迷迭香抗氧化成分的提取及其活性研究

分别用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯和无水乙醇依次提取迷迭香成分，并对它们的抗氧化性能进行了一系列测定，发现迷迭香的石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯和乙醇提取物均具有很好的抗氧化作用。加入0．01％时，就表现出明显的抗氧化活性(Pf≥5．62)，而且均表现出一定剂量相关性。对合铁离子的猪油也表现出很强的抗氧化性能，添加0．02％的抗氧化剂后，猪油的氧化诱导期仍可达到12h以上。几种提取物与BHA、TBHQ、VE和柠檬酸均没有明显的抗氧化协同作用。     

迷迭香抗氧化成分的提取及其活性研究

分别用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯和无水乙醇依次提取迷迭香成分 ,并对它们的抗氧化性能进行了一系列测定 ,发现迷迭香的石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯和乙醇提取物均具有很好的抗氧化作用。加入 0 0 1%时 ,就表现出明显的抗氧化活性 (Pf≥ 5 6 2 ) ,而且均表现出一定剂量相关性。对含铁离子的猪油也表现出很强的抗氧化性能 ,添加 0 0 2 %的抗氧化剂后 ,猪油的氧化诱导期仍可达到 12h以上。几种提取物与BHA、TBHQ、VE 和柠檬酸均没有明显的抗氧化协同作用。     

药食两用小蓟中细胞毒活性成分解析

本课题组前期研究发现,小蓟乙醇提取石油醚萃取部位具有较好的抑制多种人肿瘤细胞毒活性的作用,现对其中强活性亚组分的化学成分进行研究,挖掘发挥细胞毒活性的功能因子。在体外抑制细胞毒活性指导下,应用多种色谱技术进行分离纯化,采用波谱学方法进行结构鉴定,并结合文献数据对照确定化合物结构。从石油醚的1个活性组分中共分离鉴定了5个甾体化合物,分别为:3β-羟基豆甾-5-烯-7-酮、豆甾-22-烯-3β,5α,6β-三醇、6β-羟基-豆甾-4-烯-3-酮、6β-羟基-豆甾-4,22-二烯-3-酮和6β-羟基-芸苔甾-4-烯-3-酮。5个化合物均为首次从蓟属植物中发现;除化合物α-豆甾-22-烯-3β,5α,6β-三醇外,其余4个化合物对不同人肿瘤细胞均具有一定的抑制活性。     

葛花解酒活性与成分

采用乙醇提取、多种层析分离,以及核磁共振鉴定结构的方法,建立小鼠急性酒精中毒模型,以小鼠醉酒潜伏期、睡眠时间、血液乙醇浓度、肝中乙醇和乙醛脱氢酶活性为指标,筛选各组分的解酒作用,研究葛花对急性酒精中毒小鼠的解酒功效与活性成分。结果表明:葛花醇提物经大孔树脂分离得到的体积分数为30%的乙醇洗脱物具有显著缓解小鼠急性酒精中毒的作用(P <0. 05)。从该组分分离到3个单体,分别是8-C-葡萄糖-鹰嘴豆素甲(Ⅰ)、8-C-葡萄糖-O-木糖-染料木素(Ⅱ)、印度黄酮苷(Ⅲ),其中化合物Ⅰ能显著增加小鼠对酒精的耐受时间(84. 19 min),缩短小鼠的醉酒时间(241. 40 min),降低血液中的乙醇质量浓度(401. 79 mg/100 mL),提高肝中乙醇和乙醛脱氢酶的活性(3. 06 U/mg,1 109. 26 U/g)。首次从葛花中分离出化合物Ⅰ,并证实其具有解酒功效,为葛花解酒作用提供了理论依据。     

