液相色谱法测定饮料中咖啡因、可可碱和茶碱

采用高效液相色谱法同时测定饮料中的咖啡因、可可碱和茶碱.饮料样品经超声提取后,用高效液相色谱分离,二极管阵列检测器检测,建立标准工作曲线,以外标法定量.实验精密度为0.58%～1.85%,添加回收率范围为80.2%-96.4%.此方法快速,简便,准确,适用于饮料中咖啡因、可可碱和茶碱的测定.     

钛胶RP-HPLC法同时测定5 种维生素

采用钛胶反相色谱柱,建立高效液相色谱法同时测定5 种维生素：烟酸、生物素、烟酰胺、叶酸和钴胺素含量的检测方法。研究5 种维生素的保留行为与磷酸缓冲盐pH值、缓冲盐类型及浓度、柱温和流速的关系,得出了最优色谱条件：于波长210 nm处检测生物素和钴胺素,于波长270 nm处检测烟酸、烟酰胺和叶酸,磷酸盐pH 7.0,浓度5.0 mmol/L,柱温50 ℃,流速0.8 mL/min。分析5 种维生素保留的热力学参数焓、熵和吉布斯自由能。烟酸、生物素、烟酰胺、叶酸和钴胺素标准曲线线性良好（R2＞0.999 0）;烟酸、生物素、烟酰胺、叶酸和钴胺素的检出限分别为6、10、20、22、8 ng/mL;5 种物质的相对标准偏差均低于1.36%;加标回收率范围为92.30%～107.20%。方法的精密度和准确度均可满足高效液相色谱法的测定要求。     

钛胶反相高效液相色谱法测定饮料中的柠檬酸

建立了钛胶反相高效液相色谱法测定饮料中酸味剂柠檬酸含量的快速检测方法.色谱条件:分离柱为Titania Sachtopore-RP柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为水∶甲醇=60∶40 (v/v)、流动相中含磷酸盐3mmol/L,流速0.SmL/min,柱温60℃,检测波长210nm.线性范围为0.02mg/mL～8.0mg/mL,检出限2.4μg/mL (3σ),回收率为92.79％～99.30％,RSD (n=8) ＜0.72％.准确度和精密度均可满足饮料中柠檬酸的测定要求.     

几种常见绿茶茶碱与咖啡碱成分的分析

利用高效液相色谱法(HPLC),对9种绿茶进行了生物碱的定量和定性分析和比较。通过实验得出鉴别绿茶品质的重要参数。结果表明:茶碱含量与产地气候有密切关系,咖啡碱的含量随产地气候变化较小,而咖啡碱含量与茶碱含量比值具有稳定而明显的差异,可以作为绿茶的生化鉴别依据之一。      

ISO_(10727)茶和固态速溶茶—咖啡碱含量的测定——反相高效液相色谱法

国际标准化组织农产品技术委员会(ISO/TC34)于1981年颁布的ISO3720《红茶——规格》引言中已指出:咖啡碱和茶多酚类物质的含量是红茶的重要化学特性,但是,其测定方法尚未确定,限量指标迄今不能规定。此后,茶叶分技术委员会(TC34/SC8)进行了大量研究工作,有关国家曾推荐Lehmann法、Smith法、紫外分光光度法、气相色谱法、液相色谱法等,试验表明这些方法的精确度和精密度均不理想,尤其不适用于去咖啡碱的茶类。1989年荷兰代表L.Kaper提出一种反相高效液相色谱法,虽然用于含量低于0.3％的茶类精密度尚欠佳,但是,经各国试验验证基本上接受了该方法,TC34批准该方法为国际标准,标准代号为ISO10727。现将标准全文译出。     

液相色谱法快速测定荞麦制品中可可碱、咖啡因含量研究

该研究建立高效液相色谱法快速测定荞麦制品中可可碱、咖啡因含量分析方法,采用甲醇∶水∶氨水(70∶3∶1,V/V/V)为提取液超声提取荞麦制品中的可可碱、咖啡因,在Shimpack VP–ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)上,以甲醇∶0.02 mol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,紫外检测器275 nm波长检测。结果:采用外标法定量,该方法在0.25⁵0.0μg/mL浓度范围内有良好的线性关系,加标回收率均在97%以上,相对标准偏差不大于3.0%,可可碱最低检出限1.4 mg/kg;咖啡因最低检出限1.0 mg/kg,对荞麦制品中可可粉添加量的最低识别浓度为0.01%。结论:该方法具有快速、准确、灵敏度高,满足实验室日常鉴别荞麦制品中是否添加可可粉的工作需求。     

钛胶反相高效液相色谱法测定饮料中的柠檬黄

建立了基于钛胶柱对饮料中合成色素柠檬黄的高效液相色谱快速测定方法.色谱条件:分离柱为Titania Sachtopore-RP柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5μm),流动相为甲醇:水=45∶55(体积比)、流动相中含乙酸铵1.5 mmol/L,流速0.8 mL/min,柱温35℃,检测波长426 nm.线性范围为5 mg/L～80 mg/L,最低检出限为4μg/L,回收率为91.7％～93.7％,相对标准偏差(n=8)小于0.7％.准确度和精密度均可满足饮料中柠檬黄的测定要求.     

