正红菇多糖的抗癌和免疫调节活性研究

本文选用人宫颈鳞癌细胞SiHa进行体外抗肿瘤活性试验,并通过划痕实验对其抗肿瘤活性进行验证;同时选用昆明小鼠脾脏细胞的体外增殖试验和小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7吞噬中性红以及刺激巨噬细胞产生NO和IL-6的试验,探讨正红菇子实体多糖(HAP-I)的抗癌和免调节疫活性。结果显示,正红菇多糖在125~2000μg/mL的范围内对SiHa细胞的增殖抑制作用随着浓度的增大而增大,并有一定的剂量依赖性;通过癌细胞划痕实验,证实其对癌细胞SiHa增殖有抑制作用。多糖浓度在10~500μg/mL范围内能够促进淋巴细胞的增殖,且能协同LPS和ConA显著促进淋巴细胞的增殖,HAP-I协同LPS在50μg/mL和100μg/mL浓度时增殖作用显著(p0.05),HAP-I协同ConA在100μg/mL浓度时协同效果最佳。HAP-I能增强巨噬细胞吞噬中性红的能力,并且促进巨噬细胞分泌NO和IL-6,表明正红菇多糖有较好的免疫活性。     

河蚬汤纳米颗粒细胞毒性及对大鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

许多传统食品中存在大量的伴生性纳米颗粒,其纳米尺度的构造赋予它们特殊的活性与功能,然而这类纳米颗粒对人体细胞的影响尚未被充分揭示。以河蚬汤及其伴生纳米颗粒为例,采用狗肾上皮细胞(MDCK)、人结肠腺癌细胞(Caco-2)、人正常肝细胞(L-02)和大鼠原代腹腔巨噬细胞模型,研究以液相色谱方法分离制备的河蚬汤纳米颗粒的细胞毒性,以及其对大鼠原代腹腔巨噬细胞功能的影响。实验结果表明:15.63~500.00μg/mL河蚬汤伴生纳米颗粒对4种细胞均无明显毒性;这些纳米颗粒能被大鼠原代腹腔巨噬细胞吞噬,对正常巨噬细胞的膜电位和吞噬功能无明显影响,抑制AAPH诱导氧化应激引起的细胞膜超极化,拮抗线粒体的氧化应激与细胞吞噬功能损伤。抗氧化测试结果显示,河蚬汤伴生纳米颗粒具有FRAP、ABTS抗氧化活力,但不具有ORAC活性。研究旨在为后续深入开展河蚬汤及其伴生纳米颗粒的功效以及作用机制提供必要的基础数据和理论支持。     

龙眼肉多糖LPII的体外免疫调节活性评价

LPII是龙眼肉多糖的主要级分之一,本文研究了其体外免疫调节活性及酶降解作用对活性的影响。采用尼龙毛柱分离脾淋巴T/B细胞,在25~400μg/mL剂量范围内体外评价LPII对脾淋巴细胞的刺激作用发现,LPII能刺激脾淋巴细胞及B细胞增殖,并促进B细胞抗体生成,但对T细胞激活作用不明显(P0.05)。此外,LPII还能有效刺激巨噬细胞增殖,并增强其吞噬功能和NO生成量。LPII的高分子量组分在木瓜蛋白酶、链酶蛋白酶和胰蛋白酶的作用下均发生明显降解,且200μg/mL剂量下对刀豆蛋白A诱导的脾淋巴细胞增殖的刺激作用显著降低(P0.05),但对脂多糖诱导的脾淋巴细胞增殖和巨噬细胞吞噬的刺激作用却显著增强(P0.05)。LPII具有显著的体外免疫调节活性,是龙眼肉"滋补"的重要功能成分,而适度降解有利于增强活性。     

树蝴蝶多糖的免疫调节活性研究

本文采用超声波辅助水提、乙醇沉淀、DEAE-52纤维素阴离子交换层析法分离纯化得到从树蝴蝶原料中提取的中性多糖LKY-I。以不同浓度的多糖为原料,研究了LKY-I的体外免疫调节活性。结果表明,LKY-I在125~500μg/mL浓度范围内对RAW 264.7细胞无明显毒性。LKY-I可显著增强巨噬细胞吞噬中性红的能力,当多糖浓度为500μg/mL时,吸光度值可达到1.39,显著高于阳性对照组LPS。LKY-I可促进巨噬细胞RAW 264.7分泌NO,最大分泌量可达55.42±1.79μM;与正常对照组相比,LKY-I促进巨噬细胞分泌IL-6、TNF-α细胞因子,分泌量分别增加了102.3%和289.5%。在125~500μg/mL浓度范围内,LKY-I可显著提高i NOS、IL-6及TNF-α基因的表达。LKY-I协同LPS和Con A能显著促进小鼠脾淋巴细胞的增殖。研究结果表明,LKY-I多糖具有良好的体外免疫调节活性,可以作为一种有益健康的成分应用到食品工业中。     