马齿苋中抗炎活性物质的提取、分离及结构鉴定

以活性物质示踪为导向,建立脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症模型对马齿苋中的抗炎物质进行跟踪,采用柱层析提取法、硅胶柱色谱分离法、制备液相色谱法及气相色谱-质谱联用技术对抗炎物质进行提取分离和结构鉴定。结果表明,石油醚-乙醇、无水乙醇和纯水溶剂依次对马齿苋样品进行提取,三种粗提物将细胞中一氧化氮（Nitric Oxide,NO）的分泌量分别减少至33.13、25.83和20.53μmol/L,其中石油醚相粗提物的抑制效果最强（P<0.05）。对石油醚相进一步分离得到四个组分,Fr.1、Fr.2和Fr.3组分具有较强的抗炎效果,但Fr.1和Fr.2组分含有潜在的毒性成分,选择Fr.3组分继续分离。Fr.3组分经硅胶柱分离得到三个组分,Fr.3.1组分表现出最强的抑制NO的分泌量效果（11.80μmol/L）。经制备液相色谱进一步纯化及气质分析,确定Fr.3.1组分的主要成分为硬脂酸（47.09%）、邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯（13.21%）和其他成分。该研究建立了一种从马齿苋中分离纯化出抗炎物质方法,为马齿苋的开发利用提供理论参考。     

牛蒡中性多糖结构分析与抗炎活性评价

对水提醇沉法获得的牛蒡粗多糖进行分离纯化并对中性多糖组分进行结构表征和抗炎活性评价。通过DEAE-52纤维素柱制备牛蒡中性多糖,通过单糖组成、分子量、紫外、红外、XRD、粒径和核磁等方法对其进行结构表征,利用硫酸铜诱导的斑马鱼急性炎症模型,评价不同剂量牛蒡粗多糖和牛蒡中性多糖对斑马鱼巨噬细胞移动的影响。通过实时荧光定量PCR分析测定核转录因子激活蛋白-1（AP-1）、环氧化酶-2（COX-2）、IKBα、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-12（IL-12）和髓样分化因子（MyD88）等不同炎性因子mRNA的表达量。结果表明,牛蒡中性多糖重均分子量为2682 Da,数均分子量为2079 Da,主要由果糖和葡萄糖组成,摩尔比为11.32:1,粒径主要分布在80~110 nm。牛蒡中性多糖主要由β构型的呋喃糖组成,有明显的尖而窄的晶体衍射峰,结晶度较高,核磁结果显示其结构为α-D-吡喃葡萄糖基-（1→2）-[β-D-呋喃果糖基-（1→2）]₁₀-β-D-呋喃果糖基。牛蒡中性多糖可以显著（P<0.05）减少斑马鱼巨噬细胞的迁移数目,且当浓度为100 μg/mL时,巨噬细胞数量较模型组下降了41.11%,抗炎效果最佳;牛蒡中性多糖可能通过沉默炎性细胞因子信号传导,抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的过度激活,从而抑制炎症反应。本研究可为牛蒡中性多糖的抗炎活性和开发功能性食品提供理论依据。     

洋甘菊抑制酪氨酸酶活性成分研究

研究了罗马洋甘菊乙醇提取物对蘑菇酪氨酸酶活性的影响并对有效成分进行分离纯化。实验中以L-酪氨酸为底物,空白对照,采用比色法测定了罗马洋甘菊乙醇提取物不同乙醇浓度的洗脱物对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用。结果表明:MCI30%(体积分数)乙醇浓度洗脱物对酪氨酸酶活性的抑制率最灵敏。该部分洗脱物经MCI、ODS-A柱分离,得到了3个单体化合物:山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、山奈酚-3-O-(6"-3-羟基-3-甲基-戊二酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷。     

小蓟中氧化蒲公英赛酮和醇的分离鉴定和细胞毒活性测试

研究小蓟乙醇提取物中显示细胞毒活性的石油醚的化学成分,并对分离得到的化合物进行体外细胞毒活性的筛选。应用各种硅胶和凝胶色谱技术分离纯化,用MS和NMR等波谱学方法,结合文献对照确定化合物结构。从小蓟乙醇提取物的石油醚萃取部位分离得到3个氧化蒲公英赛烷型三萜类化合物,分别鉴定为11α,12α-氧化蒲公英赛酮、11α,12α-氧化蒲公英赛醇和11α,12α-氧化蒲公英赛醇棕榈酸酯。3个化合物均为首次从蓟属植物中发现,它们在人结肠癌细胞、肝癌细胞、胃癌细胞、肺癌细胞和卵巢癌细胞的体外细胞毒活性测试中均显示一定的抑制活性。     

