一株高效降解呕吐毒素的德沃斯氏菌筛选鉴定及效果评价

以脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxynivalenol,DON）为唯一碳源,采用富集培养法从河流污泥等样品中分离获得一株高效降解DON的微生物菌株。通过形态学观察和16S rDNA序列分析,初步鉴定为德沃斯氏菌(Devosia limi),命名为德沃斯氏菌D-8。该菌株在MSM培养基中3 d内可将10 μg DON完全降解。研究表明,德沃斯氏菌D-8产生的活性物质可将DON转化为质荷比为297.134 3的产物,经分析推导为DON的同分异构体3-epi-DON。以被DON污染的谷物及其副产物原料,以菌株D-8为发酵菌株,经过18 h发酵,污染小麦、玉米稀浆和酒糟蛋白（DDGS）中的DON降解率分别为98.11%、62.84%和42.5%,对被污染的小麦脱毒效果最佳,可将DON初始含量由6 110.42 μg/kg降解至115.41 μg/kg。该研究结果可为DON污染粮食及其制品采用生物脱毒方法处理提供一定的技术支撑。     

二氧化氯对玉米乙醇发酵糟液中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的降解

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)是造成粮食污染的主要原因之一。采用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)对DON含量进行检测分析,通过液体浸泡法,探究了ClO_2对DON纯品以及玉米乙醇发酵糟液中DON的降解效果。结果显示:DON降解率随ClO_2溶液浓度的增大以及处理时间的延长而提高,且pH值对DON降解有影响。当pH值为4. 5～5. 5时,600 mg/L ClO_2溶液对DON纯品处理12 h,降解率为28. 23%,并产生了2种降解产物;该方法同样适用于玉米乙醇发酵糟液中DON降解,600 mg/L的ClO_2溶液对玉米发酵糟液处理12 h,降解率达40. 70%,降解效果较好,对处理乙醇发酵工艺中的DON或其他真菌毒素具有一定的指导意义,为大规模生产中对DON的去除提供了新的思路。     

高温高压膨化法降解小麦中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇及降解产物解析的研究

本文研究了高温高压膨化法降解小麦中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇（俗称呕吐毒素，Deoxynivalenol，DON）的条件，确定了压力是影响降解结果的关键因素，在压力为1.3 Mpa时DON的降解率为61.9%~81.1%，降解产物经超高效液相串联四极杆飞行时间质谱仪(UHPLC-QTOF-MS)定性分析，得到至少5个降解产物，通过对主要降解产物的结构解析，确定了主要降解产物的分子式、分子质量和分子结构式。DON的重要毒位点3-OH的β、α异构化和内醚的水化反应，对DON毒性的降低意义重大，降解产物之一3-epi-DON的毒性是DON的1/350。     

呕吐毒素(DON)生物合成和降解研究进展

呕吐毒素(Vomitoxin),即脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),是镰刀菌产生的次生代谢物质,是污染粮食的主要真菌毒素.随着我国灾害气候的频频发生,DON的污染程度呈现加剧趋势,因此DON污染的控制迫在眉睫.本文阐述了DON的物理化学特性,结合化学结构和基因遗传分析了DON的生物合成途径,并综述了微生物对DON的生物降解研究,推测了DON可能的作用位点、降解途径及降解产物,以此启发利用生物技术,探求安全、高效,低成本的DON生物降解途径,确保粮食和食品安全、保护消费者健康.     

降解呕吐毒素微生物的筛选鉴定及其应用

目的 筛选高效降解呕吐毒素（Deoxynivalenol,DON）的微生物并鉴定其种类。方法 分离培养出高效降解DON的微生物,鉴定该微生物种类,分析微生物各组分降解DON的效率,并在DON超标的小麦麸皮中开展应用。结果 筛选到高效降解DON的菌株MB-1,该菌株能降解82.3%的DON。鉴定结果表明菌株MB-1被命名为Bacillus aryabhattai MB-1,中文名为阿氏芽孢杆菌MB-1。各组分降解DON的结果表明菌株MB-1产生至胞外的活性物质主导DON的生物降解。菌株MB-1可降解小麦麸皮中80.4%的DON。结论 本研究筛选到降解DON的阿氏芽孢杆菌MB-1,这是首次报道阿氏芽孢杆菌可高效降解DON,为降解去除小麦等谷物中的DON提供了菌种资源。     