大连紫海胆棘壳色素的体外抗炎和免疫调节作用

目的:研究大连紫海胆棘壳色素的体外免疫调节和抗炎活性。方法:以LPS(细菌脂多糖)为炎症诱导物,研究棘壳色素对RAW264.7细胞分泌多种炎症因子的影响。分别采用MTT法及中性红吞噬法研究棘壳色素对脾淋巴细胞增殖及腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。采用补体结合法考察棘壳色素对补体活性的影响。结果:棘壳色素可显著抑制LPS刺激后RAW264.7细胞合成分泌NO(作用质量浓度5~30μg/m L)、IL-6、TNF-α(作用质量浓度60μg/m L)、PGE2及6-KETO-PGF1α(作用质量浓度10~60μg/m L)的水平,但不影响IL-4的分泌水平。20,50μg/m L的棘壳色素均可促进脾淋巴细胞的增殖,30,60μg/m L的棘壳色素可显著增强腹腔巨噬细胞的吞噬活性,1~500μg/m L的棘壳色素还可显著抑制补体活性。结论:海胆棘壳色素可在功能性产品开发方面具有一定应用潜力。     

树蝴蝶多糖的免疫调节活性研究（英文）

本文采用超声波辅助水提、乙醇沉淀、DEAE-52纤维素阴离子交换层析法分离纯化得到从树蝴蝶原料中提取的中性多糖LKY-I。以不同浓度的多糖为原料,研究了LKY-I的体外免疫调节活性。结果表明,LKY-I在125~500μg/mL浓度范围内对RAW 264.7细胞无明显毒性。LKY-I可显著增强巨噬细胞吞噬中性红的能力,当多糖浓度为500μg/mL时,吸光度值可达到1.39,显著高于阳性对照组LPS。LKY-I可促进巨噬细胞RAW 264.7分泌NO,最大分泌量可达55.42±1.79μM;与正常对照组相比,LKY-I促进巨噬细胞分泌IL-6、TNF-α细胞因子,分泌量分别增加了102.3%和289.5%。在125~500μg/mL浓度范围内,LKY-I可显著提高i NOS、IL-6及TNF-α基因的表达。LKY-I协同LPS和Con A能显著促进小鼠脾淋巴细胞的增殖。研究结果表明,LKY-I多糖具有良好的体外免疫调节活性,可以作为一种有益健康的成分应用到食品工业中。     

乌鸡肽免疫调节作用的研究

对乌鸡肽的基本理化指标进行了测定,并对其免疫调节活性进行研究。应用WST-8法检测不同浓度乌鸡肽对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,以吞噬能力和NO的生成量为指标评价乌鸡肽对小鼠腹腔巨噬细胞活力的影响。乌鸡肽主要含有相对分子量低于1000U的短肽,对ConA诱导的T-淋巴细胞增殖和LPS诱导的B-淋巴细胞增殖均有显著的促进作用。浓度为100μg/mL时,显著促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能中性红的能力和NO生成。乌鸡肽具有较好的增强免疫调节的能力。     

苦瓜多糖对小鼠淋巴细胞免疫调节作用的影响（网络首发、推荐阅读）

以苦瓜多糖(MCP)为研究对象,在细胞和分子水平上探讨其对小鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用机制。以空白组和左旋咪唑组为对照,小鼠脾淋巴细胞经不同质量浓度(40,80,160,320μg/mL)的MCP体外刺激,检测MCP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,腹腔巨噬细胞的吞噬活性,淋巴细胞上清液中IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12分泌与mRNA表达水平。分析发现,与空白组相比,随浓度的升高细胞增殖指数倍数增长(P<0.05),MCP能不同程度的促进细胞增殖、不同程度的增强巨噬细胞的吞噬能力(P<0.05);与空白组相较,细胞因子IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的分泌量最大增幅分别为:42.73%、18%、27.81%、29.42%;IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的mRNA表达显著上升,最高表达水平分别为空白组的9.18、7.53、9.37、8.95倍,存在显著性差异(P<0.05)。结果表明,MCP能有效提高细胞因子IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的分泌和mRNA表达水平,促进细胞增殖,增强巨噬细胞的吞噬活性,从而提高机体免疫功能。     