酸笋中具有抗炎活性乳酸菌的筛选及鉴定

从柳州采集的3 份酸笋发酵液样品中分离筛选得到46 株疑似乳酸菌菌株,通过耐酸、耐胆盐、模拟胃肠道实验以及体外黏附HT-29细胞和NO实验进行益生特性和抗炎活性研究,筛选得到1 株具有优良抗炎活性菌株SS-31,经16S rRNA基因序列测序鉴定为发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum）。结果表明：菌株SS-31具有较强耐酸能力,0.1%牛胆盐处理3 h后活菌数为107 CFU/mL,存活率高达90.02%;模拟人工胃液消化2 h后存活率为80.28%,模拟人工肠液处理2 h后存活率为3.63%;SS-31在体外对HT-29细胞有较高黏附性,黏附率为4.47%,略低于对照菌鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）LGG（4.95%）;在体外脂多糖刺激RAW264.7细胞炎症中,与模型组相比,SS-31组显著下调炎性物质NO分泌量（P＜0.05）;此外,SS-31能显著下调炎症因子白细胞介素（interleukin,IL）1β、IL-6的含量（P＜0.05）。从酸笋发酵液中筛选得到1 株具有优良益生特性的发酵乳杆菌SS-31,初步证明了乳酸菌SS-31在治疗炎症中具有潜在应用和开发价值。     

富硒葡萄中硒多糖的分离纯化及抗氧化活性

本文以克瑞森(小粒)富硒葡萄为原料,通过提取、分离纯化得到硒多糖提取物(selenium polysaccharide,sKGP),并对其理化性质、结构特征及抗氧化活性进行了研究。采用超声波辅助酶法提取,用二乙氨基乙基交联葡聚糖凝胶A-25(DEAE-SephadexA-25)层析柱分离纯化得到高纯度硒多糖组分,通过紫外光谱、液质、傅里叶红外、扫描电镜等对其活性官能团及其结构进行鉴定,并对其抗氧化活性指标进行了分析。结果表明：sKGP硒含量为(0.642±0.038)mg/kg;纯化后sKGP-3几乎不含核酸、蛋白质等;sKGP-3由鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和果糖组成,摩尔比为0.172:0.743:0.718:0.082:4.540:0.093;sKGP-3具有Se=O、SeH结构和多糖的典型特征峰;sKGP-3主要呈片状和丝状,属于非晶态。体外抗氧化活性评估表明,纯化前sKGP具有比同质量浓度多糖(grape polysaccharide,KGP)更高的抗氧化活性,sKGP的总抗氧化能力为8.499μmol/mL,DPPH自由基、羟自由基、ABTS⁺     

结核分枝杆菌腺苷磷酰硫酸激酶的异源活性表达和酶学性质

PAPS是生物体内磺化反应的惟一活性磺酸基团供体.腺苷磷酰硫酸激酶是催化APS和ATP生成PAPS和ADP的一类酶.为实现PAPS的酶法合成,作者通过密码子优化来自结核分枝杆菌(Mycobacteriuim tuberculosis AUSMDU00018547)的腺苷磷酰硫酸激酶编码基因与共表达硫氧还蛋白TrxB,实...     

铁皮石斛多糖分离纯化及其药理活性研究进展

目的：从铁皮石斛中分离纯化得到铁皮石斛多糖,对其进行结构表征,并探究其抗炎作用。方法：以铁皮石斛为原料,通过水提醇沉法得到铁皮石斛粗多糖,再经过DEAE-52纤维素离子交换树脂和葡聚糖凝胶Sephadex G-100从粗多糖中分离纯化得到多糖组分DOP-1。利用紫外扫描法、气相色谱法、高效凝胶色谱、红外光谱和核磁共振扫描等技术对多糖DOP-1进行结构分析,并测定DOP-1对小鼠腹腔巨噬细胞RAW 264.7细胞增殖抑制效果,及其对LPS诱导的RAW264.7细胞NO、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）表达的影响。结果：分离纯化得到的多糖DOP-1为鼠李糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的均一性多糖,单糖摩尔比为0.6:9.0:2.7:2.9,分子量为59.2 kDa。DOP-1对RAW 264.7细胞增殖无显著性抑制,与模型组相比,DOP-1能显著抑制NO、TNF-α和IL-1β的表达量。结论：本实验得到的铁皮石斛多糖结构明确,且具有较好的抗炎活性,提取工艺条件具有可行性。本研究可为铁皮石斛多糖在抗炎功效产品的开发利用提供理论依据。