臭氧和紫外降解面粉中的DON及对面粉品质的影响

为降低面粉DON含量,用臭氧及紫外线处理受污染的面粉,研究处理条件对降解效果的影响,对比处理前后面粉的蛋白含量、湿面筋含量和白度值并通过MTT法评价降解产物安全性。研究表明,在臭氧浓度45.00 mg/L,水分含量为16.00%的条件下处理DON污染面粉60 min,初始DON含量为2.35、2.84、4.09和4.95 mg/kg的面粉DON降解率分别为46.59%、40.71%、38.96%和35.40%;在紫外照射强度1200μW/cm2,水分含量12.00%的条件下处理DON污染面粉60 min,相同初始含量的DON降解率为39.89%、40.32%、36.68%和30.32%。两种处理后面粉蛋白质含量、湿面筋含量和白度等理化指标均无显著变化(p0.05)。MTT实验表明:DON对LO2有很强的细胞毒性,给药48h后细胞活性降低62.02%,相同DON浓度的紫外降解产物使细胞活性降低17.50%,臭氧降解产物则使细胞活性仅下降2%(p0.05)。本研究使用的方法可在短时间内有效降低面粉中DON含量,对面粉品质无显著影响,两种方法的降解产物对LO2细胞毒性均显著下降(p0.01)。     

米曲霉Aspergillus oryzae As-W.6对脱氧雪腐镰刀菌烯醇的降解效果

研究米曲霉Aspergillus oryzae As-W.6对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)的降解作用。经高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)检测,不同初始质量浓度的DON经菌株As-W.6发酵7 d后,降解率均在35%以上;发酵14 d后,降解率均在90%以上;同时该菌株中提取的降解酶对不同初始质量浓度DON的降解率均达70%以上。对降解产物采用高效液相色谱-质谱(HPLC-mass spectrometry,HPLC-MS)分析检测,结果显示DON经该降解菌降解后,相对分子质量从原来的295.1变为281.2,减少了13.9,说明DON确实被该菌降解成为另一种物质。     

臭氧对不同基质中呕吐毒素的降解效果研究

为了研究臭氧对不同基质中呕吐毒素（DON）的降解效果及其规律，本研究采用臭氧来处理不同状态下DON纯品和赤霉病小麦，并初步探究了小麦组分对臭氧降解DON效果的影响。结果表明，臭氧可以在短时间内降解水溶液中的DON纯品和固态DON纯品，在处理浓度为10 mg/L、处理时间为60 s时，DON的降解率可达90%；臭氧可以有效降解小麦中的DON，料液比对小麦中DON的降解效果具有显著影响，当小麦粉与水的料液比为1:6时，臭氧可将初始含量为1.82 mg/kg的全麦粉中DON含量降解至国家标准限量 (1 mg/kg)以下。此外，在臭氧降解小麦中的DON时，小麦麸皮、淀粉和蛋白均对其降解效果有着明显的阻碍作用，且蛋白的阻碍作用最大。由此可知，臭氧可以显著降解不同状态下的DON纯品，对小麦各组分中的DON有较好的降解效果，并且臭氧对DON纯品的降解效率要显著高于赤霉病小麦，说明小麦各组分对臭氧降解DON有一定影响，其中蛋白的影响效果最为明显。不同基质中的DON的臭氧降解效果不同，且该降解效果受臭氧处理浓度和处理时间、样品与臭氧接触面积、样品水分含量等因素的影响。     