玉米蛋白粉中叶黄素和玉米黄素对小鼠巨噬细胞免疫调节活性的研究

采用体外细胞培养方法,研究小鼠腹腔巨噬细胞在LPS刺激的情况下,从玉米蛋白粉中提取的叶黄素和玉米黄素对其生成NO的影响作用.噻唑蓝（MTT）法检测淋巴细胞及巨噬细胞增殖,比色分析检测巨噬细胞吞噬中性红的能力,生物法测定肿瘤坏死因子α（TNF-α）活性,Griess法测定NO含量.结果表明：叶黄素和玉米黄素对小鼠腹腔巨噬细胞的生长有一定的促进作用,当叶黄素、玉米黄素分别为5μmol/L和2.5μmol/L时对小鼠腹腔巨噬细胞产生NO表现为抑制作用,而当叶黄素的浓度在10～40μmol/L、玉米黄素的浓度在5～30μmol/L时巨噬细胞NO的生成水平表现为能显著提高正常小鼠腹腔巨噬细胞产生NO,且呈现剂量效应关系.叶黄素在20～50μ mol/L,玉米黄素在10～40 μ mol/L的浓度范围内,能够促进巨噬细胞吞噬中性红的能力,并能诱导其分泌TNF-α.     

卵转铁蛋白体外免疫活性研究

研究卵转铁蛋白(OVT)的体外免疫活性。分别采用中性红吞噬法测定卵转铁蛋白对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;MTT法测定卵转铁蛋白对小鼠腹腔巨噬和脾淋巴细胞增殖作用的影响;双抗体夹心ELISA法测定卵转铁蛋白对脾淋巴细胞IL-2分泌水平的影响。结果表明,OVT能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞对中性红吞噬能力(P<0.01),协同LPS促进腹腔巨噬细胞的增殖(P<0.05),并显著改善由CsA引起的对小鼠腹腔巨噬细胞增殖活性的抑制作用(P<0.05);OVT能显著促进脾淋巴细胞的增殖(P<0.01),协同LPS和ConA促进小鼠脾淋巴细胞的增值(P<0.05),并能显著促进小鼠正常脾淋巴细胞IL-2的分泌(P<0.01)。在体外培养的条件下,卵转铁蛋白对正常小鼠免疫细胞的免疫能力有促进作用。     

酶解鸡蛋清寡肽混合物对小鼠体外免疫功能的影响

考察了用Alcalase（AL）、Flourezyme（FL）、木瓜蛋白酶（PA）、胃蛋白酶（PE）和胰蛋白酶（TR）酶解鸡蛋清制得的5种酶解鸡蛋清寡肽混合物（MOEE）对小鼠体外免疫功能的影响．采用体外培养，细胞吞噬试验和细胞增殖试验，观察同一MOEE不同剂量以及同一剂量不同MOEE对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和脾细胞增殖能力的影响,结果发现，所有MOEE均能显著（P〈0．05）或极显著（P〈0．01）提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力，促进小鼠脾淋巴细胞增殖，且表现出一定的剂量效应关系．其中，1．0mg／mL不同MOEE促进巨噬细胞吞噬能力（PI）大小顺序为：FL1-5〉PA1-55〉TR1-55〉AL1-5〉PE1-5〉对照；促脾淋巴细胞增殖能力（SI）大小顺序为：FL1-5〉AL1-5〉PA1-5〉TR1-5〉PE1-5〉对照（无丝裂原），FL1-5〉PA1-5〉TR1-5〉AL1-5〉PE1-5〉对照（LPS刺激），FL1-5〉TR1-55〉PE1-5〉PA1-5〉AL1-5〉对照（ConA刺激）．结果表明，所有MOEE都具有免疫增强活性，且以FL1-5的活性最强．     

