谷氨酸脱羧酶(GAD)的研究进展

谷氨酸脱羧酶（GAD,EC4.1.1.15）是生物体内广泛存在的一种酶,有重要的生理学作用,能催化谷氨酸脱羧生成重要的抑制性神经递质γ-氨基丁酸（GABA）。GAD用于医疗和食品中具有很大潜力,本文综述了GAD的研究进展和应用。      

Lactococcus lactis谷氨酸脱羧酶的分离纯化及部分酶学性质

采用溶菌酶处理、超声破碎、硫酸铵分级、3次DEAE SepharoseCL 6B层析、SephacrylS 200凝胶过滤等手段,从乳酸菌细胞中分离纯化得到谷氨酸脱羧酶(GAD;EC4.1.1.15).纯化酶的比活力为14.4U/mg,纯化倍数31,回收率3.8%,SDS PAGE得到亚基的相对分子质量为65000.L 谷氨酸是测试的18种氨基酸中的惟一作用底物,表明乳酸菌GAD具有高度的底物专一性.酶在pH值3.6～5.4时具有活性,pH值4.7时活性最高,pH值6.0以上时没有活力.耐热性实验表明,pH值4.7条件下处理5h后,60℃时该酶仍能保持80%以上的活性,80℃以上迅速失活,由Lineweaver Burk作图得到的GAD的Km值为1.9mmol/L.     

发芽糙米与稻谷的谷氨酸脱羧酶活力及γ-氨基丁酸含量比较

比较了糙米与稻谷发芽期间及培养结束后的静置过程中谷氨酸脱羧酶(GAD)活力、γ-氨基丁酸(GABA)及谷氨酸(Glu)含量变化情况。结果表明,糙米和稻谷在(32±1)℃条件下,以1.2 L/min的通气量,用含有0.1%L-谷氨酸、0.1%抗坏血酸的培养液浸渍发芽,生长速率和呼吸速率均以糙米为快。培养结束时,发芽糙米中GABA含量和Glu含量分别比发芽稻谷增加64.05%和14.68%,空气中放置8 h后发芽糙米中GABA含量比发芽结束时增加了24.32%,整个发芽和静置期间发芽糙米中GAD活力始终高于发芽稻谷。     

谷氨酸脱羧酶基因工程改造研究进展

γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是一种具有重要生理功能的天然氨基酸,广泛应用在医药、食品、化工等行业。利用谷氨酸脱羧酶催化法合成GABA因其反应条件温、对环境友好和原料易得已成为当前研究的热点。该研究论述了催化合成GABA关键酶谷氨酸脱羧酶的分子改造、基因工程菌构建等研究进展。     

微生物谷氨酸脱羧酶研究进展

文章综述了谷氨酸脱羧酶的研究概况,包括微生物来源及分布、在微生物中的作用、酶学特性、酶的结构及基因工程,并对其研究前景进行了展望。     

玉米胚谷氨酸脱羧酶的性质

研究了玉米胚谷氨酸脱羧酶(GAD)的性质。结果表明:玉米胚GAD的最适温度为40℃,最适pH为5.7,其热稳定较差,60℃下保温1 h,酶活下降至39%,85℃时酶完全失活,而此酶在pH4.5～7.5可保持80%以上的酶活。玉米胚GAD对Glu的Km值和Vmax分别为51.87 mmol/L和1.807 mg/min。另外,KCl、NaCl和SDS对玉米胚GAD活性有较大的抑制作用,而Ca2+对此酶的活性有较强的激活作用,可提高底物与玉米胚GAD的亲和力。     

不同乳酸菌产谷氨酸脱羧酶特性研究

通过对发酵乳杆菌、植物乳杆菌、短乳杆菌所产谷氨酸脱羧酶(GAD)的酶学性质进行比较,分析酶反应温度、pH值、磷酸吡哆醛(PLP)浓度、酶浓度与酶活性的关系,并对高活性乳酸菌GAD酶的米氏常数进行测定。结果表明,3株乳酸菌GAD酶的最适温度为40℃,最适pH值为4.5,在PLP添加量为0.1mol/L时,对酶的促进作用达到最高,发酵乳杆菌Km值为0.05215mmol/L,最大反应速度Vmax=2.08μmol/min;短乳杆菌Km值为0.0243mmol/L,最大反应速度Vmax=1.01μmol/min。     

利用米糠谷氨酸脱羧酶富集γ-氨基丁酸的新研究

通过一系列实验对传统的直接法与"提酶法"富集米糠γ-氨基丁酸(GABA)进行了比较,结果表明提酶法进一步提高了GABA的产率并且成本几乎没有增加."提酶法"即采用米糠谷氨酸脱羧酶(GAD)粗酶液外加谷氨酸钠来富集GABA,产率达到3 789.1 mg/100 g米糠,在此条件下可进一步采用固定化酶的方法固定化GAD粗酶液中的GAD,从而不仅很大程度上提高GAD的利用率,更方便了后期GABA的纯化工作,适合工业化生产要求.     