臭氧水协同超声波处理对小麦中DON降解效果的研究

为了研究臭氧水协同超声波处理对赤霉病小麦中DON降解效果的影响,采用不同协同方式对赤霉病小麦进行处理,并筛选出臭氧水和超声波协同的最佳方式。随后在最佳联合方式下进行单因素和正交实验来探讨臭氧水浓度、超声振幅和处理时间对赤霉病小麦籽粒中DON降解效果的影响。结果表明:臭氧水和超声波最佳联合处理方式为T5,即先超声波处理5 min再臭氧水处理5 min,此时赤霉病小麦中DON降解率最高(46.99%)。经单因素和正交实验得出,在此联合方式下臭氧水浓度为58.32 mg/L,超声振幅为60%,处理时间比为9:1时赤霉病小麦中DON降解率最高(51.02%)。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇解毒酶研究进展

脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxynivalenol, DON）是镰刀菌属（Fusariums spp.）产生的剧毒次级代谢产物,主要污染小麦、玉米等粮食及其制品,导致了严重的食品安全风险。目前生物酶法去除DON的技术研究,展现出良好的应用前景。综述了国内外关于DON生物转化的生物酶类型、降解机制、产物结构特征、解毒酶挖掘策略,以及解毒酶分子改造等研究现状,并对人工智能应用于真菌毒素解毒酶的相关研究进行了展望,以期为食品和饲料中DON的生物脱毒技术的研发提供参考。     

玉米赤霉烯酮胶体金试纸条质量验证试验

目的验证玉米赤霉烯酮胶体金试纸条对玉米基质、小麦基质样品中玉米赤霉烯酮检测的准确性。方法根据试纸条说明书方法,将不同浓度系列的玉米基体和小麦基体质控样品进行前处理后,用试纸条测定其浓度。结果检测样品为玉米基体时试纸条间无显著性差异,相对准确率为99.5%,检测结果准确;小麦基体时,试纸条显著性差异为39.03(自由度df=1),相对准确率为80.5%,检测结果差异较大。结论该方法基本可行,适合对玉米中玉米赤霉烯酮的含量进行定性检测,不适合对小麦中玉米赤霉烯酮含量进行定性检测。     

胶体金粒径对氯霉素胶体金试纸条性能的影响

采用柠檬酸三钠法分别制备出粒径为20、30、40nm的3种胶体金溶液,并标记抗氯霉素(CAP)单克隆抗体,另分别制备出竞争法氯霉素胶体金试纸条,并且对各种粒径胶体金制备试纸条的工艺进行优化,比较各种试纸条的性能。结果发现,利用30nm的胶体金制得的试纸条检测限(消线)为3ng/mL,检测快速、稳定,而20、40nm的胶体金制得的试纸条检测限(消线)分别为7、9ng/mL,稳定性较差。30nm的胶体金制备的胶体金试纸条在稳定性、灵敏度方面都明显优于20nm和40nm。     

液体乳中三聚氰胺的快速检测产品评价研究

目的 评价液体乳中三聚氰胺的快速检测产品。方法 采用空白基质加标的方式制备了三聚氰胺3个不同浓度水平的牛奶盲样，并验证盲样的均匀性和稳定性，对3个不同厂家的三聚氰胺胶体金试纸条、3台不同的便携式拉曼光谱仪进行评价测试，系统性地研究了快速检测产品评价方法。结果 评价结果表明，各快速检测产品灵敏度分别为100%（5个）和99.3%（1个），特异性均为100%，假阴性率为0%（5个）和0.7%（1个），假阳性率均为0%。结论 本研究用于液体乳中三聚氰胺检测的快速检测产品符合性能指标的要求，满足市场监管的需要。     

Advantage of Eu3+‐Doped Polystyrene Microspheres Compared with Colloidal Gold Used in Immunochromatographic Assays for the Detection of Melamine in Milk

Colloidal gold and Eu³⁺‐doped fluorescent microspheres were applied as labels to develop the immunochromatographic strips for detecting melamine in milk. Under the optimized condition, the visual detection limit of colloidal gold‐immunochromatographic test strip (ICTS) was 150 μg/L of melamine in phosphate‐buffered saline (PBS), although the visual detection limit of fluorescent nanoparticles (FN)‐ICTS was 75 μg/L in PBS. As thermal acceleration test, FN‐ICTS could be stored at 37 °C for at least 11 d before sample testing, but the color of the lines on colloidal gold‐ICTS faded away after 7‐d storage. The visual result of FN‐ICTS was more stable than that of colloidal gold‐ICTS, and the fluorescence intensity of the line on FN‐ICTS could be maintained up to 30 d at 22 °C after sample testing. Once the immunochromatographic strips were used to detect melamine in milk, no negative effect of milk components on the performance of FN‐ICTS was identified, whereas the performance of colloidal gold‐ICTS was significantly influenced by milk matrix.     