3 种乳制品对低免疫力模型斑马鱼免疫功能的影响

目的：研究3 种乳制品对长春瑞滨（一种半合成的长春花生物碱）诱导的低免疫力斑马鱼免疫功能的调节作用。方法：分别给斑马鱼静脉注射0.2 mg/mL酒石酸长春瑞滨注射液诱导低免疫力模型,按照随机法将斑马鱼随机分为正常对照组、模型对照组、低温酸奶组（8 333 μg/mL）、常温纯牛奶组（70.4 μL/mL）、冷冻酸奶冰淇淋组（33 333 μg/mL）,每组30 尾。利用荧光显微镜观察并分析3 种乳制品对低免疫力斑马鱼的巨噬细胞数量、巨噬细胞吞噬功能,以及T淋巴细胞数量的影响。结果：与正常对照组比较,模型对照组巨噬细胞数量显著降低、巨噬细胞吞噬功能减弱、T细胞数量高度显著降低（P＜0.001）。与模型对照组比较,给予低温酸奶、常温纯牛奶和冷冻酸奶冰淇淋后巨噬细胞和T淋巴细胞的数量均显著增加（P＜0.05、P＜0.01和P＜0.001）;常温纯牛奶和冷冻酸奶冰淇淋均能显著增强巨噬细胞吞噬能力（P＜0.05）,低温酸奶对巨噬细胞吞噬功能的无显著促进作用。与低温酸奶比较,常温纯牛奶巨噬细胞数量显著提高（P＜0.05）,但T细胞数量和巨噬细胞吞噬功能无显著性差异（P＞0.05）;冷冻酸奶冰淇淋组巨噬细胞数量、T淋巴细胞数量、巨噬细胞吞噬功能均无显著性差异（P＞0.05）。结论：低温酸奶、常温纯牛奶和冷冻酸奶冰淇淋可以通过增加巨噬细胞、T淋巴细胞的数量,改善巨噬细胞的吞噬能力,从而提高长春瑞滨诱发的低免疫力斑马鱼的免疫功能。     

纳豆粉对小鼠免疫调节作用的试验研究

探讨纳豆粉对小鼠的免疫调节作用。方法 以不同剂量的纳豆粉连续经口给予小鼠30 d,然后通过细胞免疫、体液免疫、吞噬系统功能、自然杀伤细胞活性4个方面的试验结果评价纳豆粉对小鼠免疫系统的作用。结果 纳豆粉能够增强小鼠的脾淋巴细胞增殖、转化作用,提高小鼠的迟发型变态反应程度,促进小鼠的抗体生成细胞增殖,提高小鼠的血清溶血素水平,增强小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清能力和腹腔巨噬细胞吞噬能力,对自然杀伤细胞活性无明显影响。结论 纳豆粉可提高小鼠的免疫力。     

大蒜提取物对小鼠免疫调节作用的实验研究

目的：研究大蒜提取物（Allium sativum extract,ASE）对正常小鼠免疫功能的影响。方法：将40只清洁级昆明种小鼠随机分为空白对照组[0．1mL蒸馏水／（10g·bw）]、大蒜提取物高剂量组[900mg／（kg·bw）]、大蒜提取物中剂量组[600mgJ（kg·bw）]、大蒜提取物低剂量组[300mg／（kg·bw）],每组10只,各组每天灌胃1次,连续给药14d。观察大蒜提取物对正常小鼠免疫器官重量、巨噬细胞吞噬功能等的影响。结果：大蒜提取物能增强正常小鼠巨噬细胞吞噬功能（P〈Qc15）,对免疫器官指数也有增加作用（P〈Q（15）。结论：大蒜提取物能增强正常小鼠的免疫功能。     

芦笋醇提取物的免疫调节作用

分析芦笋醇提取物对机体免疫功能的调节作用。将风干芦笋用75%体积分数的乙醇溶液进行超声提取,获得芦笋醇提取物。对实验小鼠灌胃芦笋醇提取物,剂量分别设为7、70、140 mg/kg,另设一个空白对照组灌胃等体积生理盐水,连续30 d灌胃后,分别进行小鼠脏器/体重、腹腔巨噬细胞吞噬实验、淋巴细胞转化实验及半数溶血值实验。结果显示,中、高剂量组的芦笋提取物可显著提高小鼠的脾脏指数和腹腔巨噬细胞的吞噬能力;中、高剂量组的芦笋提取物具有显著增强淋巴细胞增值能力的作用,对提高血清溶血素含量作用极显著,并具有剂量依赖性。表明芦笋提取物能增强正常小鼠的非特异性和特异性免疫功能。     

