO2后接种6种酵母于15℃下发酵梨酒的甘油含量均显著高于同条件下发酵的苹果酒甘油含量(P<0.01),其中以Y2发酵的苹果酒甘油含量最高,Y4最低,而以Y6发酵的梨酒甘油含量最高,Y4最低。     

红发夫酵母生产虾青素的培养基优化

从提高虾青素产量和降低生产成本综合考虑。研究选择了混合碳源、混合氮源、柠檬酸铵((NH_4)_3C_6H_5O_7)、Na_2HPO_4、K_2HPO_4、MgSO_4·7H_2O组成培养基。正交设计优选出的培养基为混合碳源(糖蜜40%、淀粉塘60%)30 g/L、混合氮源(玉米浆40%、(NH_4)_2SO_460%)7 g/L、MgSO_4·7H_2O 1.5 g/L、(NH_4)_3C_6H_5O_7 2g/L、Na_2HPO_4 2.0 g/L,用此优化培养基摇瓶培养红发夫酵母获得生物量16.92 g/L,虾青素含量903μg/g和虾青素产量15 279μg/L。     

以废弃毕赤酵母为高效氮源强化丁酸发酵生产

为有效利用固态废弃毕赤酵母,高效发酵生产丁酸,建立了以80 g/L玉米淀粉为基础培养基、以废弃毕赤酵母处理液为高效有机氮源,连续补加葡萄糖的丁酸发酵工艺。7 L厌氧发酵罐下,发酵20h,先以1∶4的比例添加250~400 g/L规格的废弃酵母处理液替代昂贵的发酵用复合培养基,再连续补加葡萄糖浓缩液。最终的丁酸质量浓度为45 g/L、得率为40%,丁酸占总酸的比率(butyric acid ratio over total organic acids,B/TA)≥0.90的较高水平。该工艺可以有效地利用来自于废弃酵母处理液中的氨基酸,提高细胞生长速度和浓度,增强丁酸合成所依赖的NADH再生速度,间接改善了丁酸发酵性能。与此同时,实现了废弃生物质的有效利用和资源化。     

响应面法优化少根根霉发酵合成富马酸

利用少根根零发酵生产富马酸,考察了不同浓度的初始葡萄糖以及有机氟源酵母膏和无机氮源(NH_4)_2SO_4对富马酸的合成的影响。在此基础上运用响应曲面分析方法优化了富马酸产量以及转化率,葡萄糖和(NH_4)_2SO_4的浓度为162.0g/L、3.08g/L时,富马酸的产量最大为75.15g/L;葡萄糖和(NH_4)_2SO_4的浓度为121.2g/L、2.23g/L时,富马酸的转化率最大为55.16%,在原来基础上产量有了明显的提高,优化效果较好,通过验证实验值与预测值基本相符。     

利用Pseudoalteromonas elyakouii菌株发酵法生产褐藻胶寡糖培养基的改进

利用Pseudoalteromonas elyakouii菌株发酵降解相对分子质量10000左右的褐藻胶，制备褐藻胶寡糖．为了达到降低培养基成本和简化分离工艺的目的，使用（NH4）2SO4为氮源的发酵培养基来代替使用蛋白胨为氮源的发酵培养基．为了促进菌的生长和发酵产物褐藻胶寡糖的生成，在新发酵培养基中分别添加海带浸液、葡萄糖、乳糖、几种氨基酸和几种代谢中间产物（丙酮酸、柠檬酸、延胡索酸、尿素），并考察这些成分对菌生长和发酵产物褐藻胶寡糖生成的影响．研究发现：在基本培养基中和添加0．1g／L的L-谷氨酰氨、0．1g／L尿素或0．1g／L柠檬酸时可获得较高的产物浓度。     

CHU-R菌株产虾青素的发酵工艺研究

本文通过对获得的虾青素产生菌CHU-R进行最佳培养基、培养温度、接种量、初始pH等发酵工艺参数的优化研究,得到CHU-R菌产虾青素的最佳培养基为:6％蔗糖、1％糖蜜、0.5％硫酸铵、0.3％ Na2HPO4、0.05％ KI、0.05％ MgSO4·7H2O; 50 L罐最适发酵工艺条件为:温度28℃,通风量1:0.1～0.15(V/V/min)、初始转速120 r/min、罐压0.05～0.08 MPa、装液量30L、初始pH 6.8～7.0、接种量6％,发酵过程维持溶氧量在40～60％之间.由此得到的虾青素含量近达23 mg/g干菌体重.     