高效液相色谱法测定可可粉和可可壳酊中的可可碱和咖啡因

采用高效液相色谱法测定可可粉和可可壳酊中的可可碱及咖啡因含量,固定相为Hypersil ODS,流动相为甲醇-醋酸-水(20179),紫外检测波长275nm.样品中可可碱和咖啡因的回收率分别为98.6%±0.71%和97.1%±0.80%,变异系数为0.80和1.49.     

钛胶反相高效液相色谱法测定饮料中的咖啡因

建立了利用钛胶反相柱快速测定饮料中咖啡因的含量的高效液相色谱方法.色谱条件:分离柱为Titania Sachtopore - RP柱(250mm×4.6mm i.d.,5μm),柱温30℃,流动相为水∶甲醇=83∶17 (V/V),流速1 mL/min,检测波长273nm.线性范围为12 - 900μg/mL,此范围内标准曲线线性良好(R2=0.9998).最低检出限(S/N =3)为0.03 μg/mL,样品加标回收率范围为98.6％～102.2％,精密度即相对标准偏差(n=9)小于0.23％.本法简单易操作、分析速度快,精密度和准确度均取得满意效果,适用于各种饮料样品中咖啡因的定量分析.本研究不仅是对食品中咖啡因检测方法的补充,更重要的是发挥了钛胶固定相不可比拟的优势.     

钛胶正相高效液相色谱法测定饮料中的山梨酸

防腐剂是能抑制微生物生长,防止食品腐败变质,延长保存期的一类添加剂。山梨酸在人体内能参加正常的新陈代谢,可视做食品的成分之一,是迄今为止国际公认的理想食品防腐剂。本文建立了根据钛胶正相高效液相色谱法测定饮料中防腐剂山梨酸含量的快速检测方法,4种饮料样品经过0.45μm微孔滤膜过滤后直接进样。色谱条件:分离柱为Titania Sachtopore-NP柱(250mm×4.6mm i.d.,5μm),流动相为水∶甲醇=20∶80(V/V)、流动相中含醋酸盐8mmol/L,流速0.8mL/min,柱温60℃,检测波长254nm。采用外标法定量,得到了良好的线性关系,线性范围为2-20μg/mL,检出限1.2μg/mL,回收率为98.2%103.9%,RSD(n=8)<0.74%。准确度和精密度均可满足饮料中山梨酸的测定要求,是一种简单、快速、结果准确的检测方法。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定保健食品中磷脂酰丝氨酸

目的 建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法检测保健食品中磷脂酰丝氨酸的含量。方法 将样品用氯仿+甲醇(9:1, V:V)提取液溶解定容后过膜, 采用高效液相色谱法(正相色谱柱, 蒸发光散射检测器)进行检测, 流动相为正己烷+异丙醇+水+乙酸+三乙胺(36:55:8:1.5:0.08, V:V:V:V:V), 外标法定量。结果 在40~ 1000 μg/mL的范围内磷脂酰丝氨酸浓度的自然对数与峰面积的自然对数线性关系良好, 相关系数为0.9991, 加标回收率为99.00%~100.15%, 相对标准偏差为0.3%~0.7%。结论 该方法操作简便、准确、重现性好, 适用于保健食品中磷脂酰丝氨酸含量的测定。     

反相高效液相色谱法测定发酵液中的风味强化肽

采用反相高效液相色谱法对发酵液中的风味强化肽进行定量分析。色谱条件 :色谱柱为日本shimadzu公司的ShimadzuVP ODSC18(5 μm ,1 5 0mm× 4 6mmi d )不锈钢柱 ,流动相为乙腈 水 (含体积分数为 0 1 %的三氟乙酸 )溶液 ,采用线性梯度洗脱方式 ,流动相B(含 0 1 %三氟乙酸的乙腈溶液 )体积分数在 3 0min内由 5 %线性升至 5 0 % ,流速为 1 0mL/min ,检测波长为 2 3 0nm ,室温测定。结果 :RP HPLC法测定浓度在 0 1 2 5～ 2 0 0 0mg/mL时线性关系良好 ,r =0 9998。回收率为 86 2 %～ 1 0 3 4% ,最低检测限量为 1 2 5ng ,该方法精密度高 ,相对标准偏差 (RSD)为1 4%。此方法准确、灵敏、重现性好 ,适合于发酵液这种复杂体系中风味强化肽的定量分析     

高效液相色谱-二极管阵列检测器测定兽药、保健食品中茶碱、二羟丙茶碱和盐酸二氧丙嗪

目的 建立高效液相色谱-二极管阵列检测器(high performance liquid chromatography-photodiode array detector,HPLC-PDA)检测茶碱、二羟丙茶碱和盐酸二氧丙嗪3种平喘类药物成分的检测方法.方法 以水-甲醇(70:30,V:V)为流动相,流速为1.0 mL...     