酪蛋白糖巨肽对小鼠腹腔吞噬细胞及肠黏膜免疫细胞的影响

目的：由于酪蛋白糖巨肽（casein glycomacropeptide,CGMP）具有许多生理活性功能和独特营养特性,研究CGMP对小鼠腹腔免疫细胞以及肠黏膜屏障的影响可为其应用于保健食品和医药品提供科学依据。方法：以96 只健康昆明雌性小鼠为实验动物,利用流式细胞仪、HE染色和免疫荧光标记技术,分别检测分析了灌胃不同剂量的CGMP（30 μg/d和120 μg/d）对实验小鼠腹腔吞噬细胞吞噬活性以及肠上皮内淋巴细胞（intraepithellallymphocytes,IEL）和固有层IgA+浆细胞数量的影响,探讨CGMP改善小鼠腹腔吞噬细胞和肠黏膜屏障功能的作用。结果：CGMP能够显著增加小鼠腹腔吞噬细胞的吞噬能力,灌胃时间越长,作用效果越明显;其中灌胃CGMP的剂量为120 μg/d的作用效果优于30 μg/d剂量组。且与对照组相比,灌胃CGMP组小鼠十二指肠上皮内淋巴细胞数和固有层IgA+浆细胞数量显著增加（P ＜ 0.01）。结论：CGMP可以增强小鼠腹腔吞噬细胞吞噬功能,诱导肠道黏膜免疫应答,增强肠黏膜免疫屏障功能,有望开发为抑制肠道炎症的功能性食品添加剂。     

北五味子多糖提取工艺优化及其对LPS刺激巨噬细胞线粒体膜电位的保护作用

目的:提取北五味子多糖,研究其体外抗氧化活性及对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞线粒体膜电位的保护作用。方法:通过热水浸提法及四因素三水平正交分析法L₉(34)提取北五味子多糖,对比北五味子多糖与维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(V_E-TPGS)的体外抗氧化活性,利用LPS构建巨噬细胞损伤模型,通过活性氧(ROS)、JC-1细胞染色实验研究北五味子多糖对ROS的抑制作用及对细胞线粒体膜电位的保护作用。结果:北五味子多糖提取工艺为:料液比1:40 g/mL,提取次数3次,提取时间3.0 h,提取温度为90 ℃,在此条件下多糖最高得率为10.72%,北五味子多糖总糖含量为84.28%±2.03%,葡萄糖含量为30.26%±1.12%;北五味子多糖清除DPPH自由基的IC₅₀值为602.52 μg/mL,清除羟自由基的IC₅₀值为34.24 μg/mL,北五味子多糖1600 μg/mL时,总抗氧化能力达到(0.28±0.01) mmol/mg。细胞实验表明北五味子多糖能够降低LPS诱导巨噬细胞的活性氧的水平,抑制细胞线粒体膜电位下降。结论:北五味子多糖在体外具有较强的抗氧化活性,能够抑制LPS诱导巨噬细胞中活性氧水平进而发挥其对线粒体膜电位的保护作用。     

不同来源乳铁蛋白及乳铁蛋白素对小鼠脾淋巴细胞增殖影响的比较

以牛乳清乳铁蛋白(bovine whey lactoferrin,LFW)、牛初乳乳铁蛋白(bovine colostrum lactoferrin,LFC)、人乳铁蛋白(human lactoferrin,LFH)、牛乳铁蛋白素(bovine lactoferricin,Lfcin B)和人乳铁蛋白素(human lactoferricin,Lfcin H)为研究对象,研究其对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响并比较不同来源乳铁蛋白(lactoferrin,LF)及乳铁蛋白素(lactoferricin,Lfcin)作用效果的差异性。采用CCK-8法检测不同来源的LF与Lfcin作用小鼠脾淋巴细胞24、48、72 h后,及其与丝裂原共同作用对小鼠T、B淋巴细胞增殖作用的影响。结果显示:LF与Lfcin均在48 h时对小鼠脾淋巴细胞增殖的促进效果最好,且在一定质量浓度范围内促进效果随质量浓度升高而加强;LF与Lfcin均在一定质量浓度范围内提高刀豆蛋白A诱导的T淋巴细胞的增殖和脂多糖诱导的B淋巴细胞的增殖。结果表明:两种牛乳铁蛋白(bovine lactoferrin,LFB)及Lfcin B可替代LFH应用于婴幼儿配方产品中以提高婴幼儿免疫能力,LFB推荐添加质量浓度为0.50~2.00 mg/m L,Lfcin推荐添加质量浓度为75~125μg/m L。