米糠谷氨酸脱羧酶的酶学性质研究

研究了米糠谷氨酸脱羧酶(GAD)的酶学性质。结果表明:米糠GAD的最适温度为40℃,最适pH5.6,米糠GAD耐热性较差,60℃下保温0.5 h后,酶活下降至65%,保温1 h,酶活下降至48%,而70℃时酶就完全失活,而此酶在pH5.5～9都可以保持84%以上的酶活力。米糠GAD对底物和辅酶PLP的Km分别为0.028 45 mol/L和1.13μmol/L。KI、Ag~(2+)、SDS、乙酸对米糠GAD的活力有较大的抑制作用,而Ca~(2+)对米糠GAD的活性有较强的激活作用,提高了底物与米糠GAD的亲和力。     

巨大芽孢杆菌谷氨酸脱羧酶的表达及其酶活性研究

谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,GAD)能够催化L-谷氨酸(盐)脱羧反应生成γ-氨基丁酸,它是微生物发酵法生产γ-氨基丁酸的关键酶,具有很高的工业应用价值。本文将来源于巨大芽孢杆菌的谷氨酸脱羧酶(Bm Gad)经克隆至表达载体pET21b后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达,并采用亲和层析的方法将该酶纯化后,用比色法测定该酶的酶活性。结果表明,BmGad克隆表达后,采用SDS-PAGE分析可知其相对分子质量约为5.3×10~4 Da。重组蛋白经亲和纯化后,该酶的最适温度为50℃,酶活性达到153U/mg;最适p H为5,酶活性为151 U/mg,在偏中性环境中比较稳定,适合于工业化生产的应用。     

丙烯醛致突变性研究进展

丙烯醛与DNA可形成加合物,并可形成DNA-DNA、DNA-蛋白质2种交联结构,从而表现出不同的致突变性。丙烯醛致突变性研究结论不一,归因于不同研究对象、靶细胞、试验方法。最近对吸烟者肺组织细胞中丙烯醛-DNA加合物的分析,以及对P53热点突变谱的研究,为丙烯醛致突变性提出了新的证据。      

豆豉溶栓酶的研究新进展

豆豉溶栓酶是豆豉中的某些微生物在发酵过程中产生的一种碱性丝氨酸蛋白酶.跟传统的一些溶栓药物相比,它不仅具有很强的溶血栓能力,还具有安全性好、成本低、口服有效等优点,极有可能开发为新一代的溶栓剂.论文重点对金属离子以及酶抑制剂对豆豉溶栓酶的理化性质影响、豆豉溶栓酶高产菌种选育方法、溶栓酶生物活性及酶制荆产品开发等最新研究成果进行了综述.为深入研究豆豉溶栓酶的特性,进一步开发豆豉溶栓酶产品提供了科学研究基础.     

香港海鸥型菌(Laribacter hongkongensis)的鉴定方法研究现状

香港海鸥型菌是从香港肝硬化病人体内分离得到的新细菌菌属，被认为是致腹泻病原菌。为给相关的研究提供参考，介绍香港海鸥型菌选择性培养基的筛选，生物学特征检测方法，基因序列分析检测方法中的16s rRNA寡核苷酸序列分析定性鉴定核糖分型(ribotyping)与脉冲电场电泳，自动化细菌鉴定系统。     

卷烟烟气生物标志物研究进展

卷烟烟气生物标志物在评估烟气有害成分感受量、分析吸烟引起的潜在危险以及评价低危害卷烟方面起着极重要的作用。本文综述了现有烟气生物标志物的分类、研究进展,并对其应用情况进行了简要介绍。      

烟草绿原酸的研究进展

简介了绿原酸的主要理化特性和在烟草中的分布特点,综述了绿原酸的生物活性、提取纯化与分析检测等方面的研究进展,同时重点分析了绿原酸对烟草的重要影响及影响烟草绿原酸含量的主要因素,指出了今后对绿原酸的研究方向。      

烟草特有亚硝胺及其前体物研究进展

综述了烤烟烟叶中烟草特有亚硝胺及其前体物的研究进展,并对今后的研究方向进行了展望,以期为生产优质低害的烟叶提供参考依据。      

鱼类抗菌肽研究的最新进展

鱼类抗菌肽作为天然免疫系统的主要组成部分,有着非常显著的碱性、热稳定性和广谱抗菌性。研究发现,抗菌肽对一些真菌、原虫、病毒及癌细胞等均具有很强的杀伤作用。因此,鱼类抗菌肽具有重要的研究意义。该文根据近年来国内外的有关研究报道,介绍了鱼类抗菌肽的种类,简述了抗菌肽的抗菌机制,同时回顾了已发现的鱼类抗菌肽的基因结构,并对其应用前景方面做了简要的分析。     

卷烟滤嘴加香研究进展

对国内外滤嘴加香方面的研究成果进行较为系统的梳理与分析,主要在滤嘴用香精的种类、滤嘴加香方法和发展前景等方面进行了综述.     

植物I型二酰甘油酰基转移酶研究进展

综合分析植物Kennedy途径中最后一步的反应酶/限速酶———I型二酰甘油酰基转移酶（DGAT1亚型）的种类、结构、对底物的亲和性和在不同器官中的表达特点,重点综述DGAT1与植物生长发育的关系,并就深入开展植物DGTA1的研究提出建议。