     

工业大麻叶对金黄色葡萄球菌的抑菌机制

探索工业大麻叶的抑菌组成及对金黄色葡萄球菌的抑菌机制,为以工业大麻叶成分为先导化合物开发新型天然防腐剂提供理论依据。工业大麻叶乙醇提取物经乙酸乙酯萃取、硅胶柱分离,采用微量二倍稀释法确定最低抑菌浓度(MIC),获得高活性组分,GC-MS分析抑菌组成;研究作用前后菌体细胞壁完整性、细胞膜通透性、能量代谢和氧化损伤变化,探讨抑菌机制。结果表明,工业大麻叶Fr5(石油醚和乙酸乙酯的体积比为1∶1)组分抑菌效果最佳,对金黄色葡萄球菌的MIC为31.25μg/mL,GC-MS共鉴定出24种化合物;经Fr5处理后,细菌表面明显凹陷,胞外碱性磷酸酶(AKP)活力升高,培养液电导率升高,核酸相对浓度增加,可溶性蛋白质质量浓度增大,菌体三磷酸腺苷(ATP)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性均先升后降。工业大麻叶Fr5可破坏金黄色葡萄球菌细胞壁和细胞膜结构,导致细胞膜通透性增加,内容物外泄,进而影响菌体能量代谢并造成质膜氧化损伤,最终抑制细胞生长。     

草酸青霉线性五肽生物合成的比较转录组分析

草酸青霉(Penicillium oxalicum)是一种重要的植物生防菌,从三峡河岸带分布的草酸青霉中,分离到一种线性五肽,该物质对柑橘致腐菌指状青霉(P.digitatum)具有极强的抑制作用.为了分析该五肽的生物合成机制,本研究采用BGISEQ-500平台,测定了3株不同五肽含量的草酸青霉(114-2,SG-4,...     

添加酿酒酵母的类Cheddar干酪生产工艺

开发具有特色风味的干酪产品是提高我国消费者对干酪接受度的重要手段.以新鲜牛乳为原料,选取蔗糖添加量、干酪发酵剂添加量、凝乳酶添加量为因素,以干酪产率、感官评定为主要检测指标,通过单因素实验和正交实验对添加酿酒酵母的类Cheddar干酪的加工工艺进行优化,并以感官评定为主要检测指标,对最佳工艺进行验证.结果表明,添加酿酒...     

板栗种仁多糖的提取纯化及体外抗肿瘤活性筛选

以燕山地区板栗为原料,利用加压溶剂萃取法提取板栗种仁粗多糖,以多糖得率为指标,通过单因素结合响应面法优化提取工艺条件。将最优提取条件下得到的粗多糖经除蛋白、脱色素、透析后得到纯化多糖,继而借助制备型高效体积排阻色谱得到板栗多糖的高分子量组分(YCP-H),分析了其形貌特点、结构特征和单糖组成,并针对8种人体肿瘤细胞模型进行了体外抗肿瘤活性筛选。结果表明,高压溶剂萃取法提取板栗种仁粗多糖的最佳提取条件为:当投料量为10 g,静态提取次数为3次时,设定温度60 ℃、时间9 min、压力6 MPa,多糖得率可达19.78%±0.27%。组分YCP-H是具有β-吡喃构型的酸性多糖,重均分子量范围为217~5900 kDa,在扫描电镜下呈现纤维状的微观形貌,单糖组成包含阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和岩藻糖。YCP-H对人肝癌细胞HepG2的增殖具有显著(P<0.05)的抑制作用,其半数抑制浓度可达0.08 μg/mL。此外,YCP-H对人结肠癌细胞HCT-116和肺癌细胞A-549的增殖也有较强的抑制作用。     