不同茶叶中表没食子儿茶素没食子酸酯的含量测定

目的建立反相高效液相色谱法检测茶叶中表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)的含量,并对比不同茶叶中EGCG的含量。方法对不同产地茶叶样品用70%甲醇提取10 min,提取后冷却至室温,提取溶液经过离心;采用反相色谱柱Agilent SB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)检测,以流动相A(90mL乙腈:20 mL乙酸:2 mL乙二胺四乙酸二钠:888 mL水)、流动相B(800 mL乙腈:20 mL乙酸:2 mL乙二胺四乙酸二钠:178 mL水)梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长278 nm。结果 EGCG在78.0~468.0μg/mL的范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r~2=1.0000),平均加标回收率为95.6%,RSD为1.29%。结论该方法简单、灵敏、稳定、可靠,可用于不同茶叶EGCG的含量测定。实验同时发现,不同茶叶由于产地和工艺不同,EGCG含量差异较为明显。     

固相萃取柱净化-高效液相色谱法测定谷物中的呕吐毒素残留量

目的 建立固相萃取柱净化-高效液相色谱法快速检测小麦、大麦、玉米及大米等谷物中呕吐毒素的残留量。方法 样品经乙腈-水提取液(85:15, V:V)提取,过HLB固相萃取柱净化。采用C_18柱为分离柱,对流动相的组成和洗脱斱式等参数进行优化和探讨。以水和甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,柱温35℃,外标法定量。结果 呕吐毒素浓度在0.05～5.0 mg/L的范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9999。呕吐毒素在0.5、1.0和2.0 mg/L添加水平的回收率为79.7%～106.0%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)小于4.2%(n=5),斱法定量限为300μg/kg。结论 该斱法简便、快捷、准确、灵敏度较高,适用于小麦、大麦、玉米及大米等的谷物中呕吐毒素的快速检测。     

核壳型色谱柱-反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法同时测定饮料中5种人工合成甜味剂

建立了一种同时测定饮料中主要限用人工合成甜味剂:安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、三氯蔗糖和阿斯巴甜的反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法。采用核壳型HALO色谱柱,甲醇/甲酸-三乙胺缓冲溶液（p H=4.5）为流动相,梯度洗脱,ELSD检测,结果表明5种甜味剂在4.5 min内能够实现完全分离。线性范围为5μg/m L⁵00μg/m L,线性相关性系数大于0.997,方法最低检出限为2μg/m L,定量限为5μg/m L。在3个添加水平下,样品的加标回收率为83.0%¹06.7%,相对标准偏差为0.84%³.37%。该方法方便、快速、适用性强并可快速推广,可实现饮料中多种人工合成甜味剂的同时分离检测,同时也适用于无紫外吸收的甜味剂的检测。      

Micellar electrokinetic capillary chromatography of methylxanthines‐containing beverages: discussion of the molecular species involved

Micellar electrokinetic capillary chromatography (MECC) experimental conditions were applied to 12 samples of methylxanthine‐containing infusions of different commercial brands of yerba mate, coffee, tea and cocoa as well as two cola drinks. The best resolution in this mode of automated high‐performance capillary electrophoresis (HPCE) was achieved here when using 15 kV voltage in an uncoated fused‐silica capillary of 45 cm length (40 cm effective length), 50 mM sodium dodecylsulfate, 90 mM pH 8.5 borate buffer and UV detection. Theobromine, caffeine and theophylline were separated, and the peak splitting due to tautomeric species was observed. Experimental conditions were controlled, keeping constant the size of the elution window in each analysis. The limit of detection was less than 1 mg l^?1, the limit of quantitation was 2.5 mg l^?1 and the work range was 2.5–300 mg l^?1. This HPCE–MECC system has proved suitable for the analysis/quality control of xanthines in beverages for consumption. Roles of various parameters as well as distinctly charged species of each xanthine and the origin of peak splitting in this MECC system are discussed. Copyright © 2004 Society of Chemical Industry     

氨基酸柱前衍生高效液相色谱分析中色谱条件的优化

采用柱前衍生高效液相色谱法对氨基酸标样进行测定,比较在不同比例流动相下氨基酸的分离效果,并找出最优色谱条件.     

酶解胶原蛋白制备血管紧张素转化酶抑制肽的研究

血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制剂是目前用于治疗高血压的重要药物.本实验采用胃蛋白酶(pepsin)和胰蛋白酶(trypsin)组合酶解胶原蛋白制备水解液.使用1kD超滤膜对水解液进行超滤,超滤液采用葡聚糖凝胶Sephadex G-15凝胶过滤层析得到多种组分.各组分经酶活力和蛋白浓度测定,筛选出有较高 ACE抑制率的两个样品.继续使用反相高效液相色谱进一步分离筛选出样品,对分离出的不同组分进行蛋白浓度和抑制率测定,通过分析实验数据,筛选出具有最高活性组分.最终样品经脱盐和冷冻干燥后进行高抑制活性的血管紧张素转化酶抑制肽的分子量的测定.