Thermal degradation products of wood

After thermal degradation of wood the lignin degradation products were separated by gas chromatography and identified by mass spectrometry. The mass spectra and chemical formulae of 82 monomeric lignin derived degradation products are presented.     

Thermal degradation products of wood

The analysis of volatiles after thermal degradation of wood allows specific characterization of wood and its potential use as raw material for different purposes. Thermal degradation products from analytical pyrolysis have been separated by gas chromatography and characterized by mass spectrometry. Up to 82 different degradation products of lignins are tabulated. In following publications also degradation products derived from polysaccharides will be presented.     

烟草赤星病病原长柄链格孢菌快速检测胶体金试纸条的研制

为实现大田期烟叶烟草赤星病的快速测定,以胶体金标记特异性识别长柄链格孢菌的单克隆抗体,利用侧流免疫层析技术构建了长柄链格孢菌快速检测试纸条。结果表明,该试纸条对目标真菌的检出限为20 ng/mL,且与烟草相关病原体无交叉反应,灵敏度高、特异性好。利用该试纸条对加标鲜烟叶进行检测,10 min内可完成检测,操作简便快速,可用于大田赤星病的快速诊断及早期预警。      

Thermal degradation products of wood

Thermal degradation products of woods arising at 450°C have been separated by gas chromatography on a DB-1701 capillary column. GC retention times and mass spectral data of 104 polysaccharide derived pyrolysis products are tabulated. The elemental composition of 76 identified compounds are also presented. The mass spectra were obtained by electron impact ionization (EI). However, the molecular mass of all degradation products with Mw>76 was determined by chemical ionization (CI) using iso-butane as reagent gas. The peak assignment was proved in 38 cases by mass spectrometry of authentic compounds and 32 degradation products were identified according to the literature. The spectral data are presented as a Mass Peak Index showing the intensity of the nine most abundant peaks.     

烟叶中多菌灵胶体金定量试纸条的研制及应用

为了建立烟叶中残留的多菌灵的快速定量检测方法,利用胶体金免疫层析技术并配套胶体金读数仪,确定更适用于现场检测的多菌灵试纸条的产品形式,明确温度对胶体金试纸条定量结果的影响,用恒温孵育器控制检测温度,基于胶体金读数仪绘制标准曲线。结果表明:①研制的定量胶体金试纸条检测限为0.017 mg/kg,检测范围为0.020~2.0 mg/kg,定量范围为0.020~0.50 mg/kg,加标回收率为95.6%~128.9%,批内变异系数为6.2%~11.2%;②与高效液相色谱-串联质谱法的检测结果相比,阴性样品检测结果准确率大于95%,阳性样品的检测结果在定量范围0.020~0.50 mg/kg内线性关系良好;③对于与多菌灵结构相似的药物,试纸条与其无交叉反应,可特异性定量检测烟叶中残留的多菌灵。本研究中研制的多菌灵定量试纸条具有操作简便、检测速度快、准确性高、稳定性好等优点,适用于基层实验室的大批量样品检测及现场快速检测。      

Thermal degradation products of wood

Woods were degraded by analytical pyrolysis at 450°C. The degradation products were separated by gas chromatography and the polysaccharide derived degradation products were characterized by mass spectrometry using electron impact (EI) and chemical ionization (CI). The complete (EI) mass spectra and structural formula of 104 polysaccharide derived products are presented. The mass spectral recognition of anhydrosugars and the presence of structure isomers from dihydro-methyl-furanones in the product mixture is discussed.