牛膝多糖降血糖活性成分的分离鉴定

研究牛膝多糖与降血糖活性的关系。牛膝粉碎后先经乙醇提取,再用热水提取,水提液减压浓缩后经醇沉得到牛膝水提醇沉物。采用链脲佐菌素（streptozocin,STZ）诱导方法建立小鼠糖尿病模型,每日给药牛膝各分离组分,连续给药8周,通过测定小鼠血糖、糖化血红蛋白,检测牛膝中具有降血糖活性的组分。采用DEAE、HW-55F、Sephacryl S-400等凝胶色谱柱对具有降血糖活性的牛膝多糖组分进一步分离。运用Sephadex G-100凝胶色谱、飞行时间质谱（time of flight mass spectrometer,TOF-MS）、气相色谱（gas chromatography,GC）、核磁共振（nuclear magnetic resonance,NMR）等手段鉴定多糖纯度、测定相对分子质量、分析结构。结果表明,牛膝的水提醇沉物能显著降低糖尿病小鼠的空腹血糖（fasting plasma glucose,FPG）和糖化血红蛋白（HbA1c）浓度（P＜0.05）。将水提醇沉部分进一步分离得到具有降血糖活性的牛膝多糖,并鉴定其纯度为均一多糖,相对分子质量为1 800.5,该多糖由1分子葡萄糖和10分子果糖组成,以葡萄糖分子为起点,与果糖C₂相连,果糖之间以β-1,2 糖苷键连接形成主链,支链连接在果糖的C₆上,该研究明确了牛膝中具有降血糖活性的多糖分子结构。     

枯草芽孢杆菌产D-阿洛酮糖3-差向异构酶的发酵优化

D--阿洛酮糖是D--果糖在C-3位的差向异构体,由于较低的热量和与蔗糖相似的甜度,D-阿洛酮糖成为一个具有发展前景的功能性甜味剂。D--阿洛酮糖 3-差向异构酶（D--psicose 3-epimerase,EC 5.1.3.30,DPEase）能够催化D--果糖生产D--阿洛酮糖,这种生物酶法制备的功能性甜味剂D--阿洛酮糖由于简单的纯化步骤和高产物浓度等优点受到关注。该研究对1株前期构建的枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 1A751/pUB-P43dpe-dal产DPEase进行了3 L发酵罐水平培养,通过优化溶解氧（DO）、pH、温度、初始碳源质量浓度确定最适发酵条件为：DO为30%、pH 6.0、温度37 ℃、初始葡萄糖质量浓度15 g/L,最高发酵酶活达78.3 U/mL。在此基础上进行补料发酵优化,得到最适补料条件为：在发酵5 h进行补料,碳源补料速率8.0 g/（L·h）,在此条件下,发酵9 h全细胞酶活高达123.0 U/mL。此发酵策略为扩大工业化生产提供了参考。     

番茄发酵液中乳酸杆菌的分离鉴定及对模拟胃肠液耐受性研究

为获得具有较好生长能力及胃肠耐受性的果蔬发酵剂,作者以自然发酵60 d的番茄液为对象,利用形态学及16S rDNA基因序列分析等方法,从中分离鉴定出3株乳酸杆菌（分别命名为L1、L2、L3）,并研究其生长特性及对模拟胃肠环境的耐受能力。其中,L1和L3属于植物乳杆菌属（Lactiplantibacillus plantarum）;L2为乳杆菌属（Lactobacillus brevis）,3株菌的最适生长pH值均为6.6,最适生长温度为30~38 ℃。耐受性研究发现,L1和L3具有更强的高温及高盐耐受性,L2具有更好的胆盐耐受性;3株乳酸杆菌尤其是L3对人工胃液环境具有良好的耐受能力,存活率均高于96%。在人工肠液环境下3株菌的存活率超过90%,尤其L1表现出更好的稳定性。结果表明,作者分离得到的3株乳杆菌均具有良好的生长特性和胃、肠耐受特性,本研究结果可为果蔬发酵剂的研制及其发酵制品的开发提供参考。     

不同产地黑果腺肋花楸品质分析

为研究黑果腺肋花楸的品质状况,选取了我国15个不同产地的黑果腺肋花楸样品,对理化品质、营养品质、质构特性以及感官品质进行了综合分析.结果表明,12个品质指标中变异系数大于15％的有9个,包括咀嚼性、花色苷、原花青素、黄酮、多酚等,说明不同产地之间品质差异明显.主成分分析将12个品质指标降维成3个主成分,累积方差贡献率为...