一种棕色、富含γ-氨基丁酸蜜柑醋的制作及其品质分析

以高产棕色素的葡糖杆菌（Gluconobacter sp.）FBFS 82菌株发酵柑橘汁,生产棕褐色的色素发酵液,然后与液态发酵的原醋进行调配,制成酸度为5 g/100 mL、色素发酵液含量分别为10%、15%、20%和25%的蜜柑醋（分别以A、B、C和D表示）。对蜜柑醋的理化指标、色泽稳定性、游离氨基酸以及挥发性成分进行分析。结果表明,蜜柑醋色泽鲜亮,自然环境下存放至60 d其色素无明显变化。蜜柑醋A和C均检测到18种氨基酸,包括8种必需氨基酸和具有生理功能的γ-氨基丁酸（（182.27±8.68） mg/100 mL,（383.19±8.27） mg/100 mL）。从蜜柑醋A和C中分别鉴定出51种和60种挥发性成分,包括酯类、酸类、醇类、醛类、酮类、酚类及其他类。     

异硫氰酸苯酯柱前衍生RP-HPLC法同时测定莲雾中15种游离氨基酸的含量

采用异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生化试剂,结合反相高效液相色谱法,建立了同时测定莲雾果实中15种游离氨基酸含量的方法。采用Atlantis T3柱为固定相,以0.1 mol/L乙酸钠缓冲液(pH6.5,含0.5%三乙胺)和乙腈-水(4:1)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温35 ℃,紫外检测器波长254 nm。各氨基酸组分在2.0~500 mg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数r均大于0.99,检出限为0.08~0.35 mg/L,定量限为0.35~1.25 mg/L,加标回收率为85.61%~106.68%,相对标准偏差RSD均小于5%。该方法使得15种氨基酸很好的分离,且准确度和精密度好,灵敏度和回收率高,适用于莲雾果实游离氨基酸含量的分析。     

凝结芽孢杆菌工业化发酵培养基初步研究

针对工业生产的需要,采用正交试验设计,研究筛选了饲料添加剂用凝结芽孢杆菌的发酵培养基。优化后的培养基配方为玉米粉15 g/L,豆粕粉10 g/L,(NH_4)_2SO_46 g/L,玉米浆6 g/L,MgSO_4·7H_2O 1 g/L,K_2 HPO_4·3H_2O 2g/L,MnSO_4 0.05 g/L。在pH7.0～7.2和40℃条件下,培养24 h活菌数量达到7.5×10~9 CFU/mL,36 h活菌数量达到9.3×10~9CFU/mL。     

嗜根考克氏菌K45对发酵猪肉品质的影响

为了研究嗜根考克氏菌（Kocuria rhizophila）K45对发酵猪肉品质的影响，以自然发酵肉为对照组，通过测定发酵组的色度、挥发性风味化合物和游离氨基酸等探究菌株K45对发酵肉品质的影响。结果表明，菌株K45发酵组红度a*值显著高于自然发酵组（P<0.05），添加菌株K45能促进发酵肉发色；游离氨基酸含量为（365.97±3.68）mg/100 g，显著高于自然发酵组（P<0.05）；两组发酵肉中共检测到136种挥发性风味物质，菌株K45发酵组中检测到131种，有8种挥发性物质仅在菌株K45发酵组被检出，说明菌株K45可以促进发酵肉滋味和香味的形成。通过火山图分析结合相对气味活度值（ROAV）结果，发现菌株K45发酵组的特征性风味物质为双乙酰、三甲基吡嗪、2,5-二甲基吡嗪、3-甲基丁醛、2-甲基丁酸乙酯、2,3-二甲基吡嗪和萘；特征呈味氨基酸为天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、精氨酸和酪氨酸。综上，接种菌株K45发酵可改善发酵肉制品的色泽和整体风味。     

融合子F3产衣康酸的培养基组成及摇瓶发酵条件的优化

对直接利用生淀粉发酵产衣康酸的融合子F3的发酵条件进行了研究。得到较佳培养基组成及发酵条件为:玉米淀粉110g/L,NH_4NO_3 3.0g/L,玉米浆2.5mL/L,MgSO_4·7H_2O1.5g/L,CuSO_4·5H_2O2.0 mg/L,初始pH3.0～3.5,摇瓶装液量80mL/500 mL三角瓶,接种量10%(种龄44h),34℃振荡(220r/min)培养140h。在此条件下,F3衣康酸产率达到45.3g/L,比优化前提高了4.4g/L;对供给淀粉的转化率达41.2%。